目的 探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者血清白介素-21(IL-21)和趋化因子水平变化及其临床意义.方法 2015年3月～2017年3月我院收治的21例AIH患者,采用ELISA法检测血清IL-21及趋化因子C-C-基元配体20(CCL20)、趋化因子配体9(CXCL9)、趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)、趋化因子C-X-C-基元受体3(CXCR3)水平,常规行肝活检.应用受试者工作特征曲线(ROC)下面积(AUC)分析血清IL-21水平预测AIH患者病情和判断肝组织炎症活动分级的效能.结果 5例重症AIH患者血清ALB、ALT、AST、INR、TBIL、CCL20、CCR6和IL-21水平分别为(2.6±0.2)g/dL、(716.8±363.2)U/L、(632.6±334.9)U/L、(1.4±0.7)、(96.1±4.2)μmol/L、(263.2±123.8)pg/mL、(162.4±70.3)pg/mL和(400.2±102.3)pg/mL,与16例轻中症组[分别为(3.7±0.4)g/dL、(384.5±143.7)U/L、(327.1±98.6)U/L、(1.2±0.3)、(25.8±4.3)μmol/L、(147.5±63.7)pg/mL、(63.8±25.3)pg/mL和(256.3±122.6)pg/mL]比,差异显著(均P<0.05),而外周血PLT计数为(110.4±2.8)×109/L,显著低于轻中症组的(170.4±5.3)×109/L(P<0.05);单因素分析显示,7例肝组织G3～4级患者上述指标与14例G1～2级组比,差异有统计学意义(P<0.05),而两组患者外周血WBC、血清CXCL9、CXCR3和IgG水平比较差异无统计学意义(P>0.05);以血清IL-21水平大于380 pg/mL为截断点,预测AIH患者临床病情严重的AUC为0.900(95％CI:0.690～0.987),其敏感性为80.0％,特异性为100.0％;以血清IL-21水平>405.7 pg/mL为截断点,判断AIH患者肝组织炎症分级>S3的AUC为0.857(95％CI:0.605～0.976),其敏感性为100.0％,特异性为70.0％;多因素Logistic回归分析结果显示,血清IL-21≥405.7 ng/mL为判断AIH患者肝组织重度炎症活动的独立因子(OR为5.673,95％CI为2.952～9.118,P=0.000).结论 检测血清IL-21水平可能有助于判断AIH患者病情和肝组织炎症活动度,对评估病情有一定的临床意义.

目的 探讨自身免疫性肝炎(AIH)患者血清趋化因子和高尔基体糖蛋白73(GP73)水平的变化及其临床意义.方法 2018年3月～2019年3月我院就诊的46例自身免疫性肝炎患者和46例同期健康人群,采用ELIS法检测血清趋化因子C-C-基元受体6和20(CCR6、CCL20)、血清趋化因子配体10(CXCL10)和GP73水平.AIH患者接受肝活检,并将肝炎程度分为轻中重度.结果 AIH血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(112.4±59.3)pg/mL、(186.5±71.8)pg/mL、(81.5±42.0)pg/mL和(171.4±62.5)ng/mL,均显著高于健康人[分别为(75.8±32.6)pg/mL、(123.7±42.2)pg/mL、(53.9±28.1)pg/mL和(83.1±35.2)ng/mL,P<0.05];10例重度患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(174.2±81.4)pg/mL、(271.5±99.7)pg/mL、(162.7±83.1)pg/mL和(278.3±91.5)ng/mL,,显著高于14例中度组[分别为(124.5±55.3)pg/mL、(198.6±66.9)pg/mL、(88.4±46.8)pg/mL和(186.2±75.8)ng/mL,P<0.05]或22例轻度组[分别为(83.5±34.5)pg/mL、(155.6±51.0)pg/mL、(42.6±22.7)pg/mL和(123.9±58.9)ng/mL,P<0.05];26例肝组织G3～4级患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平分别为(154.5±28.1)pg/mL、(201.6±56.3)pg/mL、(98.4±56.1)pg/mL和(196.2±59.78)ng/mL,显著高于20例G1～2级组[分别为(73.5±34.8)pg/mL、(135.6±41.7)pg/mL、(62.5±20.1)p g/mL和(93.9±33.9)ng/mL,P<0.05].结论 AIH患者血清CCR6、CCL20、CXCL10和GP73水平升高,且随着疾病程度和肝组织炎症活动度加重而升高.检测自身免疫性肝炎患者血清趋化因子和GP73水平可能有助于评估患者病情的变化.

目的 研究淫羊藿苷改善缺氧性肺动脉高压(hypoxic pulmonary hypertension,HPH)作用与趋化因子C-X3-C基元配体1(chemokine C-X3-C motif ligand 1,CX3CL1)介导的炎症反应的关系.方法 将40只C57BL/6J雄性野生型(wide type,WT)小鼠随机分为对照组、WT模型组和WT+淫羊藿苷(10、20mg/kg)组,20只雄性CX3CL1-/-小鼠分为CX3CL1-/-模型组和CX3CL1-/-+淫羊藿苷(20mg/kg)组.除对照组外,各组均于含氧量为10％的低氧环境中连续饲养21 d,于低氧饲养7d后ig淫羊藿苷2周.采用小动物超声仪检测小鼠肺动脉血流速度和右心室血流动力学,测量右心室肥厚指数(right ventricular hypertrophy index,RVHI);采用苏木素-伊红(HE)和Masson染色观察小鼠肺小动脉重构情况;采用ELISA法检测小鼠血清中肿瘤坏死因子-α(tumornecrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)水平;采用Western blotting检测小鼠肺组织CX3CL1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关蛋白表达情况.结果 与对照组相比,WT模型组小鼠肺动脉血流速度明显降低(P＜0.05),RVHI显著增大(P＜0.05),右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量升高(P＜0.05),右心室短轴缩短率和射血分数降低(P＜0.05),肺小动脉重构明显.与WT模型组相比,淫羊藿苷能够增加WT小鼠肺动脉血流速度(P＜0.05),降低RVHI、右心室收缩末期直径、收缩末期容积和每博输出量(P＜0.05),升高右心室短轴缩短率和射血分数(P＜0.05),肺小动脉重构明显改善,同时,淫羊藿苷降低血清IL-1β和TNF-α水平以及肺组织CX3CL1蛋白表达水平(P＜0.05),抑制NF-κB通路相关蛋白表达水平(P＜0.05).与WT模型组相比,CX3CL1-/-模型组小鼠肺动脉血流速度、肺小动脉重构、右心室血流动力学均有改善(P＜0.05),血清IL-1β和TNF-α水平降低(P＜0.05).敲除CX3CL1-/-后,淫羊藿苷(20 mg/kg)对HPH小鼠的改善作用减弱甚至消失.结论 淫羊藿苷能够通过抑制CX3CL1介导的炎症反应改善小鼠HPH.

目的 通过筛选干旱环境中大鼠泪腺的差异表达蛋白,探讨与"燥伤清窍"病机相关的蛋白质或信号通路,从分子水平认识外燥证的本质.方法 20只SD雌鼠随机均分为2组,分别为在常温常湿环境中饲养的对照组(CG),以及采用人工气候箱和砂尘试验箱模拟干旱环境(西北燥证的主要病因)干预的干旱风沙组(DD),均饲养48 d.随后摘取大鼠左侧泪腺,采用串联质谱标签(TMT)技术筛选差异表达蛋白,并进行生物信息分析.结果(1)差异表达蛋白:筛选出DD组大鼠泪腺中差异表达蛋白共505个,其中上调蛋白有210个,下调蛋白有295个.(2)基因本论(GO)功能注释:差异表达蛋白主要影响细胞过程和单生物过程,主要定位在细胞和细胞器,分子层面主要影响蛋白的结合和催化活性.(3)GO富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集:上调蛋白多与免疫功能相关,主要富集在抗原加工呈递通路;下调蛋白多与离子的转运和肌肉的收缩相关,主要富集在与氧化、磷酸化相关的通路.(4)候选靶标蛋白:S100钙结合蛋白A9(S100A9)、α-1-酸性糖蛋白(AGP1)、趋化因子C-X3-C基元配体1(CX3CL1)、髓过氧化物酶(MPO)、泛醇-细胞色素C还原酶铰链蛋白(UQCRH)、T-激肽原1(KNT1)、蛋白酶体亚基β-8(PSMB8)、前列腺素D合酶(PGDS)、免疫球蛋白G(IgG)、热休克蛋白27(HSP27)、血清转铁蛋白(TF)、酪蛋白激酶Ⅱα'亚基(CSNK2A2)、泛素羧基末端水解酶L3(UCHL3)为探索"燥伤清窍"微观机制的候选靶标蛋白.结论 基于眼部症状,或可立足免疫功能(尤指炎症反应与变态反应)和细胞凋亡,选择相应的信号通路探索"燥伤清窍"的微观机制.