目的:探讨脊神经双侧离断神经源膀胱(NB)幼鼠模型的膀胱形态结构功能变化及转化生长因子β1(TGF-β1)通路相关蛋白的表达。方法:选取SD雌性幼鼠64只，其中32只行L 6＋S 1神经双侧离断建立NB模型，32只行假手术作为对照。神经离断和假手术3、6、12、24周后行膀胱测压检查。收集对应膀胱组织行马松染色和天狼猩红染色分析胶原纤维变化，免疫组织化学染色分析TGF-β1、Smad2、Smad6蛋白变化，采用Western blot检测TGF-β1受体Ⅰ的蛋白水平变化。 结果:各NB神经离断组膀胱不稳定，存在膀胱漏尿点压(BLPP)，膀胱无明显排尿收缩压；神经离断3、6、12周和24周鼠的膀胱基础压(22.10±2.51)、(18.20±1.52)、(31.20±2.82)、(41.10±3.41) cmH 2O(1 cmH 2O＝0.098 kPa)和膀胱容量(22.30±1.72)、(49.10±5.54)、(30.30±2.68)、(13.50±1.52) mL均明显高于假手术组[(3.51±0.45) cmH 2O和(0.52±0.04) mL]，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。神经离断组膀胱组织横切面大小为先增大(3、6周)后变小挛缩(12、24周)，膀胱壁厚度先变薄(3、6周)后增厚(12、24周)；膀胱质量随离断时间持续增加。马松染色结果显示，神经离断大鼠的膀胱壁中正常纤维结缔组织逐渐紊乱，膀胱壁分层结构逐渐解体，平滑肌肥大增厚，肌间胶原纤维逐渐增多，染色变深。天狼猩红检测示神经离断24周的膀胱组织中Ⅲ型胶原纤维明显增多，Ⅲ型/Ⅰ型胶原纤维比例(3.14±0.71)明显高于对应的假手术组(0.88±0.21)，差异有统计学意义( t＝7.48， P<0.01)。免疫组织化学染色发现，神经离断膀胱组织中TGF-β1和Smad2表达随着离断时间逐渐升高，通路抑制性蛋白Smad6随离断时间逐渐降低。Western blot显示TGF-β1受体Ⅰ蛋白水平在12、24周的表达分别高于对应的假手术组1.3、1.6倍( t＝6.06、14.45，均 P<0.01)。 结论:脊神经双侧离断导致的幼鼠NB，收缩功能瘫痪，膀胱内压逐渐增高，膀胱正常结构逐渐解体，膀胱纤维化通路TGF-β1/Smads信号通路逐渐激活，小儿NB发展的过程为膀胱纤维化，临床治疗小儿NB应尽早预防膀胱纤维化。

目的:观察miR-217对血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的肝星状细胞（HSC）活化的影响，观察四氯化碳（CCl 4）诱导小鼠中miR-217过表达产生的效果，阐明miR-217在肝纤维化中的作用。 方法:使用AngⅡ刺激HSC并检测miR-217表达水平的变化情况。将HSC分为对照组、AngⅡ处理组和AngⅡ+miR-217处理组，检测各组中α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Ⅰ型胶原蛋白（Collagen I）的表达水平。采用TargetScan和双荧光素酶报告基因实验对miR-217的靶基因进行筛选及验证。荧光实时定量PCR和Western blot检测miR-217对转化生长因子β受体Ⅱ （TGFBR2）表达水平的影响。构建CCl 4诱导的小鼠肝纤维化模型，Masson染色和天狼星红染色检测过表达miR-217对CCl 4小鼠肝纤维化进程的影响。2组数据间的比较采用 t检验，多组数据比较采用One-Way ANOVA进行统计分析。 结果:AngⅡ刺激HSC细胞能下调miR-217的表达水平，转染miR-217 mimics能抑制AngⅡ诱导的α-平滑肌肌动蛋白，成纤维细胞特异蛋白1和Collagen I的表达水平。miR-217能特异性结合TGFBR2的3’-UTR，转染miR-217 mimic能抑制HSC中TGFBR2的mRNA和蛋白表达水平。CCl 4小鼠中过表达miR-217能抑制Collagen I和Collagen Ⅲ的表达水平，缓解肝纤维化进程。 结论:miR-217通过靶向调控TGFBR2调节肝纤维化，抑制AngⅡ诱导的HSC活化，减缓CCl 4小鼠的肝纤维化进程，表明miR-217可能具有抑制肝纤维化的功能。

目的:探讨可诱导共刺激分子(inducible costimulatory molecular, ICOS)和程序性死亡受体1(programmed cell death protein 1，PD-1)蛋白在四氯化碳致小鼠肝纤维化中的动态变化。方法:将80只雄性BALB/c小鼠按随机数字表法分为正常对照组和肝纤维化模型组，每组40只。流式细胞仪分析测定不同阶段滤泡辅助性T细胞(follicular helper cells，Tfh)群ICOS及PD-1的动态表达趋势及特征；酶联免疫吸附测定法(enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA)检测小鼠不同周期脾淋巴细胞培养上清中的相关细胞因子白细胞介素(interleukin，IL)-21，IL-33，转化生长因子-β1(transforming growth factor-β，TGF-β1)的分泌水平及小鼠血清中Ⅲ型前胶原肽(procollagen type Ⅲ，PCⅢ)的含量；分析PD-1 +CD4 +CXCR5 +T细胞、ICOS +CD4 +CXCR5 +T细胞与肝纤维化标志物PCⅢ的相关性。 结果:与正常对照组相比，纤维化模型组中CXCR5 +CD4 +T细胞表面PD-1的表达比例均明显升高，并在13 W达到峰值，组间差异有统计学意义{(2.77±0.92)%比[8 W：(6.53±2.12)%，13 W：(27.47±5.15)%，20 W：(19.20±6.64)%]， t值分别为4.60、13.35、6.93， P值均<0.05}；CXCR5 +CD4 +T细胞表面ICOS的表达比例亦逐渐升高，13 W达到峰值，组间差异有统计学意义{(1.13±0.44)%比[(8 W：(13.28±3.85)%，13 W：(33.62±6.28)%，20 W：(21.50±5.83)%]， t值分别为8.87、14.60、9.85 ， P值均<0.05 }。随着病程进展，肝纤维化小鼠组CD4 +CXCR5 +T细胞群IL-33，IL-21，TGF-β1的表达从8 W开始上调，13 W达到峰值，20 W仍维持较高水平，且均显著高于对照组，组间差异具有统计学意义(IL-33： t值分别为5.85、18.47和10.54，IL-21： t值分别为10.03、13.34和13.60，TGF-β1： t值分别为9.23、19.69和15.40， P值均<0.05)。PD-1 +CD4 +CXCR5 +T、ICOS +CD4 +CXCR5 +T细胞表达水平与PCⅢ的水平成正相关( r值分别为0.6278和0.6036， P值均<0.05)。 结论:肝纤维化慢性期ICOS +和PD-1 +的循环Tfh细胞可能促进肝纤维化发病，IL-21和IL-33作为主要的细胞因子参与炎症进展。

目的:建立神经源性膀胱大鼠模型，分析肾脏形态功能及血管紧张素Ⅱ/转化生长因子β1/Smads（AngⅡ/TGF-β1/Smads）通路相关蛋白表达的变化。方法:48只Sprague-Dawley大鼠随机分为实验组（脊神经离断， n=36）和对照组（假手术， n=12），分别于6周、12周和24周通过尿动力学检测膀胱顺应性，B超检测肾脏形态，血肌酐和尿素氮分析肾功能变化，Masson和HE染色检测肾脏病理改变，免疫组化检测AngⅡ/TGF-β1/Smads通路蛋白在肾脏的分布，Western印迹检测AngⅡ/TGF-β1/Smads通路蛋白表达。 结果:尿动力显示，实验组大鼠基础膀胱压明显高于对照组大鼠。B超显示，与对照组相比，实验组大鼠肾盂直径逐渐增宽（ P<0.05），肾积水逐渐明显。与对照组相比，实验组大鼠BUN和Scr逐渐增加（均 P<0.01）。Masson和HE染色显示，与对照组相比，实验组大鼠胶原沉积面积和肾小管间质评分逐渐增加（均 P<0.01）。免疫组化显示，与对照组相比，实验组血管紧张素Ⅱ一型受体（AT1）、TGF-β受体1（TGF-βR1）、磷酸化Smad2表达逐渐增加（均 P<0.01），通路抑制蛋白Smad6逐渐降低（ P<0.01），且各蛋白在肾脏分布具有一致性。Western印迹显示，随神经离断时间延长，AT1、TGF-βR1、磷酸化Smad2、Ⅰ型和Ⅲ型胶原表达逐渐增加，Smad6逐渐降低（均 P<0.05）。 结论:双侧脊髓神经切断引起的神经源性膀胱，由于膀胱功能障碍，膀胱压力增加，引起肾积水，肾小球结构破坏，AngⅡ/TGF-β1/Smads通路激活，肾脏发生纤维化。该方法有效，具有临床相似性，为探索神经源性膀胱的治疗方法奠定了基础。

目的:探讨miR-223对大鼠心肌细胞纤维化相关通路的保护作用及对Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1（Twist1）、转化生长因子β1受体2（TGFBR2）的表达调控。方法:体外培养大鼠心肌细胞H9c2，以TGF-β人工诱导心肌细胞纤维化相关通路活化，分为模型组、miR-223组（转染miR-223过表达慢病毒）以及miR-223-NC组（转染miR-223-NC慢病毒），同时设立正常细胞对照组。免疫组化检测α-SMA的表达情况；实时荧光定量PCR（real-time PCR）测定心肌细胞miR-223、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平；Western印迹法检测心肌细胞Twist1、TGFBR2、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ及α-SMA蛋白水平；双荧光素酶报告基因验证miR-223对Twist1、TGFBR2 3′UTR的靶向调控。结果:miR-223组α-SMA阳性心肌细胞平均吸光度（0.089±0.013）明显低于模型组和miR-223-NC组（0.134±0.018，0.132±0.016）；miR-223组心肌collagen Ⅰ、collagen Ⅲ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平与模型组及miR-223-NC组比较显著下降，且差异具有统计学意义（ P<0.05）；Twist1、TGFBR2、collagen Ⅰ、collagen Ⅲ及α-SMA蛋白水平较模型组及miR-223-NC组显著下降，且差异具有统计学意义（ P<0.05）；Twist1、TGFBR2 3′UTR野生型双荧光素酶报告质粒与miR-223 mimics共转染293T细胞，荧光素酶活性均显著降低[（0.48±0.06，0.51±0.07）比（0.92±0.17,0.94±0.12）]。 结论:miR-223可能通过下调Twist1、TGFBR2基因的表达抑制心肌细胞中纤维化相关信号通路活化。

目的:探讨G蛋白耦联受体55（G protein-coupled receptor 55，GPR55）拮抗剂CID16020046在小鼠肾脏纤维化中的作用，为肾脏纤维化治疗提供新的方法和思路。方法:（1）在体外大鼠肾脏成纤维细胞（NRK-49F）中分别过表达GPR55和使用GPR55拮抗剂CID16020046，同时使用转化生长因子β1（TGF-β1）刺激，观察纤维化相关因子和炎性因子的表达。（2）体内构建单侧输尿管梗阻（unilateral ureteral obstruction，UUO）小鼠肾脏纤维化模型，将8周龄雄性C57BL/6J小鼠（20～25 g）按照随机数字表法随机分为3组：假手术组（Sham组， n=6）、造模组（UUO组， n=7）、造模+CID16020046药物组（UUO+CID组， n=8），UUO+CID组在造模前1 d、造模当日和术后每日均腹腔注射药物CID16020046（10 mg/kg），每日1次，Sham组和UUO组均腹腔注射对应剂量的0.9%生理盐水。UUO术后7 d处死小鼠取材，检测其肾功能指标、肝脏转氨酶、心肌标志物，Western印迹和实时荧光定量PCR检测肾脏纤维化相关因子和炎性因子的表达，免疫组化、天狼猩红染色、Masson三色染色检测肾组织的病理改变。 结果:（1）使用TGF-β1刺激NRK-49F细胞后，GPR55 mRNA和蛋白表达量均明显增加（均 P<0.05）；TGF-β1组和TGF-β1+GPR55过表达质粒组纤维化相关因子纤连蛋白、Ⅰ型胶原蛋白（Collagen Ⅰ）和炎性因子白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α mRNA表达的差异均无统计学意义（均 P>0.05）；与TGF-β1组比较，TGF-β1+CID组纤维化相关因子α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、波形蛋白（Vimentin）蛋白及Collagen Ⅰ、α-SMA mRNA表达均较低（均 P<0.05）。（2）与Sham组比较，UUO组GPR55 mRNA和蛋白表达均较高（均 P<0.05）。与UUO组比较，UUO+CID组血清肌酐较低（ P<0.05），两组血尿素氮、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、乳酸脱氢酶、肌酸激酶同工酶的差异均无统计学意义（均 P>0.05）。与UUO组比较，UUO+CID组肾组织纤维化相关因子纤连蛋白、Collagen Ⅰ、Vimentin蛋白及纤连蛋白、Collagen Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白、α-SMA mRNA表达均较低，肾小管扩张和间质胶原纤维沉积程度显著较轻（均 P<0.05）。 结论:CID16020046可降低UUO小鼠血清肌酐，保护肾功能，同时可降低肾脏成纤维细胞和小鼠肾组织纤维化相关因子表达，减轻肾脏纤维化。

目的:探讨肝泡型棘球蚴病患者肝纤维化与微小核糖核酸（microRNA，miR）-1、miR-133b的相关性。方法:选择2020年10月至2021年4月在新疆医科大学第一附属医院明确诊断为肝泡型棘球蚴病（9例）、肝硬化（9例）、肝细胞癌（5例）患者作为研究对象，并以同期健康志愿者为对照（10例），采集所有对象外周血样本制备血浆，经实时荧光定量PCR法检测外周血miR-1、miR-133b表达量；同时，自5例肝泡型棘球蚴病患者采集肝脏病灶周围组织（近端）、距病灶约5 cm处相应组织（远端），并采用免疫组织化学染色法检测肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近、远端的细胞活化相关指标[细胞周期蛋白D1（CyclinD1）、细胞周期蛋白依赖性激酶1（CDK1）、α平滑肌肌动蛋白（α-SMA）]，纤维化指标[Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白（CollagenⅠ、CollagenⅢ）]，转化生长因子β1（TGF-β1）信号通路相关基因[TGF-β1，Ⅰ、Ⅱ型转化生长因子β1受体（TGF-β1RⅠ、TGF-β1RⅡ）]及其下游相关蛋白（SMAD2、SMAD3）表达情况。结果:实时荧光定量PCR结果显示，肝泡型棘球蚴病、肝硬化、肝细胞癌和对照组人群外周血miR-1、miR-133b表达水平比较，差异均有统计学意义（ H = 16.54、28.40，均 P < 0.001）；其中，肝泡型棘球蚴病组miR-1、miR-133b表达水平均高于对照组、肝硬化组（均 P < 0.05）。肝泡型棘球蚴病患者病灶近端和远端CDK1（0.46 ± 0.02、0.42 ± 0.01），α-SMA（0.54 ± 0.09、0.51 ± 0.07），TGF-β1（0.55 ± 0.15、0.51 ± 0.13），TGF-β1RⅠ（0.58 ± 0.09、0.57 ± 0.08），TGF-β1RⅡ表达水平（0.40 ± 0.05、0.39 ± 0.05）比较，差异均有统计学意义（ t = 5.56、3.17、3.18、4.27、5.65， P = 0.005、0.034、0.034、0.024、0.011）；CyclinD1、CollagenⅠ、CollagenⅢ、SMAD2、SMAD3表达水平比较，差异均无统计学意义（ t = 3.06、3.06、2.86、1.43、1.50， P = 0.055、0.055、0.064、0.247、0.230）。Pearson相关分析结果显示，肝泡型棘球蚴病患者外周血miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关（ P = 0.001）；miR-1、miR-133b与CDK1、α-SMA、TGF-β1、TGF-β1RⅡ表达水平均无相关性（均 P > 0.05)。 结论:肝泡型棘球蚴病患者肝脏病灶近端TGF-β1信号通路相关因子表达上调；外周血miR-1和miR-133b表达上调，且miR-1与肝脏病灶近端TGF-β1RⅠ表达水平呈正相关，提示miR-1可能促进肝泡型棘球蚴病肝纤维化发生。

目的:探讨生脉强心颗粒对慢性心力衰竭气阴两虚夹瘀证病人Toll样受体4(TLR4)/髓分化因子88(MyD88)/核因子-κB(NF-κB)信号通路及心肌纤维化的影响.方法:选取2021年10月—2022年10月黑龙江中医药大学附属第二医院收治的慢性心力衰竭气阴两虚夹瘀证病人80例,采用随机数字表法分为研究组与对照组,每组40例.对照组采用常规治疗方案,研究组在对照组基础上加用生脉强心颗粒治疗.比较两组临床疗效及不良反应发生率,观察两组治疗前后中医证候积分、TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA及蛋白表达,心肌纤维化指标[Ⅲ型前胶原氨基末端肽(PⅢNP)、转化生长因子β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)]水平.结果:研究组临床疗效总有效率明显高于对照组,差异有统计学意义(90.0％与65.0％,P＜0.05).治疗后,研究组中医证候各项积分均明显低于对照组(P＜0.05),TLR4、MyD88及NF-κB的mRNA及蛋白表达均明显低于对照组(P＜0.05),血清TGF-β1、MMP-2及PⅢNP水平均明显低于对照组(P＜0.05).两组不良反应发生率比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论:生脉强心颗粒治疗慢性心力衰竭气阴两虚夹瘀证病人,可缓解临床症状,抑制TLR4/MyD88/NF-KB信号通路及心肌纤维化进程,且安全性较好.

目的:分析基因表达综合(GEO)数据库和癌症基因组图谱(TCGA)数据库中食管腺癌(EAC)基因表达数据,阐明EAC发病的潜在核心基因与肿瘤淋巴细胞浸润的关系,为EAC的诊断和治疗提供分子靶标.方法:在GEO数据库检索"esophageal adenocarcinoma",下载包括EAC和食管正常组织的高通量芯片数据集GSE13898、GSE26886、GSE74553和GSE92396.采用R软件的limma包筛选EAC组织和食管正常组织的差异表达基因(DEGs),并通过韦恩图获取共同DEGs,采用STRING数据库分析后导入Cytoscape软件筛选核心基因并构建蛋白-蛋白互作(PPI)网络,采用基因表达谱交互分析(GEPIA)数据库验证核心基因表达水平,采用阿拉巴马大学伯明翰分校癌症数据分析门户(UALCAN)和Kaplan-Meier Plotter数据库分析核心基因与EAC患者预后和临床资料的关联性,采用肿瘤免疫评价资源(TIMER)数据库分析核心基因与肿瘤免疫浸润的关系,采用基因本体论(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)对LinkedOmics数据库获得的核心基因中正相关表达基因进行功能和信号通路富集分析.结果:对GEO获得的4个数据集的DEGs取交集,共获得340个DEGs,其中上调基因127个,下调基因213个.经STRING数据库和Cytoscape软件筛选后,最终获得评分最高的关键核心基因分泌型磷蛋白1(SPP1)和转化生长因子β1(TGFB1).GEPIA数据库分析,与食管正常组织比较,癌组织中SPP1和TGFB1 mRNA表达水平明显升高(P＜0.01);SPP1低表达组EAC患者1、3和5年总体生存期均高于SPP1高表达组(HR=10.1,P＜O.05;HR=3.09,P＜0.05;HR=2.32,P＜0.05),TGFB1低表达组EAC患者5年总体生存期高于TGFB1高表达组(HR=2.36,P＜0.05).UALCAN数据库分析,与食管正常组织比较,Ⅱ-Ⅲ期及N1-N2期淋巴结转移的EAC患者癌组织中SPP1和TGFB1mRNA表达水平明显升高(P＜0.01).TIMER分析,SPP1和TGFB1 mRNA表达水平与EAC患者癌组织中巨噬细胞(r=0.353,P＜0.01;r=0.187,P＜0.05)和树突状细胞(r=0.236,P＜0.01;r=0.221,P＜0.01)浸润呈正相关关系.GO功能和KEGG信号通路富集分析,SPP1和TGFB1及其排名前50位正相关基因主要参与细胞迁移、细胞活性和血管发育等生物学过程及肿瘤蛋白多糖、细胞外基质(ECM)-受体互作和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)等信号通路.结论:SPP1和TGFB1与EAC患者临床分期、淋巴结转移和总体生存期有密切关联.SPP1和TGFB1高表达可能导致巨噬细胞和树突状细胞浸润,从而改变肿瘤微环境.SPP1和TGFB1可能成为EAC诊断和治疗的新靶点.

目的:探讨血清低密度脂蛋白受体相关蛋白5(LRP5)对2型糖尿病(T2DM)合并急性心肌梗死(AMI)患者心肌纤维化(MF)的影响.方法:选取四川省盐亭县人民医院2021年3月至2023年11月收治的142例AMI患者,其中45例合并T2DM的患者为T2DM+AMI组,97例未合并T2DM的患者为AMI组.比较2组一般资料、LRP5表达水平、心功能指标和MF指标;采用Pearson相关分析T2DM+AMI组患者LRP5表达水平与心功能和MF指标的相关性;采用单因素有序logistic回归分析T2DM+AMI组患者LRP5表达水平对MF指标的影响.结果:T2DM+AMI组多支血管病变比例、Killip分级Ⅲ～Ⅳ级患者比例高于AMI组(P＜0.05);T2DM+AMI组左室射血分数(LVEF)、每搏输出量(SV)、心输出量(CO),二尖瓣口舒张早期和晚期血流速度峰值的比值(E/A)低于AMI组(P＜0.05);T2DM+AMI组透明质酸(HA)、Ⅰ型前胶原(PCⅠ)、Ⅲ型前胶原(PC Ⅲ)、转化生长因子-β1(TGF-β1)、基质金属蛋白酶-2(MMP-2)表达水平高于AMI组(P＜0.05);相关分析显示,T2DM+AMI患者LRP5表达水平与LVEF、SV、CO、E/A呈负相关(r=-0.275、-0.211、-0.242、-0.234,P均＜0.05),与 HA、PC Ⅰ、PCⅢ、TGF-β1、MMP-2 呈正相关(r=0.316、0.332、0.354、0.395、0.366,P均＜0.05);单因素有序 logistic 回归分析结果显示 LRP5 是 T2DM+AMI 患者 HA(OR=1.291)、PC Ⅰ(OR=1.273)、PC Ⅲ(OR=1.682)、TGF-β1(OR=1.935)、MMP-2(OR=1.643)表达水平增加的危险因素(P＜0.05).结论:T2DM合并AMI患者心功能恶化与MF程度比单纯AMI患者更加严重,LRP5表达水平增加是T2DM合并AMI患者发生MF的危险因素.