目的:探究骨形成蛋白4(BMP4)在血小板源性生长因子(PDGF)诱导的肺动脉重塑中的作用及其机制。方法:本研究为实验研究。使用细胞活力检测、蛋白活力测定、蛋白质印迹法、siRNA干扰技术等方法研究BMP4对肺动脉平滑肌细胞(PASMC)的作用。烟雾连续暴露12周小鼠构建肺动脉重塑的动物模型，免疫荧光检测肺动脉BMP4的表达。结果:相较于PDGF组，PDGF+BMP4组能够抑制Ⅰ型胶原蛋白的合成( P<0.001)和钙蛋白酶活性( P<0.001)。相较于对照组，蛋白激酶A(PKA)的活性增加( P<0.001)。已知PKA是钙蛋白酶活性的负调控因子。使用PKA激活剂后，PDGF诱导的钙蛋白酶活性下降( P<0.01)。siRNA沉默PKA，由BMP4下调的钙蛋白酶活性得以恢复( P<0.001)，并增加了Ⅰ型胶原蛋白的表达量( P<0.001)。与PDGF组相比，PDGF+BMP4抑制转化生长因子β 1(TGF-β 1)的活化( P<0.001)和Smad2/3的磷酸化( P<0.001)。在烟雾暴露的小鼠肺动脉中，BMP4蛋白表达降低( P<0.001)。 结论:BMP4通过激活PKA抑制钙蛋白酶-TGF-β 1信号轴，导致PASMC Ⅰ型胶原蛋白合成下降。BMP4作为一种保护因素阻碍肺动脉重塑。

目的:探讨补骨脂素抗增生性瘢痕的作用机制。方法:体外培养成纤维细胞，按随机数字表法分为正常组(培养正常成纤维细胞)、瘢痕组(培养增生性瘢痕成纤维细胞)、TGF-β1组(10 ng/ml TGF-β1处理增生性瘢痕成纤维细胞5 min～12 h)、Smurf2 RNA干扰组[Smad泛素化调节因子2(Smad ubiquitin regulatory factor2, Smurf2)siRNA转染增生性瘢痕成纤维细胞72 h]、补骨脂素组(10 μmol/L补骨脂素处理增生性瘢痕成纤维细胞继续培养72 h)、补骨脂素＋TGF-β1组(增生性瘢痕成纤维细胞加入补骨脂素培养72 h后加入TGF-β1培养6 h)。采用Western blot法检测Smurf2、α-平滑肌肌动蛋白(α-actin SMA, α-SMA)蛋白表达；RT-PCR法检测Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达；ELISA法检测TGF-β1蛋白分泌。结果:与正常组比较，瘢痕组Smurf2蛋白[(0.83±0.08)比(0.38±0.07)]表达增加( P<0.05)；与瘢痕组比较，Smurf2 RNA干扰组TGF-β1[(2.2±0.18)比(4.2±0.47)]表达降低( P<0.05)；TGF-β1组Smurf2 [(0.71±0.06)比(0.42±0.04)]、α-SMA[(1.42±0.12)比(0.91±0.09)]蛋白表达增加( P<0.05)，Ⅰ型胶原蛋白mRNA [(0.72±0.09)比(0.41±0.07)]表达增加( P<0.05)；补骨脂素组Smurf2[(0.05±0.01)比(0.42±0.04)]、α-SMA[(0.71±0.07)比(0.91±0.09)]蛋白表达降低( P<0.05)，Ⅰ型胶原蛋白mRNA表达[(0.12±0.04)比(0.41±0.07)]降低( P<0.05)。 结论:补骨脂素可能通过TGF-β1/Smurf2信号通路抑制α-SMA蛋白表达，从而降低Ⅰ型胶原蛋白表达，起到抑制瘢痕形成的作用。

骨质疏松症是一种严重危害老年人健康的疾患。目前临床上治疗骨质疏松的药物主要有骨矿化促进药、骨吸收抑制药和骨形成促进药，可供选择种类仍然有限，亟待更多的基础研究成果向临床转化。本文将阐述骨质疏松基础领域新的潜在的治疗靶点和相关机制的研究现状：(1)骨质疏松发生发展的病理生理机制：骨重塑过程中的免疫调节(RANK/RANKL通路和WNT通路)；(2)单克隆抗体生物制剂研究(抗骨硬化蛋白Romosozumab)与骨质疏松；(3)细胞因子(骨形态发生蛋白、转化生长因子-β、生长激素和胰岛素样生长因子-1)与骨质疏松；(4)转录因子(GATA4、SFRP1、Tph1和DDK1)与骨质疏松；(5)干细胞与骨质疏松；(6)其他："骨骼-肠道菌群"调节轴和miRNAs等。

目的:研究压力对增生性瘢痕(HTS)形成及转化生长因子β1(TGF-β1)/Sma和Mad同源物蛋白(Smad)信号通路的影响。方法:健康成年新西兰大白兔12只(空军军医大学动物实验中心提供)，用直径为1 cm的圆形打孔器在每侧兔耳腹侧标记出4个圆形创面，用手术小圆刀沿标记线切开皮肤全层至兔耳软骨膜，分离软骨膜及全层皮肤，刮除创面残留组织，暴露创面，术后第28天观察瘢痕形成情况。兔耳HTS模型构建成功后进行分组，采用自身对照研究，兔左耳设为实验组，右耳为对照组，用抽签法于每侧兔耳选取2个HTS模型作为研究对象，每组24个。实验组：使用4-0尼龙丝线将直径为1.5 cm的圆形钕铁硼磁铁垫上压力垫片缝合至兔耳软骨上，使用Flexiforce压力传感器测量压力大小并每周进行调整，将压力控制在20~25 mmHg(1 mmHg＝0.133 kPa),每天持续时间≥23 h；对照组：不做处理。在施加压力后第40天观察兔耳瘢痕大体形态，并切取组织行HE、Masson染色进行组织学研究，计算瘢痕增生指数(SEI)、成纤维细胞数、角质层厚度；采用荧光定量PCR检测TGF-β1、Smad3、Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、Ⅲ型胶原(Collagen Ⅲ)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)mRNA相对表达量；采用蛋白质印迹法检测TGF-β1、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白相对表达量及Smad3磷酸化蛋白(p-Smad3)相对表达量(p-Smad3与Smad3蛋白表达量的比值)。使用Excel 2019、GraphPad Prim 8.0软件进行数据统计分析，计量资料均符合正态分布，以 ± s表示，2组间比较采用配对样本 t检验， P<0.05为差异有统计学意义。 结果:12只兔共形成96个创面，有27个创面无明显增生，其余69个创面形成突出皮肤表面、质地坚硬、暗红色的瘢痕增生样组织块，瘢痕形成率为71.9%(69/96)。施加压力后第40天，与对照组相比，实验组瘢痕外观凸起明显降低，硬度变软，颜色稍浅；HE染色和Masson染色结果显示，实验组中角质层厚度、SEI和成纤维细胞数分别为(69.33±6.03) μm、1.30±0.08、(236.30±14.64)个/视野，均显著低于对照组的(114.00±10.15) μm、1.72±0.05、(320.30±14.57)个/视野(均 P<0.01)，真皮层未见丰富的毛细血管、炎性细胞和成纤维细胞，胶原纤维排列有序，且较稀疏。荧光定量PCR检测结果表明，实验组TGF-β1、Smad3、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA mRNA相对表达量分别为0.48±0.08、0.58±0.05、0.04±0.01、0.15±0.02、0.31±0.03，均低于对照组的1.00±0.07、1.00±0.05、1.00±0.08、1.00±0.10、1.00±0.06(均 P<0.01)。蛋白质印迹法检测结果显示，实验组TGF-β1、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅲ、α-SMA蛋白相对表达量及Smad3磷酸化蛋白相对表达量分别为0.65±0.03、0.07±0.01、0.43±0.03、0.53±0.03、0.54±0.03，均低于对照组的1.02±0.06、0.93±0.05、0.92±0.03、0.82±0.03、0.92±0.03(均 P<0.01)。 结论:压力疗法可明显抑制瘢痕的增生，改善HTS组织结构，有利于胶原纤维蛋白的正常排列，减少胶原蛋白的过度沉积；压力疗法可能通过调控TGF-β1/Smad信号通路来抑制瘢痕的增生。

目的:观察电磁场干预对异位骨化(HO)大鼠模型的抗异位骨化效应并探讨相关作用机制。方法:采用随机数字表法将72只雄性SD大鼠分为对照组、模型组及观察组。采用钳夹、切断跟腱等方式将模型组、观察组大鼠制成HO动物模型，对照组术中仅暴露跟腱组织，未给予钳夹、切断处理。观察组大鼠于制模后每天给予2次50 Hz、1 mT正弦交变电磁场暴露干预，每次持续2 h。于术后3 d、14 d、1个月及3个月时每组各取6只大鼠，提取跟腱组织进行大体、组织学及免疫组化染色观察，并采用Western blot或RT-PCR方法检测标本中母亲DPP同源物7(Smad7)、母亲DPP同源物3(Smad3)、磷酸化母亲DPP同源物3(p-Smad3)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)及组织金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)等蛋白或基因表达情况；于术后1个月、3个月时对各组大鼠患肢跟腱部位进行X线检查以了解异位骨化形成情况。结果:术后各时间点对照组大鼠各项检测指标(包括跟腱大体外观、HE染色、免疫组化染色以及X线检查等)均无明显变化；与模型组比较，观察组异位骨化形成被明显抑制。模型组及观察组MMP-9基因表达量均显著高于对照组( P<0.05)，且随时间延长呈上升趋势；TIMP-1基因表达量均显著低于对照组( P<0.05)，且随时间延长呈下降趋势。与模型组比较，观察组术后各时间点MMP-9表达量均明显降低( P<0.05)，TIMP-1表达量均明显升高( P<0.05)。与模型组比较，观察组术后各时间点Smad7蛋白含量均明显增加，p-Smad3蛋白含量均明显减少。 结论:50 Hz、1 mT正弦交变电磁场干预对HO大鼠模型具有明确的抗异位骨化效应，其作用机制可能与促进Smad7表达，阻止Smad3磷酸化，从而抑制转化生长因子-β(TGF-β)/Smad信号转导通路，促进MMP-9/TIMP-1重新恢复动态平衡有关。

肺癌恶病质会严重影响患者的生活质量、生存期和治疗效果。循环细胞因子作为信号分子在肿瘤与肌肉组织、脂肪组织相互作用中扮演着重要的媒介角色，参与了肺癌恶病质的形成过程。高水平的循环激活素A、生长分化因子15、肿瘤坏死因子α、白细胞介素(IL)-6、IL-8、IL-17A、IL-35、脂质运载蛋白2，以及低水平的循环瘦素、eotaxin-1与肺癌患者恶病质发生或不良预后有关，它们通过下游激活素Ⅱ型受体、JAK/STAT3、核因子κB、铁死亡等途径，参与了肺癌恶病质患者中枢性厌食以及外周骨骼肌组织、脂肪组织的消耗过程。本文从三类关键的循环细胞因子(转化生长因子β超家族、炎症因子、脂肪因子)水平变化与肺癌恶病质的关系、对预后的影响及作用机制等方面综述了循环细胞因子在肺癌恶病质中的作用。

目的:研究大鼠百草枯（paraquat，PQ）中毒后不同时期输注骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells，BMSC）治疗肺纤维化的疗效并探讨可能的机制。方法:于2018年10至12月，采用全骨髓贴壁培养法分离、提纯SPF级SD大鼠的BMSC培养至第三代（P3）。对P3 BMSC进行表面抗原CD29、CD90、CD45、CD34检测并进行成骨和成脂诱导分化培养，分别以碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）、茜素红染色和油红O染色观察ALP、钙结节和脂肪滴形成情况。随机选择36只SPF级SD雄性大鼠随机分成6组，分别是空白对照组（NC组，注射等量的生理盐水），百草枯模型组（PQ组，腹腔注射20%PQ溶液18 mg/kg），BMSC-A组、BMSC-B组、BMSC-C组和BMSC-D组（分别于PQ染毒后3 h、3 d、7 d和14 d注射BMSC悬浮液1×10 6 cells/只）。28 d后处死，计算各组大鼠的肺脏器系数，碱水解法计算肺组织中羟脯氨酸（hydroxyproline，HYP）含量，HE染色及Masson染色观察肺损伤及肺纤维化情况，ELISA法检测血清中转化生长因子β1（TGF-β1）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）、基质金属蛋白酶-9（MMP-9）及金属蛋白酶组织抑制因子-1（TIMP-1）等细胞因子的水平。 结果:成功分离并获得高纯度BMSC，P3 BMSC阳性表达CD29、CD90，阴性表达CD34、CD45，并具有成骨、成脂分化潜能。HE染色和Masson染色显示，NC组大鼠肺泡结构完整，均匀；PQ组肺泡结构严重破坏，大量的胶原纤维和成纤维细胞沉积；与PQ组比较，各BMSC组肺损伤程度明显减轻，以BMSC-A组和BMSC-B组减轻程度明显。与NC组比较，PQ组大鼠的肺脏器系数、肺组织中HYP含量及血清中的TGF-β1及TIMP-1水平增高，差异均有统计学意义（ P<0.05），而TNF-α、MMP-9差异无统计学意义（ P>0.05）；与PQ组比较，BMSCA、B组的肺脏器系数、血清中TGF-β1、TIMP-1降低，差异均有统计学意义（ P<0.05）；与PQ组比较，BMSC-C、BMSC-D组的肺脏各系数血清中TGF-β1、TIMP-1降低，差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:早期注射BMSC对于减缓百草枯导致的肺纤维化效果更好，其机制可能是BMSC通过降低体内TGF-β1水平，调节TIMP-1/MMP-9的平衡，进而减轻炎症损伤、增加细胞外基质的降解而减轻肺纤维化。

多囊卵巢综合征以高雄激素血症、胰岛素抵抗、代谢综合征为主要临床表现,通常合并月经不调、排卵障碍、不孕症,其远期心血管疾病、骨质疏松症和癌症的发病风险增高.既往研究表明,磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B、丝裂原活化蛋白激酶/细胞外信号调节激酶、Toll样受体4/核转录因子-κB、转化生长因子-β1/Smads蛋白、抑癌基因p53/腺苷酸活化蛋白激酶等信号通路可通过抑制雄激素分泌、改善胰岛素抵抗,调节卵巢颗粒细胞增殖、凋亡与自噬,促使卵母细胞成熟,抑制卵巢纤维化形成,改善炎症反应等途径治疗多囊卵巢综合征.故本文通过对参与多囊卵巢综合征形成过程的相关信号通路进行综述,并探讨中药的治疗机制.

背景:传统尿路修复重建手段受限于供体短缺、并发症多以及生理功能恢复不理想等问题,组织工程策略为此领域提供了新方向.鉴于尿路主要由肌性组织构成,其中关键在于发掘适合的种子细胞并高效诱导分化为平滑肌细胞,但关于不同平滑肌细胞诱导方案效能的对比研究仍较为匮乏.目的:旨在分离、培养及鉴定人尿源性干细胞,并比较两种不同成平滑肌诱导方案的效果.方法:采用多次离心法从11份健康成人志愿者尿液中分离提取尿源性干细胞,使用流式细胞仪进行表面标志物的鉴定,通过成骨、成脂诱导分化来验证尿源性干细胞的多向分化潜能.尿源性干细胞分别在含转化生长因子β1以及转化生长因子β1联合血小板衍生生长因子的成平滑肌细胞诱导分化培养基中诱导分化14 d,采用免疫荧光染色和Western blot检测平滑肌特异性蛋白(α-SMA、SM22)的表达差异.结果与结论:①成功从8份健康人尿液中分离出尿源性干细胞,细胞呈"米粒"样,具有很好的分裂增殖能力;②尿源性干细胞高表达间充质干细胞表面标志物CD73、CD90和CD44,极低表达造血干细胞表面标志物CD34和CD45,不表达CD19、CD105和HLA-DR;③经成骨和成脂诱导分化后,可见明显的钙结节和脂滴形成,茜素红染色和油红O染色结果呈阳性;④成平滑肌诱导培养14 d,免疫荧光染色显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组尿源性干细胞成平滑肌诱导分化率显著高于转化生长因子β1组(P<0.005);⑤成平滑肌诱导培养14 d,Western blot检测显示转化生长因子β1/血小板衍生生长因子组α-SMA和SM22蛋白表达量显著高于转化生长因子β1组(P<0.005).结果表明:尿源性干细胞可以通过多次离心法无创分离获取;相较于单纯转化生长因子β1,转化生长因子β1/血小板衍生生长因子联合应用能显著提高尿源性干细胞诱导分化为平滑肌细胞的效率.

目的 观察复元活血汤联合人工股骨头置换治疗高龄股骨粗隆间骨折的临床疗效.方法 回顾性分析120例2019年2月至2022年2月就诊于湖州正博骨科医院的高龄股骨粗隆间骨折患者,按治疗方法将其分为中医组(60例)与西医组(60例),2组均行人工股骨头置换术治疗,西医组术后给予西医常规治疗,中医组术后给予西医常规治疗及复元活血汤口服治疗.对比2组治疗前后中医证候学积分、髋关节功能(Harris髋关节功能、骨密度)、骨折愈合因子水平[外源性骨形成蛋白(BMP)、转化生长因子-β(TGF-β1)]、血液流变学指标(红细胞刚性指数、全血高切黏度),对比2组术后肢体肿胀程度及并发症发生情况.结果 治疗后2周相较于治疗前,2组各项中医证候学积分、红细胞刚性指数、全血高切黏度降低,Harris髋关节功能改善,差异有统计学意义(P＜0.05).治疗后2个月相较于治疗前,2组骨密度、BMP、TGF-β,升高,差异有统计学意义(P＜0.05).相同时间中医组相较于西医组,中医证候学积分[局部胀闷(1.67±0.53)分与(2.25±0.73)分;瘀斑(2.14±0.69)分与(2.58±0.81)分;疼痛(1.79±0.57)分与(2.36±0.77)分、红细胞刚性指数(5.47±0.72)与(5.92±0.75)、全血高切黏度(3.89±0.69)mPa·s 与(4.23±0.76)mPa·s、术后 3 d 肢体肿胀程度(3.59±0.31与4.07±0.35)、下肢静脉血栓(DVT)发生率(0％与8.3％)更低,Harris髋关节功能(60±6与57±6)、骨密度(0.83±0.11)g/cm3 与(0.77±0.09)g/cm3、BMP(41±6)ng/ml 与(39±5)ng/ml、TGF-β1(395±96)μg/L 与(351±71)μg/L更高,差异有统计学意义(P＜0.05).2组其余并发症发生情况对比差异无统计学意义(P＞0.05).结论 复元活血汤联合人工股骨头置换可缓解高龄股骨粗隆间骨折患者的中医证候,促进骨折愈合及髋关节功能恢复,还可改善术后肢体肿胀情况,预防DVT发生.