目的:探讨转录因子7类似物2（transcription factor 7-like 2，TCF7L2）基因多态性及表达在绝经后2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）合并骨质疏松（osteoporosis，OP）患者中的作用及相关机制。方法:选择2019年1月至2020年6月在宁波大学医学院附属医院就诊的148例绝经后T2DM女性患者作为研究对象。其中合并OP 86例（T2DM+OP组），未合并OP 62例（T2DM组），并纳入同期在本院进行健康体检的100例自然绝经后健康女性作为对照组。抽取空腹静脉血，检测临床和骨代谢指标；采用毛细管电泳和片段分析（SNaPshot）技术对TCF7L2基因的两个SNP位点rs7901695（T>C）、rs290487（C>T）进行分型；采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测法测定TCF7L2基因mRNA的相对表达量。构建过表达和沉默慢病毒载体，探究TCF7L2过表达和沉默对大鼠成骨细胞增殖的影响。结果:对于rs7901695位点，T2DM+OP组、T2DM组和对照组间的TT、TC和CC基因型分布差异有统计学意义（ χ2=12.545， P=0.014），3组间的T、C等位基因频率分布差异有统计学意义（ χ2=17.089， P<0.001）。对于rs290487位点，T2DM+OP组、T2DM组和对照组间的CC、CT和TT基因型分布差异有统计学意义（ χ2=10.500， P=0.033），3组间的C、T等位基因频率分布差异有统计学意义（ χ2=14.665， P=0.001）。对于rs7901695位点，携带CC+TC基因型的T2DM+OP患者FPG、TG水平显著高于携带野生型TT基因型的患者（FPG： t=2.559， P=0.014；TG： t=2.034， P=0.036），而血钙和25OHD3水平显著低于后者（血钙： t=3.889， P<0.001；25OHD： t=4.112， P<0.001）；对于rs290487位点，携带TT+CT基因型的T2DM+OP患者血钙、BGP和25OHD3水平均显著低于携带野生型CC基因型的患者，差异有统计学意义（血钙： t=3.751， P<0.001；BGP： t=2.731， P=0.007；25OHD3： t=3.225， P=0.002）。T2DM+OP患者TCF7L2基因mRNA相对表达量显著低于T2DM组和对照组（ F=5.735， P<0.05）；随着rs7901695位点C等位基因的增加，TCF7L2基因mRNA相对表达量逐渐降低（ F=5.723， P<0.05）。此外，TCF7L2过表达的大鼠成骨细胞增殖率显著升高，而TCF7L2沉默的成骨细胞增殖水平显著下降（ F=7.846， P<0.05）。 结论:在绝经后T2DM女性中，TCF7L2基因变异会导致基因表达水平降低，抑制成骨细胞的增殖，从而参与到OP的发病机制中。

目的 探讨高脂饮食对小鼠胰岛功能及胰腺组织中转录因子7-类似物2(TCF7L2)与胰高血糖素样肽-1(GLP-1)的影响.方法 30只小鼠随机均分为2组:正常对照组和高脂饮食(T2DM模型)组,分别连续24周喂养普通饲料和60％高脂饲料.连续喂养24周后比较两组小鼠的体质量以及胰岛功能等相关指标的差异;检测小鼠不同时间点的血糖水平,血浆中胰岛素、高密度脂蛋白(HDL-C)、低密度脂蛋白(LDL-C)、总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)的水平,胰腺组织中 TCF7L2、GLP-1和胰高血糖素样肽-1受体(GLP-1R)蛋白的表达水平和mRNA转录水平.结果 与正常对照组比较,高脂饮食组小鼠的体质量显著增加(P＜0.01),葡萄糖耐量和胰岛素耐受能力明显受损(P＜0.05),HDL-C、LDL-C、TC、TG、空腹血糖和胰岛素的水平明显增加(P＜0.05),而TCF7L2、GLP-1和GLP-1R的mRNA和蛋白表达水平明显降低(P＜0.01).另外,与正常对照组相比,高脂饮食组小鼠胰腺组织的胰岛形态不规则,体积增大,血管数量增多,扩张充血显著.结论 高脂饮食的T2DM小鼠,胰腺组织胰岛形态改变,胰岛功能降低,TCF7L2表达水平降低,并且GLP-1和GLP-1R表达水平同步降低.

目的 探究长链非编码RNA(LncRNA)转录因子7类似物2(TCF7L2)在表皮生长因子受体基因(EGFR)突变的非小细胞肺癌(NSCLC)组织表达及其与病人临床病理特征和预后相关性.方法 选取2019年3月—2021年6月河北北方学院附属第一医院治疗的EGFR突变NSCLC病人104例为研究对象,分别取其癌组织和癌旁组织应用逆转录PCR(RT-PCR)检测LncRNA TCF7L2的表达,比较不同组织TCF7L2表达及其与临床病理特征和预后的相关性.结果 RT-PCR检测结果显示,癌组织中LncRNA TCF7L2表达量显著高于癌旁组织(t=12.410,P＜0.05).与LncRNA TCF7L2低表达病人比较,高表达者发生淋巴结转移更多、肿瘤体积更大(x2=4.579、7.762,P＜0.05);LncRNA TCF7L2高表达病人6、9和12个月的生存率较低,但差异均无统计学意义(P＞0.05).结论 LncRNA TCF7L2在EGFR突变NSCLC病人癌组织表达高于癌旁组织,且TCF7L2高表达病人的淋巴结转移风险较高、肿瘤体积较大,其生存率可能较低.

目的 探讨河北地区 T2DM 患者转录因子 7 类似物 2(TCF7L2)基因 rs290487、rs7903146位点单核苷酸多态性(SNP)与DKD发生的相关性.方法 选取2020 年1月至2023 年6月于我院内分泌科治疗的T2DM患者 619 例,根据是否合并DKD分为单纯T2DM组(n=317)和T2DM合并DKD组(DKD,n=302),比较两组TCF7L2 rs290487、rs7903146 位点SNP资料,分析SNP与DKD的相关性.结果 两组TCF7L2 基因rs290487、rs7903146 位点基因型频率分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05),等位基因频数分布均符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05).单因素Logistic回归分析显示,显性模型中TC+CC基因型携带者DKD风险是TT基因型携带者的2.772 倍.多因素Logistic回归分析显示,TC+CC基因型携带者DKD风险是TT基因型携带者的2.837 倍.结论 TCF7L2 基因rs290487 位点TC、CC基因型是DKD发生的危险因素,rs290487 位点基因突变可能与河北地区T2DM患者DKD发生相关.

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)结肠癌相关转录本2(CCAT2)在高糖培养条件下心肌细胞中的表达变化及通过Wnt/β-catenin信号通路调控心肌细胞损伤和凋亡的机制.方法 体外培养人心肌细胞AC16,将细胞分为4组,对照组、高糖组、高糖+干扰RNA阴性对照组、高糖+干扰RNA组(干扰RNA的靶标为lncRNA CCAT2).采用CCK8法及流式细胞术检测细胞增殖和凋亡率;实时荧光定量PCR(qPCR)检测lncRNA CCAT2、β-catenin、转录因子7类似物2(TCF7L2)、Caspase-3、c-Myc、细胞周期蛋白(Cyclin)D1基因的表达;Western blot检测β-catenin、TCF7L2、CyclinD1蛋白表达;检测细胞培养液中超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)和天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性.结果 高糖培养条件下的AC16心肌细胞lncRNA CCAT2的基因表达显著高于对照组(P<0.05),同时β-catenin、TCF7L2、Caspase-3、c-Myc、CyclinD1基因表达显著上调(P<0.05),细胞增殖受到抑制(P<0.05),凋亡率增加(P<0.05),细胞培养液中LDH和AST活性显著升高(P<0.05),细胞中SOD活性显著降低(P<0.05).高糖培养条件下,RNA干扰lncRNA CCAT2表达后,细胞增殖增加(P<0.05),细胞凋亡率显著下降(P<0.05),β-catenin、TCF7L2、Caspase-3、c-Myc、CyclinD1基因的表达下调(P<0.05),β-catenin(细胞核)、TCF7 L2、CyclinD1蛋白表达显著下调(P<0.05),β-catenin(细胞质)蛋白表达显著上调(P<0.05).结论 高糖条件下,lncRNA CCAT2可通过Wnt/β-catenin信号通路调控心肌细胞损伤和凋亡.

目的 探讨转录因子7类似物2(transcription factor 7 analogue 2,TCF7L2)的单核苷酸多态性(single nucleotide poly-morphism,SNP)位点与2型糖尿病(type 2 diabetes mellitus,T2DM)之间的相关性,为个体T2DM发病风险的预测及早期干预提供依据.方法 采用回顾性病例-对照研究,选取2020年新疆维吾尔自治区墨玉县医院维吾尔族150例T2DM患者为病例组,另选取同期健康体检者218例为对照组.采用MGB探针检测两组TCF7L2基因rs7901695位点的基因型,并进行相关问卷调查和生化指标检测.采用Logistic回归模型分析不同遗传模型中基因型与T2DM遗传易感性的关联性.结果 两组在空腹血糖和低密度脂蛋白胆固醇水平方面比较,差异有统计学意义(P＜0.05).两组间TCF7L2基因rs7901695位点的等位基因和基因型分布频率比较,差异均无统计学意义(P＞0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,在调整协变量后,TCF7L2基因rs7901695位点CC基因型与T2DM遗传易感性有相关性(P＜0.05).TCF7L2基因rs7901695位点与吸烟、饮酒和高甘油三酯在T2DM中未发现存在交互作用.结论 在新疆维吾尔自治区墨玉县维吾尔族人群中,TCF7L2基因rs7901695位点的多态性与T2DM遗传易感性存在相关性,即CC基因型可能会增加T2DM的发病风险.

目的:分析系统性硬化症(systemic sclerosis,SSc)合并肺间质病变(interstitial lung disease,ILD)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)全基因组DNA甲基化和转录组表达谱,并进一步探讨DNA甲基化对Wnt/β-catenin信号通路和趋化因子信号通路的影响.方法:收集19例SSc患者(SSc组)及18例健康人(对照组)外周血PBMCs.SSc患者中有10例合并ILD(SSc合并ILD亚组)、9例未合并ILD(SSc未合并ILD亚组).采用Illumina 450K甲基化芯片和Illumina HT-12 v4.0基因表达谱芯片分析全基因组DNA甲基化和基因表达水平,研究DNA甲基化对Wnt/β-catenin和趋化因子信号通路的影响.结果:全基因组DNA甲基化分析发现:与SSc未合并ILD亚组比较,SSc合并ILD亚组存在71个高甲基化位点,98个低甲基化位点.转录组分析发现:与SSc未合并ILD亚组相比,SSc合并ILD亚组有164个基因表达上调,191个基因表达下调.SSc组患者PBMCs中Wnt/β-catenin信号通路中有35个低甲基化基因,其中卷曲同源物1(frizzled-1,FZD1)、丝裂原活化蛋白激酶9(mitogen-activated protein kinase 9,MAPK9)、母亲DPP同源物2(mothers against DPP homolog 2,SMAD2)、转录因子7类似物2(transcription factor 7-like 2,TCF7L2)和无翅型MMTV整合位点家族成员5B(wingless-type MMTV integration site family,member 5B,WNT5B)mRNA在SSc组中的表达显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).与SSc未合并ILD亚组比较,SSc合并ILD亚组中Dickkopf相关蛋白2(dickkopf homolog 2,DKK2)、FZD1、MAPK9等多个基因的mRNA表达虽上调,但差异均无统计学意义(均P>0.05).趋化因子信号通路中有38个低甲基化基因,其中β-抑制蛋白1(β-arrestin 1,ARRB1)、C-X-C基序趋化因子配体10(C-X-C motif chemokine ligand 10,CXCL10)、C-X-C基序趋化因子配体16(C-X-C motif chemokine ligand 16,CXCL16)、FGR、中性粒细胞胞浆因子1C(neutrophil cytosolic factor 1C,NCF1C)mRNA在SSc组中的表达显著高于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05).与SSc未合并ILD亚组比较,SSc合并ILD亚组中ARRB1、CXCL10、CXCL16等多个基因的mRNA表达上调,但差异均无统计学意义(均P>0.05).结论:SSc合并ILD与SSc无ILD患者存在DNA甲基化和转录组表达谱的差异,且SSc患者PBMCs中存在Wnt/β-catenin和趋化因子信号通路多个基因表达上调,这可能与SSc的发病机制有关.

胰岛β细胞去分化是β细胞功能衰竭的主要机制之一.转录因子7类似物2(transcription factor 7-like 2,Tcf7l2)表达水平与β细胞的功能密切相关.但是,转录因子Tef7l2表达水平与高糖诱导的β细胞去分化的关系目前尚未见报道.本研究通过Tcf7l2的RNA干扰和过表达慢病毒转染MIN6细胞,分别下调和上调Tcf7l2的表达.研究分为空载体对照组与Tcf7l2干扰组和Tcf7l2过表达组.高糖(35 mmol/L)干预48 h,采用qRT-PCR和Western印迹检测祖细胞标志基因和β细胞标志基因的表达变化.结果显示,干扰慢病毒转染MIN6细胞12 h,慢病毒感染效率达95％以上,与对照组比较,Tcf7l2 mRNA的干扰率约为83％,蛋白质水平的干扰率约为49％.过表达慢病毒转染MIN6细胞12 h时,慢病毒转染效率达95％以上.与对照组比较,Tcf7l2 mRNA水平增加16倍,蛋白质水平增加4倍.高糖干预细胞48 h,Tcf7l2干扰组的祖细胞标志基因表达明显高于对照组,β细胞标志基因表达明显低于对照组(P＜0.05).相反,Tcf7l2过表达组的祖细胞标志基因表达明显低于对照组,β细胞标志基因表达明显高于对照组(P＜0.05).上述结果提示,Tcf7l2的表达水平与β细胞去分化密切相关;Tcf7L2表达下调可增加高糖诱导的p细胞去分化,而Tcf7l2过表达可减少高糖诱导的β细胞去分化.

目的 研究转录因子7类似物2(TCF7L2)基因在胃癌中的表达情况及其与胃癌化疗耐药的关系.方法 采用qRT-PCR方法检测15例胃癌及其癌旁组织中TCF7L2的mRNA量,western blot实验检测胃癌细胞株SGC-7901、HSC44、44AS3、N87、MKN45、MGC803与永生化正常胃黏膜上皮细胞GES-1中TCF7L2蛋白表达量.通过基因稳定转染技术构建高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株和SGC-7901/CON(对照组)细胞株,用细胞计数法分别检测两者对顺铂和卡铂的耐药情况.结果 TCF7L2在胃癌组织中的表达显著高于癌旁正常组织,在胃癌细胞株中的表达水平也明显高于对照细胞GES-1.高表达TCF7L2的SGC-7901/TCF7L2细胞株对顺铂与卡铂的耐受性明显强于对照细胞株.结论 TCF7L2基因表达与胃癌的发生发展有正相关关系;TCF7L2高表达可能是胃癌对铂类药物化疗耐受的原因之一.

2型糖尿病(T2DM)的发生是多因素共同作用的结果,多基因变异是其中重要的因素,并且产生了T2DM的遗传易感性.全基因组关联性研究发现与T2DM密切相关的许多基因变异.核转录因子7类似物2(TCF7L2)基因是发现最早、研究较深入的基因之一,其表达产物转录因子TCF7L2介导Wnt信号通路,调节靶基因在全身各组织表达维持血糖平衡,该基因单核苷酸多态性变异通过影响Wnt信号通路调节胰岛素分泌及外周胰岛素抵抗,从而增加T2DM的易感性,其中rs7903146位点单核苷酸多态性变异与T2DM相关性密切,是目前研究的热点.