目的:探讨雄蚕益肾方含药血清对H2O2诱导小鼠睾丸间质细胞氧化应激损伤后铁死亡的影响.方法:应用H2O2诱导小鼠TM3 睾丸间质细胞建立氧化应激损伤模型,将诱导成模的TM3 细胞随机分为模型组、雄蚕益肾方组、铁死亡抑制剂 Ferrostatin-1 组、Ferrostatin-1 联合雄蚕益肾方组,分别用空白血清、20%含药血清、2 μmol/L Ferrostatin-1、2 μmol/L Ferrostatin-1+20%含药血清干预,另设置对照组(正常TM3 细胞+空白血清).观察各组细胞形态,检测各组细胞分泌的睾酮、超氧化物歧化酶(SOD)、活性氧(ROS)、丙二醛(MDA)、铁蛋白重链1(FTH1)、溶质载体家族7 成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽(GSH)、谷胱甘肽过氧化物酶 4(GPX4)、脂肪酸辅酶A连接酶4(FACL4)、总铁离子及亚铁离子含量.结果:与模型组比较,对照组ROS、MDA、FACL4、总铁和亚铁离子表达均显著降低(P<0.05),睾酮、SOD、谷胱甘肽、FTH1、SLC7A11 及GPX4 表达均显著升高(P<0.05);雄蚕益肾方组能显著促进TM3 细胞分泌睾酮并上调TM3 细胞FTH1、SLC7A11、GPX4、GSH和SOD表达(P<0.05),显著下调ROS、MDA、FACL4、总铁离子和亚铁离子表达(P<0.05).结论:H2O2 暴露后可通过氧化应激诱导小鼠TM3 睾丸间质细胞发生铁死亡,雄蚕益肾方可能通过激活SLC7A11/GSH/GPX4 轴拮抗TM3 细胞氧化应激损伤及铁死亡,这可能是雄蚕益肾方治疗男性迟发性性腺功能减退症的潜在作用机制.

目的:探讨SUCLG1基因突变所致新生儿脑肌病型线粒体DNA耗竭综合征9型（MDS）的临床特点，为其早期诊断提供依据。方法:对广州市妇女儿童医疗中心新生儿科收治的1例新生儿脑肌病型MDS 9型患儿的临床表现、生化结果、辅助检查、尸体病理及基因报告进行回顾性分析，并以"线粒体DNA耗竭综合征""SUCLG1基因""甲基丙二酸尿症""甲基丙二酸""SUCLG1"等为关键词，分别对中国知网、万方、Pubmed、ClinVar自建库至2023年5月收录的文献进行检索，其中仅13篇文章报道20例新生儿期发病的SUCLG1基因突变导致的MDS，本文总结新生儿脑肌病型MDS 9型的临床特点。结果:本例患儿为足月小样儿，女，生后0.5 h起病，主要表现为呼吸窘迫、难以纠正的代谢性酸中毒、高乳酸血症、低氧血症、尿甲基丙二酸和血氨轻度升高，予以禁食、呼吸循环支持、纠酸等治疗效果欠佳，生后5 d死亡。尸体病理见脑干蛛网膜下腔出血及血肿形成、动脉导管未闭、卵圆孔未闭、左肺动脉狭窄、右心室和左心室室壁增厚。外观及四肢未见畸形。血酰基肉碱提示C0含量极低，C3较正常高值升高3.7倍。尿液GC-MS见少量甲基丙二酸，全外显基因检测出SUCLG1基因c.901G>A（p.Gly301Arg）和c.315-316dup（p.Glu106GlyfsTer63）复合变异，确诊脑肌病型MDS 9型。共检索13篇文献20例新生儿期发病的脑肌病型MDS 9型患者，包括本例共21例，临床特征主要为新生儿期出现不明原因的肌张力减低、喂养困难，伴有甲基丙二酸轻度升高，95%有高乳酸血症，80%有呼吸窘迫，累及呼吸、循环系统者更易出现致死性乳酸酸中毒，全外显子基因测序示SUCLG1基因突变。治疗以支持为主，预后差，死亡率高。结论:新生儿期不明原因的肌张力减低、喂养困难、乳酸酸中毒、甲基丙二酸轻度升高应警惕新生儿脑肌病型MDS 9型，累及呼吸、循环系统者更易出现新生儿致死性酸中毒，基因测序可帮助诊断。

目的:对1例以肌痛为主要临床表现的Becker肌营养不良症(Becker muscular dystrophy，BMD)的家系进行遗传学分析，并回顾分析以肌痛为主要症状的BMD患者的 DMD基因变异，以期为疾病的早期诊断提供依据。 方法:对患者进行临床资料采集并完善肌酶、肌电图等辅助检查，利用多重连接探针扩增技术(multiplex ligation-dependent probe amplification，MLPA)和高通量技术进行基因检测，Sanger测序法进行验证；分析已报道的以肌痛为主要症状的BMD患者的基因变异特征。结果:先证者的主要临床表现为肌痛和血清肌酸激酶(creatine kinase，CK)升高，家系中另1例患者的临床表现类似；基因测序显示先证者和患病的舅舅 DMD基因存在第10~29外显子半合子缺失，其母亲为杂合缺失携带者，父亲为野生型；根据美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南，该变异判定为致病变异(PVS1+PM2+PP1)。 结论:肌痛伴血清CK升高可以是BMD的不典型临床表现，BMD的肌痛症状可能与 DMD基因中央棒状结构域外显子缺失变异相关， DMD基因第10~29外显子缺失可能为该家系患者的致病原因，基因检测结果可以为临床诊断提供依据。

目的:观察胶质瘤微环境中发生恶性转化的肿瘤相关巨噬细胞（TAM）脂代谢特征，分析抑制其脂代谢重塑后生物学表型变化及调控机制。方法:实验采用12只6~8周雄性Balb/c小鼠。巨噬细胞（Mφ）来源于小鼠骨髓，恶性转化巨噬细胞（tMφ 1和tMφ 2）为胶质瘤干细胞与巨噬细胞体内外互相作用模型所克隆。检测Mφ、tMφ 1和tMφ 2内脂滴形成和胆固醇含量，qRT-PCR检测脂代谢关键酶固醇调节元件结合蛋白（SREBP）、脂肪酸合成酶（FASN）和3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶（HMG-CoA）的表达水平，并与正常Mφ比较。分析脂代谢抑制药物辛伐他汀（SIM）对相关细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响及胞内胆固醇含量的变化。构建SIM处理前后恶性转化TAM中miRNA的差异表达谱，生物信息学分析筛选并验证与脂代谢重塑相关的miR449a及其靶基因分拣微管连接蛋白17（SNX17）。qRT-PCR和Western 印迹分析上调miR-449a对SNX17表达水平影响，检测上调miR449a对恶性转化TAM生物学表型及胆固醇含量的影响，并检测敲减SNX17后低密度脂蛋白受体（LDLR）表达变化及其对恶性转化TAM胆固醇含量的影响。 结果:tMφ 1和tMφ 2内脂滴数量明显多于Mφ，胆固醇相对含量分别为3.89±0.68、3.56±0.53，显著高于Mφ（1.01±0.21）（ P<0.001），脂代谢酶SREBP（4.78±0.60、2.84±0.41）、FASN（4.65±0.70、3.01±0.45）和HMG-CoA（5.74±0.55、2.97±0.34）相对表达量高于Mφ（1.01±0.19、1.02±0.21和0.99±0.18）（均 P<0.001）。SIM作用后tMφ 1和tMφ 2细胞增殖率分别由（47.06±5.88）%、（45.29±5.64）%下降至（23.53±4.70）%、（18.74±5.76）%（均 P<0.05）；迁移细胞数分别由（1 025±138）个、（350±47）个下降至（205±63）个、（99±25）个（均 P<0.001），侵袭细胞数分别由（919±45）个、（527±34）个下降至（220±23）个、（114±21）个（均 P<0.001），胞内胆固醇相对含量分别由1.01±0.14、1.02±0.09下降至0.52±0.08、0.58±0.07（均 P<0.05）。SIM作用tMφ 1后筛选出miR-449a，生信分析并验证其靶基因为SNX17。过表达miR-449a后SNX17表达下调，细胞增殖率、迁移和侵袭数明显减少，胞内胆固醇含量降低；敲减SNX17后LDLR表达下调，胞内胆固醇水平亦相应下降（均 P<0.05）。 结论:胶质瘤干细胞重构的高度免疫抑制性微环境中恶性转化TAM脂代谢水平显著增高。miR-449a通过靶向SNX17调控LDLR从而重塑恶性转化TAM的脂代谢，进而抑制其增殖、迁移和侵袭能力，精准干预miR-449a/SNX17/LDLR轴可为通过代谢干预逆转胶质瘤干细胞重构的以TAM为主的高度利瘤性免疫微环境治疗提供实验依据。

本文报道 SUCLG1基因复合杂合突变所致的以轻度甲基丙二酸尿症获诊的新生儿琥珀酰辅酶A连接酶缺乏症1例。患儿生后2 d发病，以"呕吐、拒奶"就诊于山东大学齐鲁医院，血气分析提示代谢性酸中毒及高乳酸血症。实验室检查提示血氨轻度升高、血清转氨酶轻度升高、同型半胱氨酸正常。影像学检查提示脑发育不良及心脏多发畸形。血液氨基酸及酰基肉碱谱、尿有机酸谱分析提示甲基丙二酸尿症。行全外显子组测序，结果显示， SUCLG1基因有2个新突变，即c.40A>G(p.M14V)突变和6~9号外显子的杂合缺失，分别来自于患儿母亲和父亲。患儿经扩容、纠酸等治疗，代谢性酸中毒好转，但乳酸持续偏高，出现水肿及呼吸衰竭，家长放弃治疗，出院后死亡。 SUCLG1基因突变可导致琥珀酰辅酶A连接酶缺乏症、线粒体DNA耗竭综合征。该病无特效治疗，对于喂养困难、乳酸酸中毒、多脏器受累的新生儿，应行遗传代谢病筛查，基因检测为确诊手段。

目的:总结归纳免疫介导坏死性肌病（IMNM）患者3个临床亚组的临床、股部磁共振（tMRI）及肌电图特点。方法:纳入2019年4月至2021年4月解放军总医院第一医学中心神经内科确诊IMNM患者32例，分为抗信号识别颗粒抗体阳性（SRP +）组、抗3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A还原酶抗体阳性组（HMGCR +）和血清抗体阴性（SN）组，分析3组间的性别、年龄、病程、合并肌炎抗体、肌外表现、肌电图等临床资料，tMRI炎性水肿和脂肪浸润评分评估骨骼肌受累特征。应用方差分析、Kruskal-Wallis检验、Chi-square检验对比3组间不同临床特征以及tMRI评分的差异，3组间有统计学差异时，其中两组间比较应用Bonferroni法校正。 结果:（1）32例患者中女性20例（62.5%），起病年龄为18~76（47±14）岁，25例（78.1%）患者呈现急性或亚急性病程，SRP +组17例（53.1%），HMGCR +组8例（25.0%），SN组7例（21.9%）。抗Ro52抗体是最常见的合并抗体（12/32，37.5%），其中SRP +组10例。（2）所有患者肌酸激酶值均升高，峰值中位数为5 948（4 229，7 664）U/L，徒手肌力评定法（MMT）评分3组间差异无统计学意义（ P值均>0.05），肢体近端低于远端（ P<0.01），中轴肌低于肢体远端（ P<0.05）。（3）HMGCR +组肌外表现显著少于其余两组（12.5% 比 71.4%和76.5%， P<0.017），抗SRP抗体合并Ro52抗体阳性患者皮疹（60.0% 比 14.3%， P<0.05）和间质性肺病（70.0% 比 14.3%， P<0.05）均多于单纯SRP +者。SN组合并结缔组织病最多见（57.1% 比 11.8%和0， P<0.017）。（4）tMRI示SN组的筋膜水肿比其他两组更明显（ P<0.017），脂肪浸润和肌肉水肿程度在3组间差异无统计学意义（ P值均>0.05），但SRP +组有更多的病例早期即出现脂肪化。（5）HMGCR +组中肌强直电位（25% 比 0和0， P<0.017）和复合重复放电（CRDs）（50.0% 比 5.9%和0， P<0.017）均明显多于其余两组，蛋白组学分析发现有上述自发电位患者的肌肉组织中细胞骨架、细胞连接和细胞外基质等相关蛋白表达上调。 结论:单纯SRP +和HMGCR +的IMNM以骨骼肌受累为主，抗SRP抗体和抗Ro52抗体共阳性者有更多的肌外表现，可能是SRP +组的特殊亚型。本研究提出肌筋膜炎性水肿是SN-IMNM早期损伤征象。HMGCR +组肌电图更易出现肌强直电位及CRDs。

目的:探究白藜芦醇（resveratrol, Res）预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤（myocardial ischemia reperfusion injury, MIRI）的影响。方法:将42只健康成年雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组：假手术组（Sham组，12只）、心肌缺血再灌注损伤组（IR组，12只）、白藜芦醇组（Res组，12只）和地尔硫卓组（阳性对照组，6只）。IR组、Res组和阳性对照组大鼠均采用结扎冠状动脉左前降支30 min再灌注2 h的方法建立MIRI模型，Sham组大鼠只穿线不结扎。建立MIRI模型前，Res组和阳性对照组大鼠连续7 d、每天分别腹腔注射1次Res（20 mg/kg）和地尔硫卓（5 mg/kg），Sham组和IR组大鼠每天腹腔注射1次等容量二甲基亚砜（dimethyl sulfoxide, DMSO）溶液。4组大鼠于再灌注2 h时取腹主动脉血，采用ELISA法测定血清乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase, LDH）、肌酸激酶同工酶（creatine kinase isoenzyme, CK-MB）浓度；取心肌组织测定心肌梗死面积，计算心肌梗死面积百分比。Sham组、IR组和Res组大鼠取心肌组织检测铁含量、丙二醛（malondialdehyde, MDA）含量和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）活性，采用Western blot法检测心肌组织谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4, GPX4）、铁蛋白重链（ferritin heavy chain, FTH）、脂肪酸辅酶A连接酶4（fatty acid-coenzyme A ligase 4, FACL4）蛋白水平。结果:与Sham组比较：IR组、Res组、阳性对照组血清CK-MB、LDH浓度升高（ P<0.05），IR组、Res组心肌梗死面积百分比增大（ P<0.05）；IR组心肌组织铁含量、MDA含量和FACL4蛋白水平升高（ P<0.05），心肌组织SOD活性和FTH、GPX4蛋白水平降低（ P<0.05）。与IR组比较：Res组和阳性对照组血清CK-MB、LDH浓度降低（ P<0.05），心肌梗死面积百分比减少（ P<0.05）；Res组大鼠心肌组织铁含量、MDA含量和FACL4蛋白水平降低（ P<0.05），SOD活性和FTH、GPX4蛋白水平升高（ P<0.05）。其他指标比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:Res预处理可降低大鼠心肌组织氧化应激水平以抑制铁死亡，从而减轻MIRI。

基于靶向能量代谢组学、肠屏障蛋白表达和葡萄糖转运的差异,探讨吴茱萸炮制黄连对溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)的增效机制.小鼠饮用 4%葡聚糖硫酸钠构建UC模型,随机分为模型组、黄连组及萸黄连组,给药 14 d后结肠组织病理学及炎症指标等检测评价炮制对UC药效的影响;运用靶向能量代谢组学评价炮制对结肠组织能量代谢的影响;采用分子对接预测能量代谢物与肠屏障紧密连接蛋白Claudin和葡萄糖转运体2(glucose transporter 2,GLUT2)的结合度;大鼠在体单向肠灌流实验评价炮制对肠道葡萄糖转运的影响.结果表明黄连和萸黄连均可修复UC小鼠结肠组织损伤,下调组织炎症因子白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,且萸黄连药效优于黄连.炮制品显著上调结肠组织糖酵解、三羧酸循环和氧化磷酸化多种代谢物水平,其中上调的 1,6-二磷酸果糖和乙酰辅酶A能与Claudin和GLUT2 良好结合,且炮制品还能提高GLUT2 表达和转运葡萄糖活性.该研究提示吴茱萸炮制黄连可能提高葡萄糖转运从而改善结肠能量代谢,促进屏障修复,发挥炮制增效作用.

为探讨氮磷钾3种养分对有柄石韦生理及有效成分绿原酸合成积累的影响,该研究以有柄石韦组培苗为材料,分别用低养分(不施肥:N0,P0,K0)、正常施肥(N:0.20 g·kg-1,P:0.15 g·kg-1,K:0.15 g·kg-1)和高养分(N1:0.40 g·kg-1,P1:0.30 g·kg-1,K1:0.30 g·kg-1)3个浓度梯度,设置7个处理分别为NPK、N0PK、N1PK、NP0K、NP1K、NPK0、NPK1,测定不同处理下有柄石韦的抗性生理指标、绿原酸(CGA)含量及其合成关键酶活性.结果表明:(1)氮磷钾肥对有柄石韦的抗性生理有显著的影响,超氧化物歧化酶(SOD)在高氮和低钾处理中活性显著增加,而3种养分的低浓度和高浓度处理均会导致过氧化氢酶(CAT)活性显著上升.(2)不同养分水平氮、磷和钾对有柄石韦CGA含量存在显著影响,正常施肥的CGA含量最高,达到12.92 mg·g-1;高钾施肥的CGA含量最低,为7.79 mg·g-1;钾肥对CGA含量影响最显著.(3)CGA合成关键酶活性在不同施肥处理中差异显著,CGA含量与奎宁酸羟基肉桂酰转移酶(HQT)和4-香豆酰辅酶A连接酶(4CL)活性呈显著正相关,与莽草酸羟基肉酰转移酶(HCT)活性显著负相关,HQT、4CL和HCT是导致CGA含量差异的关键因素.该研究结果为有柄石韦药材的人工栽培提供了理论依据.

[目的]从蛋白水平阐明水源拉梅尔芽孢杆菌(Rummeliibacillus suwonensis)的生长及己酸代谢机理,为水源拉梅尔芽孢杆菌的基因工程改造提供一定技术基础.[方法]以R.suwonensis 3B-1 为研究对象,应用串联质谱标签(tandem mass tags,TMT)蛋白组学技术对该菌在好氧与厌氧条件下的差异表达蛋白(differentially expressed proteins,DEPs)进行挖掘,并对鉴定到的DEPs进行亚细胞定位、GO功能富集、KEGG信号通路注释、蛋白相互作用等生物信息学分析.[结果]从比较组中共鉴定获得810 个DEPs,其中上调蛋白 423 个,下调蛋白 387 个,亚细胞定位到 6 个条目上,主要涉及细胞质蛋白,细胞膜蛋白和细胞壁等蛋白.GO功能富集分析结果显示,肽的生物合成、翻译和肽代谢过程等生物学过程;核糖体的结构组成和结构分子活性等分子功能;核糖体和核糖核蛋白复合物等细胞组分发生了显著变化.810 个DEPs 注释到 113 条KEGG信号通路,主要涉及辅因子生物合成,双组分系统,磷酸戊糖代谢,糖酵解/糖异生,以及氧化磷酸化等信号通路.苯丙氨酸-tRNA连接酶β亚基和核黄素生物合成蛋白RibD在蛋白互作网络中关联度最高.[结论]厌氧条件下,糖酵解途径中丙酮酸脱氢酶和丙酮酸激酶表达下调,氨基酸代谢和生物素蛋白连接酶等辅因子相关蛋白表达均呈现下调,表明该菌适合在好氧环境中生长.己酸合成方面,酰基辅酶A硫酯酶的表达量显著上调,同时,糖酵解/糖异生途径、三羧酸循环和磷酸戊糖途径为己酸合成提供了充足的前体物质和还原当量,共同促进了己酸合成.