目的:比较不同高温瞬时灭菌条件下开心散的灭菌效果,结合灭菌后样品中有效成分含量的变化,确定最佳灭菌条件.方法:采用高温瞬时灭菌法对2～8目的远志、人参、茯苓和石菖蒲4味中药的粗颗粒进行灭菌,分别考察160、165、170℃3个温度水平,灭菌时间分别为5、7、9 s.在洁净区对灭菌粗颗粒分别进行粉碎,过六号筛后均匀混合,制得开心散.参照《中华人民共和国药典》2020年版进行微生物限度检测,并采用高效液相色谱法对开心散灭菌前后的样品进行含量检测.结果:9个灭菌条件下开心散样品的需氧菌总数均小于1×104 CFU·g–1、霉菌和酵母菌总数均小于1×102 CFU·g–1.同时,控制菌项下的大肠埃希菌、沙门菌、耐胆盐革兰阴性菌均未检出,所有开心散灭菌样品均符合口服散剂的微生物限度要求.开心散中8个有效成分(远志酮Ⅲ、3,6′-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1、茯苓酸、β-细辛醚和α-细辛醚)的含量受不同灭菌温度和时间影响.结论:结合需氧菌、霉菌和酵母菌、控制菌结果和有效成分含量变化情况,最终确定灭菌温度160℃、灭菌时间5 s为开心散最佳高温瞬时灭菌条件.

目的 优化炆远志炮制工艺,并对其成分与色泽进行相关性分析.方法 采用Box-Behnken响应面法确定加水量、甘草用量、干燥温度工艺参数,AHP法确定远志口山酮Ⅲ、阿魏酸、细叶远志皂苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖、醇浸出物含量权重系数,计算综合评分.采用色差仪量化炆远志色泽程度,Prism关联性分析其成分与色泽之间的关系.结果 最佳条件为每 100 g远志加 5 倍量水,甘草用量 7g,干燥温度 70℃.明亮度(L值)与远志口山酮Ⅲ、醇浸出物含量呈极显著正相关(P<0.01),与阿魏酸含量呈显著负相关(P<0.05);红绿色值(a值)与醇浸出物、远志口山酮Ⅲ含量均呈极显著负相关(P<0.01);总色度值(Eab值)与醇浸出物含量呈极显著正相关(P<0.01),与远志口山酮Ⅲ含量显著正相关(P<0.05),与阿魏酸含量呈显著负相关(P<0.05).结论 该方法合理可行,可用于预测炆远志饮片的质量.炆远志化学成分与色泽度具有显著相关性.

目的 建立高效液相色谱-二极管阵列检测器(HPLC-PDA)波长切换法同时测定远志-石菖蒲药对提取液中4种主要成分远志(口山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、β-细辛醚及α-细辛醚的含量.方法 采用AgilentTC-C18(250mm×4.6mm,5 μm)色谱柱,流动相为甲醇-0.2％甲酸水溶液,梯度洗脱,检测波长分别为257 nm、320 nm,流速为0.8 mL·min-1,柱温30 ℃.结果 远志(口山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、β-细辛醚及α-细辛醚在各自质量浓度范围与峰面积线性关系良好(r均≥0.9998),精密度、重复性、稳定性RSD值均小于5.0％;低、中、高浓度的平均加样回收率在100.79％～103.57％;远志-石菖蒲药对中远志(口山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、β-细辛醚及α-细辛醚含量平均值分别为0.5829、3.7005、6.3593、1.4827 mg·g-1.结论 所建立的多成分含量测定方法简单、准确、重复性好,可用于远志-石菖蒲对药的质量控制.

目的 建立指纹图谱和多指标定量的蜜远志质量评价方法.方法Kromasil 100-5-C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm)为固定相,以乙腈(A)-0.2％磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱,体积流量为1.0 mL/min,检测波长318 nm.对16批蜜远志建立指纹图谱,确定共有峰并进行相似度分析结合化学计量学分析.采用Waters Xbridge Shiled RP C18色谱柱(250mm×4.6mm,5 μm)进行同时测定远志(山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的含量.结果 在指纹图谱研究中,标定了 27个共有峰,结合对照品和HPLC-Q-TOF-MS共指认8个成分,分别为西伯利亚远志糖A5、西伯利亚远志糖A6、远志(山)酮Ⅸ、远志(山)酮Ⅲ、3,6-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元.聚类分析将16批样品分为3类;经主成分分析,主成分1～3是影响蜜远志质量评价的主要因子.多指标含量测定中远志(山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、细叶远志皂苷、远志酸、远志皂苷元的质量分数分别为0.027％～0.068％、0.074％～0.798％、1.1％～1.4％、0.15％～0.36％、0.15％～0.37％.经方法学验证,线性关系良好(r≥0.9996),平均加样回收率为97.15％～100.9％.结论 所建立的指纹图谱结合多指标含量测定方法准确、高效,特征性强,可为蜜远志饮片的质量评价和临床应用提供有效参考.

目的 预测远志药材抗抑郁的质量标志物(Q-marker),并建立其质量评价方法.方法 利用网络药理学和分子对接,预测远志抗抑郁的核心成分.结合指纹图谱、化学模式识别方法对远志药材进行定性研究,寻找不同产地远志药材的共性成分,进一步确定远志药材中潜在的Q-marker.结果 通过网络药理学分析,预测细叶远志皂苷、3,6'-二芥子酰基蔗糖、瓜子金皂苷ⅩⅩⅠ、远志(口山)酮Ⅲ、西伯利亚远志糖A5 和西伯利亚远志糖A6 等 12 个成分为远志抗抑郁的核心成分,通过作用于IL2、VEGFA、APP、HSP90AA1、PLCG1等关键靶点,从而调控信号通路,发挥抗抑郁作用.分子对接验证显示关键靶点与核心成分具有较好的结合活性.同时建立 20 批远志药材的指纹图谱,发现 29 个共有峰,相似度在 0.95 以上.综合网络药理学活性和成分的可测性以及Q-marker理念,最终确定 3,6'-二芥子酰基蔗糖、远志(口山)酮Ⅲ、西伯利亚远志糖A5 和西伯利亚远志糖A6 为远志药材的Q-marker.结论 本研究利用网络药理学进行初步预测,同时建立指纹图谱结合化学模式识别分析加以确定,为远志药材Q-marker的研究提供参考.

目的 研究远志甘草制前后对正常大鼠肠道菌群和短链脂肪酸(short-chain fatty acids,SCFAs)代谢的影响,探讨甘草制远志降低肠道炎症的机制.方法 SD大鼠连续15 dig远志或制远志后,ELISA法检测十二指肠组织中炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-8 和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平;苏木素-伊红(HE)染色观察肠组织病理变化;采用16SrDNA测序技术检测大鼠肠道菌群结构变化;运用气相色谱法测定大鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸、戊酸含量.结果 甘草制远志可显著降低远志引起的大鼠十二指肠组织中IL-6、IL-8、TNF-α水平升高和肠道炎症损伤(P＜0.05、0.01).16SrDNA测序结果显示,甘草制远志后可改善远志引起的大鼠肠道菌群结构改变和物种多样性减少,在门水平上主要表现为厚壁菌门(Firmicutes)和疣微菌门(Verrucomicrobia)相对丰度回升(P＜0.05、0.01),拟杆菌门(Bacteroidetes)、变形菌门(Proteobacteria)和放线菌门(Actinobacteriota)相对丰度下调(P＜0.05、0.01);在属水平上,远志甘草制后可上调有益菌乳酸杆菌属Lactobacillus、毛螺菌属Lachnospira、颤螺旋菌属Oscillospira等菌属的丰度(P＜0.05、0.01),下调潜在的致病菌拟杆菌属Bacteroides、梭状芽孢杆菌属Clostridium等菌属的丰度.甘草制远志可一定程度逆转远志引起的大鼠粪便中乙酸、丙酸、丁酸、戊酸含量降低(P＜0.05、0.01).结论 远志引起的肠道炎症可能与其引起肠道菌群和SCFAs紊乱有关,甘草制远志可通过改善肠道菌群和SCFAs代谢来降低肠道炎症反应.

目的 建立UPLC-ESI-MS/MS法同时测定归脾丸中斯皮诺素、远志口山酮Ⅲ、党参炔苷、甘草苷、甘草素、黄芪甲苷、细叶远志皂苷、异甘草素、木香烃内酯、去氢木香内酯、藁本内酯、白术内酯Ⅰ、甘草次酸、茯苓酸的含量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用ACQUITY UPLC? BEH C18色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.7 μm);流动相乙腈-0.1%甲酸,梯度洗脱;体积流量 0.25 mL/min;柱温 40℃;电喷雾离子源;正负离子扫描;多反应监测模式.再进行系统聚类分析、主成分分析、偏最小二乘判别分析.结果 14 种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 5),平均加样回收率 93.0%～103.9%,RSD 0.51%～1.9%.19 批样品聚为 3 类,藁本内酯、去氢木香内酯、木香烃内酯、细叶远志皂苷为差异性成分.结论 该方法稳定可靠,可用于归脾丸的质量控制.

目的:建立经典名方开心散基准样品高效液相色谱特征图谱,全面表征开心散处方中 4 个药味的成分特征,为开心散制剂质量控制提供可靠方法.方法:采用Waters Xbridge Shield RP18 色谱柱(150 mm×4.6 mm,3.5 μm),第 1 套方法以乙腈为流动相A,含 0.1%磷酸水溶液为流动相B,梯度洗脱,柱温为 35℃,进样量为10 μL,检测波长为 242 nm;第 2 套方法以乙腈为流动相A,水为流动相B,梯度洗脱,柱温为 30℃,进样量为20 μL,检测波长为 203 nm.使用不同批次饮片制备 17 批开心散基准样品,将色谱图经"中药色谱指纹图谱相似度评价系统"(2004A版)进行峰匹配,明确共有峰个数,生成对照特征图谱,归属和指认共有峰.结果:建立了 2套特征图谱分析方法,其中第 1 套确定特征峰 13 个,归属远志药味特征峰 9 个、石菖蒲药味 2 个、茯苓药味 2 个,指认 5 个成分为远志(口山)酮Ⅲ、3,6?-二芥子酰基蔗糖、β-细辛醚、α-细辛醚和猪苓酸C;第 2 套确定特征峰 12 个,归属人参药味特征峰 7 个、远志药味 2 个、共有峰 3 个,指认 6 个成分为人参皂苷Rg1、人参皂苷Re、人参皂苷Rf、人参皂苷Rb1、人参皂苷Rb2 和人参皂苷Rd.结论:建立的 2 套特征图谱分析方法简单可行,具有较好的针对性,为经典名方开心散基准样品及制剂质量控制提供了参考.

目的:建立远志药材多指标成分的HPLC指纹图谱.方法:Kromasil 100-5ODS-C18色谱柱(250 mm×4.6mm,5μm);流动相为0.05％磷酸乙腈溶液-0.05％磷酸水溶液,梯度洗脱;流速1.0 mL/min;检测波长为315 nm切换215 nm;柱温35℃.利用“中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004 A版)”计算相似度,SPSS软件对10个对照指纹峰进行聚类分析.结果:方法精密度、稳定性、重复性良好,对照品对照指认西伯利亚远志糖脂A5、3,6’-二芥子酰基蔗糖、远志(咄)酮Ⅲ、远志皂苷B、远志皂苷元等10个共有峰;16批样品相似度大于0.91;3,6'-二芥子酰基蔗糖和远志酸为主差异成分.结论:该方法操作简便准确,多指标鉴别专属性强,建立的HPLC指纹图谱可为远志药材的质量评价提供支持.

目的 建立一测多评法同时测定安神补气丸(黄芪、茯苓、党参等)中细叶远志皂苷、毛蕊异黄酮葡萄糖苷、芒柄花素、远志(口山)酮Ⅲ、3,6'-二芥子酰基蔗糖、去氢土莫酸、去氢茯苓酸、茯苓酸的含有量.方法 该药物甲醇提取液的分析采用Hyperisl ODS C18色谱柱(4.6mm×250mm,5μm);流动相乙腈-0.05％磷酸,梯度洗脱;体积流量0.9 mL/min;柱温30℃;检测波长210、260、320 nm.以细叶远志皂苷为内标,计算其他7种成分的相对校正因子,测定其含有量.结果 8种成分在各自范围内线性关系良好(r＞0.999 0),平均加样回收率96.98％～100.05％,RSD 0.67％～1.38％,一测多评法所得结果与外标法接近.结论 该方法稳定可靠,可用于安神补气丸的质量控制.