为摸清云南省龙陵县药用植物资源的分布状况及蕴藏量,2015年1月至2016年12月,开展全国第四次中药资源普查云南省第二批试点县龙陵县的普查工作.按照普查工作要求,普查队对云南省龙陵县的野生药用植物资源、栽培药用植物资源、传统医药知识及中药材市场进行调查.在龙陵县10个乡镇37块样地进行了野外普查、样线调查、标本采集、药材采集、实地采访及标本鉴定,调查采集药用植物腊叶标本653个,通过鉴定和查证有明确药用功效的植物有142科,437属,606种.调查到重点药材84种,其中包括野生药材基源植物48种,栽培药材基源植物36种(其中3个种既有野生,也有栽培);调查到国家珍稀濒危药用植物24种,根据调查,龙陵县野生分布较多、分布广泛的重点药材主要有石松、白茅根、金荞麦、葛根、常山、黄精、天南星等20余种;栽培药用植物主要有石斛、苹果、重楼、龙胆、附子、续断、三七、白花蛇舌草、丹参、桔梗、半支莲、黄精、当归、玛卡、栀子等10余种,其中栽培面积较大的中药材主要有石斛、草果、重楼3种.本研究对当地药用植物资源的分布概况、消长情况及调查、收集到的药用植物资源种类进行了鉴定评价及分析,为龙陵县药用植物资源的可持续发展提供参考依据.

目的 建立一种快速鉴别长梗黄精种的分子技术手段.方法 基于简单序列重复区间扩增多态性(ISSR)和相关序列扩增多态性(SRAP)分子标记对多花黄精与长梗黄精的基因组DNA进行种间的多态性分析,获得ISSR和SRAP-PCR差异片段,经测序设计种特异性的特征性片段扩增区域(SCAR)引物,用于二种黄精属植物的准确快速鉴别.结果 3对SCAR引物在各自最适退火温度下,分别只从长梗黄精中扩增出了150、354和518 bp的特异性片段,而多花黄精不扩增任何片段,实验操作便捷,结果重复性好.通过对市场上8份黄精块茎材料的鉴定,SCAR分子鉴别技术的可靠性进一步得以验证.结论 本实验开发的SCAR分子技术可用于长梗黄精种的辅助鉴别.

为了揭示“黄精”花中主要营养与功效成分,采集安徽青阳、浙江庆元多花黄精花和根茎,浙江龙游长梗黄精花和根茎,分别测定多糖、皂苷、总酚、氨基酸、矿质元素含量和DPPH自由基清除率.结果 表明多花黄精和长梗黄精花中均含有丰富的多糖、皂苷、酚性成分、氨基酸和矿质元素,其中多糖质量分数为60.88～97.00 mg·g-1,约为根茎中含量的1/2;皂苷质量分数为32.55～40.93 mg·g-1,与根茎接近;总酚为40.79～50.95 mg·g-1,约为根茎的4.5倍;总氨基酸为111.85～131.03 mg·g-1,约为根茎的2.3倍,人体必须氨基酸占总氨基酸量的33.77％～35.71％,并含有丰富的味觉氨基酸;矿质元素钾、钙、铁、锌等含量较高,重金属元素含量均在限量标准规定以内;DPPH清除率IC50为1.77～ 3.25 mg· mL-1,显著低于根茎,抗氧化活性显著高于根茎.研究结果初步揭示了历代本草所载“黄精花胜于根”的物质基础,表明黄精花具有很好的功能食品开发潜力.此外,花中多糖、皂苷、氨基酸、总酚等营养功效物质物种、种源间差异明显,开展品种选育对提高花的质量与产量十分重要.

为了更好地运用现代技术提升黄精根茎炮制工艺,该文对黄精炮制方法进行了古法考证及文献研究.经考证,黄精始载于《名医别录》,炮制方法始载于《抱朴子内篇》,古代用药黄精基原植物以轮叶系的滇黄精、黄精、粗毛黄精、轮叶黄精和对叶系的棒丝黄精为主,互叶系的多花黄精和长梗黄精为辅;多花黄精作为药用黄精使用史见于宋朝,民国开始作为药用黄精主流基原物种.古代多花黄精炮制方法有"九蒸九曝"、黑豆炮制法、蔓菁子炮制法等,以"九蒸九曝"为主;现代多花黄精炮制方法有干燥法、蜜润蒸透法、酒润炖透法、蒸透法,均1次炮制而成.现代科学研究中,可能由于用于炮制试验的多花黄精原生境、根茎龄级及各龄级质量比例的不确定性,导致了研究结论"多花黄精炮制根茎多糖含量变化规律"大相径庭.因此,在确保根茎材料一致性的基础上,开展不同炮制方法和蒸晒次数与多花黄精根茎多糖含量之间的相关性研究,从炮制后的药效组分筛选评价多花黄精根茎最佳炮制方法,对生产更具指导意义.

目的:开发适用于区分黄精属主要药用植物的DNA条形码序列,分析物种间亲缘关系.方法:设计黄精属专用的matK和rps16基因扩增引物,扩增得到多花黄精、长梗黄精、黄精、滇黄精、玉竹、湖北黄精的相应序列,比较序列的种内和种间变异、条形码序列间隔,构建系统发育树,分析38份样品的系谱关系.结果:matK基因的种内变异度高于rps16,rps16基因的种间变异度高于matK,结合matK和rps16基因序列可以应用于区分黄精属的主要药用植物.结论:结合matK和rps16基因序列的信息可以用于区分黄精属的主要药用植物.

目的:获得多花黄精和长梗黄精根茎转录组信息特征,解析2种黄精属植物活性成分生物合成通路的异同点.方法:以多花黄精和长梗黄精根茎为研究对象,采用Illumina HiSeq测序平台进行高通量转录组测序并进行数据分析.结果:获得154778个Unigenes,其中注释差异表达Unigenes 14135个,GO功能可分类为51个,功能富集2076条,而多糖和薯蓣皂苷代谢显著性较差;KEGG富集到114条代谢通路,前20条通路中未见多糖和薯蓣皂苷相关代谢通路;782个Unigenes参与果糖和甘露糖、半乳糖、淀粉和蔗糖代谢途径,其中228个Unigenes编码3条多糖生物合成途径中13个关键酶,但只有35个Unigenes有显著性差异;270个Unigenes参与甾醇化合物、萜类化合物骨架和单萜类生物合成等5条甾体皂苷相关代谢途径,其中64个Unigenes编码薯蓣皂苷生物合成途径9个关键酶,仅6个Unigenes有显著性差异.结论:多花黄精与长梗黄精转录组差异性大,但在多糖和薯蓣皂苷相关代谢通路中的关键酶对应的Unigenes差异较少,该结果为日后扩大黄精药材植物资源以及深入研究黄精属转录组提供参考依据.

目的:采用显微红外成像光谱对不同产地多花黄精和不同种黄精进行鉴别.方法:在波数为1018 cm–1的条件下,使用显微红外成像光谱对7个不同产地多花黄精和5种黄精属植物的切片进行扫描,以糖类含量高低及分布情况作为鉴别的判断依据.结果:不同产地及不同种黄精显微图像有明显区别,表明其化学成分存在差异.不同产地多花黄精中,贵州省铜仁市样品中糖类成分含量较高,其次是黄山市祁门县和湖北省赤壁县样品,浙江省天目山、湖南省怀化市、江西省瑞昌市样品中糖类成分含量相对较低,贵州省六盘水市样品中糖类成分含量最低;5种黄精属药材中多糖类成分由高到低的顺序为黄精、长梗黄精、轮叶黄精、滇黄精、多花黄精.结论:采用显微红外成像光谱技术能够有效区分不同产地多花黄精和不同种黄精.与传统红外光谱相比,显微红外成像光谱可研究各扫描微区的组分分布情况,使其含量分析表达更加直观,具有可视性、高灵敏度等特点.

目的 探讨参芪丹鸡黄精汤加减联合西药治疗冠状动脉慢性完全闭塞(CTO)病变患者的临床效果.方法 选择2019年4月至2020年2月于山东中医药大学附属医院就诊的冠状动脉CTO病变患者74例,根据随机数字表法分为观察组与对照组,各37例.对照组给予双联抗血小板聚集等西药治疗,观察组在对照组基础上给予参芪丹鸡黄精汤加减治疗.2组均治疗3个月.观察2组治疗前后中医证候评分、心脏彩色多普勒超声指标、血管内皮功能指标、西雅图心绞痛量表(SAQ)评分和随访6个月的主要不良心脑血管事件(MACCE)发生情况.结果 治疗后2组胸闷刺痛、心慌乏力、神疲气短、腹胀便溏评分均低于治疗前,且观察组均低于对照组(均P<0.05).治疗后2组左心室射血分数均高于治疗前,左心室舒张末期内径均低于治疗前,且观察组均优于对照组(均P<0.05).治疗后2组血栓素B2水平均低于治疗前,一氧化氮及血管内皮生长因子水平均高于治疗前,且观察组均优于对照组(均P<0.05).治疗后2组SAQ评分均高于治疗前,且观察组均高于对照组(均P<0.05).治疗后观察组全因死亡、急性致死性心肌梗死、急性心力衰竭发生率均低于对照组[2.7％(1/37)比18.9％(7/37)、0(0/37)比16.2％(6/37)、10.8％(4/37)比29.7％(11/37)](均P<0.05).结论 参芪丹鸡黄精汤加减联合西药治疗可降低冠状动脉CTO病变患者中医证候评分,改善心功能及血管内皮功能,提高SAQ评分,降低心脏不良事件发生率.