目的:研究体内微进化对阿萨希毛孢子菌生物膜相关表型及耐药性的影响。方法:阿萨希毛孢子菌标准株源自荷兰真菌多态性保藏中心，阿萨希毛孢子菌原代株TO（氟康唑敏感）为解放军总医院第七医学中心皮肤科1例毛孢子菌病的临床分离株，进化株TEVO（氟康唑耐药）在该患者2014年复诊时分离。体外构建上述菌株的生物膜，使用四甲基氮盐（XTT）还原法及激光共聚焦扫描显微镜评估生物膜生长动力学并测定生物膜厚度；体外测定氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑对不同生长阶段生物膜的最低抑菌浓度（SMIC），评估生物膜的耐药性。多组间比较采用单因素方差分析，Hartley检验对数据进行方差同质性检验，若方差齐，选用LSD检验进行组间多重比较，若方差不齐，选用Tamhane′ T2检验进行组间多重比较。 结果:在阿萨希毛孢子菌生物膜黏附（0 h）及形成阶段（4 ~ 24 h），进化株TEVO代谢活性最弱（ F黏附 = 35.705， P < 0.001； F形成 = 15.042， P < 0.001）。而黏附后第48小时生物膜成熟，此时生物膜代谢活性最弱的菌株为TO株（ F = 10.985， P < 0.001）。生物膜厚度测量结果显示，成熟阶段TEVO株生物膜厚度[（26.1 ± 1.18）μm]大于TO株[（22.8 ± 1.73）μm， P = 0.001]，但小于标准株[（29.5 ± 1.28）μm， P = 0.001]。药物敏感性实验结果显示，在阿萨希毛孢子菌生物膜黏附及形成阶段，唑类抗真菌药物对TEVO株的SMIC值大于TO株；生物膜成熟阶段，3株菌生物膜的SMIC值均大于1 024 mg/L。 结论:在宿主内环境和抗真菌药物的双重压力下，阿萨希毛孢子菌生物膜相关表型发生了适应性改变，并增强了对唑类抗真菌药物的耐药性。

阿萨希毛孢子菌（Trichosporon asahii）为酵母样真菌的一种，感染后的临床表现广泛 [1]。在免疫功能正常的宿主，表现为毛发、皮肤等浅表感染；在免疫抑制患者中，会发展成侵袭性疾病，可迅速导致休克、呼吸衰竭、肾功能衰竭以及弥散性血管内凝血，从而使得治疗难度大，病死率高 [2]。本研究报道1例急性淋巴细胞白血病患儿合并阿萨希毛孢子菌致脓毒性休克的救治过程，该患儿在诱导化疗过程中出现脓毒性休克，血培养、外周血宏基因组二代测序（metagenomic next-generation sequencing，mNGS）和痰液mNGS确定病原为阿萨希毛孢子菌。

目的 本研究旨在调查中国多中心侵袭性感染毛孢子菌的抗真菌药物敏感性分布特征.方法 选取2009年8月-2016年7月CHIF-NET监测网43个监测中心收集的133株侵袭性感染毛孢子菌.利用基因测序分析实现菌种的准确鉴定和基因分型,按照美国临床和实验室标准协会(CLSI)推荐的微量肉汤稀释法检测菌株的体外抗真菌药物敏感性.结果 中国多中心侵袭性毛孢子菌感染中,共分离到10个菌种,阿萨希毛孢子菌是主要的致病菌(108/133株),血液是最常见的标本类型(36.8％).利用IGS1序列,将108株阿萨希毛孢子菌分为5个型别,基因型1型(41.7％)、4型(31.5％)和3型(23.1％)是我国主要的基因型.体外药物敏感性结果显示,阿萨希毛孢子菌对两性霉素B的MIC值的总体分布高于非阿萨希毛孢子菌,GM值分别是1.36 μg/mL和0.7 μg/mL.47.2％的阿萨希毛孢子菌(51/108株)对两性霉素B的MIC值≥ 2 μg/mL,而全部非阿萨希毛孢子菌(25株)对两性霉素B的MIC值小于1 μg/mL.25％的阿萨希毛孢子菌(27/108株)、2株T.dohaense、1株星形毛孢子菌、1株黏质毛孢子菌和1株T.faecale对氟康唑呈现较高的MIC值(≥8 μg/mL).伏立康唑对毛孢子菌呈现出最有效的体外抗真菌活性,GM值为0.09 μg/mL.我国阿萨希毛孢子菌对氟康唑、伏立康唑、伊曲康唑和泊沙康唑的ECV值分别采用16 μg/mL、0.25 μg/mL、1 μg/mL和1 μg/mL,而对两性霉素B和5-氟胞嘧啶的ECV值均采用4 μg/mL.结论 本研究系统调查了抗真菌药物敏感性分布情况,并试验性建立了我国阿萨希毛孢子菌的流行病学折点.

目的 分析上海迪安医学检验所有限公司临床送检体液样本中真菌感染的种类、临床样本来源分布及其耐药性情况,为后续真菌感染类型及其耐药性的现状、治疗策略和发展趋势等提供参考依据.方法 收集2023年1月至2023年7月的临床体液样本2 681份进行真菌培养,对分离到的823株真菌进行菌种分布和药敏情况进行分析.结果 发现构成比最高的前5种菌种分别为白念珠菌(n=355)、光滑念珠菌(n=212)、热带念珠菌(n=105)、近平滑念珠菌(n=69)、拟平滑念珠菌(n=36).其中白念珠菌的构成比为43.1％,占据了所有分离到的真菌近一半.其次是光滑念珠菌的构成比为25.8％,热带念珠菌和近平滑念珠菌的构成比分别为12.8％和8.4％,而构成比前3位的体液类型为尿液(44.8％)、痰液(26.7％)、血液(12.4％).分别测试了 823株菌对5-氟胞嘧啶、伏立康唑、氟康唑、两性霉素-B、伊曲康唑的敏感性,这些菌株对两性霉素B综合敏感性达到了 98.5％,除阿萨希毛孢子菌外,其余菌株对两性霉素B均没有耐药情况.同时,这些菌株对5-氟胞嘧啶的综合敏感性达到了 97.3％,对伏立康唑、氟康唑和伊曲康唑的综合敏感性分别为92.8％、63.1％和62.3％.结论 本研究结果主要为念珠菌属,其中又以白念珠菌为主,这些菌种对两性霉素B和5-氟胞嘧啶的敏感性均较好,而热带念珠菌对氟康唑、伏立康唑和伊曲康唑的耐药率均较高,达到30％以上.

目的 探讨阿萨希毛孢子菌与西弗射盾子囊霉的实验室鉴定与体外抗真菌药敏特点,为临床用药、准确鉴定和流行病学研究提供依据.方法 收集2017年1月-2022年9月广东省人民医院临床分离的2种少见酵母样真菌,其中阿萨希毛孢子菌54株,西弗射盾子囊霉23株,复苏后进行形态学鉴定、生化鉴定和质谱鉴定,同时采用FUNGUS-3 MIC法测定5-氟胞嘧啶、两性霉素B、氟康唑、伊曲康唑和伏立康唑的最小抑菌浓度(MIC).结果 阿萨希毛孢子菌主要感染65岁以上人群(46.30％),感染部位以创面感染(27.78％)与尿路感染为主(22.22％),主要分布于外科(35.19％)和内科(35.19％);而西弗射盾子囊霉感染患者主要以18～40岁(39.13％)和41～65岁(47.83％)两个年龄段为主,感染部位以耳道为主(78.26％),分布于耳鼻喉外科病区(60.87％)和耳聋专科门诊(26.09％);在形态学鉴定方面,2种真菌菌落均为白色凸起,呈镶嵌生长,其中阿萨希毛孢子菌生长速度快于西弗射盾子囊霉,菌落革兰染色可见关节孢子、关节菌丝、真假菌丝及芽生孢子,而西弗射盾子囊霉可见分枝分隔菌丝和单细胞、卵圆形的芽生孢子.在生化鉴定方面,阿萨希毛孢子菌尿素酶阳性,可水解七叶苷,同化多种糖类化合物,而西弗射盾子囊霉尿素酶阴性、不水解七叶苷,但可同化多种碳水化合物.微生物质谱对阿萨希毛孢子菌和西弗射盾子囊霉的鉴定率分别为96.30％和91.30％,具有良好鉴定效果;在体外药敏结果方面,两种真菌对5-氟胞嘧啶均表现出高MIC值,其中54株(100％)阿萨希毛孢子菌MIC值均≥4 μg/mL,23株(100％)西弗射盾子囊霉MIC值均≥4 μg/mL;同时也需警惕2种真菌对氟康唑出现高MIC值的情况,其中7株(12.97％)阿萨希毛孢子菌MIC值均≥4 μg/mL,16株(69.56％)西弗念珠菌MIC值≥16 μg/mL;两性霉素B、伊曲康唑、伏立康唑则整体上表现出较低的MIC值(≤2 μg/mL),表现出较好的体外活性.结论 阿萨希毛孢子菌和西弗射盾子囊霉的实验室鉴定与体外药敏结果具有不同特点,对其实现准确鉴定和进行抗真菌药敏试验,对临床用药、实验室鉴定和流行病学的研究具有重要意义.

阿萨希毛孢子菌可引起浅表性感染和侵袭性感染,在免疫功能低下的患者中导致严重甚至致命的感染.我院收治3例阿萨希毛孢子菌导致肺部感染的患者,行支气管镜检查,送检肺泡灌洗液,明确患者均感染该菌,在治疗上给予伏立康唑治疗,但病情进一步恶化,最终因全身多脏器功能衰竭死亡.我国关于该菌的报道仍较少,本案例的报道有助于对阿萨希毛孢子感染提供临床诊疗思路及方案.

近年来,全球结核病的发病率已趋于稳定,泌尿系结核误诊、漏诊率高,一些患者由于长期误诊误治导致肾功能衰竭等严重后果,甚至选择患肾切除等手术治疗[1-4].肾结核是结核分枝杆菌感染到肾脏组织造成的炎症反应,是肺外结核的一种,可导致肾脏实质性病变,肾结核多在成年人中发生,我国综合统计75%的病例发生在20～40岁之间,男性的发病数略高于女性.肾结核的致病菌主要来自于肺结核,结核分枝杆菌经血行播散至肾脏,最终引发肾结核.肾结核起病缓慢,早期往往无任何临床症状.仅在检验尿液时有异常发现.尿中可找到结核分枝杆菌.随着病程进展,患者可出现尿频、尿急、尿痛、血尿、脓尿、腰痛等症状.因其早期症状不典型,往往易漏诊、误诊、延误治疗,可损伤患者的泌尿生殖系统,最终导致肾功能丧失,威胁患者生命.因此,肾结核的早发现、早诊断及早治疗对以后的康复具有重要意义[5].提高肾结核的诊断水平,有助于肾结核的早期发现和治疗,避免或减少手术,改善预后[5-7].阿萨希毛孢子菌是毛孢子菌病最常见的致病菌,可引起表浅部位感染,也可导致深部侵袭性感染,其发病率和死亡率逐渐增高.

患者,女,40岁,患骨髓增生异常综合征.患者骨髓移植术后,反复发热,血培养显示,血流混合感染2株真菌.18S核糖体RNA(18S rRNA)测序结果显示,其中1株真菌为阿萨希毛孢子菌,另1株真菌为棒状大孢酵母.两株真菌为罕见真菌,均对伏立康唑敏感.因鉴定及药敏时间较长,患者未等调整合理抗真菌药物,因持续中性粒细胞缺乏及真菌血症死亡.该病例是国内首次报道血液病患者血流混合感染阿萨希毛孢子菌和棒状大孢酵母.

目的 探讨阿萨希毛孢子菌在低铁限制性条件下生长的机制,为后续联合常用抗真菌药物治疗播散性毛孢子菌病提供实验室依据.方法 200 μmol/L的去铁胺加入酵母浸出粉胨葡萄糖培养基(Yeast Extract Peptone Dextrose Medi-um,YPD)培养基中制备低铁限制性培养基,检测阿萨希毛孢子菌临床分离株在该培养基中的生长曲线,并检测低铁条件下,阿萨希毛孢子菌产生铁载体的情况.结果 阿萨希毛孢子菌的生长曲线不受低铁限制性条件的影响,且其在低铁环境下可以产生铁载体.结论 阿萨希毛孢子菌通过产生铁载体在低铁限制性条件下正常生长.

目的 研究格尔德霉素和环孢素(热休克蛋白90与钙调磷酸酯酶抑制剂)抗阿萨希毛孢子菌活性,及联合常用抗真菌药物后的体外药物敏感性.方法 通过美国临床实验室标准化协会(CLSI)推荐的M27-A3肉汤稀释法检测格尔德霉素和环孢素对21株阿萨希毛孢子菌临床株的体外抗真菌活性,棋盘微量液基稀释法检测上述2种抑制剂与5种常用抗真菌药(氟康唑、伊曲康唑、伏立康唑、两性霉素B和卡泊芬净)的相互作用.结果 格尔德霉素对阿萨希毛孢子菌临床株有较好的体外抗真菌活性,而环孢素作用较弱.此外,格尔德霉素和环孢素与5种常用抗真菌药联合使用,均显示具有良好的体外抗阿萨希毛孢子菌协同作用.结论 格尔德霉素和环孢素可以提高常用抗真菌药对阿萨希毛孢子菌的敏感性,提示一种针对侵袭性毛孢子菌病的潜在治疗策略.