2023年5月在浙江省金华市永康市西溪镇寨口村附近林地中(120°17′02″E,28°58′09″N,海拔273 m)捕捉到2只雌性蝙蝠.它们体型较小,前臂长分别为30.66 mm和30.79 mm,无鼻叶,耳廓似漏斗,呈卵圆形,耳屏略呈披针形,较为细长.头骨颅全长分别是14.51 mm和14.67 mm,齿式:2.1.3.3/3.1.3.3=38,具有强壮的上颌犬齿.以上特征与暗褐彩蝠(Kerivoula furva)基本相符.基于线粒体COI基因部分序列的系统发育数据分析支持形态鉴定结果,故将这两个浙江样本鉴定为暗褐彩蝠,为浙江省翼手目分布新记录种.

目的:比较不同采血方式对狂犬病疫苗免疫小鼠中和抗体检测的影响，为狂犬病研究中选择更适合抗狂犬病病毒中和抗体（rabies virus neutralizing antibody，RVNA）检测的采血方法提供科学依据。方法:将50只4~6周龄雌性昆明小鼠随机分为3组，A组（摘眼球采血，间隔7天，n=30）、B组（内眦采血，间隔7 d，n=10）、C组（内眦采血，间隔14 d，n=10），各组小鼠进行狂犬病疫苗免疫后，于不同时点取血检测血清抗体，分析不同采血方式对小鼠RVNA的影响。每日观察小鼠状态，并记录体重。结果:在整个试验中，各组小鼠采血前后体重均有正常性增长，但各组体重差异无统计学意义（ P>0.05）；小鼠利用率A组高于B、C组，B组和C组小鼠利用率差异无统计学意义（ P>0.05）；各组小鼠RVNA水平之间差异均无统计学意义（ P>0.05）。 结论:在小鼠体重、RVNA水平无差异的前提下，综合考虑试验成本、动物福利等因素的影响，认为间隔7天内眦采血法为检测RVNA水平试验最合适的采血方法。

目的:探讨应用自主研发的腰椎复合运动机对直立体位犬腰椎施加累积性轴向载荷和六位相复合运动构建犬腰椎间盘退变模型的可行性。方法:成年雌性草犬20只，体重（10.0±0.5） kg，随机分为两组，每组10只。模型组：将实验动物以垂直坐位固定于运动机上，在持续轴向载荷下（245 N）进行一定周期的腰椎六位相（前屈后伸、左右侧屈、左右旋转各45°）复合运动；对照组：将实验动物以垂直坐位固定于运动机上，不予任何干预。模型组动物在进行复合运动前、运动2、5、10及15万次时行腰椎影像学检查，侧位X线片测定椎间盘高度指数（disc height index，DHI），MRI T2-mapping成像定量分析椎间盘退变程度，当MRI T2WI显示椎间盘出现明显退变（改良pfirrmann分级系统>V级）时停止复合运动。取两组动物腰椎各节段椎间盘标本，通过Micro-CT定量分析上、下终板骨密度（bone mineral density，BMD）及骨小梁结构，组织学染色（HE染色、番红"O"染色、天狼猩红染色）验证及评价椎间盘退变程度。结果:模型组动物5万次复合运动后L 6-7、L 7S 1椎间盘MRI T2WI呈轻度退变，随着运动负荷累积其退变程度逐渐加重；至复合运动10万次时达到中度退变，表现为DHI开始降低，同时L 5-6椎间盘也出现轻度退变；当复合运动量15万次时，L 5-6、L 6-7、L 7S 1椎间盘高度进一步降低，椎间盘呈严重退变（改良pfirrmann分级系统Ⅳ~Ⅵ级），而上位L 4-5椎间盘也级联出现轻度退变。L 5-6椎间盘组织学评分为（8.2±0.8）分、L 6-7为（9.5±0.7）分、L 7S 1为（10.3±0.5）分。退变程度表现为L 5-6

目的:研究雌激素缺乏背景下，牙周炎对骨组织和肠道色氨酸代谢的影响。方法:将32只雌性C57BL6/J小鼠根据随机数字表法随机分为4组（每组8只）：假手术组（Sham组）；假手术牙周炎组（Sham_Lig组）；去卵巢组（Ovx组）；去卵巢牙周炎组（Ovx_Lig组）。Sham_Lig组与Ovx_Lig组小鼠术后4周，以5-0号丝线结扎双侧上颌第二磨牙诱导牙周炎。丝线结扎8周后对4组小鼠实施安乐死，取材小鼠股骨、胫骨、下颌骨及颅骨样本行显微CT（micro-CT）扫描，并检测样本骨密度、骨体积分数（BV/TV）、骨小梁数量（Tb.N）、骨小梁厚度（Tb.Th）和骨小梁分离度（Tb.Sp）。收集4组小鼠盲肠内容物，利用16S rRNA基因测序检测肠道菌群的组成，通过液相色谱-质谱法检测肠道中的色氨酸及其代谢物的含量，并对肠道菌群相对丰度水平与色氨酸代谢物含量行相关性分析。结果:Ovx_Lig组小鼠股骨骨密度［（82.23±3.97）mg/cm 3］、BV/TV［（9.25±1.37）%］和Tb.Th［（70.95±5.70）μm］均显著低于Ovx组［分别为（96.30±3.76）mg/cm 3（ P=0.004）、（14.45±1.55）%（ P=0.022）和（87.58±8.02）μm（ P<0.001）］。肠道菌群基于Bray-Curtis距离的β多样性分析显示，Ovx_Lig组小鼠肠道菌群与Ovx组分群明显。线性判别分析效应量显示，另枝菌属为Ovx_Lig组显著差异菌属。Ovx_Lig组另枝菌属的相对丰度［（0.42±0.14）%］显著高于Ovx组［（0.17±0.05）%］（ t=4.45， P<0.001）。色氨酸代谢分析显示，Ovx_Lig组小鼠肠道内犬尿酸的含量［（531.12±158.60）ng/g］显著高于Ovx组［（400.42±57.96）ng/g］（ t=2.19， P=0.046），吲哚-3-甲醛的含量［（383.37±144.06）ng/g］显著低于Ovx组［（701.72±141.93）ng/g］（ t=4.45， P<0.001）。相关性分析显示另枝菌属的相对丰度与犬尿酸呈正相关（ r=0.32， P=0.088），与吲哚-3-甲醛呈负相关（ r=-0.32， P=0.088）。 结论:小鼠雌激素缺乏背景下，牙周炎可导致小鼠股骨骨质破坏，其机制可能与肠道另枝菌属及色氨酸代谢物犬尿酸和吲哚-3-甲醛有关。

目的:建立狂犬病病毒CVS-11以肌肉注射或脑内注射方式攻毒的BALB/c小鼠动物模型。方法:将由BSR细胞传代繁殖的滴度为2.7×10 7 FFU/ml的CVS-11毒株进行10 －1～10 －7倍系列稀释，分别以肌肉或脑内注射的方式对4周龄的雌性BALB/c小鼠进行攻毒，观察小鼠发病死亡情况，并对所有攻毒小鼠的脑组织进行直接免疫荧光试验(direct fluorescent assay, DFA)及逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测以确定小鼠死因。确定不同攻毒方式下小鼠的半数致死量(median lethal dose，LD 50)，建立小鼠模型。根据已建立的小鼠模型，评估4种国内市售狂犬病疫苗对CVS-11暴露后小鼠的免疫保护效果。 结果:BALB/c小鼠脑内攻毒后于第6～12天开始出现典型的神经症状并死亡，其LD 50为18.3/0.1 ml；肌肉注射攻毒的小鼠在第8～15天出现临床症状并死亡，LD 50为2.7×10 5/0.1 ml。DFA检测结果显示，所有死亡小鼠脑组织印片中均出现特异性黄绿色荧光，RT-PCR检测结果显示所有的扩增产物均出现大小约250 bp的明亮条带。以上结果提示狂犬病病毒感染是小鼠的致死原因。4种不同的市售狂犬病疫苗在无免疫球蛋白应用情况下的保护效果试验显示，接种其中1种疫苗暴露后小鼠的存活率为50%，接种其他3种疫苗小鼠的存活率为30%。以上结果表明，在无狂犬病被动免疫制剂使用的情况下，所选用的4种狂犬病疫苗对经CVS-11暴露后的小鼠提供了部分保护作用。 结论:本研究建立了狂犬病病毒CVS-11不同攻毒方式下的BALB/c小鼠动物模型，为狂犬病及狂犬病疫苗的相关研究提供了一个技术平台。

目的:探讨一种雌性犬尿道壁内血管窦压力的测定方法。方法:健康成年雌性犬10条，购自华中科技大学同济医学院附属同济医院实验动物中心。麻醉下显露膀胱及尿道外口并在膀胱、尿道高压段腔内和尿道壁血管窦内放置测压管用于测定膀胱内压(IBP)、尿道高压段腔内定点压(IUP)和尿道壁内血管窦压(VSP)。每条犬分别在静息和应力状态同步测定IBP、IUP及VSP。完成上述测压后，经VSP测压通道灌注肝素墨汁混合液，过量麻醉处死犬取全尿道和膀胱标本固定后行冰冻切片观察尿道壁内血管窦墨汁充盈着色，以验证VSP所反映的血管窦结构。采用SPSS 19.0统计软件分析，实验数据使用计量资料的统计描述，以均值±标准差( Mean± SD)表示。 结果:本方法能够准确记录静息状态下稳定的VSP值和应力状态下灵敏的VSP变化，并实现IBP、IUP、VSP的同步测定。本组10条成年雌性犬静息状态下IBP、IUP、VSP分别为(9.10±2.81)、(21.02±3.83)、(12.27±3.51) cmH 2O(1 cmH 2O＝0.098 kPa)，IUP/VSP为1.86±0.64；应力状态下，IBP、IUP、VSP分别为(43.05±6.41)、(52.01±7.47)、(17.80±4.50) cmH 2O，IUP/VSP为3.08±0.81。墨汁灌注冰冻切片可见各节段尿道壁内血管窦被墨汁充盈染色，从形态学角度证实本研究所测的VSP为尿道壁内血管窦内压力。 结论:本研究建立了一种准确测定雌性犬尿道壁内血管窦压力的方法，为进一步研究尿道压力的形成机制奠定了方法学基础。

目的:比较骨重塑能力正常和骨重塑能力缺陷大鼠肩袖撕裂（RCT）修复术后色氨酸代谢的差异，探讨色氨酸代谢是否与骨长入有关。方法:共选取50只成年雌性Sprague-Dawley（SD）大鼠进行研究，随机选择18只大鼠接受双侧卵巢摘除手术（OVX），设为OVX组；余32只大鼠接受双侧卵巢摘除假手术，设为假手术组。术后3个月，OVX组和假手术组各自随机选择4只大鼠，采用显微计算机断层扫描（Micro-CT）鉴定肱骨头的骨量流失情况。OVX组剩余大鼠进行RCT造模，并接受急性冈上肌横断修复术，设为OVX+RCT组（ n=14）；假手术组剩余大鼠分别选取14只接受急性冈上肌横断修复术和RCT假手术，分别设为RCT组（ n=14）和SO组（ n=14）。修复手术后2周检测大鼠抓力，并取出冈上肌腱骨复合体，通过实时荧光定量多聚酶链式反应（qPCR）检测、苏木素伊红（HE）染色和免疫组化（IHC）染色评估新骨生成和骨长入情况，采用超高效液相色谱（UPLC）分析检测色氨酸代谢。 结果:抓力测试结果表明，SO组大鼠抓力最大，RCT组次之，OVX+RCT组抓力最小，三组间差异有统计学意义（ P<0.05）。qPCR分析结果表明，SO组腱骨复合体的骨硬化素相对表达量显著高于OVX+RCT组和RCT组，IHC染色显示RCT组的骨织素相对表达量显著高于SO组和OVX+RCT组，以上项目组间差异均有统计学意义（ P<0.05）。UPLC检测结果表明，SO组、RCT组、OVX+RCT组肩袖腱骨复合体色氨酸含量相近，差异无统计学意义（ P>0.05）。qPCR结果表明，犬尿酸代谢途径的吲哚胺2，3-双加氧酶2的表达量在SO组、RCT组、OVX+RCT组呈递增趋势：OVX+RCT组显著高于SO组，OVX+RCT组的3-羟基邻氨基苯甲酸3，4-双加氧酶的表达量显著高于RCT组和SO组，5-羟色胺代谢途径的单胺氧化酶A亚型和B亚型在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增，OVX+RCT组吲哚代谢途径的多巴脱羧酶的表达量显著高于SO组，而细胞色素P450氧化还原酶的表达量在SO、RCT、OVX+RCT三组间递增，以上项目组间差异有统计学意义（ P<0.001）。 结论:大鼠正常肩袖和RCT后修复的肌腱复合体中色氨酸代谢以犬尿酸代谢为主，5-羟色胺代谢次之；在RCT骨重塑中，5-羟色胺代谢途径改变最大，吲哚途径次之。犬尿酸代谢途径的烟酸、黄尿酸含量和5-羟色胺代谢途径的5-羟色氨酸、5-羟色胺、羟基吲哚乙酸、褪黑素及吲哚代谢途径的色氨醇、吲哚乳酸均与骨长入有关。因此，色氨酸代谢与骨长入有关，为RCT寻找潜在治疗靶点。

目的 制备狂犬病病毒(rabies virus,RV)基质蛋白(M)鼠源和兔源多克隆抗体,并比较其反应原性.方法 以RV CVS-11毒株感染细胞后的cDNA为模板构建原核表达载体pET-28a-M,转化E.coli BL21(DE3),IPTG诱导表达M蛋白,经镍柱亲和层析、透析复性后,免疫雌性BALB/c小鼠和雌性新西兰大白兔,取全血,分离血清,ELISA法检测鼠源和兔源多克隆抗体效价,Western blot法、间接免疫荧光试验(immunofluorescence assay,IFA)、免疫沉淀(immunoprecipitation,IP)法检测鼠源和兔源多克隆抗体反应原性.结果 质粒pET-28a-M经测序鉴定证明构建正确;制备的鼠源和兔源多克隆抗体效价分别为1∶100和1∶256 000,与不同RV毒株均具有反应原性.结论 成功制备了 M蛋白鼠源和兔源多克隆抗体,为探讨M蛋白与宿主蛋白相互作用的关系以及研究RV的致病机制提供了重要的生物学工具.

目的:探索微弧氧化处理的镁合金支架辅助自体牙异位移植的可行性.方法:拔除9只雌性比格犬(9～11 kg)的左下颌第二前磨牙、左下颌第三前磨牙和右下颌第二前磨牙,截冠得犬牙根,3Shape扫描形态制作微弧氧化镁合金支架并装配自体牙根,3个月后植入牙槽窝,同时植入1个钛合金种植体和自体牙根进行对照;植入后3、6、12个月分三批处死实验犬,每批3只.截取骨组织标本进行Micro-CT扫描、切片VG染色观察.结果:Micro-CT结果显示,镁合金支架组成骨效果在各时间点均优于钛合金组和自体牙组.VG染色结果可见,无论是在哪个时间点,镁合金支架组的骨接触率均高于钛合金种植体组,自体牙组最低,且差异具有统计学意义(P＜0.05).结论:与自体牙移植和钛合金种植体相比,镁合金支架辅助的自体牙异位移植可以有效促进机体形成新骨,有利于提高移植牙的初期稳定性.

目的 构建并评价富氢环境在干预比格犬盆腹腔手术损伤中的作用.方法 选取的10只健康清洁幼年雌性比格犬,随机分为对照组与实验组,均在术中暴露并回纳回肠、空肠、回盲部、膀胱、子宫及附件,同时用电凝刀破坏回盲部、膀胱、子宫及附件;根据吸氢后血氢浓度变化、饮用水盆2000ml富氢水浓度衰减分析以及200ml腹腔富氢生理盐水灌洗液氢浓度衰减分析,构建出盆腹腔手术围术期富氢环境条件;对照组术后予以普通处理,实验组在富氢环境下饲养与护理.结果 吸入含2％氢的混合气体30min后,血氢浓度趋于稳定;新制饱和富氢水1h后,氢浓度下降为初始浓度的一半;腹腔灌注饱和富氢生理盐水后,氢浓度急剧下降,约至15min后,浓度下降一半.根据已构建的富氢环境,检测术前、术后第1天以及第3天的WBC、MDA、SOD、IL-6以及TNF-α的水平.其中,术前两组对比差异无统计学意义(P＞0.05);术后第1天和第3天实验组WBC、MDA、IL-6以及TNF-α水平均明显低于对照组(P＜0.05),而实验组SOD的水平明显高于对照组(P＜0.05).结论 本研究成功构建了一个完整的富氢环境模型,利用该模型后,盆腹腔手术术后血清炎性指标及氧化应激代谢指标明显下调,提示该富氢环境能够有效控制盆腹腔手术带来的损伤、炎性反应及氧化应激.