目的:探究何氏养巢方(简称"养巢方")提高卵巢颗粒细胞线粒体功能的机制.方法:取36只6～8周龄C57BL/6J雌鼠随机分为空白对照组,模型对照组,养巢方小、中、大剂量组和阳性对照组.均予环磷酰胺90 mg/kg单次腹腔注射以建立原发性卵巢功能不全(POI)模型后,分组灌胃21 d后处死.另取6只6～8周龄C57BL/6J雌鼠造模后获取原代颗粒细胞,分为养巢方组、PHTPP(一种雌激素受体阻滞剂)组、养巢方+PHTPP组,分别予养巢方含药血清或PHTPP或同时给予两者干预培养24 h.分别采用苏木精-伊红(HE)染色观察卵巢组织病理学变化;荧光素酶法检测颗粒细胞腺苷三磷酸(ATP)水平;定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测线粒体DNA(mtDNA)的拷贝数;透射电镜观察线粒体结构变化;蛋白质印迹法检测雌激素受体β(ERβ)、过氧化物异酶体增殖物激活受体γ共激活因子1α(PGC1α)、线粒体转录因子A(TFAM)、超氧化物歧化酶2(SOD2)蛋白表达;qRT-PCR检测Erβ、Pgc1α、Tfam、Sod2 mRNA表达.结果:模型对照组卵巢组织次级及三级卵泡较少,养巢方各剂量组及阳性对照组次级及三级卵泡较多.与空白对照组比较,模型对照组颗粒细胞ATP和mtDNA水平均下降(均P＜0.01),线粒体嵴消失或空泡化结构异常比例增加,ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均下降(均P＜0.01).养巢方中、大剂量组及阳性对照组颗粒细胞内ATP生成增多、mtDNA拷贝数增加(P＜0.05或P＜0.01);颗粒细胞内结构异常线粒体减少,ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均增加(P＜0.05或P＜0.01).体外实验中,与PHTPP组比较,养巢方+PHTPP组线粒体结构正常比例更高,线粒体ATP含量增加(P＜0.05或P＜0.01),mtDNA拷贝数增加(P＜0.05或P＜0.01);ERβ、PGC1α、TFAM、SOD2蛋白及其mRNA表达均上升(P＜0.05或P＜0.01).结论:养巢方可以通过ERβ/PGC1α/TFAM通路提高线粒体生物发生从而改善POI小鼠卵巢功能.

目的 探讨乳腺癌组织中Ⅺ型胶原α1(COL11A1)表达与雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体-2(HER-2)和Ki-67 的关系.方法 采用免疫组化EnVision两步法检测 18 例乳腺纤维腺瘤组织和 120 例乳腺癌组织(36 例原位癌组织、84 例浸润性癌组织)中COL11A1 的表达,同时对乳腺癌组织进行ER、PR、HER-2 和Ki-67 免疫组化检测,对HER-2(2+)进行荧光原位杂交检测;分析COL11A1 表达与乳腺癌临床病理特征和多种免疫标记(ER、PR、HER-2 和Ki-67)的关系.结果 免疫组化结果显示COL11A1 主要表达于乳腺癌细胞中.在纤维腺瘤组织中COL11A1 表达呈弱阳性.COL11A1 在原位癌中表达高于浸润性乳腺癌(P<0.05).COL11A1 表达与乳腺癌患者的年龄、部位、肿块大小和淋巴结转移无关(P>0.05),而中、高分化组织的 COL11A1 表达水平高于低分化组织,差异有统计学意义(P<0.05).进一步分析COL11A1 与乳腺癌其他免疫标记间的相关性发现,在Ki-67 高表达组织中COL11A1 低表达的比例更高,差异有统计学意义(P<0.05),而其他 3 种标记与COL11A1 的表达无关(P>0.05).结论 COL11A1 在浸润性乳腺癌中表达较原位癌低,在低分化乳腺癌中表达水平较中高分化更低,且与Ki-67 表达有关,提示COL11Al表达在乳腺癌发生发展过程中是动态变化的,为乳腺癌的诊断治疗提供潜在标记物.

背景 结节性硬化症(tuberous sclerosis complex,TSC)患者中女性占比高、疾病程度重、进展快,具体机制不明.目的 比较男女TSC患者的临床特点,检测雌激素受体α(estrogen receptor alpha,ERα)在TSC患者肾病变组织中的表达水平,探索雌激素对TSC2-/-小鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblasts,MEF)增殖能力的影响.方法 本研究分两部分,临床研究部分收集 2015年 1月-2020年 12月在解放军总医院第三医学中心泌尿外科医学部接受治疗的结节性硬化症患者资料,比较男女患者临床特征差异,免疫组织化学检测TSC患者肾血管平滑肌脂肪瘤(renal angiomyolipoma,RAML)组织中ERα的表达水平;细胞学研究部分采用MTS实验检测雌二醇和雌激素受体拮抗剂氟维司群对TSC2-/-MEF细胞增殖能力的影响.结果 本中心共诊治 145例伴发RAML的TSC患者,中位年龄 29(IQR:24～36)岁,女性(77.2%)显著多于男性(22.8%).与男性患者比较,女性患者病灶＞3 cm的比例更高(47.3%vs 27.3%,P=0.041),差异有统计学意义;女性患者进展中病灶(22.3%vs 12.1%)、RAML引起相关疼痛(10.7%vs 6.1%)、肾功能受损(5.4%vs 3.0%)和破裂出血(8.9%vs 3.0%)比例更高,但差异无统计学意义(P＞0.05).本组患者中 6例患者进行了免疫组化检测,其中 4例(均为女性)RAML组织中阳性表达ERα.MTS实验发现雌二醇能够促进TSC2-/-MEF细胞的增殖能力,而氟维司群能够抑制细胞的增殖能力.结论 女性TSC患者RAML体积更大,症状更重.ERα在部分TSC患者RAML组织中高表达,且雌激素能促进TSC2-/-MEF细胞增殖,ERα可能在TSC疾病进展中发挥重要作用.

目的:探讨白细胞介素(IL)-17A与雌激素受体α(ERα)、ERβ在上皮性卵巢癌(EOC)组织中的表达水平及其与患者临床病理特征和预后的关系.方法:回顾性分析2018年8月—2022年8月间在无锡市妇幼保健院诊治的102例EOC患者的临床和病理资料,采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测癌组织及相应病旁组织中IL-17A、ERα、ERβ mRNA的表达情况,计算ERα/β比值.分析IL-17A mRNA、ERα/β与患者临床病理特征的关系,并采用Kaplan-Meier法和Cox回归法分析IL-17A mRNA、ERα/β对EOC患者预后总生存期(OS)的影响.结果:与癌旁组织比较,癌组织中IL-17A、ERα mRNA表达水平及ERα/β水平均升高(P<0.05),而ERβ mRNA表达水平降低(P<0.05).分别以IL-17A mRNA、ERα/β的平均值0.52、3.85为分界值进行高、低表达分组,结果显示IL-17A高表达及ERα/β高比值与FIGO分期、淋巴结转移、腹水量有关(P<0.05).随访时间12～60个月,中位随访时间36个月,随访期间共38例(37.25%)患者死亡.Kaplan-Meier分析显示,IL-17A mRNA高表达者累积生存率低于其低表达者(P<0.05);ERα/β高比值者累积生存率亦低于ERα/β低比值者(P<0.05).多因素Cox分析显示,FIGO III+IV期、术后残灶>2 cm、IL-17A mRNA高表达、ERα/β高比值是EOC患者总体生存期的独立危险因素(P<0.05).结论:EOC组织中IL-17A、ERα及ERα/β mRNA上调,而ERβ mRNA水平下调,且IL-17A高表达及ERα/β高比值的EOC患者预后相对较差.

目的 探讨雌激素信号转导通路失衡在妊娠高血压疾病胎盘血管病变发生中的作用.方法 建立高血压妊娠大鼠模型,分为对照组、模型组和模型+雌二醇(E2)组.记录母体大鼠的血压(BP)和尿蛋白水平,HE染色检测妊娠高血压大鼠胎盘病理组织,采用蛋白质印迹检测各组成纤维细胞中雌激素通道蛋白[雌激素受体 α36(ERα36)、雌激素受体 α(ERα)、雌激素受体 β(ERβ)和G蛋白偶联雌激素受体(GPER)]、血管内皮因子[C反应蛋白(CRP)、血管内皮生长因子(VEGF)和内皮型一氧化氮合酶(eNOS)]及TLR4通路(TLR4、MyD88、p-IRAK4和TRAF6)蛋白的表达.结果 与对照组比较,模型组的雌激素ERα36、ERα和ERβ表达下调,而E2处理后其表达增加;此外,模型组大鼠血压及尿蛋白升高,模型组胎盘绒毛中的细胞胆细胞、绒毛数量减少,胎盘绒毛结构萎缩,部分绒毛出现纤维蛋白样坏死等,而模型+E2组病理明显好转;模型组的血管内皮因子(CRP、VEGF和eNOS)及TLR4通路(TLR4、MyD88、p-IRAK4和TRAF6)表达升高,而E2处理后其表达降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论 E2可以改善妊娠高血压大鼠结局.E2的保护作用可以通过与ERα36结合来降低胎盘血管生成因子以及TLR4/MyD88/IRAK4/TRAF6信号转导的表达来部分发挥.

目的 研究雌激素受体α36(estrogen receptor alpha-36,ERα36)介导雌激素促进甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)细胞增殖的分子机制及相关信号通路.方法 采用免疫组化(S-P)检测ERα36在34例人PTC组织标本及其21例配对癌旁组织标本中的表达;梯度浓度E2(0、10-7、10-8、10-9 mol/L)处理PTC细胞株K-1和BCPAP后,Western blot检测两种细胞株中ERα36的表达;10-8 mol/L E2处理后,Western blot检测两种细胞株ERK1/2和AKT磷酸化水平的变化,以及ERα36-siRNA对其的抑制作用;梯度浓度的E2处理BCPAP细胞后,MTT法检测细胞增殖和ERα36-siRNA对增殖的抑制作用.结果 在人PTC组织中ERα36的阳性表达率为82.4％,明显高于癌旁组织(P＜0.05).PTC细胞株K-1和BCPAP均表达ERα36;10-8 mol/L E2处理细胞后,ERα36的表达增高,且呈时间依赖性.E2能促进BCPAP和K-1细胞ERK1/2和AKT蛋白磷酸化水平增高,且处理15 ain时BCPAP细胞最明显,10 min时K-1细胞最明显,而ERα36-siRNA能抑制E2的诱导效果;E2促进BAPAP细胞增殖,ERα36-siRNA则抑制E2的诱导效果.结论 ERα36通过ERK/AKT途径介导雌激素促进PTC细胞增殖.

目的 探讨miR-143通过靶向雌激素受体ER-α36介导人胃癌细胞系SGC7901的侵袭.方法 通过慢病毒载体的构建及包装生成上调/下调miR-143的慢病毒LV-miR-143 up和LV-miR-143 down并感染人胃癌细胞系SGC7901,用Western blot检测ER-α36的蛋白表达水平和细胞的侵袭能力;生物信息学软件预测miR-143的靶基因;荧光素酶报告基因实验验证靶基因.结果 LV-miR-143 up 与 LV-miR-143 down 慢病毒病毒颗粒分别感染人胃癌细胞系SGC7901,感染效率均在80%以上;上调miR-143,人胃癌细胞系SGC7901的ER-α36表达水平明显下降,侵袭能力明显降低(P<0.05),反之则增加.结论 miR-143通过靶向雌激素受体ER-α36负向调控胃癌细胞SGC7901的侵袭.

除经典核内雌激素受体(estrogen receptor,ER)介导的基因组信号通路外,越来越多的证据显示,膜性ER介导的非基因组信号通路对乳腺癌细胞的生长、耐药及肿瘤干细胞的富集等发挥重要作用.ER-α36是膜性ER的主要形式,是ER-α66的剪切变异体,主要定位于细胞膜和细胞质,通过非基因组信号通路,激活MAPK/ERK和PI3 K/AKT等细胞内重要信号分子,促进乳腺癌细胞生长、诱导Tomaxifen耐药及肿瘤干细胞富集.该文将就ER-α36在此方面的作用作一综述.

研究证实,雌激素与胃癌的发生有关.男性生理性低浓度雌激素可促进胃癌细胞增殖,而女性生理性高浓度雌激素则可抑制胃癌细胞增殖.因此推测,雌激素对胃癌的生长具有双向调节作用.雌激素主要通过雌激素受体α(ERα)发挥作用,故ERα与胃癌的发生亦存在相关性.ERα有3种亚型,即ERα-66、ERα46、ERα-36,三者均能通过相应的信号通路参与胃癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性生物学行为.本文就近年雌激素及ERα与胃癌生物学行为关系的相关研究进行综述.

ER-α36由ER-α66衍生而来,它的5′末端和3′末端没有转录活性区AF-1和AF-2,仅保留了ER-α66的DNA结合区、核定位信号区和配体依赖区.ER-α66定位于细胞核,而ER-α36主要锚定于细胞膜和细胞质,故ER-α36属于膜型雌激素受体.与ER-α66相比,ER-α36具有更强大的配体依赖活性,可对内、外源性雌激素迅速做出反应,在数秒至数分钟内快速激活信号通路,并与各类信号因子(如Ca2+、PKA、PKC、IGF)协同,参与细胞内的信号级联反应,介导了雌激素的非基因组信号途径.ER-α36与胞内多种信号通路存在着交叉对话现象,并参与介导细胞内的快速信号途径,如腺苷酸环化酶途径(AC)、蛋白激酶C途径(PKC)、G蛋白偶联途径、磷脂酰三磷酸肌醇激酶PI3K/AKT信号途径、丝裂原活化蛋白激酶MAPK/ERK信号途径、Ca2+通路和Src激酶激活的信号途径.上述信号途径可归纳为3种主要的信号通路:Ras-Raf-MEK-MAPK通路、Src-PI3K-AKt通路、PLC-PKC-cAMP-PKA.