从药效相关性和成分差异阐释青翘与老翘改善博来霉素(BLM)诱导肺纤维化小鼠的作用差异.小鼠随机分为正常组,模型组,吡非尼酮组(50mg·kg-1),青翘低、高剂量组(1.3、2.6g·kg-1),老翘低、高剂量组(1.3、2.6 g·kg-1).采用气管滴注BLM制备肺纤维化模型,统计小鼠存活率及体质量变化;给药完成后计算肺指数,HE染色、Masson染色和天狼星红染色评价肺组织病理变化;透射电子显微镜观察肺组织超微结构;生化法测定肺组织转化生长因子-β1(TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、E钙黏着蛋白(E-cadherin)、羟脯氨酸(HYP)及肺泡灌洗液中白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平;RT-qPCR、Western blot法检测肺组织中基质金属蛋白酶7(MMP7)、胶原蛋白I型(collagen I)、E-cadherin、TNF-α、波形蛋白(vimentin)、TGF-β1、α-SMA表达;免疫荧光检测肺组织中α-SMA的表达;主成分分析法评价老翘与青翘改善肺纤维化的作用差异;分子对接技术分析老翘中含量高的化合物与TGF-β1受体之间的相互作用,CCK-8法检测其对TGF-β1诱导BEAS-2B和HFL1细胞模型的影响.结果显示,青翘、老翘可提高肺纤维化小鼠存活率,降低肺指数,改善肺组织病理损伤与胶原纤维沉积水平,改善小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞板层小体受损情况,降低肺泡灌洗液中IL-6、TNF-α水平,下调肺组织中HYP、MMP7、vi-mentin、collagen Ⅰ、TGF-β1、α-SMA的表达,上调E-cadherin的表达.通过主成分分析综合评价胶原纤维沉积水平,其改善程度为老翘高剂量＞老翘低剂量＞青翘高剂量＞青翘低剂量.分子对接显示羟基酪醇、咖啡酸、连翘脂素、落叶松脂素与TGF-β1受体有较好的结合活性,且可显著减轻TGF-β1诱导BEAS-2B细胞损伤,抑制TGF-β1诱导HFL1细胞增殖.综上,青翘、老翘均可有效改善BLM诱导的肺纤维化小鼠损伤,老翘在减少胶原沉积方面优于青翘,可能与老翘中羟基酪醇、咖啡酸、连翘脂素、落叶松脂素含量高于青翘有关.

基于超高效液相色谱-串联四极杆飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)技术结合自建化学成分数据库,对连翘Forsythia suspensa的叶、花、果实、青翘、老翘、种子等11个部位中化学成分进行整体表征和鉴定.运用主成分分析、偏最小二乘法判别分析等化学计量学方法,评价连翘不同部位的质量属性与差异.从连翘中共推测鉴定出79个化合物,包括13个苯乙醇苷类、10个木脂素类、12个黄酮类、10个有机酸类、14个萜类及20个其他类型化合物.其中,34个化合物为连翘不同部位间差异的主要变量,且连翘叶和青翘中各成分的相对含量较高.应用脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞炎症模型,评价了连翘不同部位提取物及主要成分的抗炎活性.结果显示,青翘、连翘花、连翘枝和连翘梗的提取物均具有一定的抗炎活性,且连翘酯苷A、连翘苷、连翘脂素、(+)-松脂素-β-D-吡喃葡萄糖苷等成分也具有可显著抑制NO释放的抗炎活性.该研究对连翘不同部位的化学成分进行了较全面的分析以及抗炎活性评价,为连翘的资源开发和综合利用提供参考.

目的:研究不同授粉方式对连翘果实农艺性状和主要药用成分含量的影响.方法:花期采用不同方式对连翘进行授粉,在青翘收获期测定结果率、果长、果宽、鲜重、干重、折干率等农艺性状指标和连翘酯苷A、连翘苷2个品质指标.结果:连翘♀长 × ♂短异花授粉产生的果实农艺性状和含量最优;其余果实农艺性状和含量测定值由大到小依次为连翘♀短 × ♂长异花授粉、♀短 × ♂短(同型异花)授粉、♀长 × ♂长(同型异花)授粉,连翘自花授粉不结实;♀长 × ♂短异花授粉后的结果率、鲜重、干重、折干率、连翘酯苷A和连翘苷含量显著高于♀短 × ♂短(同型异花)授粉和♀长 × ♂长(同型异花)授粉.结论:连翘♀长 × ♂短异花授粉的果实农艺性状、连翘酯苷A和连翘苷含量最佳,可为连翘的规范化种植提供参考依据.

为了探讨连翘生长环境和采收时间的影响,对我国主产区连翘精油进行了系统评价.采用GC-MS技术对不同产地的青翘(green Forsythiae Fructus,GF)和老翘(ripe Forsythiae Fructus,RF)中的精油成分进行了分析,为连翘的资源化利用提供参考.共鉴定出54种化合物,其中常见化合物12种,烯烃和醇类是最丰富的两种成分,且结构多样.基于主成分分析(PCA)的质量评价表明,湖北武汉RF、陕西洛南RF和安徽六安RF的综合评价得分较高;PCA和聚类分析(CA)能够区分样品中的GF和RF,也表明,采收期和区域环境共同影响连翘精油的成分.从精油成分角度考虑,应优先选用老翘进行开发和利用.应用精油的特性作为连翘采收期和区域环境的化学分类标志是可行的.

目的:对连翘药材的不同商品规格“青翘”、“老翘”、“青翘心”及“老翘心”进行品质评价.方法:采用清除DPPH自由基方法对不同商品规格连翘的抗氧化活性进行测定,以量效关系、IC50等指标进行直观和定量比较;同时,通过高效液相色谱法(HPLC)测定样品中连翘苷、连翘酯苷A、槲皮素、牛蒡子苷元及牛蒡子苷的含量,以相关分析及多元线性逐步回归分析进行抗氧化活性与化学成分之间的关联.结果:连翘具有较强清除DPPH自由基活性,IC50大小为:青翘心＞青翘＞老翘心＞老翘＞维生素E,HPLC测连翘酯苷A与槲皮素的含量为:青翘心＞老翘心＞青翘＞老翘,连翘酯苷A及槲皮素、牛蒡子苷元分别与IC50呈极显著及显著负相关关系,多元线性逐步回归分析显示槲皮素的含量增加有助于清除DPPH自由基水平的提高,槲皮素与牛蒡子苷元可能有协同作用.结论:不同商品规格的连翘抗氧化活性为“青翘”优于“老翘”、“心”优于“皮”,连翘酯苷A含量最高,且连翘酯苷A及槲皮素含量越多,连翘商品的抗氧化性越强,所建立方法把抗氧化活性与化学成分关联对不同规格连翘商品的品质进行评价,可以为完善和提高连翘的质控水平提供技术支持与研究思路的参考.

为了优化连翘含量测定方法,该文首先通过《中国药典》含量测定方法对各种连翘供试品的制备方法进行了评价,优选出了供试品的制备方法,即30倍70％甲醇超声提取0.5h.该方法可满足同时提取连翘酯苷A和连翘苷的要求,并能达到最佳效果.其次,通过方法学考察建立了同时测定连翘酯苷A和连翘苷的HPLC方法,色谱条件乙腈(A)-0.4％冰醋酸溶液(B)梯度洗脱,0～33 min,15％A,33～43 min,15％ ～25％A,43～60 min,25％A;检测波长为277,330 nm.最后,利用该文方法和《中国药典》方法对10份青翘和5份老翘的连翘酯苷A和连翘苷进行了含量测定.结果表明:该文所建立的HPLC测定方法有效、快速、简便,符合含量测定要求.同时发现连翘酯苷A和连翘苷的含量在青翘和老翘中具有显著性差异,因此,建议两者指标成分的限量值应分别制订.该研究结果为连翘药材含量测定方法的建立和青(老)翘质量控制标准分别建立提供了依据.

连翘是常用中药之一[1],主产于山西山区,又名黄花条、青翘、老翘等[2]. 一般以果实作为药用,有清热解毒、消肿散结等作用[3]. 由于连翘花期较早,在山区受到春寒的影响而减产,从而导致其果实价格上涨,但是连翘叶确被大量遗弃. 连翘叶不是常用中药,但我国民间有很长应用历史,在山西,河北等地居民们自做"连翘茶"作为饮品[4].连翘中主要的成分为连翘苷,有研究表明连翘叶中连翘苷含量远远高于青翘和老翘,李发荣等[5]研究表明其含量约为老翘的40倍,青翘的3～4倍,因此连翘叶是否具有很好的的药用价值是值得研究的问题.同时也有研究表明连翘苷存在遗传毒性,王虹等[6]研究表明,高浓度的连翘水提物能明显提高哺乳动物精子畸形率;其他物质如连翘酯苷对细胞的遗传毒性和小鼠经口急性毒性作用也已得到证实[7],但连翘叶对动物致畸和致突变作用文献报道较少[8],这对利用连翘叶进行大规模开发时,安全性提出了极大的考验,为此我们对连翘叶提取物进行了致畸和和致突变作用的研究.

目的:考察微波炮制工艺代替青翘产地加工的可行性.方法:以连翘苷和连翘酯苷A的含量等多项指标作为评价标准,优化青翘的微波炮制工艺,并考察炮制对连翘酯苷A水解酶的灭活作用.结果:优选的微波炮制工艺为:取青翘生品50 g,平铺于微波炉内以中火加热6 min.该工艺经中试试验验证,优选的工业生产工艺为:青翘生品炮制量为10 kg,炮制过程中传送带速度为4.5～6 m/min.制备得到的微波炮制品与传统炮制品中连翘苷和连翘酯苷A的含量无显著性差异,且连翘酯苷A水解酶灭活率均在95％左右,同时微波炮制工艺更节省时间和能源.结论:青翘的微波炮制工艺简单、高效、省时省力,可作为青翘产地加工的一种替代方法.

目的 建立超高效液相色谱(UPLC)法分析青翘主成分的含量,评价不同产区青翘质量.方法 UPLC法测定18个产区青翘中连翘苷、连翘酯苷A、芦丁含量,对其重要程度按层次分析法(AHP)进行重要性评判,计算每种成分权重,根据权重计算每个样品综合评分,一测多评评价各产地青翘综合质量.结果 湖北省十堰市郧阳区5批青翘样品综合评分平均89.4,普遍高于其他产区.结论 湖北省十堰市是野生青翘药材传统产区,规范采收时间及产地加工工艺能保证该地区青翘药材质量优质及均一.

通过对历代本草及医方记载的连翘品种、功效主治、入药部位的变化进行考证,证实古今连翘品种存在变迁,各时期医书中的连翘所指非同一植物来源或药用部位.唐宋以前使用的藤黄科湖南连翘及同属植物,功效偏重于散结消肿,还能通淋.宋以后开始使用的木犀科连翘,主要偏重于清心火散上焦之热.之后青翘、老翘、连翘心的使用一直存在争议,建议在引用古方时加以注意.药材中不同有效成分之间的量及其比例是药材药效好坏的决定因子,建议青翘、老翘分开使用,老翘应单独设定指标性成分的检测值,并加强采收和加工管理.根据连翘心在临床表现出和青翘老翘的差异性疗效,建议恢复连翘心作为单独品种使用.