目的:探究髓系/淋巴系或混合谱系白血病3基因(myeloid/lymphoid or mixed-lineage leukemia 3,MLL3)对宫颈癌细胞生长、转移、放射敏感性的影响.方法:选择60例宫颈鳞癌患者的癌组织及配对癌旁组织,采用实时定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测检测MLL3 mRNA水平.体外培养SiHa细胞,将其分为以下5组:Control组(不转染)、NC-sh组(转染阴性对照shRNA慢病毒)、MLL3-sh组(转染MLL3 shRNA慢病毒)、NC-OE组(转染阴性对照过表达慢病毒)和MLL3-OE组(转染MLL3过表达慢病毒).进一步采用2300EX直线加速器9 MeV β射线照射细胞建立放射抵抗SiHa细胞(SiHaR),然后将其分为:NC-sh组、MLL3-sh 组、8 Gy+NC-sh 组和 8 Gy+MLL3-sh 组.NC-sh 组和 MLL3-sh 组细胞不照射,8 Gy+NC-sh 组和 8 Gy+MLL3-sh 组细胞用9 MeV β射线照射8 Gy.采用MTT法检测细胞增殖情况;Annexin V-FITC/PI双染色法检测细胞凋亡;Transwell检测细胞侵袭能力;qRT-PCR检测MLL3、共济失调毛细血管扩张征突变基因(ATM)、ATM-Rad3相关基因(ATR)、乳腺癌易感基因(BR-CA1)和RAD50双链断裂修复蛋白(RAD50)的mRNA水平;Western blot检测MLL3、Bcl-2相关X蛋白基因(Bax)、B细胞淋巴瘤/白血病-2基因(Bcl-2)、cleaved caspase 3、基质金属蛋白酶(MMP)2、MMP9和γ-H2AX的表达;免疫荧光染色检测γ-H2AX的表达.结果:与癌旁组织相比,宫颈鳞癌组织中的MLL3 mRNA水平显著降低(P＜0.001).与NC-sh组比较,MLL3-sh组SiHa细胞的MLL3 mRNA和蛋白相对表达量降低,细胞活力升高,细胞凋亡率、Bax和cleaved caspase 3蛋白相对表达量降低,Bcl-2蛋白相对表达量升高,侵袭细胞数量、MMP2和MMP9蛋白相对表达量升高(P＜0.05).与NC-OE组比较,MLL3-OE组SiHa细胞的MLL3 mRNA和蛋白相对表达量升高,细胞活力降低,细胞凋亡率、Bax和cleaved caspase 3蛋白相对表达量升高,Bcl-2蛋白相对表达量降低,侵袭细胞数量、MMP2和MMP9蛋白相对表达量降低(P＜0.05).与SiHa细胞相比,SiHaR细胞中的MLL3 mRNA和蛋白相对表达量均升高(P＜0.001).与8 Gy+NC-sh组比较,8 Gy+MLL3-sh组SiHaR细胞的细胞活力降低,γ-H2AX的蛋白相对表达量和γ-H2AX foci数目升高,ATM、ATR、BRCA1和RAD50的mRNA水平降低(P＜0.05).结论:宫颈癌细胞MLL3的表达下调促进了其生长和转移,但降低DNA损伤修复能力,提高宫颈癌细胞的放射敏感性.

目的 探讨毛刺状淋巴样原始细胞在急性白血病中的诊断价值,并分析毛刺状淋巴样原始细胞的实验室检查特征.方法 选取 2020 年 1 月至 2021 年 12 月在陆军军医大学第二附属医院血液病医学中心初诊为急性白血病的 525 例患者作为研究对象,进行回顾性分析.研究对象根据骨髓细胞形态学特征筛选出不伴成熟细胞分化的急性白血病,且毛刺状淋巴样原始细胞比例≥5%(定义为毛刺状淋巴样原始细胞型急性白血病)的患者 72 例作为阳性组;其余研究对象白血病细胞形态规则呈圆形或椭圆形,并且毛刺状淋巴样原始细胞<5%的患者 453 例为对照组.对两组 WHO 诊断标准分型、免疫表型、跨系表达及干/祖细胞阶段标志等实验室特征进行比较分析.结果 阳性组与对照组WHO 诊断标准分型结果比较差异有统计学意义(P<0.05).阳性组中 75%急性髓系白血病伴CD7 或CD56 表达,61.5%急性B淋巴细胞白血病(B-ALL)出现伴 CD13 或CD33 表达,3 例急性T淋巴细胞白血病(T-ALL)均出现伴髓系表达.阳性组 B-ALL 和 T-ALL 的干/祖细胞阶段标志表达与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05).结论 毛刺状淋巴样原始细胞型急性白血病主要集中在混合表型急性白血病及微/低分化急性白血病亚型,白血病细胞高频出现混合谱系、高表达跨系免疫标志和干/祖细胞阶段标志.

目的 总结31例婴儿急性白血病(infantile acute leukemia,IAL)的临床特征,为寻找适合于IAL的治疗方案提供参考.方法 回顾性分析2012年1月至2016年12月于郑州大学第一附属医院初次诊断和治疗的31例IAL患儿的临床表现,辅助检查包括骨髓细胞形态学、免疫表型、细胞分子遗传学分型等,以及治疗情况和随访资料.结果 (1)首发症状:发热17例,肝和(或)脾肿大22例,浅表淋巴结肿大10例,中枢神经系统白血病3例.(2)辅助检查:初治时白细胞计数≥300×109/L者4例,(100～ 300)×109/L者11例;婴儿急性淋巴细胞白血病(infantile acute lymphocytic leukemia,IALL)22例,婴儿急性髓系白血病(infantile acute myeloid leukemia,IAML)9例;14例行骨髓免疫分型、染色体和融合基因检查,其中前体B细胞急性淋巴细胞白血病(progenitor B cell acute lymphoblastic leukemia,pro-B-ALL)9例,CD10均阴性;11q23染色体易位5例;混合谱系白血病(mixed lineage leukemia,MLL)基因重排5例,4例MLL-AF4阳性,1例AML-AF9阳性.(3)预后:31例中15例IALL接受化疗,5例存活;5例IAML接受化疗,2例存活;11例未治疗患儿电话随访均死亡.结论 IAL的临床表现多样,以发热、肝脾淋巴结肿大最常见;高白细胞计数多见;IALL发病率多于IAML;ALL中以pro-B-ALL多见,多为CD10阴性表达;常伴MLL/11q23基因重排.绝大多数患儿未经治疗或治疗途中放弃治疗,化疗相关并发症致死率高,易复发,MLL基因重排患儿预后极差.

目的·分析混合谱系白血病(mixed linage leukemia,MLL)基因重排(MLL rearrangement,MLL-r)阳性的儿童急性白血病(acute leukemia,AL)患者的临床特点及预后情况.方法·回顾性分析2009年1月1日 至2019年12月31日上海交通大学附属儿童医院收治的MLL-r AL患儿45例.采用荧光原位杂交和/或实时荧光定量PCR检测MLL-r.Kaplan-Meier法评估患儿生存情况,Log-rank检验比较各组生存率.对性别、年龄、白细胞数等影响生存的指标进行单因素和多因素分析.结果·AL患儿MLL-r的检出率为7.1％;在急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)和急性髓细胞性白血病(acute myeloid leukemia,AML)中MLL-r的检出率分别为5.4％和13.3％,二者差异有统计学意义(P=0.002);2组患儿的年龄(＞1岁和≤1岁)和初发时白细胞数(≥50x 109/L和＜50×109/L)比较,差异均有统计学意义(P=0.032和P=0.021).MLL-r ALL患儿的免疫分型以早期前体B-ALL为主,占79.2％;MLL-r AML患儿以M5为主,占77.8％.MLL伙伴基因分析,ALL患儿MLL/A4F4占59.2％(16/27),其中小于1岁的患儿占68.7％(11/16),与非MLL/AF4组小于1岁的患儿数相比差异有统计学意义(P=0.034);AML患儿以MLL/AF9为主,占33.3％.42例患儿可进行疗效分析,完全缓解率为97.6％(41/42),中位随访时间26个月(2～138个月),中位无事件生存(event-free survival,EFS)和总生存(overall survival,OS)时间分别为21个月和24.5个月,3年EFS和OS率分别为(41.8±9.4)％和(60.9±9.3)％.MLL-r ALL患儿中位EFS和OS时间分别为21.5个月和28个月,3年EFS和OS率分别为(44.3 士 11.7)％和(58.2±12.1)％.MLL-r AML患儿中位EFS和OS时间分别为16个月和23个月,2年EFS和OS率分别为(36.5±15.8)％和(64.7±14.5)％.ALL患儿复发8例,中位复发时间20个月(2～36个月);AML患儿复发7例,中位复发时间16个月(5～38个月);二者累积复发率分别为48.4％和63.9％,差异无统计学意义(P=0.398).单因素分析显示,MLL-r ALL患儿年龄＞1岁与≤1岁组、白细胞数≥50×109/L与＜50×109/L组、血小板数＞30×109/L与≤30×109/L组EFS率比较差异均有统计学意义,P值分别为0.028、0.024和0.027.多因素分析显示发病时的白细胞数为影响MLL-r ALL患儿EFS的独立预后因素(RR=6.113,95％CI0.017～1.050,P=0.013)结论·AML患儿MLL-r的发生率比ALL患儿高.MLL-r ALL患儿免疫分型以早期前体B-ALL为主,MLL-r AML患儿多见于M5型.MLL-r阳性儿童白血病患者化学治疗的缓解率尚可,但复发率高.发病时的白细胞数≥50xl09/L是MLL-r ALL患儿的不良预后因素.

髓样/淋巴或混合谱系白血病蛋白3(myeloid/lymphoid or mixed lineage leukemia3,MLL3),又名赖氨酸甲基转移酶2C(lysine methyltransferase 2C,KMT2C),为 KMT2家族的成员之一,位于7q36.1,具有65个外显子,编码一种核蛋白,是对组蛋白3赖氨酸4(histone 3 lysine 4,H3K4)进行甲基化修饰的酶,H3K4甲基化通常与转录活性相关,二甲基和三甲基化的H3K4与基因启动子的激活有关,而单甲基化则与基因增强子[1,2]有关.MLL家族基因被认为与组织的生长调控、肿瘤发生有关.MLL3被发现镶嵌于一种与SET1相关的蛋白复合物中,.该复合物在人类中有6种亚型.MLL3/4蛋白复合物是调节基因增强子区H3K4单甲基化的重要的复合物,MLL3蛋白复合物是包含9个亚基的巨大复合物[3].

在急性白血病治疗过程中系别转化罕见,在与系别转化相关的染色体畸变中,t(4;11)(q21;q23)与KMT2A/AFF1 融合蛋白[原混合谱系白血病(mixed linage leukemia,MLL)基因 MLL/AFF1 或 MLL/AF4 ]重排最为常见[1 ].研究表明,MLL重排急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)起源于一个有淋巴细胞分化潜能的前体细胞,从而使系别发生潜在的变化[2].细胞毒性治疗后患者的系别转化是由选择或基因重组引起的[2].博纳吐单抗是一种双特异性单克隆抗体,由一种抗 CD19 抗体和一种抗CD3 抗体连接而成,对B细胞 CD19 和细胞毒性 T细胞CD3 均具有特异性.在与2 个表位同时结合后,正常和肿瘤B细胞被宿主细胞毒性 T细胞裂解.有研究报道,6 例婴幼儿和 4 例成人急性 B淋巴细胞白血病(B cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)在CD19 靶向治疗[嵌合抗原受体 T细胞(chimeric anti-gen receptor T-cells,CAR-T)和博纳吐单抗]后转化为急性髓系白血病[1,3-9].有研究观察到 CD19 靶向免疫治疗后复发与获得髓样表型和 B淋巴系抗原缺失有关,是一种新的复发机制,不同于以前注意到的孤立CD19表达丢失[3,10].可能是ALL患者接受靶向免疫治疗后经过髓系转化而产生的一种耐药和适应.