目的:探讨西达本胺与BRD4抑制剂(+)-JQ-1联合对混合谱系白血病基因重排急性髓系白血病(MLL-r AML)细胞的DNA损伤及修复机制的影响.方法:分别将MLL-r AML细胞系Molm-13、MV4-11细胞和非MLL-r AML细胞系Kasumi细胞分成对照组(contr)、西达本胺组(chida)、(+)-JQ-1组、联合组(combi)4组.采用CCK-8检测Molm-13细胞活力,以确定西达本胺和(+)-JQ-1的给药浓度.采用流式细胞术检测细胞周期变化,Western blot检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax、caspase-3的表达.利用免疫荧光检测DNA损伤标志物γH2AX;Western blot检测DNA损伤因子γH2AX,DNA损伤检查点激酶p-ATR、p-CHK1、p-ATM、p-CHK2和DNA损伤修复因子Rad51、53BP1蛋白的表达情况;qRT-PCR检测DNA损伤修复因子Rad51、53BP1 mRNA的表达情况.结果:在药物西达本胺(300 nmol/L)和(+)-JQ-1(400 nmol/L)的联合作用下,MLL-r AML 细胞系 Molm-13、MV4-11 中,与 contr 组相比,combi组G1期细胞比例升高;非MLL-r AML细胞系Kasumi中,与contr组相比,combi组G1期细胞比例升高(P＜0.05).在Molm-13、MV4-11细胞系中,与contr组相比,combi组DNA损伤标志物γH2AX表达水平升高(P＜0.05),DNA 损伤检查点和损伤修复因子 p-ATR、p-CHK1、p-ATM、p-CHK2、Rad51、53BP1 表达水平降低(P＜0.05);而在Kasumi细胞系中,与contr组相比,combi组上述因子部分表达无明显变化(P＞0.05),部分因子的表达趋势与MLL-r AML 细胞系相反.在 MLL-r AML 细胞系 Molm-13、MV4-11 中,与 contr 组相比,combi 组 Bax 和 caspase-3 蛋白表达水平升高,而Bcl-2蛋白表达水平下降(P＜0.05);非MLL-r AML细胞系Kasumi细胞中,与contr组相比,combi组凋亡因子的表达无明显变化(P＞0.05).结论:西达本胺联合(+)-JQ-1可抑制MLL-r AML细胞的增殖,并通过抑制DNA损伤反应途径抑制此类白血病细胞保护性自我修复的启动,最终增加细胞的凋亡,而非MLL-r AML细胞却无类似的结果.

目的:探讨KMT2A：：CBL融合基因阳性儿童早期前体T细胞急性淋巴细胞白血病（ETP-ALL）的临床特征及治疗效果。方法:对2021年10月郑州大学附属儿童医院收治的1例KMT2A：：CBL融合基因阳性ETP-ALL患儿的临床资料与诊治过程进行回顾性分析，并进行文献复习。结果:患儿为10岁男性，因皮疹、发热就诊。经骨髓细胞学、免疫分型检查，荧光原位杂交检查示MLL重排阳性，全转录组测序示KMT2A：：CBL融合基因阳性，确诊为ETP-ALL。后给予中国儿童白血病协作组-ALL-2018方案化疗，VDLD（长春新碱、柔红霉素、培门冬酶、地塞米松）方案诱导化疗反应差，CAML（环磷酰胺、阿糖胞苷、巯嘌呤、培门冬酶）方案化疗达完全缓解后予单倍体异基因造血干细胞移植，截至2024年4月（移植后22个月），复查骨髓提示完全缓解。结论:KMT2A：：CBL融合基因阳性儿童ETP-ALL恶性程度高，化疗反应差，第1次完全缓解后需考虑尽快行异基因造血干细胞移植。

目的:探讨异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)治疗11q23/MLL阳性急性髓性白血病的疗效。方法:回顾分析2012年9月至2019年12月期间在航天中心医院接受allo-HSCT的50例伴11q23/MLL阳性急性髓性白血病受者，通过分析植入成功率，移植物抗宿主病的发生率、感染发生率及移植相关病死(TRM)率、累积复发率、无病存活(DFS)率、总存活(OS)率进行疗效评估。结果:50例受者中除1例受者因合并器官功能衰竭，回输细胞后未植活外，其余49例受者顺利植活出仓，白细胞植活的中位时间是15 d(9~18 d)，血小板植活的中位时间是13 d(8~33 d)。移植后28 d评估骨髓，49例受者均处于完全缓解(CR)状态。中位随访时间38个月(3~79)个月。移植前缓解组和未缓解组在移植后3年的OS率分别为(83.3±10.8)%、(30.9±8.2)%( P＝0.002)，DFS率分别为(83.3±10.8)%、(28.4±8.0)%( P＝0.003)。 结论:异基因造血干细胞移植是治疗11q23/ MLL重排AML的有效方法，移植前缓解的受者有更高的存活率，移植后复发仍是目前面临的首要问题。

目的:建立应用荧光原位杂交技术（FISH）筛查成人Ph样急性淋巴细胞白血病（ALL）的体系。方法:根据Ph样ALL的遗传学特征，设计了针对ABL1、ABL2、JAK2、EPOR、CRLF2、CSF1R、PDGFRB、P2RY8等基因断裂重排的FISH探针；对BCR-ABL1、ETV6-RUNX1、MLL基因断裂重排和E2A断裂重排均阴性的B-ALL，采用FISH进行Ph样ALL筛查，并结合流式免疫表型、靶向二代测序突变检测和RNA测序进行Ph样ALL诊断分析。结果:2016年1月至2019年4月，南方医院血液科收治189例成人B-ALL，经FISH和（或）PCR检测，BCR-ABL1、ETV6-RUNX1、MLL断裂重排或E2A断裂重排阳性者共83例；其余106例患者接受Ph样ALL FISH探针筛查，其中，12例（11.3％）检出典型的Ph样ALL特异基因断裂重排，2例检出基因缺失。经RNA测序进一步验证，FISH检测Ph样ALL基因断裂重排结果灵敏度为71.4％，特异度为95.8％。综合免疫表型、靶向二代测序突变检测和RNA测序，共诊断融合基因阳性Ph样ALL 14例（13.2％）。结论:FISH技术检测Ph样ALL具有较高的特异性，结合免疫表型和测序技术可完善诊断体系。

目的:探讨靶向捕获高深度测序（Panel-seq）及转录组测序（RNA-seq）与传统检测方法在儿童初发急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）细胞及分子遗传学分型中的差异及意义。方法:回顾性分析2020年9月至2021年12月在广州市妇女儿童医疗中心新诊断为B-ALL的152例患儿临床资料。患儿除接受包括核型分析、荧光原位杂交以及43种融合基因定量筛查的传统细胞及分子遗传学方法检测外，还进行Panel-seq及RNA-seq检测。Panel-seq覆盖血液系统肿瘤常见变异的600多个基因，同时分析融合基因及基因突变；RNA-seq分析融合基因、基因突变及基因表达情况，推测染色体水平的拷贝数变异，并结合基因表达谱聚类和拷贝数变异预测高二倍体亚型。分析比较各检测方法遗传学分型结果。结果:152例患儿中，男性93例，女性59例，中位年龄4.0岁（0.8~13.0岁），中位原始细胞比例0.855（0.215~0.965）。152例患儿中，传统检测方法鉴定出4例（2.6%）BCR-ABL1、2例（1.3%）CRLF2基因相关融合、27例（17.8%）ETV6-RUNX1、1例（0.7%）iAMP21、5例（3.3%）MLL重排、8例（5.3%）TCF3-PBX1以及22例（14.5%）高二倍体核型；Panel-seq鉴定出4例（2.6%）BCR-ABL1、2例（1.3%）CRLF2基因相关融合、27例（17.8%）ETV6-RUNX1、3例（2.0%）MEF2D基因相关融合、1例（0.7%）MEIS1-FOXO1、5例（3.3%）MLL重排、5例（3.3%）PAX5基因相关融合、8例（5.3%）TCF3-PBX1、4例（2.6%）ZNF384基因相关融合和2例（1.3%）IKZF1 N159Y突变。1例MLL重排患儿因样本质量问题未进行RNA-seq检测，其余151例患儿中，共检出1例（0.7%）ACIN1-NUTM1、4例（2.6%）BCR-ABL1、3例（2.0%）CRLF2基因相关融合、8例（5.3%）DUX4基因相关融合、27例（17.9%）ETV6-RUNX1、3例（2.0%）MEF2D基因相关融合、1例（0.7%）MEIS1-FOXO1、4例（2.6%）MLL重排、5例（3.3%）PAX5基因相关融合、1例（0.7%）ZMIZ1-ABL1、8例（5.3%）TCF3-PBX1、4例（2.6%）ZNF384基因相关融合及61例（40.4%）高二倍体亚型和2例（1.3%）IKZF1 N159Y突变；RNA-seq对融合基因及高二倍体核型检出有明显优势。传统方法、Panel-seq和RNA-seq检测的细胞及分子遗传学分型率分别为45.4%（69/152）、40.1%（61/152）和87.4%（132/151），三者结合可对89.5%（136/152）患儿进行分型。结论:联合应用Panel-seq、RNA-seq技术可提高B-ALL患儿遗传学异常的检出率，从而进行更精确的细胞及分子遗传学分型，为指导治疗及判断预后提供依据。

目的:探讨初发儿童急性B淋巴细胞白血病（B-ALL）的细胞遗传学特征及首次治疗反应相关影响因素。方法:回顾性收集2019年4月至2021年9月厦门大学附属第一医院收治的49例初发B-ALL患儿资料，获得患儿临床特征、细胞遗传学和分子生物学检查结果、治疗前后临床指标等数据。按照儿童ALL诊疗规范（2018版），进行基因分型和首次诱导化疗后临床危险度分层及化疗方案制订。分析B-ALL患儿不同基因分型与临床指标的关系，采用Spearman等级相关分析法分析临床危险度分层与各指标的相关性。结果:49例患儿中位年龄3.0岁（四分位数间距：3.2岁），男性32例（65.3%），女性17例（34.7%），男女比1.88∶1。治疗前基因突变35例（71.4%），无突变14例（28.6%）。基因突变35例中，E2A-PBX1 5例（10.2%），其中伴费城染色体（Ph）样1例；IKZF1缺失8例（16.3%），其中伴Ph样4例，伴Ph阳性1例，伴MLL重排1例；MLL重排3例（6.1%）；单独Ph样12例（24.5%）；TEL-AML1 6例（12.2%），其中伴Ph样2例；单独Ph阳性1例（2.0%）。临床危险度分层高危7例（14.3%），中危28例（57.1%），低危14例（28.6%）。诱导化疗前基因突变患者临床危险度高、中危患者比例[20.0%（7/35）比0.0%（0/14）、62.9%（22/35）比42.9%（6/14）]及诱导化疗第33天基因突变情况发生改变患者比例[42.9%（15/35）比0.0%（0/14）]均高于治疗前基因未突变患者（均 P<0.01），诱导化疗前是否基因突变与性别、初诊时白细胞计数、激素敏感性、诱导化疗第15天至第19天骨髓微小残留病（MRD）、诱导化疗第33天MRD均不相关（均 P>0.05）。患儿临床危险度分层与初诊时白细胞计数（ r＝0.392， P＝0.005）、中性粒细胞计数（ r＝0.453， P＝0.001）、淋巴细胞计数（ r＝0.418， P＝0.001）、单核细胞计数（ r＝0.359， P＝0.017）、血尿酸水平（ r＝0.378， P＝0.007）、治疗前（ r＝0.316， P＝0.027）和诱导化疗第15天至第19天（ r＝0.399， P＝0.005）及诱导化疗第33天骨髓幼稚淋巴细胞比例（ r＝0.408， P＝0.028）以及诱导化疗第33天骨髓MRD≥0.000 1患儿比例（ χ2＝15.42， P<0.001）、治疗前基因突变患儿比例（ χ2＝9.10， P＝0.005）均相关。 结论:B-ALL患儿初发时血液中高水平的白细胞、中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、幼稚淋巴细胞、血尿酸以及化疗第15天至第19天，第33天幼稚淋巴细胞、化疗第33天MRD、基因型与治疗反应不佳可能相关。临床危险度分层与基因突变情况相关，基因突变可能是B-ALL患儿治疗反应重要指标。

目的:分析伴11q23/ MLL基因重排的初治急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia，ALL)的临床特征及预后。 方法:收集725例ALL患者资料，检测11q23/ MLL基因重排及其伙伴基因，分析 MLL基因重排ALL患者的实验室、临床特征及预后特点。 结果:42例(5.8%)患者检出 MLL基因重排，免疫分型以早B前体-ALL(pro-B-ALL)为主， MLL伙伴基因中， MLL/ AF4发生率最高。 MLL/ AF4组起病时外周血白细胞计数、幼稚细胞计数高于非 MLL/ AF4组( P值均<0.05)，两组1疗程完全缓解(complete remission，CR)率、1年总生存(overall survival，OS)率之间的差异无统计学意义( P值均>0.05)； MLL/ AF4组1年内复发率高于非 MLL/ AF4组，3年OS率低于非 MLL/ AF4组( P值均<0.05)。 MLL重排ALL移植组患者的2年OS和无进展生存(progress free survival，PFS)率分别高于未移植组( P值均<0.05)。多因素分析发现年龄≤1岁、 MLL/ AF4阳性、早期复发以及行异基因造血干细胞移植(allogeneic hematopoietic stem cell transplant，allo-HSCT)( P值均<0.05)为影响11q23/ MLL重排ALL患者生存的独立预后因素。 结论:伴11q23/ MLL基因重排ALL中 MLL/ AF4是最常见的伙伴基因，该类型白血病以pro-B-ALL为主，常规化疗虽然缓解率可，但极易复发，预后很差，allo-HSCT可能改善其预后。

目的:分析混合表型急性白血病（MPAL）的临床特征及疗效预后。方法:回顾性分析2005年1月1日至2019年12月1日就诊于中国医学科学院血液病医院儿童血液病诊疗中心的29例MPAL患儿，分析其形态学、免疫表型、细胞遗传学、分子生物学特点、诱导化疗以及预后情况。应用Kaplan-Meier法绘制生存曲线，单因素分析应用Log-Rank法。结果:（1）29例MPAL患儿中1例为MPAL伴KMT2A重排，1例为MPAL伴BCR-ABL1，13例为MPAL伴B-M，12例为MPAL伴T-M, 2例为急性未分化细胞白血病。（2）免疫表型阳性率较高的是CD33 23例（79%)，CD34 25例（86%)，HLA-DR 20例（69%)。表达CD19的共17例，阳性率59%。（3）8例患儿检测到异常融合基因，其中MLL-AF4基因1例，BCR-ABL1基因1例，TEL-AML1基因3例，WT1 2例，FLT3-ITD 阳性1例。（4）27例获得染色体核型，14例为异常核型，其中10例为复杂核型。（5）接受化疗的27例患儿中完全缓解（CR）率为85%（23/27），5年无病生存率（DFS)为（71±10）%，5年总生存率（OS)为（74±10）%。14例应用急性淋巴细胞白血病（ALL）方案者中13例CR；12例应用联合方案者中10例CR；二者5年OS分别为（77±15） %和（80±13）%，差异无统计学意义（χ2=0.027， P=0.870）。 结论:MPAL是一种罕见的儿童白血病，易见复杂染色体核型，ALL方案及混合方案诱导缓解化疗可获得较好的预后。

目的:探讨急性髓系白血病（AML）自发缓解的临床特点及可能的机制。方法:回顾性分析郑州大学第一附属医院诊治的1例伴有MLL-AF9基因重排和肝功能损伤的AML自发缓解患者的临床资料，并进行相关文献报道病例汇总分析。结果:该患者伴有MLL-AF9基因重排，经历了肺部感染、发热、肝功能损伤，治疗上给予抗感染、输注血制品，未经化疗，患者获完全缓解（CR），随访35个月，仍处于CR，期间伴有轻度间接胆红素升高。1990年至2021年6月文献报道的有骨髓检测支持的AML（非急性早幼粒细胞白血病）自发缓解患者56例，与本次报道的1例汇总分析，共57例患者，其中男37例，女20例，中位年龄51（20~83）岁，中位缓解时间为5个月，52例患者获得CR，5例具有染色体核型资料的长期缓解且至今未复发的病例，3例为正常染色体核型，2例伴有t（9;11）（q21;q23）异常。结论:AML自发缓解罕见，可能与免疫抑制、基因均有关。

目的:探讨诱导治疗早期微小残留病（MRD）监测对儿童急性淋巴细胞白血病（ALL）治疗的价值。方法:多中心回顾性队列研究。分析2016年10月至2019年6月华南儿童急性淋巴细胞白血病协作组的16家医院治疗的1 164例初诊ALL患儿临床资料。根据诱导治疗第15天 MRD 水平分为MRD<0.10%组、MRD 0.10%~<10.00%组、MRD≥10.00%组；根据诱导治疗第33天MRD水平分为MRD<0.01%组、MRD 0.01%~<1.00%组、MRD≥1.00%组。分析各组间年龄、初诊白细胞计数、有无中枢神经系统白血病（CNSL）、分子遗传学特征等差异，应用Kaplan-Meier法进行生存分析，Cox回归模型进行预后相关因素分析。结果:1 164例ALL患儿中男692例、女472例，诊断年龄4.7（0.5，17.4）岁，初诊白细胞计数10.7（0.4，1 409.0）×10 9/L，53例（4.6%）有CNSL，随访时间47.6（0.5，68.8）个月。5年总生存率（OS）为（93.1±0.8）%，无复发生存率（RFS）为（90.3±1.1）%。诱导治疗第15天MRD<0.10%组466例，MRD 0.10%~<10.00%组523例，MRD≥10.00%组175例，5年OS分别为（95.4±1.0）%、（93.3±1.1）%、（85.4±2.9）%，三组间比较差异有统计学意义（ χ2=16.47， P<0.05）；5年RFS分别为（93.2±1.6）%、（90.8±1.4）%、（78.9±4.3）%，三组间比较差异有统计学意义（ χ2=21.06， P<0.05）。诱导治疗第33天MRD<0.01%组925例，MRD 0.01%~<1.00%组164例，MRD≥1.00%组59例，5年RFS分别为（91.4±1.2）% 、（84.5±3.2）% 、（87.9±5.1）%，三组间比较差异有统计学意义（ χ2=9.11， P=0.010）。诱导治疗第15天MRD≥10.00%的ALL患儿中，第33 天MRD<0.01%组80例，第33天MRD 0.01%~<1.00%组45例，第33 天MRD≥1.00%组45例，5年RFS分别为（83.9±6.0）%、（67.1±8.2）%、（83.3±6.9）%，三组间比较差异有统计学意义（ χ2=6.90， P=0.032）。对诱导治疗第15天MRD≥10.00%组、第33天MRD 0.01%~<1.00%组单因素分析显示，第15天MRD≥10.00%组伴有CNSL患儿5年RFS明显低于不伴CNSL患儿［（50.0±20.4）% 比（80.3±4.4）%， χ2=4.13， P=0.042］。第33天MRD 0.01%~<1.00%组伴有CNSL或MLL基因重排患儿5年RFS明显低于不伴CNSL或MLL基因重排患儿［（50.0±25.0）%比（85.5±3.1）%， χ2=4.06， P=0.044；（58.3±18.6）% 比（85.7±3.2）%， χ2=9.44， P=0.002］。多因素分析显示年龄（ OR=0.58，95% CI 0.35~0.97）、初诊白细胞计数（ OR=0.43，95% CI 0.27~0.70）是OS的独立影响因素。诱导治疗第15天MRD（ OR=0.55，95% CI 0.31~0.97）、ETV6-RUNX1融合基因（ OR=0.13，95% CI 0.03~0.54）、MLL基因重排（ OR=2.55，95% CI 1.18~5.53）、初诊白细胞计数（ OR=0.52，95% CI 0.33~0.81）是RFS的独立影响因素。 结论:诱导治疗早期MRD水平越高，OS越差。第15天MRD水平是RFS独立影响因素。应用诱导治疗早期MRD水平指导危险度分型进行个体化治疗有望提高ALL患儿长期生存率。