目的:评价吸入高浓度氢气对小鼠脓毒症相关性脑病(SAE)的影响。方法:健康雄性ICR小鼠200只，6~8周龄，体重20~25 g，采用随机数字表法分为4组( n＝50)：假手术组(Sham组)、SAE组、假手术＋高浓度氢气组(Sham＋H 2组)和SAE＋高浓度氢气组(SAE＋H 2组)。采用盲肠结扎穿孔法制备小鼠SAE模型。分别于造模后1和6 h时，Sham＋H 2组和SAE＋H 2组吸入氢氧混合气体(67%H 2-33%O 2)1 h，Sham组和SAE组吸入氮氧混合气体(67%N 2-33%O 2)1 h。记录造模后7 d小鼠生存情况。分别于造模后3、5和7 d时，采用Y迷宫实验评估认知功能。于造模后24 h处死小鼠，取海马组织，行尼氏染色，光镜下观察CA1区病理学结果，计数正常神经元；采用ELISA法检测TNF-α和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)的含量，采用荧光分光光度法检测线粒体膜电位(MMP)，采用荧光素-荧光酶发光法检测线粒体ATP含量。 结果:与Sham组相比，SAE组和SAE＋H 2组造模后7 d生存率降低，造模后各时点自发交替百分比降低，海马CA1区正常神经元计数降低，TNF-α和HMGB1含量升高，MMP和ATP含量降低( P<0.05)，Sham＋H 2组上述各指标差异无统计学意义( P>0.05)。与SAE组相比，SAE＋H 2组造模后7 d生存率升高，造模后各时点自发交替百分比升高，海马CA1区正常神经元计数升高，TNF-α和HMGB1含量降低，MMP和ATP含量升高( P<0.05)。 结论:吸入高浓度氢气可减轻小鼠SAE，其机制可能与减轻海马炎症反应和改善线粒体功能有关。

目的:探讨线粒体Ca 2＋浓度在高浓度氧致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用。 方法:取对数生长期的大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞，采用随机数字表法分为3组( n＝6)：对照组(C组)、高浓度氧组(H组)和高浓度氧＋钌红组(HR组)。C组置于常规培养箱(5%CO 2-95%空气)中培养4 h；HR组加入线粒体钙单向转运体抑制剂钌红2 μmol/L，然后H组和HR组置于高浓度氧密闭箱(90%O 2-5%CO 2-5%空气)中培养4 h。通过倒置相差显微镜观察细胞形态学；采用流式细胞术测定细胞凋亡率；采用多功能酶标仪检测线粒体内Ca 2＋荧光强度，并计算Ca 2＋浓度。 结果:与C组比较，H组细胞凋亡率和线粒体Ca 2＋浓度升高，HR组线粒体Ca 2＋浓度降低( P<0.05)，细胞凋亡率差异无统计学意义( P>0.05)。与H组比较，HR组细胞凋亡率和线粒体Ca 2＋浓度降低( P<0.05)。H组细胞呈现早期凋亡形态学表现(细胞皱缩呈球形、透亮度降低、与周围细胞脱离)，HR组较H组明显改善。 结论:线粒体Ca 2＋浓度升高参与了高浓度氧致大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡。

目的:分析并比较不同浓度枸橼酸钠抗凝剂应用于日间连续性肾脏替代治疗(DCRRT)的效果。方法:回顾性选取2015年1月至2021年1月在长征医院南京分院及南京江北人民医院收治的43例因活动性出血或伴有出血倾向以不同浓度枸橼酸钠体外抗凝性DCRRT治疗的ESRD患者，将其随机分为A组(21例，以4%浓度枸橼酸钠体外抗凝)及B组(22例，以30%浓度枸橼酸钠体外抗凝)。两组均选用不含碱基置换液行日间连续性肾脏替代治疗，A组外周静脉补充碱基，B组不额外补充碱基。监测并计算两组的外周血生化指标[血肌酐(Scr)、谷丙转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TB)、pH值、Na +、外周Ca 2+、滤器后Ca 2+、HCO 3－]、动脉血气[碱剩余(BE)]、凝血指标[活化部分促凝血酶原激酶时间(APTT)]变化，同时监测并计算A、B两组治疗同时间段的入液量及超滤量。 结果:两组均完成12 h的DCRRT治疗模式，患者治疗期间无口唇麻木、低钙抽搐等临床不适症状。两组治疗前及治疗4、8、12 h时的各项血生化指标、动脉血气、凝血指标比较，组间差异均无统计学意义(均 P>0.05)。两组治疗12 h时的Na +浓度均高于治疗前，差异有统计学意义( P<0.05)；两组治疗4、8、12 h的滤器后Ca 2+均低于治疗前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；两组治疗12 h后的pH值、BE及HCO 3－均高于治疗前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；两组治疗8、12 h后的血Scr均低于治疗前，差异均有统计学意义(均 P<0.05)；两组治疗前与治疗后的其他指标(包括外周Ca 2+、APTT、ALT、TB)比较，差异均无统计学意义(均 P>0.05)。治疗同时间段的入液量及超滤量比较，B组显著低于A组，差异均有统计学意义(均 P<0.01)。 结论:两种不同浓度枸橼酸钠应用于DCRRT均是安全有效的抗凝方式，高浓度枸橼酸钠抗凝操作较低浓度简便实用，易于临床推广。

目的 探索常见试剂红细胞添加剂中糖类物质和金属离子螯合剂成分对双花扁豆凝集素(Dolichos Biflorus Agglutinin,DBA,又称抗-A1)与A1红细胞间血清学反应凝集强度的影响,为减少临床检测假阴性结果和凝集素功能特性研究提供数据支持,也为当前实验室A1抗原鉴定质控实验提出改进方案.方法 以生理盐水为基础红细胞稀释液,在反应体系中分别加入梯度稀释的糖溶液(葡萄糖、蔗糖、甘露醇)和棋盘滴定的强金属离子螯合剂(EDTA-Na2)和二价金属阳离子(Ca2+、Mg2+),对不同反应条件下DBA-A1红细胞凝集强度进行评估.结果 在DBA-A1红细胞反应体系中CEDTA-Na2＞0.6 mM时出现了明显的凝集抑制现象,提高CCa2+或CMg2+可减弱高浓度EDTA-Na2对DBA-A1红细胞凝集强度的影响;另一方面,体系中糖类物质浓度的增高也使DBA-A1红细胞凝集强度产生明显减弱,加入0.6%～5%葡萄糖溶液,1.3%～10%蔗糖溶液或5%甘露醇溶液时,DBA-A1红细胞凝集明显减弱.结论 红细胞添加剂中的EDTA-Na2和糖类物质对-A1红细胞反应存在凝集抑制,是血型血清学检测中植物凝集素制剂使用的重要干扰因素.

环境臭氧(O3)已成为影响植物生长发育的重要生态因子.为探究地面O3污染对蔬菜形态学特征及营养指标的影响,选罗马直立生菜(Lactuca sativa var.roman)为实验材料,采用开顶式气室开展熏蒸实验.实验设置4个O3熏蒸浓度(NF:未过滤的环境空气;NF40:环境空气+40 nmol/mol;NF80:环境空气+80 nmol/mol;NF 120:环境空气+120 nmol/mol),每个处理设置3个重复组,分析评价O3污染对植物造成的可见伤害、生产量、叶片解剖学特征以及食用部位营养指标的影响.研究表明:(1)O3熏蒸对生菜叶片产生不可逆的可见伤害,叶片出现浅黄色斑点和棕色斑点,且随着熏蒸时间延长,叶片出现黄化,大面积的坏死斑块,衰老加速.(2)高浓度O3胁迫显著降低了生长阶段的株高(P＜0.05).与NF组相比,NF40、NF80、NF120组分别使生物量下降5.90％、14.99％、39.21％.(3)随着O3熏蒸浓度升高,气孔密度增加,气孔开度减小.叶片厚度、海绵组织厚度、栅栏组织厚度与O3暴露剂量AOT40呈显著负相关关系(P＜0.05).(4)高浓度O3暴露使蔬菜中Ca、Na、Fe、Zn、Mg等元素含量显著降低,脂肪和蛋白质含量增加,生菜的营养指标发生改变.研究表明,罗马直立生菜对环境O3污染敏感,其生长发育及营养指标在O3胁迫条件下发生明显变化.目前,关于O3污染对蔬菜形态学特征影响的研究较少,研究系统探讨蔬菜的叶片厚度、栅栏组织、海绵组织、气孔密度及开度等形态学指标在臭氧污染条件下的变化.蔬菜的品质是关系到"三农"问题的重要方面,研究探讨了臭氧污染对蔬菜的产量及营养指标的影响,可为O3污染条件下蔬菜的生产提供科学参考.

槲蕨为喀斯特地区典型的附生蕨类植物,主要通过其根茎附生于岩石的表面或缝隙中.槲蕨以干燥的根茎入药,具有重要的药用价值.为探究钙离子(Ca2+)胁迫下槲蕨根茎中代谢物的变化,该研究采用超高效液相色谱联用四极杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF/MS)技术对不同浓度(0、600、1 200 mmol·L1)Ca2+胁迫下槲蕨根茎进行非靶向代谢组学分析.结果表明:(1)共鉴定到64种差异表达代谢物.(2)在0、600 mmol·L-1比较组中有48个差异表达代谢物,在0、1 200 mmol·L-1比较组中有45个差异表达代谢物,在600、1 200 mmol·L-1比较组中有44个差异表达代谢物.(3)鉴定到的差异表达代谢物根据其化学分类归属信息进行归类,分为5类.综上认为,Ca2+胁迫影响槲蕨根茎的氨基酸代谢、黄酮类化合物生物合成、木质素生物合成、脂肪酸代谢及其他途径;该研究通过非靶向代谢组学分析,初步揭示了参与槲蕨根茎应答Ca2+胁迫的关键代谢物,为进一步研究槲蕨适应Ca2+胁迫的调控机制奠定了基础,也为槲蕨根茎药材的品质改善提供了新思路.

目的 研究不同浓度的橙皮苷通过减少炎性分子及氧化应激反应机制对去卵巢诱导骨质疏松症(Ovariectomy,OVX)大鼠模型的抗骨质疏松作用及与剂量之间的关系.方法 将SD雌性大鼠随机分为OVX组和Sham组,分别进行OVX手术和假手术;将OVX组大鼠随机分为5组,每组6只,随机选取6只Sham组大鼠作为正常对照,共6组.分别为Sham组(Sham大鼠+1%CMC混悬液)、对照组(OVX大鼠+1%CMC混悬液)、HP1组(OVX大鼠+5 mg·kg-1 HP)、HP2组(OVX大鼠+10 mg·kg-1 HP)、HP3组(OVX大鼠+20 mg·kg-1 HP)和AN组(OVX大鼠+2.5 mg·kg-1 AN).在进行去卵巢手术或假手术4周后,每天早晨经口灌胃给药,持续10周.给药10周后,测定大鼠的体质量变化量.在处死大鼠前,取得大鼠的腹主动脉血清,放在-20℃标本柜中,测得大鼠的Ca2+和P5+的水平;测定了炎性因子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平;也测得大鼠的骨周转换标志物质ALP、ACP、、β-CTx和OC水平.在处死大鼠后,取得大鼠的左股骨,同样放在-20℃标本柜中,经过处理后,测定大鼠左股骨的氧化应激因子TRARS的水平及抗氧化酶GSH、GST、GR、GPx及CAT的水平;测定了大鼠左股骨中段的骨密度、杨氏模量、最大载荷、能量吸收及最大应力;并且得到了大鼠SIRT1基因的表达水平.结果 与对照组相比,经过10周不同浓度HP的处理可显著降低体质量增加量(P<0.001),显著降低了OVX大鼠的Ca2+、P5+水平(P<0.001);显著降低了骨周转换标志物ALP、ACP、β-CTx和OC的水平(P<0.001);显著增加了骨密度、杨氏模量、最大负荷、能量吸收、最大应力及刚度(P<0.001),显著降低了OVX诱导的大鼠的骨氧化应激酶硫代巴比妥酸反应物质水平并增加了抗氧化酶GSH、GST、GR、GPx及CAT的水平(P<0.001),显著降低了炎性分子TNF-α、IL-6和IL-1β的水平(P<0.001),显著降低了SIRT1基因的表达水平(P<0.001)相比较之下,高浓度HP组的上述参数指标与对照组相比呈现出更显著的差异(P<0.001).结论 表明橙皮苷对去卵巢诱导的骨质疏松症大鼠可通过降低促炎细胞因子及氧化应激反应发挥抗骨质疏松作用,且呈浓度依赖性.

目的 建立测定白喉产毒培养基中微量铁离子的磺基水杨酸分光光度法,并进行验证及初步应用.方法 全光谱扫描铁-磺基水杨酸络合物最大吸光度;以铁磺基水杨酸络合物吸光度与铁离子含量进行线性回归,建立培养基中铁离子检测方法,并对方法进行稳定性、准确性和精密性验证;考察Ca2+、Mg2+、K+、Na+以及显色反应物对方法的影响;采用磺基水杨酸分光光度法测定自制及市售白喉产毒培养基中微量铁离子;分别采用磺基水杨酸分光度法及常用方法亚铁嗪比色法、邻菲啰啉分光光度法检测两种培养基(牛肉胰酶消化液、5％多聚蛋白胨)中铁含量,比较3种方法的检测结果.结果 铁-磺基水杨酸络合物在波长425nm处有最大吸光度;铁离子浓度在1～0.05μg/mL范围内与吸光度存在良好的线性关系,检测限为0.05 μg/mL,标准曲线方程为:Y=0.027 9 X+0.046 1,R2＞0.99;每间隔5 min测定1次A425值,各浓度标准品A425值的变异系数(CV)均小于5％;低(0.05 μg/mL)、中(0.5 μg/mL)、高浓度(1 μg/mL)Fe3+标准品溶液连续测定3次,每个浓度平行测定9组的CV均＜5％,回收率均＞95％;Ca2+、Mg2+、K+、Na+、15 μL磺基水杨酸(20％)和50 μL氢氧化氨(1∶1)不对检测方法构成干扰;产毒培养基测定结果与白喉细菌产毒结果一致;3种检测方法结果一致.结论 建立的磺基水杨酸分光光度法能够准确、有效地测定白喉产毒培养基中微量铁离子含量.

目的:通过体外细胞培养,观察不同浓度枸橼酸对内毒素(LPS)诱导的单核细胞分泌细胞因子功能的影响. 方法:采用标准方法体外培养人类单核细胞株(THP-1),加入适量枸橼酸三钠(TSC)使其体外培养液TSC浓度分别为0、0.5 mmol/L、1.0 mmol/L,并给予不同浓度LPS(0.05 μg/ml、0.1μg/ml、1μg/ml)刺激,分别于刺激后6h、12h、24h、48h用CCK-8试剂盒测定细胞活性、ELISA试剂盒测定上清液细胞因子白细胞介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平及血气分析仪测定培养基内离子钙(Ca“)水平.使用正常培养条件下的单核细胞做为对照组. 结果:不同浓度TSC对单核细胞活性无抑制作用(P＞0.05),但对不同时间点LPS诱导的单核细胞分泌细胞因子(TNF-α和IL-6)功能有一定影响,培养基TSC浓度0.5 mmol/L和1.0 mmol/L时,培养12h和24hTNF-α的分泌量显著高于对照组(P＜0.01);TSC浓度为0.5 mmol/L时,IL-6在24h开始出现分泌增高趋势,48h达到峰值(P＜0.05),TSC浓度1.0 mmol/L显著抑制IL-6分泌(P＜0.01). 结论:本实验采用的TSC浓度不存在细胞毒性,单核细胞在此浓度下,受LPS刺激时表现出TNF-α分泌亢进的现象,而IL-6的分泌则表现出TSC低浓度下亢进,高浓度下受抑制的趋势.

研究芍药苷、薄荷脑对葛根素在细胞模型转运过程中对Calu-3细胞膜生理功能的影响.以Calu-3细胞作为模拟鼻黏膜组织的体外细胞模型,采用荧光漂白恢复技术及超微量酶活性检测方法,考察细胞膜流动性、Na+-K+-ATP酶和Ca2+-ATP酶活性,探索配伍药物促进葛根素转运的作用机制.结果表明,配伍低、中、高浓度薄荷脑或同时配伍低、中、高浓度芍药苷和薄荷脑时,与单独使用葛根素相比,Calu-3细胞膜荧光漂白恢复率显著升高,Na+-K+-ATP酶活性未发生明显改变,Ca2+-ATP酶活性显著增强,由此证实薄荷脑起到主要渗透促进作用,并且其作用机制可能与增加流动性、激活Ca2+-ATP酶活性密切相关.