目的:探讨桂枝加龙骨牡蛎汤对魄不安于肺不寐大鼠脑组织Caspase-3、Bcl-2、Bax表达的影响及其治疗魄不安于肺不寐可能的作用机制.方法:32 只雄性SD大鼠随机分为对照组、模型组、中药组和西药组,每组8 只.采用水环境小平台法干预9d建立魄不安于肺不寐大鼠模型,造模成功后,中药组予以桂枝加龙骨牡蛎汤7.6 g·kg-1·d-1灌胃,西药组予以右佐匹克隆片0.1 mg·kg-1·d-1灌胃,对照组和模型组给予等体积生理盐水灌胃,连续14 d,测量体质量.采用免疫组织化学法及蛋白质免疫印迹法检测脑组织中Caspase-3、Bcl-2、Bax表达水平.结果:与对照组比较,模型组大鼠体质量减轻(P＜0.01),免疫组化检测结果显示,大鼠脑组织Bcl-2 的表达显著减少(P＜0.01),Caspase-3、Bax表达显著增加(P＜0.01),Bcl-2/Bax比率显著减少(P＜0.01);Western blot结果显示大鼠脑组织Bcl-2相对表达量显著减少(P＜0.01),Bax、Caspase-3 相对表达量显著增加(P＜0.01).与模型组比较,中药组及西药组大鼠体质量显著增加(P＜0.01),免疫组化检测结果显示,大鼠脑组织Bcl-2 表达增加(P＜0.05),Caspase-3、Bax表达减少(P＜0.05),Bcl-2/Bax比率显著升高(P＜0.01);Western blot结果显示大鼠脑组织中Bcl-2 相对表达量增加(P＜0.05),Bax、Caspase-3 相对表达量显著减少(P＜0.01).结论:桂枝加龙骨牡蛎汤改善魄不安于肺不寐大鼠的睡眠可能与增加其脑组织Bcl-2、降低Caspase-3、Bax表达水平有关.

目的:探讨魄不安于肺不寐大鼠血清生物钟分子血清褪黑素(MT)、脑褪黑素相关受体(GPR50)和松果体的变化.方法:将24只SD大鼠随机分为模型组和正常组,每组12只.采用狭长多平台浅水环境法剥夺大鼠深睡眠42 d制备慢性睡眠剥夺模型.称取大鼠体质量,进行水迷宫检测、戊巴比妥钠诱导的睡眠实验和脑肌电监测,以ELISA检测血清MT水平,以免疫组化法检测脑和脑干GPR50的水平,透射电子显微镜观察松果体的病理变化.结果:与正常组比较,模型组大鼠体质量显著减少(P＜0.05,P＜0.01)、上台潜伏期显著延长(P＜0.05)、穿越原平台上方次数显著减少(P＜0.05);戊巴比妥钠致睡眠潜伏期显著延长(P＜0.05)、睡眠时间显著缩短(P＜0.05);脑电图慢波睡眠第2期及快动眼睡眠比例显著减少(P＜0.01);血清MT显著降低(P＜0.05);脑及脑干GPR50表达显著升高(P＜0.01,P＜0.05);松果体超微结构出现明显病理变化.结论:狭长多平台浅水环境法可以剥夺大鼠部分深睡眠,引起大鼠记忆、睡眠行为改变,褪黑素和GPR50及松果体超微结构的变化.上述模型指标的变化可以用于研究魄不安于肺型不寐时参考.

目的 比较志不安于肾和魄不安于肺不寐大鼠血清和脑γ-氨基丁酸(GABA)及谷氨酸(Glu)水平的差异,为中医不寐五神分型诊断法鉴别魄不安于肺和志不安于肾不寐提供依据.方法 将36只雌性SD大鼠随机分为志不安于肾组(肾组)、魄不安于肺组(肺组)和正常组.采用久坐湿地法制备志不安于肾不寐大鼠模型,采用狭长平台浅水环境法制备魄不安于肺不寐大鼠模型.以睡眠监测评价睡眠剥夺情况,以水迷宫实验评价学习记忆功能障碍,以酶联免疫吸附试验(ELISA)评价血清GABA、Glu及脑Glu水平,以免疫组化法评价不同脑区的GABA水平.结果 与正常组比较,肾组和肺组睡眠时间均缩短,肾组觉醒次数减少,肺组觉醒次数增加.肾组表现为睡眠后期不能再次入睡致睡眠时间减少,肺组表现为上午和下午频繁觉醒致睡眠时间减少(P<0.05).肾组和肺组逃避潜伏期均延长,穿越平台次数均减少(P<0.05).肾组逃避潜伏期长于肺组,穿越平台次数少于肺组(P<0.05).肺组血清GABA和Glu水平显著降低,肾组血清和脑Glu水平显著降低,且显著低于肺组(P<0.05);肾组和肺组下丘脑、丘脑、压部b区、运动区等区域GABA水平均显著降低,肺组显著低于肾组(P<0.05);听觉区和海马杏仁移行区肺组GABA水平低于肾组,肾组海马杏仁移行区GABA水平高于正常组(P<0.05).结论 志不安于肾和魄不安于肺不寐大鼠均存在着学习记忆功能障碍,但志不安于肾不寐大鼠较为严重;志不安于肾不寐大鼠以Glu水平下降为主,魄不安于肺不寐大鼠以GABA水平下降为主,说明中医不寐五神分型诊断法中志不安于肾和魄不安于肺不寐之间Glu、GABA等分子水平存在差异.