目的:基于蛋白质组学技术探讨麻疹减毒活疫苗191株(MV-Hu191)在体内外对三阴性乳腺癌MDA-MB-231、4T1细胞的影响及其作用机制.方法:采用CCK-8法检测MV-Hu191对MDA-MB-231和4T1细胞增殖的影响;液相色谱-质谱联用技术分析MV-Hu191处理对MDA-MB-231细胞中蛋白质谱的影响,多重数据库筛选蛋白质谱中的典型差异蛋白质并进行GO、KEGG、亚细胞定位与功能注释.瘤内注射1×106 TCID50 MV-Hu191干预4T1细胞移植瘤模型小鼠,流式细胞术检测小鼠脾组织中T细胞亚群,ELISA法检测小鼠血清TNF-α和IL-6含量.结果:体外实验结果表明,MV-Hu191具有抑制MDA-MB-231和4T1细胞增殖的作用,差异均具有统计学意义(P<0.01).蛋白质组学分析结果显示,MV-Hu191作用MDA-MB-231细胞后明显上调蛋白质有38个、下调有12个;差异表达的蛋白质主要参与细胞黏附、信号受体激活、细胞代谢、应激反应等生物学过程,22个差异蛋白质亚细胞定位位于细胞外,KEGG功能分类显示与免疫调节功能相关的差异蛋白质最多且均为上调蛋白,包括C4A、C8B、SERPINF2、A2M、SERPINC1、CTSB、SERPING1、C5;PPI预测发现免疫相关差异蛋白与CD4、CD8、TNF-α及IL-6相互关联.体内实验结果显示,MV-Hu191干预组小鼠脾组织中CD4+ T细胞数量略高于对照组,但差异无统计学意义(P>0.05),CD4+/CD8+ T细胞比值明显高于对照组(P<0.05),血清TNF-α和IL-6含量显著上升(均P<0.01).结论:MV-Hu191显著抑制MDA-MB-231、4T1细胞增殖及拮抗4T1细胞荷瘤小鼠成瘤性,其机制可能是MV-Hu191通过激活免疫效应分子实现抗肿瘤作用.

溶瘤病毒通过感染癌细胞,引起病毒性细胞病变并诱发宿主抗肿瘤免疫反应,从而选择性感染和杀死癌细胞.美国食品药品监督管理局(FDA)和欧洲药物管理局(EMA)最近批准了世界上第一个用于治疗恶性黑色素瘤的溶瘤病毒制剂,命名为Imlygic.Imlygic为表达人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)的单纯疱疹病毒I型(HSV-1)活病毒颗粒,经直接注射入肿瘤组织引起肿瘤细胞裂解和机体抗肿瘤免疫双重效应.除了HSV-1外,尚有许多不同类型的病毒已经进入临床试验,评估其生物安全性和抗肿瘤疗效.这些正在临床试验的溶瘤病毒包括腺病毒、痘病毒、麻疹病毒和呼肠孤病毒等.治疗的肿瘤包括卵巢癌、腹膜癌、肝癌、胶质瘤和黑色素瘤等.目前,溶瘤病毒治疗肿瘤的临床试验约有67项,一些临床试验已经取得了有希望的结果,从而进展到第三期临床试验.该文重点讨论目前正在临床试验中用于治疗各类癌症的溶瘤病毒,并讨论这些溶瘤病毒作为一类新的癌症治疗药物的机遇和挑战.

在肿瘤基因治疗领域,具有自我复制、能选择性杀伤肿瘤的溶瘤病毒已成为抗肿瘤治疗的有效武器之一.其中溶瘤麻疹病毒因其拥有极好的安全记录和优秀的抗瘤效果目前已经进入多项临床试验阶段.但是仍存在一些因素会影响溶瘤麻疹病毒成功治疗肿瘤,研究者们正在努力寻找对策以期破解这些瓶颈,使溶瘤麻疹病毒更好的发挥溶瘤作用.

肿瘤已成为危及全人类生命的重大疾病,虽然常规治疗手段如手术及放疗/化疗等不断发展,但对某些复发、难治性恶性肿瘤仍然束手无策,亟需安全、有效可行的治疗手段.在肿瘤基因治疗领域,能在肿瘤细胞内大量自我复制并选择性杀伤肿瘤细胞的溶瘤病毒(Oncolytic virus)逐渐崭露头角,目前溶瘤病毒抗瘤治疗备受关注.其中溶瘤麻疹病毒疫苗株(MV-Edm)因其可靠的安全性和优良的溶瘤效果已进入几项临床试验,为推动其临床转化奠定了基础,期望为肿瘤患者带来治疗上的突破.本文就目前溶瘤麻疹病毒的临床研究与转化进展的相关研究成果进行综述.

溶瘤病毒(oncolytic virus,OVs)疗法是治疗肿瘤的一种新方法,它可通过直接杀死肿瘤细胞并引起机体的免疫反应发挥作用.然而天然溶瘤病毒有一定的局限性,因此需将各种不同的病毒作为载体,通过基因修饰的方法增强或减弱病毒毒力并导入新的功能性基因,以提高其溶瘤作用.目前可以作为溶瘤病毒载体的有单纯疱疹病毒、腺病毒、牛痘病毒、水泡性口炎病毒、麻疹病毒、腮腺炎病毒、脊髓灰质炎病毒等.这些病毒载体均可通过不同的基因修饰方法,靶向性感染并杀死不同的肿瘤细胞,获得较好的溶瘤作用.本文综述了几种溶瘤病毒载体的基因修饰方法,以及修饰后的溶瘤效果.

背景与目的肺癌已成为我国发病率和死亡率居首位的恶性肿瘤.能自我复制、选择性杀伤肿瘤的溶瘤病毒,是治疗恶性肿瘤的有效策略,而其中溶瘤麻疹病毒疫苗株因其良好的溶瘤效果,且对正常细胞无损伤或微损伤,已进入几项临床试验.本研究旨在探讨核转录因子κB(nuclear factor kappa B, NF-κB)信号通路抑制剂与溶瘤麻疹病毒疫苗株协同抗肺癌的作用及机制.方法 应用Western blot方法检测MV-Edm感染人肺癌细胞A549和H1299并应用细胞自噬相关的siRNA或者应用NF-κB通路抑制剂PS1145后SQSTM1、p-IκBα、IκBα、PARP及BAX的表达水平,运用流式细胞术分析各组细胞凋亡率的变化,同时采用噻唑蓝[3-(4,5)-dimethylthiahiazo (-z-y1)-3,5-di-phenytetrazoliumromide,MTT]法检测各组细胞的存活率.结果 Western blot结果显示MV-Edm感染人肺癌细胞A549和H1299后,自噬引起NF-κB通路的激活,进而抑制细胞凋亡.抑制细胞自噬可抑制NF-κB通路的激活,MV-Edm感染后p-IκBα表达水平随着感染时间有不同程度的升高,I1κBα的表达水平则降低,NF-κB通路抑制剂PS 1145可促进人肺癌细胞A549和H1299凋亡(P＜0.01),并增强其溶瘤效果.结论 NF-κB信号通路抑制剂PS 1145与溶瘤麻疹病毒疫苗株联合可促进人肺癌细胞A549和H1299凋亡,并增强其溶瘤效果.

麻疹病毒是一种传染性很强的病毒,是麻疹的病原体.我国自20世纪60年代初应用减毒活疫苗以来,儿童麻疹发病率显著下降.在天花灭绝后,WHO已将麻疹列为计划消灭的传染病之一.随着分子生物学的进展,各种减毒活疫苗和其他微生物载体的麻疹病毒疫苗也相继问世.同时,几十年来麻疹病毒减毒活疫苗的运用表明了其安全、高效,目前也被广泛用作重组麻疹病毒(rMV)载体平台,并已被应用于预防病毒感染,溶瘤等医学研究领域.现对rMV的功能和应用等方面的研究进展作一综述,为深入研究重组麻疹病毒的溶瘤机制和进一步完善重组麻疹病毒载体平台提供参考.

癌症是威胁人类健康的重要因素之一,现有的治疗方法包括手术治疗、放射治疗和化学药物治疗等,但存在如毒副作用大、对化疗药物的耐药性、肿瘤侵袭和复发等局限性,因此寻求更有效的新型肿瘤治疗方法十分必要.溶瘤病毒疗法是一种通过病毒选择性感染肿瘤细胞来杀伤肿瘤,并增强机体抗肿瘤免疫反应的新型肿瘤治疗方法,具有良好的应用前景.研究表明,麻疹病毒(measles virus,MV)是能展现出溶瘤效果的病毒之一,天然MV或经改造后用于肿瘤治疗,具有良好的抗肿瘤效应;也可与其他方法联合使用,提高治疗效果.本文就MV作为溶瘤病毒的作用机制和研究进展作一综述.

溶瘤病毒(oncolytic virus,OVs)历经百年发展,应用于当前最具潜力的肿瘤免疫疗法.它主要是天然的或基因修饰的DNA病毒和RNA病毒.近年来随着基因工程技术的飞跃发展,经基因改造的溶瘤病毒在肿瘤治疗领域取得很大进展,很多不同类型的病毒(包括单纯疱疹病毒、腺病毒、痘病毒、麻疹病毒和呼肠孤病毒等)正处于临床前研究、临床试验阶段或已批准上市,显示了良好的安全性和临床疗效.普遍认为溶瘤病毒靶向杀伤肿瘤细胞是通过选择性在肿瘤细胞内自我复制,最终裂解肿瘤细胞,同时可激发机体的免疫应答反应,进而增强抗肿瘤免疫效果,靶向杀伤肿瘤细胞而对正常细胞无明显影响.运用基因重组技术将溶瘤病毒与免疫检查点相结合以及肿瘤免疫联合疗法的兴起和不断进步,使溶瘤病毒的应用更加广泛,但仍存在病毒靶向性、安全性、给药途径等瓶颈问题.本文综述了溶瘤病毒的发展史、病毒分类、不同类型溶瘤病毒产品的临床研究进展、溶瘤病毒靶向杀伤肿瘤的免疫学机制及未来发展面临的挑战与展望等.