目的:通过网络药理学研究半枝莲-党参药对治疗膀胱癌的作用机制。方法:查询中药系统药理学数据库分析平台（TCMSP）筛选半枝莲-党参药对的药物成分，使用Swiss Target Prediction预测药物成分的作用靶点；运用GeneCards获取膀胱癌的疾病靶点，利用venny 2.1获取交集靶点。使用STRING进行蛋白-蛋白相互作用分析并使用Cytoscape构建"药物-靶点-通路"网络，利用Metascape进行基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析。将裸鼠随机分为模型组和治疗组，建立膀胱癌小鼠模型。模型组小鼠灌胃等剂量溶剂，治疗组建模后第8天灌胃半枝莲-党参药对0.2 ml，剂量为342.86 mg/kg，2次/d。建模后第28天，测量裸鼠瘤体大小，并采用酶联免疫吸附试验法检测前列腺素G/H合成酶2（PTGS2）、PTGS1、核受体辅活化子2（NCOA2）、维甲酸X受体α（RXRA）、孕酮受体（PGR）、丝裂原活化蛋白激酶1（MAPK1）、网状内皮增生病毒癌基因同源物A（RELA）、蛋白激酶B1（Akt1）水平。结果:半枝莲-党参药对的45个药物成分通过多条通路直接作用于187个疾病靶点治疗膀胱癌，主要核心成分为槲皮素、木犀草素、汉黄芩素、7-甲氧基-2-甲基异黄酮、黄芩素、β-谷甾醇和豆甾醇等，关键靶点为PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA和Akt1等。GO富集分析显示，生物过程主要涉及对激素的反应、细胞对脂质的反应、对外来刺激的反应、对细菌分子的反应等，细胞组分主要涉及转录调控复合体、膜筏、膜微区、RNA聚合酶Ⅱ转录调控复合物等，分子功能主要涉及转录因子结合、DNA结合转录因子结合、RNA聚合酶Ⅱ特异性DNA结合转录因子结合、核受体活性、配体激活的转录因子活性等。KEGG通路富集分析显示半枝莲-党参药对治疗膀胱癌的主要信号通路为晚期糖基化终产物及其受体（AGE-RAGE）、白细胞介素-17（IL-17）、磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B（PI3K-Akt）、肿瘤坏死因子（TNF）、MAPK、缺氧诱导因子-1（HIF-1）、细胞凋亡、p53、Toll样受体等。动物实验验证显示，半枝莲-党参药对能够明显改善裸鼠的瘤体大小，同时也能改善PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA、Akt1表达水平。结论:半枝莲-党参药对主要通过调节AGE-RAGE、IL-17、PI3K-Akt、TNF、MAPK、HIF-1、细胞凋亡、p53、Toll样受体等信号通路的PTGS2、PTGS1、NCOA2、RXRA、PGR、MAPK1、RELA、Akt1等靶点治疗膀胱癌。

目的:探讨中亚苦蒿醇提物大孔树脂30%乙醇洗脱部位（AAEM-30%）对小鼠树突状细胞（DC）和免疫功能的作用。方法:中亚苦蒿醇提物经AB-8型大孔树脂分离得到AAEM-30%，对其多糖、黄酮和萜类含量进行测定。体外通过流式细胞术检测AAEM-30%对DC表面分子分化簇（CD）40、CD80和CD86的表达，酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测DC细胞因子白细胞介素（IL）-6和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）的表达；体内通过不同给药剂量（50、100 mg/kg）和不同给药方式（皮下注射、腹腔注射、灌胃）检测AAEM-30%对ICR小鼠免疫功能的影响。结果:AAEM-30%中多糖、黄酮、萜类的质量分数分别为24.30%、22.50%、28.19%。体外能够增强小鼠DC表面分子CD40、CD86以及DC细胞因子IL-6和TNF-α的表达（均 P<0.001）。与对照组比较，3种给药方式的小鼠体质量比较差异均无统计学意义（均 P>0.05）；50、100 mg/kg AAEM-30%腹腔注射组的胸腺指数和50 mg/kg AAEM-30%灌胃组的脾脏指数均增加（均 P<0.05）。100 mg/kg AAEM-30%腹腔注射组的CD19 +细胞数量增加（ P<0.01），50 mg/kg AAEM-30%灌胃组的CD19 +细胞数量增加（ P<0.05）。100 mg/kg AAEM-30%灌胃组的CD11b +和CD11c +数量增加（ P<0.05）。灌胃和腹腔注射2种给药方式均能增加CD4 +和CD8 + T淋巴细胞的数量（均 P<0.05）。 结论:AAEM-30%能够促进小鼠DC的成熟，增强小鼠免疫功能。

睾丸3β-羟基类固醇脱氢酶（3β-hydroxysteroid dehydrogenase，3β-HSD）是一种类固醇生成酶，催化3β-羟基类固醇转化为3-酮类固醇。目前已克隆了人类的两种不同亚型， HSD3B1和 HSD3B2；其中， HSD3B2位于睾丸中，表达3β-HSD2。 HSD3B2是一种双底物酶，可与辅因子NAD +和3β-类固醇结合。许多内分泌干扰物，包括工业化合物（邻苯二甲酸盐、双酚类、全氟烷基物质和二苯甲酮类）、杀虫剂和杀菌剂（有机氯杀虫剂和有机锡）、食品添加剂（丁基羟基苯甲醚、白藜芦醇、棉酚、黄酮和异黄酮、类姜黄素和查尔酮类）和药物（依托咪酯、甲羟孕酮和酮康唑）可抑制睾丸中3β-HSD的活性，可能干扰雄激素合成。本文总结了3β-HSD的独特睾丸亚型，其基因、化学、亚细胞、位置以及直接抑制睾丸3β-HSD的内分泌干扰物及其抑制模式，期望为临床研究雄激素调控方法及以雄激素为靶点的药物研发提供参考。

目的:探究毛蕊异黄酮苷(calycosin-7-O-β-D-glucoside, CG)改善糖皮质激素诱导肝细胞脂质合成的作用机制。方法:地塞米松(dexamethasone, Dex)、CG、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase, AMPK)激动剂AICAR、AMPK抑制剂compound C、AMPK失活(AMPK-DN)及组成性激活(AMPK-CA)腺病毒处理HepG2细胞后，使用CCK8法、油红O染色、三酰甘油和总胆固醇检测盒、实时定量PCR及Western印迹法分别检测细胞活性、细胞脂质含量、脂质合成相关基因的表达及AMPK的磷酸化水平。结果:CG显著减少Dex诱导的HepG2细胞中脂质含量及脂质合成关键酶硬脂酰辅酶A去饱和酶(Scd1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)、脂肪酸合成酶(Fasn)与转录因子固醇调控元件结合蛋白1c(Srebp-1c)的表达，并上调AMPK的磷酸化水平，而该保护效应可被AMPK抑制剂与AMPK-DN腺病毒所抑制。结论:CG可通过激活AMPK抑制糖皮质激素诱导的肝细胞脂质合成。

目的:探讨中亚苦蒿硅胶柱分离组分（AEM-SC）对小鼠树突状细胞（DC）成熟及免疫功能的影响。方法:制备中亚苦蒿大孔吸附树脂70%乙醇洗脱组分，经硅胶柱进一步分离得到洗脱组分AEM-SC，并对其多糖、总黄酮、三萜类含量进行测定。流式细胞术检测AEM-SC对DC表面分子表达水平、抗原吞噬能力及刺激同种异体T细胞增殖能力的影响；酶联免疫吸附测定（ELISA）法检测AEM-SC对DC细胞因子表达的影响。结果:AEM-SC中多糖、黄酮类和萜类的含量分别为10.12%、5.70%和3.62%。体外功能实验结果显示，AEM-SC可明显降低脂多糖诱导的DC表面分子CD40、CD86和主要组织相容性复合体Ⅱ类（MHC-Ⅱ）的表达以及细胞因子白细胞介素-12p40（IL-12p40）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和IL-6的水平（均 P<0.05），提高DC摄取抗原的能力（ P<0.01），降低DC刺激小鼠脾脏CD4 + T与CD8 + T淋巴细胞增殖的能力（均 P<0.001）。小鼠炎症模型实验中，AEM-SC可明显降低脂多糖诱导的小鼠体内DC表面分子CD40、CD86、CD80的表达（均 P<0.001）以及血清中细胞因子TNF-α、IL-12p40的表达（均 P<0.01）。 结论:AEM-SC在体外与体内实验中均表现出抑制DC成熟的能力，显示AEM-SC具有一定的免疫抑制作用。

目的:探讨山楂叶总黄酮（FHL）对急性心肌梗死（AMI）大鼠心功能的影响及其作用机制。方法:SPF级雄性Sprague-Dawley大鼠60只，9周龄，体重300~350 g，采用随机数字表法选取 10只作为假手术组，余50只用于建立AMI模型。采用冠状动脉结扎法建立大鼠AMI模型，其中36只建模成功，随机数字表法将其分为AMI组及FHL低、中、高剂量组（每组 n=9），按10 ml/kg体重分别腹腔注射生理盐水及浓度为0.3、0.6、1.2 mg/ml的FHL溶液。假手术组仅穿线不结扎，按10 ml/kg体重给予等量生理盐水。给药干预均为1次/d，连续4周。超声心动图检测各组大鼠左心室舒张末期内径（LVEDD）、左心室舒张末期前壁厚度（LAWD）、左心室射血分数（LVEF）及左心室舒张末压（LVEDP）。然后处死大鼠，取左心室前壁组织制作切片，常规苏木精-伊红（HE）染色观察大鼠心肌组织病理学改变。另取切片进行原位末端转移酶标记法（TUNEL）染色，计算心肌细胞凋亡率。分别采用实时荧光定量PCR（RT-qPCR）和Western blot法检测大鼠心肌组织中磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）、蛋白激酶B（Akt）、糖原合成酶激酶3（GSK3β）、细胞周期蛋白D1（cyclin D1）mRNA和蛋白的相对表达水平及磷酸化Akt（p-Akt）、磷酸化GSK3β（p-GSK3β）蛋白的相对表达水平。 结果:与假手术组比较，AMI组及FHL低、中、高剂量组大鼠LVEDD、LVEDP均较大，LAWD、LVEF均较小（ P均<0.05）。与AMI组比较，FHL低、中、高剂量组大鼠LVEDD、LVEDP均较小，LAWD、LVEF均较大（ P均<0.05），且随FHL剂量增加LVEDD和LVEDP减小，LAWD和LVEF增大（ P均<0.05）。FHL低、中剂量组大鼠的LVEDD和LAWD差异无统计学意义（ P均>0.05）。HE染色结果显示，假手术组大鼠心肌组织结构正常，AMI组大鼠梗死区可见坏死心肌组织，心肌纤维排列紊乱，心肌间质大量炎性细胞浸润，FHL低、中、高剂量组大鼠心肌损伤较AMI组轻，心肌纤维排列整齐，但仍有部分断裂及少量炎性细胞浸润，梗死区有散在的岛状正常心肌组织，其中FHL高剂量组大鼠心肌损伤最轻。TUNEL染色结果显示，与AMI组比较，FHL低、中、高剂量组大鼠心肌细胞凋亡率均较低（ P均<0.001），但仍均高于假手术组（ P均<0.001），且随FHL剂量增加心肌细胞凋亡率降低（ P均<0.05）。RT-qPCR检测结果显示，与AMI组比较，FHL低、中、高剂量组大鼠心肌组织中PI3K、cyclin D1 mRNA表达水平较高，但仍低于假手术组（ P均<0.05），且随FHL剂量增加PI3K、cyclin D1 mRNA表达水平升高（ P均<0.05）。Western blot法检测结果显示，与AMI组比较，FHL低、中、高剂量组大鼠心肌组织中PI3K、p-Akt、p-GSK3β、cyclin D1蛋白表达水平较高，但仍低于假手术组（ P均<0.05），且随FHL剂量增加PI3K、p-Akt、p-GSK3β、cyclin D1蛋白表达水平升高（ P均<0.05）。 结论:FHL可有效改善AMI大鼠心功能，其可能通过激活PI3K/GSK3β/cyclin D1信号通路发挥调控作用。

研究连翘叶总黄酮(Forsythia suspensa leaf total flavonoid,FSLF)对 2,4,6-三硝基苯磺酸(2,4,6-trinitrobenzene sulfonicacid,TNBS)诱导斑马鱼溃疡性结肠炎的疗效作用.采用D101大孔树脂对FSLF分离纯化并使用超高效液相色谱-质谱联用仪(UPLC-MS)分析成分;将36条野生斑马鱼分为空白组、模型组、FSLF低、中、高剂量给药组(10、20、40 μg/mL)、地塞米松组(50 μg/mL),除空白组外,其余各组均用160 mmol/L TNBS肛门注射诱导斑马鱼溃疡性结肠炎模型,使用苏木素-伊红、阿利新蓝染色法观察斑马鱼结肠组织病理和杯状细胞数量变化,通过试剂盒检测斑马鱼结肠组织活性氧(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)含量和活性变化,经荧光定量PCR法检测斑马鱼结肠组织中髓样分化因子88(mycloid differentiation factor 88,MyD88)、肿瘤坏死因子相关分子 6(TNF receptor associated factor 6,TRAF6)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)p65、肿瘤坏死因子-α(tumor nec-rosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)mRNA 表达量.结果显示,FSLF 30％乙醇洗脱部位总黄酮含量最高,UPLC-MS共鉴定出芦丁、异槲皮苷、山柰酚-3-葡萄糖鼠李糖苷、金丝桃苷、山柰酚-3-O-芸香糖苷、槲皮素、橙皮苷、山柰酚、紫云英苷9种黄酮类化学成分.与模型组相比FSLF可改善斑马鱼结肠组织结构,提高杯状细胞数量(P＜0.001),降低ROS含量(P＜0.05)和MyD88/TRAF6/NF-κBp65、TNF-α、IL-1β mRNA表达量,升高SOD活性(P＜0.01)和IL-10 mRNA表达量(P＜0.05).本研究表明FSLF对斑马鱼溃疡性结肠炎有明显治疗作用,其作用机制可能与通过调节信号通路NF-κB,下调炎性因子TNF-α、IL-1β和上调IL-10 mRNA表达量有关.

目的 通过超高效液相色谱-四级杆-飞行时间串联质谱(UHPLC-Q-TOF/MS)和气相色谱-质谱(GC-MS)鉴定陈皮中的化学成分,结合网络药理学分析其治疗"痰、咳、喘"的药效物质基础及作用机制.方法 建立UHPLC-Q-TOF/MS和GC-MS结合诊断特征滤过和标准谱库比较的分析方法,表征陈皮的化学成分.利用Swiss Target Prediction数据库获取陈皮主要成分的作用靶点信息;通过GeneCards数据库获取"痰、咳、喘"相关的靶点;将陈皮主要成分对应靶点与"痰、咳、喘"相关靶点取交集,借助String平台和Cytoscape 3.10.0软件绘制交集靶点蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络;利用DAVID数据库对核心靶点进行基因本体(GO)功能与京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,通过微生信云平台对富集结果可视化.结果 共鉴定了 108个非挥发性成分和28个挥发性成分;陈皮的主要活性成分可能为乙酸香茅酯、乙酸香叶酯、(-)-紫苏醛、(1R,5S)-香芹醇、癸醛、(+)-α-松油醇、(-)-4-萜品醇、芳樟醇、壬醛、桔皮素、甜橙黄酮、异橙黄酮、香叶木素、枸橘苷、日当药黄素;陈皮可能通过热休克蛋白(HSP90AA1)、表皮生长因子受体(EGFR)、SCR蛋白激酶(SRC)、磷酸化蛋白激酶(AKT1)、磷酸肌醇激酶(PIK3CA)、信号传导转录激活因子(STAT1)等关键靶点,协同调控磷脂酰肌醇-3-激酶-蛋白激酶B(PI3K-Akt)、Janus激酶-信号传导和转录激活蛋白(JAK-STAT)等信号通路发挥止咳平喘祛痰的治疗作用.结论 分析获得了陈皮发挥止咳平喘祛痰功效可能的药效物质基础及作用机制,可为其质量标志物和质量标准的提升研究奠定基础.

目的 探究抑肝散对阿尔茨海默病(AD)的治疗作用,通过网络药理学方法预测其机制,并进行实验验证.方法 以D-半乳糖诱导AD小鼠模型,通过水迷宫和八臂迷宫实验考察抑肝散(400、800mg·kg-1)对AD小鼠学习记忆功能的影响,并通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法分析AD小鼠脑组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)的mRNA表达变化.通过中药系统药理学数据分析平台(TCMSP)对抑肝散的组方药材柴胡、甘草、川芎、当归、白术、茯苓和钩藤进行活性成分筛选,采用GeneCards等数据库获取AD疾病靶点,筛选其核心靶点,并对核心靶点进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路富集分析,分别获取核心靶点涉及的生物过程(BP)、分子功能(MF)和细胞组分(CC)以及KEGG信号通路.小鼠神经母细胞瘤Neuro-2a细胞和RAW264.7 巨噬细胞分别与H2O2和抑肝散(3、6 μg·mL-1)共培养,观察抑肝散对Neuro-2a细胞体外增殖和凋亡的影响,及对Neuro-2a细胞Caspase-3和Caspase-8活性、活性氧(ROS)、谷胱甘肽(GSH)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和线粒体膜电位(MMP)的影响;观察抑肝散对RAW264.7细胞TNF-α和IL-1β、IL-2、IL-6表达的影响,对网络药理学结果进行验证.结果 抑肝散可缓解AD小鼠学习记忆功能损伤,通过网络药理学技术筛选得到抑肝散治疗AD的活性成分159个,度值前10位的化合物分别是槲皮素、山柰酚、异鼠李素、β-谷甾醇、豆甾醇、7-甲氧基异黄酮、芒柄花素、柚皮素、美迪紫檀素和甘草查尔酮A,筛选得到核心靶点227个,度值排名前10的核心靶点为丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、肿瘤坏死因子(TNF)、白细胞介素6(IL6)、肿瘤蛋白P53(TP53)、白细胞介素1β(IL1B)、雌激素受体1(ESR1)、原癌基因(JUN)、前列腺素氧化环化酶2(PTGS2)、半胱氨酸蛋白酶3(CASP3)和信号转导和转录激活因子3(STAT3).生物信息学分析发现抑肝散治疗AD与糖基化终末产物/糖基化终末产物受体和脂质和动脉粥样硬化等信号通路有关.动物实验结果显示,抑肝散可改善AD模型小鼠学习记忆功能损伤,下调AD小鼠脑组织中IL-1β、IL-2、IL-6、TNF-α mRNA表达;细胞实验结果显示,抑肝散显著缓解H2O2对Neuro-2a细胞的增殖抑制作用和凋亡诱导作用(P＜0.05),降低Caspase-3、Caspase-8活性(P＜0.05),降低细胞MDA和ROS水平(P＜0.05),升高MMP及GSH水平;抑肝散对H2O2诱导的RAW264.7细胞TNF-α和IL-1β、IL-2、IL-6升高具有显著抑制作用(P＜0.05).结论 抑肝散通过缓解学习记忆功能损伤和氧化损伤发挥治疗AD作用.

目的:探讨小续命汤治疗中风的药效物质及作用机制.方法:基于UHPLC-Q Exactive Plus HRMS鉴定小续命汤中的成分,网络药理学预测小续命汤治疗中风的活性成分及潜在机制,鹌鹑胚绒毛尿囊膜(qCAM)实验可视化小续命汤的促血管生成作用.结果:从小续命汤中鉴别出麻黄碱、升麻素苷和黄芩苷等68个成分,包括氨基酸类、生物碱类、黄酮类、香豆素类、萜类、丁基苯肽类等化合物;成分与中风的交集靶点建立了蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,共筛选出IL-6、TNF、EGFR、PDGFRB和PIK3CA等33个核心靶点;麻黄碱、黄芩苷和人参皂苷Rg1等57种活性成分;核心靶点的富集分析表明小续命汤治疗中风可能主要通过磷脂酰肌醇3-激酶/蛋白激酶B(PI3K-AKT)和血管生成因子(VEGF)信号通路等与血管生成相关的通路.qCAM实验中阳性对照组(Gas,0.02 mg)和小续命汤高剂量组(XXMD-H,2 mg,折合生药量16.69 mg)的血管相对面积比空白组显著增加(P＜0.05),较好地可视化了小续命汤促进血管生成.结论:本研究通过结合UHPLC-Q Exactive Plus HRMS和网络药理学的方法阐明了小续命汤治疗中风的药效物质,得出潜在作用机制可能与作用于PI3K-AKT、VEGF等信号通路促进血管生成有关,并通过qCAM实验评价其促进血管生成活性,RT-qPCR进一步验证相关靶点,为小续命汤的质量研究与进一步开发提供参考.