[目的]为实现生物合成重要化合物 2-萘乙醇,探索利于 2-萘乙醇合成的基因组合.[方法]向酿酒酵母BY4741发酵液中外源添加 2-萘丙氨酸,运用高效液相色谱法进行产物检测;绘制BY4741 的生长曲线和产量曲线,添加不同浓度 2-萘丙氨酸到BY4741 发酵液中并检测BY4741 生长和生产情况;对BY4741 进行代谢工程改造,构建过表达Ehrlich途径 6 个基因的质粒并转化进BY4741 中;发酵 6 株改造菌株,检测产物产量.[结果]发酵液中检测到了推测产物 2-萘乙醇,代谢工程改造菌株相较于野生型BY4741 菌株产量均有所提升,其中过表达ARO9和ARO10基因使得 2-萘乙醇的产量在外源添加 1 mmol/L 2-萘丙氨酸的情况下达到 0.258 mmol/L,转化率达到野生型的 2.3 倍.[结论]在酿酒酵母中实现了 2-萘乙醇的生物合成,探索出ARO9 和ARO10 是利于 2-萘乙醇生物合成的基因组合,为工业生产 2-萘乙醇提供了一种新的生物合成方法.

目的 研究清热凉血方的化学成分.方法 查阅中国知网、PubChem等数据库,检索清热凉血方药材化学成分的相关文献,建立化学成分数据库.采用超高效液相色谱-四极杆/静电场轨道阱高分辨质谱(UPLC-Q Exactive Focus MS/MS)法分析该方剂的图谱数据,并以Xcalibur 4.0 软件拟合分子式,与自建数据库信息进行匹配,初步推测分子式信息,并结合相关化学成分数据和文献信息对目标化学成分进行鉴定和确证.结果 共鉴定出 66 个化学成分,包括单萜苷类 20 个,酚酸类 10 个,环烯醚萜苷类 8 个,糖苷类、没食子酰葡萄糖类各 4 个,有机酸类、苯乙醇苷类、香豆素类各 2 个,苯丙素类、生物碱类、黄酮类、环肽类、萘醌类、糠醛类各 1 个,其他类 8 个.结论 所建立的方法可系统地对清热凉血方中的化学成分进行定性分析.

目的 研究青钱柳Cyclocarya paliurus(Batal.)Iljinskaja叶的化学成分及其α-葡萄糖苷酶抑制活性.方法 青钱柳叶 95%乙醇提取物采用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20、聚酰胺、C18反相硅胶及半制备HPLC进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构.采用PNPG法评价其α-葡萄糖苷酶抑制活性.结果 从中分离得到15 个化合物,分别鉴定为cyclopaloside C(1)、cyclopaloside A(2)、juglanosides E(3)、vaccinin A(4)、ent-mururin A(5)、山柰酚-3-O-α-L-鼠李糖苷(6)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖苷(7)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸甲酯(8)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸乙酯(9)、山柰酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(10)、槲皮素-3-O-α-L-鼠李糖苷(11)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖苷(12)、槲皮素-3-O-β-D-半乳糖苷(13)、槲皮素-3-O-β-D-葡萄糖醛酸丁酯(14)、香橙素(15).总提取物抑制α-葡萄糖苷酶的IC50值为(1.83±0.04)μg/mL,化合物1、4～5 分别为(29.48±1.86)、(0.50±0.07)、(0.71±0.07)μmol/L.结论 化合物 1 为新四氢萘醇苷类,化合物 4～5、8～10、14 为首次从青钱柳叶中分离得到.化合物 4～5 为较少见的黄酮木脂素类化合物,对α-葡萄糖苷酶具有潜在的抑制活性.

目的:研究樟木的化学成分.方法:采用多种色谱技术和波谱学方法对樟木乙醇提取物中的化学成分进行分离、纯化和结构鉴定.结果:从樟木中分离得到 12 个化合物,分别鉴定为:3',4'-dihydroxy-1,2,6-trimethoxy-[1,1'-biphenyl]-4(1H)-one(1)、spiropreussomerin A(2)、(-)-lyoniresinol(3)、(+)-lyoniresinol(4)、异落叶松树脂素(5)、9-羟基芝麻素(6)、9-hydroxyl piperonol(7)、l-细辛脂素(8)、松脂醇(9)、6,7-二甲氧基香豆素(10)、(R)-(+)-5-(2,3-dihydroxypropyl)-1,3-benzodioxole(11)、3,4,5-三甲氧基苄醇(12).结论:其中,1、2、4、7、11 和 12 为首次从樟属植物中分离得到,化合物 3、5 为首次从该植物中分离得到.

目的 研究北五味子果实低极性部位的主要化学成分.方法 北五味子果实用95％乙醇热提取,提取液用石油醚萃取得到石油醚部位,运用GC-MS法对其主要成分进行检测,所测结果与标准谱库进行对比分析,用峰面积归一法计算各个成分的相对含量.结果 鉴定了53种化学成分,相对含量较高的有香树烯氧化物(1),约占16.26％;2-(4a,8-二甲基-1,2,3,4,4a,5,6,7-八氢萘烯)-2丙烯-1-醇,约占13.35％;别香枝烯氧化物(2),约占11.57％.结论 北五味子果实(未粉碎)低极性部位主要化学成分以倍半萜类化合物为主,约占88.63％;十八烷基磺酰氯、柠檬烯-6-醇三甲基乙酸盐、甲酸橙花叔醇酯、7-表-顺-倍半香桧烯水合物、corymbolone、顺式-表-α-檀香醇、platambin、桉油烯醇、喇叭烯氧化物(Ⅱ)、1-氧化双环外雪松烯、9-异丙基1-甲基-2-亚甲基-5-杂氧三环[5.4.0.0(3,8)]十一烷、棕榈酸甲酯、雌二醇、丹皮酚都是首次从该植物中发现.

目的 开发新的用于在血清样品中检测硫化氢和生物硫醇(高半胱氨酸、半胱氨酸和谷胱甘肽)的化学传感器.方法 以1,8-萘二甲酸酐为原料,经缩合、威廉姆森成醚反应制备得到目标传感器L,并经NMR、HRMS、FT-IR等分析手段确证其分子结构,通过高效液相色谱、质谱以及核磁滴定氢谱实验研究传感器L检测H2S和生物硫醇的机理.最后经紫外-可见光谱和荧光光谱研究其检测硫化氢和生物硫醇的性能.结果 L为预期目标化学传感器分子.在Tris-HC1缓冲液(10 mM,pH 7.40,50％乙醇,v/v)中,L能同时对H2S和生物硫醇快速、高敏感性和选择性识别.对H2S的检测在576 nm处别表现了显著的吸收强度增强并伴随溶液颜色由无色变为酒红色,而对还原谷胱甘肽在426 nm处有显著的吸收强度变化;对高/半胱氨酸的检测于543 nm处表现了特异的荧光增强,而对半胱氨酸的检测还可见溶液颜色由无色变为橙色.识别机理研究表明L是通过硫醇亲核反应识别H2S和生物硫醇.将L应用于血清的加样回收率也得到满意的结果.结论 制备的L是一个简单高效的反应型传感器,可成功应用于血清样品中H2S和生物硫醇的检测.

目的:研究北青龙衣抗肿瘤的化学成分.方法:使用95％乙醇回流提取,大孔吸附树脂、硅胶、 Sephadex LH-20等分离;1H-NMR,13C - NMR,MS鉴定结构.结果:分离得到7个化合物,分别鉴定为熊果酸乙酯(1),20(R) -24β-羟基-20,25 -环氧-达玛烷-3-酮(2),1,7-二羟基-3,6-二甲氧基蒽醌(3),反式邻羟基肉桂酸(4),4-羟甲基-2 -甲氧基苯酚(5),没食子酸甲酯(6),4 -甲氧基-5 -羟基-1 -四氢萘酮(7).结论:化合物1 ～4为首次从该属中分离得到.

为了探究连香树水提物和乙醇提取物的主要成分和抗氧化作用,该研究采用水提和醇提两种方法提取连香树叶片中的代谢物并测定其主要成分,通过体外抗氧化实验,即清除羟自由基(·OH)、DPPH自由基(DPPH·)、超氧阴离子(O2-·)和还原铁离子(Fe3+)的能力等四个指标来评价其抗氧化作用.结果表明:连香树水提物和乙醇提取物中均含有山萘酚.此外,水提物中还含有苜蓿素和异槲皮苷等黄酮类物质;乙醇提取物中还含有柚皮素和槲皮素3-O-β-D-葡萄糖苷等黄酮类物质.水提物和乙醇提取物均有清除羟自由基、DPPH自由基、超氧阴离子及还原三价铁离子的能力.抗氧化的作用随提取物浓度的增大而增强,其中清除超氧阴离子(IC50值分别为0.092、0.002 mg·mL-1)的能力强于阳性对照Vc(IC50值为0.241 mg·mL-1)且铁离子还原力的IC50值(水提物为0.014 mg·mL-1,乙醇提取物为0.001 mg·mL-1)相对较小,说明其总抗氧化活性较强.由此可见,连香树水提物和乙醇提取物均具有良好的抗氧化作用,可作为一种潜在的天然抗氧化剂.

背景:胆石症是胆道系统最常见的疾病之一,有关胆石症代谢组学的研究目前尚无报道.目的:应用非靶向代谢组学技术筛选胆石症患者的血浆代谢标志物.方法:基于上海市男、女性健康队列开展胆石症血浆代谢谱预初实验.应用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOFMS)和气相色谱-飞行时间质谱(GC-TOFMS)技术检测43例基线期胆石症患者和43名年龄配对健康对照者的血浆代谢物,采用主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘判别分析(OPLS-DA)以及t检验筛选胆石症患者的特异性代谢物.通过Logistic回归分析构建胆石症预测模型,以ROC曲线对模型进行初步评价.结果:UPLC-QTOFMS和GC-TOFMS共检测出血浆代谢物618个,根据OPLS-DA VIP>1.0且t检验P<0.05的筛选条件,筛选出差异代谢物30个,由其中的2-甲基-4-戊烯酸、磷脂酰乙醇胺PE(p-16:0e/0:0)、顺式-4,7,10,13,16,19-二十二碳六烯酸、2-氨基丁酸、尿酸、瓜氨酸、S-异戊烯基-L-半胱氨酸、羟环己脲和2,3-环氧甲基萘醌九个代谢物构建的胆石症预测模型ROC曲线下面积(AUC)为0.97,敏感性和特异性分别为95.4％和88.4％.结论:胆石症患者的血浆代谢谱发生明显变化,由其中9个差异代谢物构建的预测模型能较好地区分胆石症患者与健康对照者.

从兰州某化工厂石油废水中分离筛选出1株高效降解菲的细菌F-1并对其菌种进行鉴定, 结合紫外分光光度法及气相色谱-质谱联用 (GC-MS) 对菌株生长特性、不同烃类化合物降解特性及菲降解动力学等进行了研究, 利用PCR技术检测了芳香烃代谢相关基因.结果表明, 菌株F-1属于约翰逊不动杆菌 (Acinetobacter johnsonii), 可在终浓度为50～800 mg/L的含菲基础培养基中正常生长.在温度30℃、p H 7.0、盐度0.3％ (质量分数) 、转速180 r/min条件下培养5 d后菲 (终浓度为100 mg/L) 降解率为43.57％, 降解过程符合一级动力学特征.菌株F-1也能利用联苯、萘、蒽、芘为唯一碳源生长.GC-MS分析显示菌株对C10-C28部分直链烷烃具有较强的降解能力.PCR扩增结果表明, 菌株F-1基因组中存在邻苯二酚-1, 2-双加氧酶、苯甲酸盐双加氧酶、铁氧化还原蛋白还原酶、乙醇脱氢酶、二羟酸脱水酶、醛缩酶和氧化还原蛋白基因.研究结果为该菌株应用到含菲废水及多环芳烃污染土壤的处理和深度修复研究提供参考.