28岁，G 3P 1，孕12 +5周超声测量胎儿颈后透明带为3.0 mm，孕中期血清学筛查21三体、18三体均为低风险，升级版无创产前检测提示胎儿7号染色体部分单体综合征高风险。夫妻双方外观无异常，否认孕早期毒物及放射物接触史。在签署知情同意书后，于孕18 +4周抽取羊水30 mL以及双方外周血样各2 mL，其中10 mL羊水用于染色体微阵列分析(chromosomal microarray analysis，CMA)，结果为arr[hg19] 7p14.1p11.2(38529602_55367509)×1(图1)，提示胎儿7p14.1p11.2区存在约16.8 Mb的缺失。对剩余20 mL羊水进行常规细胞培养、制片、染色体G显带核型分析，参照《人类细胞遗传学国际命名体制(ISCN 2016)》进行描述，胎儿染色体核型为46，XN，del(7)(p11.2p14)(图2)。孕23 +1周超声提示胼胝体发育不良可能、心脏发育异常(右心室双出口伴肺动脉狭窄可能、房室间隔缺损可能)。孕妇夫妇系非近亲结婚，否认家族遗传病史，第1胎生长发育未见明显异常，双方染色体核型未见明显异常，但拒绝接受CMA亲代验证。鉴于胎儿7号染色体短臂存在大片段缺失以及超声提示的结构异常，孕妇夫妇选择终止妊娠。本研究通过了温州市人民医院伦理委员会的审查[伦审(2021)第(56)改号]。

目的:探究DNA的N6-甲基腺嘌呤(N6-methyladenine，6mA)修饰在21单体综合征流产胎儿绒毛膜组织基因组中的分布特点及与21单体综合征临床症状的关系。方法:从4例实验组流产胎儿绒毛膜组织(核型为45, XY，－21)样本和4例对照组流产胎儿绒毛膜组织(核型为46, XY)样本中提取DNA，经质量和纯度检测合格后，采用6mA抗体进行染色质免疫共沉淀反应(chromatin immunoprecipitation, ChIP)，之后进行测序。对得到的测序数据进行生物信息学分析，研究6mA位点修饰在实验组和对照组中的差异。结果:峰(peaks)的相关差异基因的分析表明，在全基因组范围内，对照组相比实验组拥有更多的含6mA修饰的基因，其中对照组特有的含6mA修饰的基因为4607个，实验组仅有1059个。在21号染色体范围内，两组之间的这一差异更加明显。在实验组中特有的含6mA的基因为1769个，而对照组则高达8032个。不同范围内的分析结果都表明在21单体综合征中基因6mA修饰的水平偏低。GO富集分析和KEGG富集分析结果均表明21单体综合征中缺失的6mA基因与胚胎生长发育有着密切关系。结论:人体中的DNA 6mA修饰可能在胚胎生长发育方面发挥着与5mC(5-methylcytosine，5mC)修饰相似的作用。

SAMD9与其旁系同源基因SAMD9L并排位于染色体7q21上，功能上有58%的相似性 [1]，均表达IFN和TNF-α，具有生长抑制因子的功效 [2]。SAMD9/9L突变与血细胞减少、骨髓衰竭、骨髓增生异常综合征（MDS）及免疫缺陷相关 [3,4]，遗传学检查上可表现伴或不伴有7号染色体单体或7染色体部分单体缺失（长臂缺失）（-7/7q-）的SAMD9/9L的错义突变或截断突变。SAMD9/9L在全血细胞减少中突变发生率为18.6% [5]，在MDS中突变发生率为8%~17% [6,7]。SAMD9/9L突变可通过等位基因丢失、回复突变或单亲二倍体（UPD）复制等对骨髓造血功能进行修正 [8,9]。SAMD9/9L突变所致疾病临床表现异质性强，目前治疗标准不统一，欧洲儿童骨髓异常增生综合征工作组（EWOG-MDS）建议，没有严重血细胞缺乏和不依赖输血的SAMD9/9L突变患者，可采用观察及等待策略；进展为髓系恶性肿瘤者及时行造血干细胞移植（HSCT）结果令人满意 [10]。本研究中，我们对我院儿科SAMD9/9L突变致儿童全血细胞减少5例患者的临床表现、实验室检查、治疗及转归进行描述。

目的:分析早孕期自然流产的遗传学病因。方法:本研究为回顾性研究。研究对象为2021年1月至2022年12月在青岛大学附属妇女儿童医院因孕6～13周自然流产自愿检测早孕期流产胚胎的患者815例。采用高通量测序技术对流产组织进行检测，利用生物信息学方法分析结果。采用 χ2检验进行统计学分析。 结果:（1）815例研究对象中检出染色体异常525例（64.4%），包括染色体数目异常479例（91.2%，包括非整倍体异常421例和三倍体58例），结构异常（拷贝数变异，copy number variation，CNV）44例（8.4%），单亲二体2例（0.4%）。（2）染色体数目异常以染色体非整倍体最常见（87.9%，421/479），涉及除1号染色体的所有染色体，以16-三体最多（17.5%，84/479），其次为X染色体单体（13.4%，64/479）和22-三体（11.3%，54/479）。27例（5.6%）存在多种染色体异常。在9例常染色体单体中，21号染色体单体7例，18和4号染色体单体各1例。（3）44例结构异常中，发现62个致病性或可能致病性CNV，片段长度为19.58 Mb（1.08～103.81 Mb）。涉及8号染色体的CNV最多，为16个（25.8%，16/62），其次为4号和18号染色体［各6个（9.7%，6/62）］。62个CNV中的10个（16.1%）片段大小≤5 Mb，包括3例微缺失综合征。（4）对低深度全基因组CNV测序（low-depth copy number variation sequencing，CNV-seq）结果未提示常染色体数目异常的胚胎进行荧光定量聚合酶链反应验证，检出2例全染色体组单亲二体，均为父源性单亲二体，为完全性葡萄胎。（5）CNV-seq结果提示胚胎存在CNV的44例中，32例孕妇及其配偶选择进行外周血染色体核型分析，其中一方为染色体平衡易位携带者9例（28.1%）。这9例样本均涉及2条染色体变异，且均位于染色体末端。对于片段大小≤5 Mb的CNV，有2例进行了CytoScan 750K芯片检测，结果与CNV-seq测序结果基本一致。（6）32对进行了外周血染色体核型分析的夫妻中，9对（28.1%）进行了染色体相关区域的荧光原位杂交检测，其中正常6例，异常3例。荧光原位杂交异常区域与染色体核型结果一致。（7）年龄≥35岁的孕妇胚胎染色体异常率，以及胚胎染色体数目异常率明显高于年龄<35岁者［75.8%（182/240）与59.6%（343/575）， χ2=23.37；73.3%（176/240）与53.2%（306/575）， χ2=19.34； P值均<0.001］。2组孕妇的胚胎染色体结构异常率差异无统计学意义。 结论:染色体数目异常是早孕期自然流产的主要原因，在流产年龄≥35岁的孕妇中表现更为明显。CNV-seq可能更适用于早孕期自然流产胚胎的检测。

目的 探讨特纳综合征(TS)患儿不同染色体核型与自身免疫性甲状腺疾病(AITD)发生率及甲状腺功能的关系.方法 回顾性收集93例特纳综合征患儿临床资料,分析AITD及甲状腺功能异常在各组染色体核型中的详细分布情况及二者之间的关联.结果 93例特纳综合征患儿初诊时有21例(22.6%)合并AITD,其中17例甲状腺功能正常,1例亚临床甲状腺功能减退(甲减),1例临床甲减,2例甲状腺功能亢进(甲亢).21例AITD患儿在中位时间间隔3年定期复查,以评估甲状腺功能状态随时间的变化,其中10例甲状腺功能正常,4例亚临床甲减,3例临床甲减,4例甲亢.AITD组按照核型被分为3个亚组(A1亚组8例45,X染色体单体、A2亚组1例嵌合体型及A3组12例X染色体结构异常),随访结束时,各组的甲状腺功能异常的发生率随时间推移明显增加.结论 特纳综合征患儿随着时间的推移甲状腺功能出现逐步恶化,并且AITD初诊时年龄越大,甲状腺功能恶化发生率越高.特纳综合征患者需要定期监测甲状腺功能并及时处置.

目的 对2例无创产前检测(non-invasive prenatal testing,NIPT)结果为假阴性的病例进行分析,综合评价NIPT在临床应用中的局限性.方法 对孕妇1在孕24周进行脐带血染色体核型分析,对孕妇2所生的患儿进行外周血染色体核型分析.对孕妇1引产后留取的脐带和胎盘不同位置的组织以及孕妇2留存的孕期外周血样本,通过高通量测序检测染色体拷贝数的变异.结果 孕妇1胎儿的染色体核型为易位型21三体,核型为46,XY,der(21;21)(q10;q10),+21.高通量测序在胎盘的胎儿面及母体面中心以及近中心处均未检测到明显的异常,而胎盘胎儿面的边缘为Chr13:(33840001-115100000)×3[60％]/46,XY[40％],胎盘母体面的边缘检测为Chr13:(34080001-115100000)×3[54％]/46,XY[46％],脐带组织为21三体.孕妇2新生儿的染色体核型为46,XY,del(18)(q22),18号染色体存在部分缺失.高通量测序结果为chr18:(62910000-78020000)×1,存在15.1 Mb的杂合缺失,提示胎儿患有18号染色体部分单体综合征.结论 NIPT的假阴性结果与母体外周血中胎儿DNA的比例相关.NIPT在检测胎儿染色体微缺失和限制性胎盘嵌合体时存在一定的局限性.对于NIPT提示低风险的孕妇,后期的B超随访非常重要.

目的 建立扩增孕妇血浆中游离胎儿DNA (cffDNA)的方法,并对该方法在21-三体综合征产前诊断中的应用价值进行分析,以期提高21-三体综合征产前检出率,提高优生率.方法 选择2014年10月～ 2017年4月本院行产前优生优育检查的60例高危21-三体综合征胎儿孕妇作为研究对象,取所有孕妇的空腹肘静脉血进行PCR扩增血浆中游离胎儿DNA的方法构建研究,提取血浆中胎儿游离DNA,分别在76 ～ 83℃温度条件下对不同长度的DNA模板进行扩增,分别在76.6 ～ 86.6℃温度条件下对连接DNA进行整体扩增,分别在80 ～ 86.9℃温度条件下对整体扩增的影响,在81.4 ～ 86.9℃温度对整体扩增效率的影响.总结不同温度对cffDNA监测时PCR扩增的效果影响,根据上述结果构建扩增片段长度多态性(AFLP)方法检测cffDNA的方法.对60例孕妇cffDNA按照传统和新构建的AFLP方法对不同的模板进行扩增,比较两种ALFP对不同长度目的产物片段的整体效率并比较.分别进行60例孕妇中49例行羊膜腔穿刺取羊水行胎儿DNA检测,11例孕妇流产,孕妇流产过程中取羊水进行DNA检测.对60例孕妇cffDNA按照传统和新构建的AFLP方法分别进行21-三体综合征检测.以羊膜腔穿刺DNA检测和流产胎儿组织DNA检测结果为金标准,计算传统和新构建AFLP方法检测的cffDNA中21-单体综合征的敏感度、特异度、准确度.结果 79.9～82.4℃温度范围可有效提高＜300bp片段的cffDNA小片段扩增,而＞300bp片段扩增效果差,这一温度范围可有效分离母体DNA与胎儿游离DNA. 80.4℃-82.4℃可有效区分链接后cffDNA模板扩增图像,82.6℃-84.2℃变性温度可有效区分片段长度500bp目标片段,选择80-83℃扩增温度条件是适合cffDNA扩增效果的变性温度.新构建AFLP扩增法可有效提升产前诊断21-三体综合征的诊断特异度度和准确度.结论 在一定范围内降低PCR反应的变性温度能够引起cfDNA连接接头后整体扩增中大片段模板不能有效扩增,同时不影响小片段模板的扩增.可达到和有效区分母源性和胎源性DNA的效果,提升诊断的准确率,提升产前遗传优生指导正确性.

目的 探讨产前筛查及诊断在双胎妊娠非整倍体异常患者中的诊断效果及价值.方法 选择2014年6月-2017年1月到科室进行常规产前检查的孕妇428名(均为双胎),对孕妇进行常规孕检,采集母体外周血,利用产前无创基因检测技术对双胎染色体非整倍性疾病进行筛查.根据检查结果对于中、高风险者进行羊水穿刺检测,完成染色体核型分析,将产前无创基因检测技术结果与染色体核型结果进行比较,分析产前筛查及诊断在双胎妊娠非整倍体异常中的价值.结果 428名孕妇产前无创基因检测技术筛查血液标本共有8例中高风险,阳性检出率为1.87％;产前无创基因检测技术与染色体核型在21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征及X单体诊断符合率均为100.00％,产前无创基因检测技术与染色体核型诊断结果无统计学意义(P＞0.05);8例双胎妊娠非整倍体异常中高危标本均行羊水或脐血穿刺完成染色体核型分析,最终确认胎儿一7例为46,XN,1例为45,XN,der (13;21) (q10;q10);胎儿均表现为21-三体综合征、18-三体综合征、13-三体综合征及X单体相应核型.通过对孕妇进行随访,8例孕妇中7例选择减胎处理,1例坚持自然分娩.结论 产前无创基因检测技术与羊水穿刺染色体核型分析用于双胎妊娠非整倍体异常患者中均能帮助胎儿早期确诊,但是产前无创基因检测技术诊断创伤性更低,是一种安全、有效的产前筛查方法,值得推广应用.

目的 回顾性分析应用定量荧光PCR (quantitive fluorescent PCR,QF-PCR)快速检测2322例产前诊断标本常见染色体非整倍体结果,评价QF-PCR在胎儿常见染色体非整倍体产前诊断中的应用价值.方法 应用QF-PCR对2015年1月至2016年12月共2322例产前诊断标本针对1 3,18,21,X及Y染色体非整倍体进行快速诊断,同时所有标本进行染色体核型分析并进行结果比较.结果 QF-PCR检出胎儿染色体非整倍体99例,其中13三体3例,18三体19例,21三体62例,X单体6例,XXX 5例,XXY 2例,XXYY合并18三体1例,三倍体(69,XXX)1例.上述染色体数目异常结果与核型分析完全一致.另外,QF-PCR结果显示1例为46,XX男性综合征,提示1例为21号染色体部分三体和3例为X染色体嵌合体.而核型分析为染色体结构异常的QF-PCR均未检出.结论 QF-PCR能快速、准确地诊断13、18、21、X及Y染色体非整倍体数目异常,且对嵌合体有一定的提示作用,可弥补核型分析结果时间过长带来的不足,最大程度缓解孕妇及其家属的焦虑.

目的 研究荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)技术在骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndrome,MDS)的诊断、细胞遗传学及预后评估中的重要意义.方法 对2010年12月-2015年4月山西医科大学第二医院收集的113例MDS患者进行FISH检测,分析细胞遗传学在MDS患者中的表达和意义.结果 ①113例MDS患者依据WHO(2008)分型诊断标准,难治性血细胞减少伴单系发育异常(refractory cytopenia with unipa-rental dysplasia,RCUD)占16.0％(18/113)、难治性贫血伴环状铁幼粒细胞(refractory anemia with ringed sideroblasts,RARS)占2.6％(3/118)、难治性血细胞减少伴多系发育异常(refractory cytopenia with multiple dysplasia,RCMD)占28.3％(32/113)、难治性贫血伴原始细胞增多(re-fractory anemia with excess blasts,RAEB)占44.2％(50/113)、MDS-未分类(MDS-U)占8.0％(9/113)、5q-综合征占0.9％(1/113).44.2％(50/113)的MDS患者具有异常染色体,依次为+8(23.9％)、-5/5q-(15.9％)、-7/7q-(14.2％)、20q-(9.7％)、-Y(2.7％),复杂核型占8.0％(9/113);其中仅伴染色体数目异常者24(21.2％)例,伴染色体结构异常者17(15.0％)例,同时伴有数目和结构异常者13(11.5％)例;MDS各亚型患者中,RCUD组染色体异常率最高,约占50％(9/18),后依次为RAEB组异常率占48.0％(24/50)、RCMD组异常率占43.8％(14/32)、RARS组异常率占33.3％(1/3);根据修订的国际预后积分系统(IPSS-R)进行危险度分层,非常低危组占0.9％(1/113),低危组占23.0％(26/113),中危组占31.9％(36/113),高危组占31.9％(36/113),非常高危组占12.4％(14/113);②单体核型组与非单体核型组相比,有低的血小板计数(P=0.039).结论 FISH检测对MDS的诊断、预后分析、指导治疗具有重要价值;将是否合并的单体核型列入预后分层中,可能对提高预后分层准确性有意义.