目的:探讨对再生障碍性贫血(AA)进行异基因造血干细胞移植(allo-HSCT)后，合并自身免疫性脑炎(AE)患者的临床特征、诊断、治疗及预后，并进行相关文献复习。方法:选择2020年12月28日第九四〇医院血液科收治的1例因AA接受单倍体造血干细胞移植(haplo-HSCT)后发生AE患者(患者1)为研究对象。患者1为男性、30岁。采用回顾性研究方法，对其病史、临床表现、实验室及影像学检查结果与诊疗结果等临床资料进行分析。对患者1的随访，截至2023年9月30日。以"造血干细胞移植""脑炎""脑膜炎""自身免疫性脑炎""hematopoietic stem cell transplantation""encephalitis""meningitis""autoimmune encephalitis"为中、英文关键词，在万方数据服务知识平台、中国知网数据库及PubMed数据库中，检索血液病患者接受allo-HSCT后发生AE的相关研究文献。文献检索时间设定为以上数据库建立至2023年12月。本研究遵循的程序符合2013年修订的《世界医学会赫尔辛基宣言》的要求，并且与受试者签署临床研究知情同意书。结果:患者1因"allo-HSCT后42 ＋个月，肌无力1 ＋个月"于2020年12月28日第九四〇医院血液科入院治疗。①患者1入院实验室检查结果如下。脑脊液压力为350 mmH 2O(1 mmH 2O＝9.81 Pa)；脑脊液生化检查：Cl －浓度为129.4 mmol/L，葡萄糖水平为2.85 mmol/L，蛋白定量为879.0 mg/L；脑脊液常规检查：白细胞计数(WBC)为15×10 6/L，蛋白定性呈阳性；外周血感染相关检测：降钙素原(PCT)水平为0.047 ng/mL，白细胞介素(IL)-6水平为2.0 pg/mL；外周血血培养、血清及脑脊液病毒系列检查、脑脊液墨汁染色、脑脊液细菌及真菌培养结果均呈阴性；脑脊液及血清AE相关抗体均呈阴性。②患者1影像学检查结果如下。头颅MRI检查结果提示，双侧大脑半球、中脑、小脑中脚见大致呈对称分布的片状稍长T2信号影，弥散加权成像(DWI)提示双侧大脑半球、中脑、小脑中脚高信号。③临床诊断：患者1于2021年1月14日被确诊为自身抗体呈阴性AE。④治疗及转归：对患者1采取镇静、输注大剂量甲泼尼龙、静注人免疫球蛋白(IVIG)、抗癫痫、脱水降颅压、抗感染及呼吸机辅助呼吸等治疗后，体温逐渐正常，可脱离呼吸机自主呼吸，提示治疗有效。3月3日，患者1出院时可在家属搀扶下行走，四肢肌张力、腱反射正常，一般情况好转，病情稳定。⑤随访及预后：患者1于随访期内规律复诊，9月30日复诊结果显示，AE后遗症症状明显，表现为反应迟钝、记忆力减退、精神行为异常等。⑥按照本研究设定的文献检索策略，检索到3篇关于allo-HSCT后发生AE的相关研究文献，共计4例患者(患者2～4)，包括患者1在内的5例allo-HSCT后合并AE患者被纳入以下研究。这5例患者allo-HSCT后，均出现中枢神经系统(CNS)症状，经头颅MRI、脑脊液AE相关抗体检测，最后均被诊断AE。对其均采取糖皮质激素、CD20单克隆抗体、IVIG等治疗后，其CNS症状均有所改善。 结论:血液肿瘤患者在接受allo-HSCT后免疫重建过程中，若出现CNS症状，需尽早完善头颅MRI、脑脊液抗体检测排查AE可能。一旦患者被诊断为allo-HSCT后合并AE，应立即采取糖皮质激素联合IVIG等治疗，以挽救其生命。

目的:通过转录组测序和生物信息学分析，探究小胶质细胞炎症激活的关键通路和基因。方法:使用质量浓度为1 μg/ml的脂多糖对小胶质细胞进行刺激，建立小胶质细胞炎症模型。使用ELISA法和RT-qPCR检测小胶质细胞炎症模型IL-6和TNF-α水平。对建立的小胶质细胞炎症模型进行转录组测序，采用生物信息学方法筛选出差异表达基因。对差异表达基因进行GO分析和KEGG分析。使用String数据库构建差异表达基因的蛋白互作网络，并使用Cytoscape软件进行蛋白互作网络的可视化。使用MCODE应用程序提取蛋白互作网络的模块，使用cytohubba应用程序提取枢纽基因。采用RT-qPCR验证枢纽基因的mRNA表达水平。对枢纽基因进行富集分析，预测其靶向miRNA，预测可能与其作用的药物。结果:经ELISA和RT-qPCR检验，小胶质细胞炎症模型建立成功。通过转录组测序和生物信息学分析，筛选出434个差异表达基因。GO分析显示这些差异表达基因主要集中在细胞对细胞因子刺激的反应、炎症反应、对外界刺激反应的调节等条目。KEGG分析显示这些差异表达基因主要集中在趋化因子信号通路、TNF信号通路、IL-17信号通路等通路。构建了这些差异表达基因的蛋白互作网络图，并进行了模块分析和枢纽基因的提取，枢纽基因大部分位于模块1内，模块1的种子基因为 S1pr1，枢纽基因包括 S1pr1、 Cxcr4、 Cx3cl1、 Cx3cr1、 Cxcl10、 Cxcl2、 Ccl4、 Ccl5、 Ccl9、 Fpr1。RT-qPCR结果显示，与培养液组相比，脂多糖组中 S1pr1、 Cxcr4、 Cx3cl1、 Cx3cr1的mRNA表达下调， Cxcl10、 Cxcl2、 Ccl4、 Ccl5、 Ccl9、 Fpr1的mRNA表达上调。枢纽基因的富集分析主要集中在趋化因子介导的信号通路、视紫红质样受体、细胞趋化性等条目。预测了可能和枢纽基因作用的miRNA和药物。 结论:通过对小胶质细胞炎症模型进行转录组测序和生物信息学分析，筛选出了差异表达基因，提取了枢纽基因和种子基因，有助于进一步理解小胶质细胞炎症的分子机制，为相关疾病的诊治提供潜在的靶点。

目的:分析肥胖症内脏脂肪组织中环状RNA(circRNA)表达水平。方法:留取北京朝阳医院2020年1月至9月收治患者的内脏脂肪组织，根据体重指数，分肥胖(>32.5 kg/m 2)和正常组(<20.0 kg/m 2)，选取10份(肥胖组6份，正常组4份)行全转录组测序，比较circRNA表达水平并利用生物信息学方法分析其功能。以Log2(Fold change>1)且 P<0.05筛选差异化表达的circRNA，以 P<0.05为条件筛选富集的通路和分子功能。 结果:与正常组比较，肥胖组有52个差异表达的circRNA[Log2 (Fold change)>1，且 P<0.05]，其宿主基因主要富集在"胰岛素抵抗"、"肿瘤坏死因子通路"和"细胞因子-因子受体通路"等通路( P<0.05)，筛选出上述通路中的关键基因，如趋化因子(CX3CL1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、白细胞介素6(IL-6)、胰岛素受体底物2(ISR2)等，这些基因与慢性炎性反应密切相关。 结论:circRNAs可能通过调控慢性炎性反应在肥胖症发生发展中发挥作用。

目的:探讨 miR-520c-3p对糖尿病肾脏病患者近端肾小管上皮细胞焦亡的影响及其分子机制。 方法:收集2019年6月至2020年12月在郑州大学第一附属医院就诊的糖尿病肾脏病患者（DKD组，4例）和糖耐量正常肾脏肿瘤手术者（正常对照组，4例）的肾脏组织。HE染色、过碘酸-希夫染色（PAS）和透射电镜观察肾脏组织病理学变化。取生长状态良好的人近端肾小管上皮（HK-2）细胞传代至培养板内，并分成如下8组：正常葡萄糖组（NG，5.6 mmol/L葡萄糖）、高糖组（HG，30.0 mmol/L葡萄糖）、抑制物组（正常葡萄糖+转染 miR-520c-3p抑制物）、抑制物对照组（正常葡萄糖+转染 miR-520c-3p抑制物阴性对照物）、模拟物组（高糖+转染 miR-520c-3p模拟物）、模拟物对照组（高糖+转染 miR-520c-3p模拟物阴性对照物）、模拟物+TXNIP共转染组（高糖+共转染 miR-520c-3p模拟物+TXNIP）、共转染阴性对照组（高糖+共转染 miR-520c-3p模拟物+TXNIP阴性对照物）。活细胞动态实时监测细胞活性，碘化丙啶（PI）染色检测细胞焦亡情况；免疫荧光染色、荧光原位杂交、实时定量PCR和Western blotting法检测 miR-520c-3p、硫氧还蛋白相互作用蛋白（TXNIP）和细胞焦亡分子NOD样受体蛋白3（NLRP3）、活化半胱氨酸蛋白酶-1（cl-caspase-1）、消皮素D（GSDMD）的mRNA和蛋白表达水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测细胞上清液白细胞介素-1β（IL-1β）含量；双荧光素酶报告基因实验明确 miR-520c-3p和 TXNIP之间的相互作用。两组间比较采用 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:与对照组相比，DKD组肾脏组织肾小管炎性细胞增多，伴随 miR-520c-3p表达水平下降， TXNIP表达升高（均 P<0.05）；肾小管特异性标志物水通道蛋白1（AQP1）与NLRP3和GSDMD焦亡蛋白共定位均增加。在HK-2细胞中，与NG组相比，HG组焦亡细胞增多，伴随 miR-520c-3p表达水平下降，TXNIP、NLRP3、cl-caspase-1、GSDMD的蛋白水平和细胞上清液IL-1β浓度升高（均 P<0.05）；与模拟物对照组相比，模拟物组中 miR-520c-3p表达量更高， TXNIP mRNA表达量更低，TXNIP、NLRP3、cl-caspase-1、GSDMD的蛋白水平和IL-1β浓度更低（均 P<0.01），TXNIP和NLRP3共表达定位减少（ P<0.05）；与抑制物对照组相比，抑制物组中 miR-520c-3p表达量更低， TXNIP mRNA表达量更高，TXNIP、NLRP3、cl-caspase-1、GSDMD的蛋白水平和IL-1β浓度更高（均 P<0.01）。与共转染阴性对照组相比，模拟物+TXNIP共转染组的TXNIP和NLRP3共表达定位增加，TXNIP、NLRP3、cl-caspase-1、GSDMD的蛋白水平更高（ P<0.05）。双荧光素酶报告基因实验表明， TXNIP是 miR-520c-3p直接作用靶点， miR-520c-3p通过靶向调节TXNIP表达，抑制高糖诱导的细胞焦亡。 结论:miR-520c-3p通过抑制TXNIP/NLRP3途径减轻高糖诱导的近端肾小管上皮细胞焦亡。

目的:探讨肝细胞核因子4α(HNF4A)对胃癌(GC)细胞自噬的调控作用及机制。方法:人GC细胞株AGS(CRL-1739)、HGC-27(CL-0107)购自美国典型培养物保藏中心，GC细胞株分为空载体对照组、HNF4A过表达组、随机干扰组、HNF4A干扰组，筛选稳定过表达/敲低HNF4A的亚克隆细胞株；采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)、蛋白质印迹法(Western blot)检测GC细胞中HNF4A的转录水平和蛋白表达变化；通过JASPAR分析寻找胃癌中HNF4A潜在靶基因；荧光成像检测细胞自噬通量变化；软琼脂克隆形成和基质胶侵袭检测细胞增殖及侵袭能力，组间比较采用 t检验。 结果:稳定过表达/敲低HNF4A的亚克隆细胞株，HNF4A组表达指标高于空载对照组(3.56±0.03比1.00±0.04， t＝25.62， P<0.05)，敲低HNF4A组表达指标低于随机干扰组(0.27±0.04比1.00±0.03， t＝21.53， P<0.05)。HNF4A过表达组自噬相关蛋白5(ATG5，2.54±0.11比1.00±0.03， t＝41.70， P<0.05)和自噬相关蛋白12(ATG12，3.14±0.03比1.00±0.02， t＝24.72， P<0.05)表达指标，克隆形成数指标(386.00±14.42比144.00±11.14， t＝23.00， P<0.05)和侵袭细胞数指标(391.70±9.50比144±11.14， t＝29.30， P<0.05)均高于空载对照组；相反，HNF4A干扰组ATG5(0.28±0.05比1.00±0.02， t＝20.32， P<0.05)和ATG12(0.31±0.07比1.00±0.05， t＝18.93， P<0.05)表达指标，克隆形成数指标(50.00±5.57比136.00±10.15， t＝12.87， P<0.05)和侵袭细胞数指标(45.00±11.00比150.30±13.58， t＝10.44， P<0.05)均低于随机干扰组。 结论:转录因子HNF4A调控自噬相关基因ATG5和ATG12表达，促进胃癌细胞自噬。

目的:分析浙江省绍兴市新确证人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1，HIV-1)感染者传播关系的分子网络特征，为疫情流行趋势和防治提供依据。方法:纳入2018年8月至2019年12月绍兴市新确证未经抗病毒治疗的423份HIV-1感染/艾滋病病例血液样本，获得375份样本序列，采用反转录聚合酶链反应和巢式聚合酶链反应扩增HIV-1的 pol基因，采用MEGA 6.0软件构建系统进化树分析亚型，并采用HyPhy软件和Cytoscape 3.7.2。生成不同基因距离的分子网络，通过美国斯坦福大学HIV耐药数据库在线软件工具分析耐药突变位点。 结果:375份样本序列中发现8种亚型，优势亚型为流行重组型(circulating recombinant form, CRF)07_BC 215份(57.33%)，CRF01_AE 103份(27.47%)，其他包括CRF08_BC、CRF85_BC、CRF55_01B、B、C和CRF01_AE/B亚型。在基因距离为1.50%时，共形成24个分子簇，194条序列入网，入网率为51.73%。在分子簇最多的0.75%基因距离时，共形成30个分子簇，129条序列入网，入网率为34.40%，35例以老年人为主的病例聚集成CL1簇。42份样本存在监测性耐药突变(surveillance drug resistance mutation, SDRM)，耐药传播率为11.20%(42/375)，其中非核苷类反转录酶抑制剂耐药突变38例，分别为 K103 N(32/375，8.53%)、 K103 S(4/375，1.07%)、 Y188 L(1/375，0.27%)和 G190 A(1/375，0.27%)，蛋白酶抑制剂耐药突变4例，分别为 M46 I(3/375，0.80%)和 V82 A(1/375，0.27%)。分子簇C2序列携带高比例耐药突变(94.29%，33/35)。 结论:绍兴市HIV-1亚型丰富多样，CRF07_BC亚型传播迅速；在0.75%基因距离仍聚集的CL1簇老年病例亟待干预，防止该耐药毒株的进一步快速传播。

目的:分析Ⅰ型Bartter综合征患儿SLC12A1基因变异的功能特性，探索分子伴侣类药物4-苯丁酸钠对SLC12A1基因变异体的纠正作用。方法:回顾性分析2017至2018年南京医科大学附属儿童医院收治的3例Ⅰ型Bartter综合征患儿的临床表现、生长发育情况、实验室检查结果及SLC12A1基因变异情况等，在人胚胎肾293细胞（HEK293）中分别过表达野生型和变异型SLC12A1基因，运用蛋白免疫印迹法检测各组Na +-K +-2Cl -共同转运体（NKCC2）的表达水平，免疫荧光技术检测NKCC2的亚细胞定位，同时用分子伴侣类药物4-苯丁酸钠处理转染SLC12A1基因变异体的细胞，运用非配对 t检验比较处理前后药物对变异体的纠正作用。 结果:3例患儿中男2例、女1例，分别为3.0、4.0、1.2岁。均表现为早产，母亲孕期羊水多，生后出现低氯性碱中毒，伴低钾、低钠血症等。一代测序结果显示3例患儿为SLC12A1基因纯合或复合杂合型变异。在HEK293细胞中发现3种变异体NKCC2（p.L463S、p.L479V和p.507-510del）膜蛋白表达均低于野生型（0.718±0.039、0.287±0.081、0.025±0.156比1.001±0.028， t=5.92、8.35、30.49，均 P<0.01），p.L479V和p.507-510del总蛋白表达均低于野生型（0.630±0.032、0.043±0.003比1.000±0.111， t=3.21、8.65，均 P<0.05）。4-苯丁酸钠处理组p.L463S、p.L479V成熟型蛋白表达水平均高于未处理组（0.459±0.018比1.123±0.024、0.053±0.012比1.256±0.037， t=2.75、18.35，均 P<0.05）。免疫荧光实验示p.L479V和p.507-510del 2种变异体滞留于细胞质内，且4-PBA可以促进p.L479V变异体转运到细胞膜上。 结论:SLC12A1基因3种变异体导致蛋白表达或定位异常，4-苯丁酸钠可在一定程度上纠正Ⅰ型Bartter综合征患儿SLC12A1基因变异体的表达和定位缺陷，可能为临床治疗Ⅰ型Bartter综合征提供新的治疗靶点。

目的:评价 99Tc m-焦膦酸盐(PYP)显像在心肌转甲状腺素型淀粉样变(ATTR)中的诊断价值。 方法:前瞻性纳入自2018年12月至2019年7月因疑诊心肌淀粉样变于北京协和医院行 99Tc m-PYP显像的17例[男9例，女8例，年龄(53.4±13.0)岁]患者，利用视觉评分及半定量方法[心脏/对侧比值(H/CL)]，对照心肌或其他部位活组织检查(简称活检)结果及基因检测结果，判断该综合分析方法对心肌ATTR的诊断价值。 结果:17例患者中有5例视觉评分为2～3分，H/CL≥1.5，诊断为阳性，后续活检或基因检测为阳性，确诊为ATTR；4例患者基因检测为阳性但无心脏症状，视觉评分0～1分，H/CL<1.5，考虑患者年龄较轻，体内淀粉样物质沉积尚未引起脏器病变；另有8例显像阴性患者视觉评分为0～1分，H/CL<1.5，其中2例后续穿刺活检证实为轻链型淀粉样变(AL)，3例临床诊断为AL，余3例基本除外ATTR。 99Tc m-PYP显像诊断ATTR心脏受累的准确性为11/11。 结论:99Tc m-PYP显像有助于无创地诊断心肌ATTR。

目的:探讨 99Tc m-焦膦酸盐(PYP)不同采集方法在心脏淀粉样变(CA)诊断与病理分型中的应用。 方法:回顾性分析2018年12月至2019年12月间北京协和医院31例临床怀疑CA的患者资料，其中男22例、女9例，年龄21~81(57.2±13.4)岁。患者注射 99Tc m-PYP后不同时间行平面显像[早期显像(注射后1 h)、延迟显像(注射后2~3 h)]和断层显像(注射后1 h)。以临床诊断为标准，分别采用视觉评分法(≥2分为阳性)和半定量法[心脏与对侧肺摄取比值(H/CL)≥1.5诊断为阳性]分析 99Tc m-PYP不同采集方法获得的CA及非CA患者的影像学特点。采用单因素方差分析和Bonferroni检验分析数据。 结果:根据临床诊断，CA组15例[转甲状腺素蛋白相关CA(ATTR-CA)5例、轻链型CA(AL-CA)10例]，非CA组16例。5例ATTR-CA患者双时相显像和SPECT/CT显像均为阳性；10例AL-CA患者中3例早期显像阳性，延迟显像和SPECT/CT显像阴性；16例非CA患者双时相显像和SPECT/CT显像均为阴性。延迟期平面显像及断层显像灵敏度均为5/5，特异性均为10/10，阳性预测值均为5/5，阴性预测值均为10/10，准确性均为15/15。31例患者中，转甲状腺素蛋白相关(TTR)突变基因患者16例，其中4例为家族性突变型(ATTRv)，表现为 99Tc m-PYP显像阳性；12例诊断为非CA，表现为显像阴性。ATTR-CA组与AL-CA组早期显像H/CL(2.11±0.24与1.31±0.07)与延迟显像H/CL(2.02±0.19与1.30±0.05)差异均有统计学意义( F值：75.41和87.15，Bonferroni检验，均 P<0.01)。 结论:早期平面显像对CA分型存在误诊现象，延迟期平面显像及断层显像结果一致性好，可准确诊断ATTR-CA。 99Tc m-PYP显像有助于发现TTR突变基因患者是否合并CA。

目的 基于高通量测序(next generation sequencing,NGS)技术分析高血压大鼠伴或不伴牙周炎状态下牙龈组织中的差异mRNA,旨在为高血压伴牙周炎的防治提供实验基础.方法 获得动物实验伦理委员会批准,通过给予含8％(w/w)NaCl的高盐饲料建立高血压大鼠模型,使用3-0的无菌丝线结扎大鼠下颌第一磨牙建立牙周炎大鼠模型,分为正常对照组(N组)、高血压组(H组)和高血压伴牙周炎组(PH组),测量血压、心率、牙槽骨吸收量和牙槽骨中破骨细胞数量;取3组牙龈组织进行NGS,分析组间差异基因表达;H组和PH组间所有差异基因行基因功能(gene ontology,GO)富集分析,行京都基因与基因百科全书(Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes,KEGG)富集分析,行蛋白相互作用网络(protein-protein interaction,PPI)筛选关键基因;免疫组织化学验证关键通路中的关键基因在各组的表达,酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbent as-say,ELISA)分析关键基因在各组全身循环中的表达.结果 实验终点(第11周)时,H组和PH组的血压均高于N组(P<0.001),但PH组的血压与H组比较无统计学意义,3组心率无统计学差异.Micro-CT显示PH组下颌第一磨牙的釉牙骨质界(cemento-enamel junction,CEJ)到牙槽骨嵴顶(alveolar bone crest,ABC)距离较N组和H组增加,牙槽骨中破骨细胞数量多于N组和H组(均P<0.016 7).3组的共同差异基因为0个,H组和PH组牙龈组织共 235 个差异基因,相较于H组,在PH组有P-选择素(P-selectin,SELP)、角蛋白 16(keratin 16,KRT16)和S100钙结合蛋白A9(S100 calcium binding protein A9,S100A9)等137个上调基因,以及FK506结合蛋白 5(FK506 binding protein 5,FKBP5)、介体复合体亚基 22(mediator complex subunit 22,MED22)和含锌指和BTB域16(zinc finger and BTB domain containing 16,ZBTB16)等98个下调基因.H组和PH组差异基因的GO分析结果提示,主要富集的生物学过程(biological processes,BP)为白细胞迁移,主要的细胞成分(cellular compo-nent,CC)为胶原三聚体复合物,主要的分子功能(molecular functions,MF)为细胞外基质结构的构建;H组和PH组差异基因的KEGG信号通路主要富集于细胞因子之间受体相互作用、白细胞介素-17(interleukin-17,IL-17)和肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)信号通路中.通过PPI分析筛选出4个作用于高血压状态下牙周炎的关键基因,包括白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、基质金属蛋白酶9(matrix metallopro-teinase-9,MMP-9)、Ⅰ型胶原α1(collagen type Ⅰ alpha 1,COL1α1)、趋化因子配体 1(chemokine ligand 1,CX-CL1).与N组和H组比较,IL-1β和TNF-α在PH组牙龈组织及全身血清中的表达均上调(P<0.016 7).结论 高血压伴牙周炎或不伴牙周炎时的差异mRNA为IL-1β和MMP-9以及差异信号通路为IL-17和TNF-α信号通路,为今后进一步研究高血压伴牙周炎的分子调控机制提供了实验基础.