旨在探讨茱萸丸对动脉粥样硬化(AS)的影响及可能的作用机制.采用高脂饲料喂养诱导小鼠AS模型,造模周期为12周.造模成功的50只载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠按照随机数字表法分为5组,即模型组,茱萸丸低、中、高剂量组,阿托伐他汀钙组,每组10只;C57BL/6J小鼠10只作为空白组.空白组及模型组给予等体积无菌蒸馏水灌胃,茱萸丸低、中、高剂量组给予130.54、261.08、522.16 mg·kg-1灌胃,阿托伐他汀钙组给予10.40 mg·kg-1灌胃,每日1次,共12周.给药结束后,采用苏木素-伊红(HE)染色观察小鼠主动脉、肝脏、附睾脂肪的病理学变化,并计算主动脉斑块面积占比、附睾脂肪面积、非酒精性脂肪肝活动性积分(NAS);油红O染色、Masson染色观察主动脉脂质及胶原纤维沉积,并计算主动脉红染脂质面积占比、主动脉胶原沉积面积占比;比色法检测血清超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、铁离子水平;免疫荧光法检测主动脉环氧合酶2(COX2)、铁蛋白重链1(FTH1)、胱氨酸/谷氨酸逆向转运蛋白溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)蛋白水平;免疫组化法检测主动脉肿瘤蛋白53(p53)水平;蛋白免疫印迹法检测主动脉p53、SLC7A11蛋白表达;实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time PCR)检测小鼠主动脉p53、SLC7A11、GPX4、FTH1、前列腺素G/H合酶2(PTGS2)、还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸氧化酶1(NOX1)mRNA表达水平.结果显示,与空白组比较,模型组小鼠主动脉斑块面积明显扩大,胶原纤维沉积增加,肝脏脂质沉积增加,脂滴变多,附睾脂肪细胞体积扩大;血清中铁离子、MDA含量升高,SOD、GSH-Px水平降低;p53、COX2蛋白表达升高;主动脉FTH1、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达降低;PTGS2、NOX1 mRNA表达升高.与模型组比较,茱萸丸低、中、高剂量组及阿托伐他汀钙组小鼠主动脉斑块面积明显缩小,胶原沉积减少,肝脏脂质沉积减少,脂滴变少,附睾脂肪细胞体积缩小;血清中铁离子、MDA含量降低,SOD、GSH-Px水平升高;p53、COX2蛋白表达降低;主动脉FTH1、SLC7A11、GPX4蛋白及mRNA表达升高;PTGS2、NOX1 mRNA表达降低.综上所述,茱萸丸对小鼠AS主动脉斑块具有较好的治疗作用,其机制可能与调控p53/SLC7A11信号通路介导的氧化损伤及抑制细胞铁死亡有关.

目的:探讨Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)在小鼠腹主动脉瘤(AAA)发生发展的作用。方法:使用8周龄雄性敲除Apoe小鼠皮下埋泵构建血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的腹主动脉瘤模型。提取并鉴定健康内皮细胞来源外泌体(VECs-exos)及Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源外泌体(VECs-AngⅡ exos)，使用收集的外泌体(20 μg/ml)处理小鼠原代血管平滑肌细胞(VSMCs)。VECs-exos及VECs-AngⅡ exos每周尾静脉注射至腹主动脉瘤模型小鼠体内，4周后获取小鼠动脉瘤组织行苏木精-伊红(HE)、EVG和马松(Masson)染色观察腹主动脉形态改变、弹性纤维断裂和胶原沉积。蛋白质印迹法(Western blot)检测小鼠动脉组织收缩型标志物α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、SM22α和CNN表达。采用 t检验分析数据统计学差异。 结果:小鼠实验组动脉瘤发生率[(80.670±4.842)%， t＝16.66， P<0.01]、最大主动脉直径[(0.554 3±0.096 2) mm， t＝5.759， P<0.01)及主动脉质量比[(0.560 0±0.106 0) mg/g， t＝5.285， P<0.01)高于对照组。VECs-AngⅡ exos刺激VSMCs后α-SMA(0.608 4±0.056 6， t＝10.76， P<0.01)、SM22α(0.465 6±0.076 6， t＝6.082， P<0.01)、CNN(0.490 8±0.161 5， t＝3.039， P<0.01)表达低于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠动脉瘤发生率[(48.330±6.839)%， t＝7.067， P<0.01]，最大主动脉直径[(0.527 1±0.138 6) mm， t＝3.803， P<0.01]及主动脉质量比[(0.557 1±0.138 9) mg/g， t＝4.012， P<0.01]高于VECs-exos组。尾静脉注射VECs-AngⅡ exos组小鼠主动脉组织中α-SMA(0.719 1±0.141 0， t＝5.101， P<0.01)、SM22α(0.578 2±0.101 8， t＝5.677， P<0.01)、CNN(－0.520 2±0.068 8， t＝7.564， P<0.01)表达低于VECs-exos组。 结论:Ang Ⅱ诱导内皮细胞来源的外泌体介导血管平滑肌细胞表型转换参与腹主动脉瘤发生发展。

目的:建立稳定可靠的小鼠动脉粥样硬化(AS)模型。方法:采用载脂蛋白E(ApoE) －/－小鼠复合高脂饮食诱导小鼠AS模型。随机分成4组：C57BL/6J普通饲料组(C57＋nd)，C57BL/6J高脂饲料组(C57＋hfd)，ApoE －/－普通饲料组(ApoE －/－＋nd)和ApoE －/－高脂饲料组(ApoE －/－＋hfd)，喂养16周后通过一般情况、血脂水平、油红O染色和主动脉病理切片苏木精-伊红(HE)染色等检测，鉴定小鼠AS模型。所有数据均以均值±标准差( Mean± SD)表示，各组间均数比较采用One-way ANOVA分析。 结果:高脂饮食ApoE －/－小鼠血浆中的胆固醇[(20.09±1.02) mmol/L]和低密度脂蛋白胆固醇[(6.84±0.65) mmol/L]水平显著高于普通饮食的C57BL/6J小鼠[总胆固醇(TC)：(2.04±0.07) mmol/L，低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)：(0.25±0.01) mmol/L， F＝190.543、82.795, P<0.01]，差异有统计学意义；油红O染色显示主动脉斑块面积占整体主动脉面积[(22.09±3.49)%]，显著高于普通饮食ApoE －/－小鼠组[(1.46±0.96)%， F＝118.558， P<0.01]，差异有统计学意义；主动脉窦切片显示斑块面积约为普通饮食ApoE －/－小鼠组的2倍，主动脉病理切片HE染色呈现典型的AS斑块。 结论:ApoE －/－小鼠经高脂饮食诱导可成功建立AS模型，并建立基因鉴定、一般情况分析、血脂水平分析、病理学检测一整套基本的模型鉴定流程，为AS相关性疾病的研究提供较为理想的体内研究动物模型。

目的:探讨核转录因子-κB(NF-κB)/核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(NLRP3)通路对动脉粥样硬化(AS)模型小鼠脂质沉积及自噬相关蛋白表达的影响。方法:以10只6周龄雄性C57BL/6小鼠为对照组，并将20只同龄雄性载脂蛋白E基因敲除( ApoE-/-)小鼠按随机数字表法分为AS组与硼替佐米(BTZ)组，每组10只。予AS组和BTZ组小鼠高脂饮食喂养8周后，BTZ组小鼠给予50 μg/kg BTZ腹腔注射(2次/周，持续4周)，AS组小鼠注射等量生理盐水。实验过程中持续观察各组小鼠的一般情况，于干预12周后测量其体质量及检测血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)和高密度脂蛋白(HDL)含量，并予HE染色和油红O染色观察小鼠主动脉根部组织病理形态及脂质沉积状况，予免疫组化染色检测小鼠主动脉根部组织中NF-κB、NLRP3的阳性表达，予Western blotting实验检测小鼠主动脉根部组织中自噬相关蛋白Beclin-1、P62和Atg12蛋白的表达量。 结果:干预12周后，AS组和BTZ组小鼠的体质量，TC、LDL含量，病变程度及脂质沉积占比，NF-κB、NLRP3阳性表达及P62蛋白表达量均明显高于对照组，而BTZ组小鼠这些指标均明显低于AS组，差异均有统计学意义( P<0.05)；AS组和BTZ组小鼠的HDL含量、Beclin-1和Atg12蛋白表达量均明显低于对照组，而BTZ组小鼠这些指标均明显高于AS组，差异均有统计学意义( P<0.05)。 结论:抑制NF-κB/NLRP3通路可通过调节血脂含量以减少脂质沉积，并介导自噬相关蛋白表达以促进自噬发生，从而起到抑制AS进程的作用。

目的:采用基因敲除法评价海马载脂蛋白E(ApoE)在年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能中的作用。方法:幼年(6日龄)及成年(60日龄)雌性野生型(WT)C57BL/6J小鼠72只、ApoE基因敲除型(ApoE-KO)C57BL/6J小鼠56只，幼年小鼠体重3～5 g，成年小鼠体重20～25 g。采用随机数字表法将WT小鼠和ApoE-KO小鼠分别分为4组(WT小鼠每组18只，ApoE-KO小鼠每组14只)：幼年对照组(P6＋C组)、幼年七氟烷组(P6＋S组)、成年对照组(P60＋C组)及成年七氟烷组(P60＋S组)。七氟烷组每天吸入3%七氟烷及60% O 2 2 h，连续3 d，对照组则置于相同环境，每天吸入60% O 2 2 h，连续3 d。于七氟烷麻醉结束当天(出生后8或62 d)每组随机选取4只小鼠，采用ELISA法检测海马IL-1β、IL-6和TNF-α含量；WT小鼠各组随机取4只，采用Western blot法检测海马完整长度ApoE和ApoE碎片段的表达水平；每组随机取10只小鼠进行标准化饲养，于七氟烷麻醉后22 d(出生后30或84 d)进行条件恐惧实验。 结果:WT小鼠：与P6＋C组比较，P6＋S组海马TNF-α、IL-6和IL-1β含量升高，完整长度ApoE和ApoE碎片段表达上调，僵直时间缩短( P<0.05)，P60＋C组与P60＋S组上述指标比较差异无统计学意义( P>0.05)；ApoE-KO小鼠：P6＋C组与P6＋S组比较、P60＋C组与P60＋S组比较海马TNF-α、IL-6、IL-1β含量和僵直时间差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:年龄因素影响多次七氟烷麻醉小鼠远期认知功能障碍的机制与上调海马ApoE表达，诱发神经炎性反应有关。

目的:探究小鼠冠状动脉斑块内巨噬细胞浸润程度与其下游心肌灌注的关系。方法:实验组采用ApoE基因敲除联合高脂喂养的方法建立冠状动脉斑块小鼠模型20只，对照组选用性别和年龄相匹配的具有相同遗传背景的C57BL/6小鼠20只。对所有实验动物行心肌造影超声心动图联合腺苷负荷试验测量静息及负荷状态下小鼠左心室心肌前间隔和后壁的A值、β值以及A×β值。采用酶联免疫吸附试验方法检测血清白细胞介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平，通过病理免疫组化染色评估冠状动脉斑块内巨噬细胞浸润程度，并与上述指标做相关性分析。结果:对照组与实验组的心率、左心室结构参数比较，差异无统计学意义(均 P>0.05)。实验组的左心室射血分数较对照组显著降低( P＝0.021)，而体重、血清三酰甘油、总胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、IL-6及TNF-α水平较对照组显著升高(均 P<0.05)。腺苷负荷状态下，实验组左心室心肌前间隔和后壁的A值、β值、A×β值显著低于对照组(均 P<0.05)。在实验组中，左冠状动脉主干斑块内巨噬细胞浸润率与血清TNF-α水平呈显著正相关( r＝0.63， P＝0.003)，而与腺苷负荷状态下左心室前间隔及后壁心肌造影A×β值呈显著负相关( r＝－0.74， P<0.001； r＝－0.72， P<0.001)。 结论:ApoE基因敲除小鼠冠状动脉粥样硬化模型的下游心肌灌注与其冠状动脉斑块中巨噬细胞的浸润程度有关，巨噬细胞可能通过释放炎症介质TNF-α发挥作用。

目的:探讨IKKε对小鼠腹主动脉瘤形成过程中血管平滑肌细胞自噬的影响。方法:将载脂蛋白E敲除(ApoE -/-)的小鼠与载脂蛋白E和IKKε双敲(ApoE -/-IKKε -/-)的小鼠用生理盐水(saline)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)分别刺激28天，检测小鼠的代谢水平以及用超声心动图检测小鼠的动脉直径，应用HE染色检测动脉瘤的病理性变化，马松染色检测小鼠动脉的纤维化水平，荧光法检测活性氧的产生和释放水平，免疫组化和Western blot检测自噬相关因子的表达变化情况。 结果:ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠与ApoE -/-单敲小鼠代谢水平差异无统计学意义，ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠动脉直径显著小于ApoE -/-单敲小鼠。ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠纤维胶原化水平显著低于ApoE -/-单敲小鼠，且ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠中活性氧的产生水平明显低于ApoE -/-单敲小鼠。免疫组化与Western blot结果均发现，ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠中LC3B与Beclin-1的表达水平均较ApoE -/-单敲小鼠有明显的降低。 结论:小鼠IKKε基因的敲除能够明显抑制血管平滑肌细胞自噬，从而减少小鼠腹主动脉瘤的形成。

目的:探索钠-葡萄糖共转运蛋白-2抑制剂卡格列净防治动脉粥样硬化（AS）的可能机制。方法:使用西方饮食饲养ApoE -/-小鼠并随机分为模型组（ n=10）和卡格列净组（ n=10）；普通饲料喂养C57BL/6 J小鼠作为对照组（ n=10）。给予卡格列净组小鼠卡格列净每日灌胃。干预周期为14周。留取心脏组织行主动脉根部HE染色和油红O染色以评价造模情况及AS损伤程度；PCR法检测一氧化氮合酶的基因表达。采用RNA-seq和液相-质谱法分别进行小鼠肝脏转录组学分析和氨基酸靶向检测。 结果:主动脉根部HE染色和油红O染色显示西方饮食饲养ApoE -/-小鼠14周可成功构建AS模型；卡格列净可减少小鼠主动脉根部斑块面积（ P=0.012）。肝脏转录组学分析提示卡格列净对ApoE -/-小鼠氨基酸代谢有影响，尤其是精氨酸生物合成途径。氨基酸靶向检测显示，卡格列净可减少肝脏L-丝氨酸、L-天冬氨酸、酪氨酸、L-羟脯氨酸和L-瓜氨酸含量，且增加了L-精氨酸含量（ P均<0.05）；与模型组比较，卡格列净组血清精氨酸、一氧化氮水平及主动脉一氧化氮合酶mRNA相对表达量均较高（ P均<0.05）。 结论:卡格列净可调节动脉粥样硬化小鼠氨基酸代谢，减少生糖氨基酸，并促进精氨酸的生物合成。

目的:通过观察脂多糖(LPS)诱导的Toll样受体4(TLR4)对载脂蛋白E基因敲除(ApoE -/-)小鼠动脉粥样硬化斑块内质网应激通路蛋白表达水平的影响，探讨内质网应激对小鼠动脉粥样硬化斑块稳定性的影响。 方法:2015年10月至2016年2月选择ApoE -/-小鼠24只，高脂喂养10周后数字抽签随机分为对照组、LPS组、TLR4的特异性抑制剂TAK(TAK组)，各8只。干预10周后取眼球血检测总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)。处死小鼠留取颈动脉和主动脉标本。免疫组化法检测颈动脉斑块巨噬细胞(MOMA-2)、平滑肌肌动蛋白(α-actin)、TLR4、白细胞介素1β(IL-1β)、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNFα)及κ基因结合核因子(NFκB)的表达。免疫印迹法检测PKR样真核起始因子2α激酶(PERK)、C/EBP同源蛋白(CHOP)、糖调节蛋白78(GRP78)的水平。 结果:LPS组小鼠与对照组和TAK组小鼠比较，TC(25.0±2.3)mmol/L比(20.2±1.6)mmol/L、(20.8±2.6)mmol/L、TG(1.3±0.1)mmol/L比(1.3±0.1)mmol/L、(1.0±0.1)mmol/L、ox-LDL(17.4±1.3)mmol/L比(15.8±1.6)mmol/L、(12.1±1.1)mmol/L水平升高( P<0.05)；斑块形态学及病理学比较，LPS组小鼠动脉粥样硬化斑块范围大，巨噬细胞含量增多( P<0.05)，平滑肌细胞含量减少( P<0.05)，斑块TLR4、IL-1β、IL-6、TNFα及NFκB的表达水平较其他两组增加( P<0.05)；PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加( P<0.05)。与对照组比较，TAK组PERK、CHOP、GRP78的表达水平减少( P<0.05)。LPS组TLR4，质网应激通路蛋白PERK、CHOP、GRP78的表达水平增加。 结论:LPS诱导的TLR4可上调内质网应激通路蛋白的表达，且引起内质网应激下游炎性细胞因子分泌增加，加重脂质代谢紊乱，增加动脉硬化斑块的不稳定性。

目的:探讨髓源性生长因子（MYDGF）对载脂蛋白E基因敲除（ApoE -/-）小鼠动脉粥样硬化的影响。 方法:西方饮食喂养MYDGF +/+ApoE -/-小鼠（AKO）和MYDGF -/-ApoE -/-小鼠（DKO）12周，根据是否予腺相关病毒（AAV）-MYDGF载体干预，将AKO和DKO小鼠分为如下6组：AKO组、DKO组、AKO-绿色荧光蛋白（GFP）组、DKO-GFP组、AKO-MYDGF组和DKO-MYDGF组，每组8只。观察MYDGF对AKO及 DKO小鼠血管内皮舒张功能、斑块面积及炎症的影响。两组间比较采用 t检验。 结果:干预12周后，与AKO组相比，DKO组小鼠内皮依赖性血管舒张功能下降（ t=12.26， P<0.05），斑块表面积及横截面积均增加［（13.56±3.10）%比（42.01±3.29）%， t=17.80， P<0.01；（7.46±1.86）%比（21.54±2.18）%， t=13.87， P<0.01］；小鼠主动脉炎性浸润［巨噬细胞（CD68）、T淋巴细胞（CD3）］面积、血清炎性因子（肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1β和白细胞介素-6）水平增高（ t=7.51~51.52，均 P<0.01）；体重、甘油三酯、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇及游离脂肪酸水平增加（ t=2.42~9.29，均 P<0.05）, 高密度脂蛋白胆固醇水平降低（ t=9.865， P<0.01）。相反，补充MYDGF后，与AKO-GFP组和DKO-GPF组小鼠相比，AKO-MYDGF组和DKO-MYDGF组小鼠内皮依赖性血管舒张功能明显改善（ t=4.38~5.17，均 P<0.05）；斑块面积明显减少［表面积：AKO-GFP组比AKO-MYDGF组为（15.22±1.47）%比（6.85±1.37）%、DKO-GFP组比DKO-MYDGF组为（43.16±2.73）%比（17.93±2.04）%；横截面积：AKO-GFP组比AKO-MYDGF组为（10.42±1.24）%比（6.31±0.72）%、DKO-GFP组比DKO-MYDGF组为（19.33±1.04）%比（13.24±1.14）%， t=8.10~20.97，均 P<0.01］；炎性浸润及炎症因子水平显著降低（ t=6.29~40.79， P<0.01），代谢紊乱得到改善（ t=2.16~4.75， P<0.05）。 结论:MYDGF可改善AopE -/-小鼠血管内皮功能，减少斑块面积，降低炎性浸润及炎症因子水平，改善机体代谢。MYDGF可能通过降低炎症反应改善AopE小鼠动脉粥样硬化的发生与发展。