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IKKε增加血管平滑肌细胞自噬促进小鼠腹主动脉瘤形成作用研究
编辑人员丨1天前
目的:探讨IKKε对小鼠腹主动脉瘤形成过程中血管平滑肌细胞自噬的影响。方法:将载脂蛋白E敲除(ApoE -/-)的小鼠与载脂蛋白E和IKKε双敲(ApoE -/-IKKε -/-)的小鼠用生理盐水(saline)和血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)分别刺激28天,检测小鼠的代谢水平以及用超声心动图检测小鼠的动脉直径,应用HE染色检测动脉瘤的病理性变化,马松染色检测小鼠动脉的纤维化水平,荧光法检测活性氧的产生和释放水平,免疫组化和Western blot检测自噬相关因子的表达变化情况。 结果:ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠与ApoE -/-单敲小鼠代谢水平差异无统计学意义,ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠动脉直径显著小于ApoE -/-单敲小鼠。ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠纤维胶原化水平显著低于ApoE -/-单敲小鼠,且ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠中活性氧的产生水平明显低于ApoE -/-单敲小鼠。免疫组化与Western blot结果均发现,ApoE -/-IKKε -/-双敲小鼠中LC3B与Beclin-1的表达水平均较ApoE -/-单敲小鼠有明显的降低。 结论:小鼠IKKε基因的敲除能够明显抑制血管平滑肌细胞自噬,从而减少小鼠腹主动脉瘤的形成。
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编辑人员丨1天前
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新型冠状病毒PLpro负调控DDX3诱导的β干扰素抗病毒免疫通路
编辑人员丨2024/7/20
目的 发现严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)木瓜样蛋白酶(PLpro)的宿主互作分子,探索其生物学意义.方法 邻近蛋白标记结合质谱分析筛选宿主互作分子DEAD-box解旋酶3(DDX3);免疫荧光法分析PLpro与DDX3的胞内共定位;免疫共沉淀法分析PLpro与DDX3的相互作用,以及PLpro对DDX3与IκB激酶ε(IKKe)和TANK结合激酶1(TBK1)、DDX3与线粒体抗病毒信号蛋白(MAVS)互作的影响;荧光素酶报告基因法检测PLpro对β干扰素(IFN-β)通路的影响和对底物的酶切效率.结果 DDX3能够与PLpro发生细胞内共定位和相互作用;PLpro可能抑制DDX3-MAVS复合体形成,抑制DDX3-IKKε-TBK1之间的相互作用,负调控Ⅰ型干扰素通路;DDX3过表达情况下,PLpro/PLP-TM对底物位点的切割效率显著升高,而DDX3表达降低时,切割效率则显著降低.结论 DDX3可能是PLpro的宿主相互作用分子之一;PLpro负调控DDX3活化的IFN-β表达,为病毒复制提供有利的免疫环境,提升蛋白酶切割活性,共同促进病毒复制.
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编辑人员丨2024/7/20
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核因子-κB激酶抑制剂ε在小鼠主动脉夹层模型中的作用
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨核因子-κB激酶抑制剂ε(IKKε)在血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导的小鼠主动脉夹层形成过程中的作用.方法 选用C57BL/6品系载脂蛋白E(ApoE)基因敲除(ApoE-/-)小鼠和ApoE和IKKε基因双敲除(ApoE-/-IKKε-/-)两组小鼠,ApoE-/-IKKε-/-组皮下泵入AngⅡ(DA组)和生理盐水(DN组)为实验组,ApoE-/-组皮下泵入AngⅡ(AA组)和生理盐水(AN组)为对照组.分别记录各组小鼠的血压变化,统计各组小鼠死亡率并观察各组小鼠血管的形态学改变.结果 AN、DN组小鼠血压值无明显异常改变,且小鼠无死亡.AN、DN组小鼠主动脉血管壁结构完整,未见异常的病理学改变.AA、DA组小鼠血压升高,且与DA组比较,AA组血压升高更明显(P=0.000);AA组小鼠无死亡,DA组4只小鼠于1周内死亡(P =0.000);AA、DA组小鼠血管壁均呈现不同程度的病理学改变,但与AA组比较,DA组小鼠血管壁明显增厚,中膜层平滑肌缺失增加(DA组小鼠血管壁肌肉缺失程度比AA组小鼠血管壁肌肉缺失程度:4.50±1.12比1.50 ±0.93,P=0.000),细胞外基质降解程度严重(DA组弹力蛋白降解程度比AA组弹力蛋白降解程度:2.25±0.66比0.63±0.74,P=0.000).结论 在AngⅡ诱导小鼠主动脉夹层模型中,IKKε的缺失促进实验小鼠主动脉夹层的形成.
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编辑人员丨2023/8/6
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伪狂犬病毒UL54蛋白与IRF3互作抑制IFN-β启动子活性
编辑人员丨2023/8/6
研究伪狂犬病毒UL54蛋白对I型干扰素表达的作用及机制, 为阐明伪狂犬病毒致病机制提供基础.构建表达UL54的真核质粒, 采用双荧光素酶报告基因检测系统, 检测UL54对IFN-β及其信号通路分子IRF3和NF-κB启动子活性的影响, 并测定UL54对RIGI、TBK1、IRF3和IKKε诱导IFN-β表达的影响;免疫共沉淀方法检测UL54与IRF3的相互作用.构建UL54截短基因表达载体, 用双荧光素酶报告基因检测系统和ELISA方法检测UL54截短基因对IFN-β启动子活性的影响.构建了pCDH-UL54和8个UL54截短基因真核表达载体.UL54显著抑制IFN-β和IRF3启动子活性, 对RIGI、TBK1、IRF3、IKKε介导的IFN-β有抑制作用, 免疫共沉淀方法检测证明其与IRF3存在互作.UL54的1146aa、74361aa和84361aa截短体仍抑制IFN-β启动子活性, 但第94aa后的其他截短体基因均丧失该抑制作用.PRV UL54通过与IRF3互作抑制IFN-β启动子活性, UL54第8494位氨基酸是其抑制IFN-β表达的关键功能区域.
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编辑人员丨2023/8/6
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IKKε在糖尿病大鼠肝脏的表达及利拉鲁肽对其干预作用的研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察糖尿病大鼠肝脏组织IKKε、核因子κB(NF-κB)、磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)的表达及利拉鲁肽对其干预的作用.方法 采用高脂饮食联合STZ诱导建立T2DM大鼠模型,将成模大鼠随机分为糖尿病组(T2DM)、低剂量利拉鲁肽组(LL)、高剂量利拉鲁肽组(HL),另设正常对照组(NC),每组各10只.Western blot检测肝脏组织IKKε、NF-κB、p-Akt的蛋白表达,RT-PCR检测IKKε、NF-κB的mRNA表达.结果 T2DM组FPG、FIns、HOMA-IR、TG、白介素6(IL-6)、丙二醛(MDA)较NC组、LL组、HL组高(P<0.05或P<0.01),HL组FPG、FIns、IL-6、MDA、HOMA-IR较LL组低(P<0.05).与NC组比较,HL组、LL组、T2DM组IKKε、NF-κB的蛋白表达依次升高(P<0.05或P<0.01),p-Akt的蛋白表达依次降低[(0.762±0.112)vs(0.598±0.085)vs(0.476±0.112)vs(0.342±0.097),P<0.05或P<0.01].结论 肝脏组织IKKε表达升高可能参与了糖尿病的发生,利拉鲁肽呈浓度依赖下调肝脏组织IKKε的表达,可能是其改善IR、糖代谢的部分机制.
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编辑人员丨2023/8/6
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基于TLR4-TBK1-IKKε信号通路探讨栀子苷对果糖代谢综合征大鼠肾保护作用机制
编辑人员丨2023/8/6
目的 探讨栀子苷对果糖诱导的代谢综合征大鼠肾保护作用及其可能机制.方法 50只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、栀子苷组(30、60mg/kg)和别嘌呤醇组(10mg/kg),每组10只,采用10%果糖水建立大鼠代谢综合征肾损伤模型,8周后处死动物,洲定胰岛素糖耐量,血清尿酸、肌酐、甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,尿液尿酸、肌酐水平以及肾脏TG、TC、IL-1β、IL-6和TNF-α水平,同时测定肾脏组织核转录因子-κB(NF-κB)和Toll样受体4(TLR4)-TANK结合激酶1(TBK1)-κB抑制因子激酶ε(IKKε)信号通路的表达变化.结果 栀子苷显著改善胰岛素抵抗,降低血清尿酸、肌酐、TG、TC、IL-1β、IL-6和TNF-α和肾脏TG、TC、IL-1β、IL-6及TNF-α水平,并显著升高尿液尿酸和肌酐水平,且NF-κB和TLR4-TBK1-IKKε信号通路的激活均得到显著抑制,同时在细胞实验中进一步证实了果糖刺激诱导人肾近端小管上皮细胞系HK-2细胞炎症因子的表达和TLR4-TBK1-IKKε信号通路的激活,而栀子苷和TLR4抑制剂TAK-242可以显著改善上述指标的异常表达.结论 栀子苷改善果糖喂养大鼠高尿酸血症、脂质堆积和肾脏炎症,并与抑制TLR4-TBK1-IKKε信号通路激活有关.
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编辑人员丨2023/8/6
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Host HDAC4 regulates the antiviral response by inhibiting the phosphorylation of IRF3
编辑人员丨2023/8/6
Class Ⅱ HDACs,such as HDAC4,are critical regulators of the immune response in various immune cells;however,its role in innate immunity remains largely unknown.Here,we report that the overexpression of HDAC4 suppresses the production of type Ⅰ interferons triggered by pattern-recognition receptors (PRRs).HDAC4 repressed the translocation of transcription factor IRF3 to the nucleus,thereby decreasing IRF3-mediated IFN-β expression.In particular,we also determined that HDAC4 can be phosphorylated and simultaneously block the phosphorylation of IRF3 at Ser386 and Ser396 by TBK1 and IKKε,respectively,by interacting with the kinase domain of TBK1 and IKKε.Furthermore,IFN-β may stimulate the expression of HDAC4.Our findings suggest that HDAC4 acts as a regulator of PRR signaling and is a novel mechanism of negative feedback regulation for preventing an overreactive innate immune response.
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编辑人员丨2023/8/6
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核因子?κB抑制物激酶ε在糖尿病伴食管癌患者中的表达水平及其临床意义
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察核因子-κB抑制物激酶 ε(IKKε)在糖尿病伴食管癌患者中的表达水平,并分析其临床意义.方法 选取2016年1月至2018年5月于我院就诊的糖尿病伴食管癌患者(DM+食管癌组)100例、单纯食管癌患者(食管癌组)90例、单纯糖尿病患者(DM组)100例及体检健康者(NC组)100名.ELISA测定各组IKKε 表达水平,采用Pearson相关分析和多元逐步回归分析IKKε的相关因素.结果 DM+食管癌组FPG、2 hPG、HbA1c及血清IKKε 水平高于其他各组(P<0.05或P<0.01);DM组和食管癌组FPG、2 hPG、LDL-C及血清IKKε 水平高于NC组(P<0.05或P<0.01),而DM组和食管癌组血清IKKε 水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);Pearson相关分析显示,血清IKKε 水平与BMI、FPG、2 hPG、HbA1c、TG、LDL-C呈正相关(r=0.623、0.545、0.523、0.635、0.682、0.491,P<0.05或P<0.01);多元逐步回归分析显示,BMI、HbA1c和TG是血清IKKε 水平的影响因素(P=0.000).结论 糖尿病伴食管癌患者血清IKKε 水平升高,可能与糖尿病伴食管癌的发生相关;BMI、HbA1c和TG可能是血清IKKε 水平的影响因素.
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编辑人员丨2023/8/6
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IKKε和TBK1通路及其抑制剂在肿瘤中的作用
编辑人员丨2023/8/6
非经典信号通路IKKε和TBK1与恶性肿瘤密切相关,多种因素激活IKKε和TBK1通路,可引起NF-κB途径的激活,导致肿瘤细胞的凋亡减少、细胞周期加快,促进肿瘤发生和发展.抑制IKKε和TBK1信号通路,可增加多种细胞凋亡因子的表达,抑制肿瘤细胞增殖,促进肿瘤细胞凋亡,同时提高化疗和放疗的敏感性.因此,阻断IKKε和TBK1信号通路可有效治疗恶性肿瘤,已有的实验证实有多种阻断IKKε和TBK1通路的药物均具有良好的抗肿瘤作用.
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编辑人员丨2023/8/6
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氨来呫诺引起肾性尿崩症的机制
编辑人员丨2023/8/5
目的 探讨氨来呫诺(ALX)引起肾性尿崩症(CNDI)的机制.方法 观察ALX对野生型大鼠(WT组)、KKε基因敲除大鼠(KL组)日尿量、日饮水量、尿比重、尿离子含量,血清抗利尿激素(ADH)的影响.Western印迹检测SD大鼠肾脏核因子-κB抑制物激酶(IKK)ε、水通道蛋白(AQP)2的蛋白表达,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测IKKε、AQP2 mRNA的表达.利用去氨加压素(dDAVP)实验和禁水实验观察尿量、尿比重.结果 两组给予ALX灌胃后大鼠日饮水量、日尿量、AVP较灌胃前均明显增加(P<0.01;P<0.05),尿比重、尿离子较灌胃前均明显降低(P<0.01);ALX诱导的多尿具有时间依赖性.WT组ALX灌胃后肾脏IKKε表达显著降低(P<0.05),两组灌胃后AQP2的蛋白表达较灌胃前明显降低(P<0.05).ALX灌胃后两组dDAVP实验和禁水实验对尿量、尿比重无明显影响(P<0.05).结论 ALX诱导CNDI的发生与AQP2表达降低有关,与IKKε无关.
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编辑人员丨2023/8/5
