目的:观察尿道上皮细胞中微小RNA(miR)-155-5p通过靶向BTB-CNC异体同源体1(BACH1)促进尿道上皮细胞的炎症和纤维化反应，从而参与尿道狭窄的发生和发展。方法:生信分析结果BACH1可能是miR-155-5p的直接靶标，然后将miR-155-5p mimics或mimics NC与pmiR-Glo-BACH1-WT或pmiR-Glo-BACH1-MUT共转染到SV-HUC-1细胞中，转染48 h后，检测荧光素酶活性。将BACH1小干扰RNA(siRNA)转染到SV-HUC-1细胞中，pcDNA3.1-BACH1转染到SV-HUC-1细胞中。转染24 h后，用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)，白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)水平，应用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、IV型胶原(collagen IV)的信使核糖核酸(mRNA)水平，同时应用蛋白质印迹法(Western blot)检测VEGF、FN和Collagen Ⅳ的蛋白质水平。两组间分析采用单因素方差分析。结果:miR-155-5p和pmiR-Glo-BACH1-WT共转染的细胞，与miR-155-5p和pmiR-Glo-BACH1-MUT共转染的细胞比较的荧光活性明显下降(FLUCR与RLUCR比率为0.54±0.05比0.95±0.07， F＝73.65， P<0.05)。然而，无论转染pmiR-Glo-BACH1-MUT或pmiR-Glo-BACH1-WT，模拟对照细胞中的荧光强度都无明显变化(比率为1.03±0.04比1.01±0.03 F＝0.548， P>0.05)。IL-1β、IL-6和TNF-α水平在BACH1敲低细胞中增加(分别为615.57±29.44比285.37±23.97， F＝226.939；818.53±41.16比502.63±24.38， F＝130.824；596.63±41.16比366.57±28.84， F＝88.349)， P<0.01，但在BACH1过表达细胞中下降(分别为122.70±15.94比298.87±12.44， F＝227.675；282.50±33.16比511.30±39.76， F＝58.585；129.83±9.31比374.80±25.40， F＝245.926， P<0.01)。此外，VEGF、FN和Collagen Ⅳ的mRNA(分别为1.65±0.08比0.96±0.06， F＝149.555；2.00±0.12比0.97±0.07， F＝160.243；1.65±0.06比0.96±0.02， F＝369.388， P<0.01)和蛋白质水平(分别为1.50±0.10比1.01±0.09， F＝38.382；1.42±0.10比0.99±0.09， F＝31.339；1.30±0.06比0.95±0.05， F＝62.642， P<0.01)也因BACH1敲低而增加，但因SV-HUC-1细胞中BACH1过表达而下降(mRNA水平分别为0.39±0.04比0.97±0.04， F＝340.18；0.52±0.04比0.94±0.03， F＝204.165；0.43±0.01比1.03±0.11， F＝47.206；蛋白水平分别为0.42±0.08比0.97±0.12， F＝45.375；0.52±0.05比0.96±0.12， F＝33.781；0.58±0.05比0.99±0.11， F＝36.900， P<0.01)。 结论:miR-155-5p通过靶向BACH1促进尿道上皮细胞的炎症和纤维化反应。

目的:观察尿道上皮细胞中BTB-CNC异体同源体1(BACH1)对转化生长因子-β(TGF-β)信号通路的影响，从而参与微小RNA(miR)-155-5p诱导的炎症和纤维化的调节。方法:采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测BACH1敲低或过表达后SV-HUC-1细胞中的TGF-β信号通路TGF-β、信号转导分子7(Smad7)和信号转导分子3(Smad3)的信使RNA(mRNA)和蛋白水平。我们在转染了miR-155-5p的细胞中过表达了BACH1，酶联免疫吸附试验(ELISA)测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(interleukin，IL)-1β和IL-6水平，RT-qPCR检测血管内皮生长因子(VEGF)、纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原(Collagen Ⅳ)、TGF-β、Smad3和Smad7的表达水平。采用单因素方差分析比较两组间差异。结果:TGF-β和Smad3的mRNA表达水平(2.14±0.11比0.99±0.07， F＝238.581；1.78±0.06比0.96±0.08， F＝201.720， P<0.01)，和蛋白表达水平(1.36±0.08比1.0±0.08， F＝32.911；1.34±0.04比1.01±0.08， F＝39.361， P<0.05)在BACH1敲低后升高，在BACH1过表达后下降(mRNA水平分别为0.39±0.06比1.09±0.04， F＝246.369；0.56±0.09比1.04±0.11， F＝36.668；蛋白水平分别为0.31±0.12比1.00±0.07， F＝81.323；0.63±0.05比0.98±0.14， F＝16.026， P<0.01)，而Smad7的mRNA水平(0.50±0.07比1.01±0.06， F＝105.446)和蛋白水平(0.40±0.08比1.00±0.11， F＝58.835)被BACH1小干扰RNA(siRNA)下调， P<0.01，在BACH1过表达后上调(mRNA水平为1.67±0.11比1.05±0.09， F＝55.960；蛋白水平为1.80±0.16比0.99±0.10， F＝52.571， P<0.01)。由miR-155-5p mimics引起的IL-1β、IL-6和TNF-α水平的增加因BACH1过表达而减弱(497.60±16.85比287.83±14.89比310.30±13.77， F＝171.691；795.17±34.84比396.53±24.59比425.67±21.39， F＝195.307；764.43±27.05比401.67±23.06比454.9±24.76， F＝184.088， P<0.01)。由miR-155-5p mimics诱导的VEGF、FN和Collagen Ⅳ的上调也被BACH1过表达阻断(1.90±0.10比0.95±0.05比1.21±0.05， F＝111.524；2.03±0.11比0.98±0.09比1.11±0.07， F＝121.346；1.91±0.11比1.11±0.06比0.94±0.04， F＝151.621， P<0.01)。TGF-β/smad信号通路相关因子TGF-β、Smad3和Smad7被过表达miR-155-5p激活，但BACH1共表达后，TGF-β/smad信号通路活性受到抑制(2.18±0.06比0.97±0.06比0.92±0.11， F＝240.091；1.64±0.11比1.01±0.08比0.92±0.03， F＝67.813；0.41±0.06比1.00±0.06比0.89±0.08， F＝65.57， P<0.01)。 结论:BACH1抑制尿道上皮细胞中TGF-β信号通路的激活从而阻断miR-155-5p诱导的炎性反应。

目的:评价艾司氯胺酮对脓毒症大鼠心肌损伤的影响及其与核因子E2相关因子(Nrf2)/血红素氧合酶1(HO-1)信号通路的关系。方法:SPF级健康成年雄性SD大鼠，体重200～230 g，采用随机数字表法分为4组( n＝8)：对照组(C组)、对照+艾司氯胺酮组(CE组)、脓毒症组(S组)、脓毒症+艾司氯胺酮组(SE组)。采用腹腔注射LPS 10 mg/kg的方法制备脓毒症模型。SE组和CE组于腹腔注射LPS或生理盐水30 min后，腹腔注射艾司氯胺酮10 mg/kg，12 h后重复给药1次。LPS注射后24 h时，采用超声心动图测定LVEF，采用ELISA法测定血清cTnI、脑钠肽(BNP)、LDH、CK-MB及TNF-α、高迁移率族蛋白B1(HMGB1)浓度。取心肌组织，HE染色观察心肌组织病理变化，采用Western blot法检测心肌组织Nrf2、HO-1及转录因子Bach1(BTB-CNC同源体1)的表达。 结果:与C组比较，S组、SE组LVEF降低，血清cTnI、BNP、LDH、CK-MB、TNF-α、HMGB1浓度升高，心肌组织Nrf2和HO-1表达下调，Bach1表达上调( P<0.05)，心肌发生显著病理损伤，CE组上述指标差异无统计学意义( P>0.05)；与S组比较，SE组LVEF升高，血清cTnI、BNP、LDH、CK-MB、TNF-α和HMGB1浓度降低，心肌组织Nrf2和HO-1表达上调，Bach1表达下调( P<0.05)，心肌病理损伤程度减轻。 结论:艾司氯胺酮可减轻脓毒症大鼠心肌损伤，机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路有关。

转录因子BTB-CNC同源体1(Bach1)主要作为转录抑制因子在大多数哺乳动物组织中广泛表达,通过亮氨酸拉链与小Maf蛋白形成异质二聚体,再结合靶基因启动子中的Maf识别元件(Maf recognition elements,MAREs),从而抑制或激活基因转录.Bach1 作为重要的调节因子,可参与调控氧化应激、血管生成、肿瘤转移及细胞周期等关键环节.近年来,关于Bach1 在氧化应激中的作用机制的研究取得了新进展,本文拟综述Bach1 的结构功能,以及Bach1 通过各种调控因子和通路在氧化应激中的调控作用,为氧化应激损伤所引发日晒伤、免疫抑制、光老化、皮肤癌变等皮肤疾病治疗提供思路.

目的 探讨BTB与CNC同源蛋白1(BACH1)通过调节MYC相关因子X二聚化蛋白1(MXD1)基因对套细胞淋巴瘤(MCL)发生发展的影响.方法 采用靶向剪切及转座酶技术(CUT&Tag)检测BACH1下游靶基因,并通过序列比对分析寻找BACH1与MXD1的结合位点.通过双荧光素酶报告基因系统验证BACH1对MXD1的调控作用,并采用慢病毒技术构建BACH1过表达及敲低的稳转MCL细胞株,采用蛋白质印迹法(West-ern blot)检测MXD1蛋白表达水平.应用GSE16411数据集分析MCL细胞和正常B细胞中MXD1 mRNA相对表达量.应用GSE132929及GSE21452数据集筛选MXD1共表达基因,对MXD1共表达基因进行基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路富集分析.采用噻唑蓝(MTT)法检测MXD1正相关基因应激诱导磷蛋白1同源物含U-框蛋白1(STUB1)的特异性激活剂YL109处理后MCL细胞的活力.结果 BACH1能够靶向结合MXD1并抑制MXD1基因的启动子活性.BACH1敲低后MXD1蛋白表达水平升高,而BACH1过表达后MXD1蛋白表达水平降低.通过GSE16411数据集分析发现,MCL细胞中MXD1 mRNA相对表达量明显低于正常B细胞,差异有统计学意义(P﹤0.01).在GSE132929数据集中筛选出2222个MXD1共表达基因,在GSE21452数据集中筛选出503个MXD1共表达基因.GO分析显示,MXD1共表达基因主要富集于信号转导、蛋白质磷酸化、细胞葡萄糖醛酸化、类黄酮葡萄糖醛酸化等代谢相关的生物学过程;KEGG信号通路分析显示,MXD1共表达基因主要富集于肝脏发育的代谢途径、蛋白质的消化和吸收、Janus激酶(JAK)/信号转导及转录激活因子(STAT)信号通路等.采用YL109处理MCL细胞后可显著降低细胞存活率.结论 BACH1通过结合MXD1近端启动子负向调控MXD1的表达水平,且BACH1介导的MXD1表达改变很可能通过调控代谢过程参与MCL的发生发展.

目的 研究转录因子BTB-CNC同源体1(BACH1)通过上调赖氨酰氧化酶(LOX)促进胶质母细胞瘤(GBM)中巨噬细胞的募集和极化.方法 基于公共数据库分析BACH1在胶质瘤中的表达特点和预后情况;构建BACH1过表达的稳转GBM细胞系,并对其进行转录组和蛋白质组联合测序分析;利用Transwell共培养体系将GBM细胞与巨噬细胞共培养,观察对巨噬细胞的趋化和极化影响;构建GL261-C57BL/6小鼠脑胶质瘤原位模型,探索靶向调控BACH1对肿瘤生长以及免疫微环境中巨噬细胞的影响.结果 首先,相对于正常脑组织,BACH1在胶质瘤中高表达,且在GBM患者中表达最高;同时还发现高表达BACH1的GBM患者预后较低表达BACH1的患者更差.然后,测序结果发现相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX的转录和蛋白水平均显著升高(转录组,P＜0.000 1;蛋白组,P=0.001 5).其次,流式实验结果表明,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中M2型肿瘤相关巨噬细胞(CD11b+CD206+)明显增加(P＜0.000 1),当加入LOX抑制剂后,两组中的M2型肿瘤相关巨噬细胞明显减少且BACH1过表达组减少的更明显(BACH1-Vec,P=0.001 5;BACH1-OE,P=0.001 3).小鼠脑胶质瘤原位模型结果提示,相对于BACH1空载组,BACH1过表达组中肿瘤体积更大且侵袭能力更强.结论 BACH1能够通过促进GBM细胞分泌肿瘤相关巨噬细胞趋化因子LOX进而影响巨噬细胞的募集和极化,最终促进肿瘤的恶性进展.

背景 微小RNA(microRNA,miRNA)是一组非编码RNA集合,能够与mRNA结合抑制靶mRNA翻译或促进其降解来调控基因表达.然而miRNA抑制蛋白表达的确切机制仍不明确. 目的 总结miRNA对血红素氧合酶(hemeoxygenase,HO)-1的调控作用. 内容 miRNA对HO-1的直接调控以及通过核因子E2相关因2(NF-E2-related factor 2,Nrf2)/BTB-CNC异体同源体1(BTB and CNC homology 1,Bach1)等对HO-1的间接调控. 趋向 miRNA有望成为疾病治疗的新靶点.

目的 探讨CORM-3在减轻失血性休克复苏大鼠认知功能障碍及皮质神经细胞焦亡中的作用.方法 168只清洁级健康雄性SD大鼠按随机数字表法分为4组:假手术组、失血性休克复苏组、CORM-3组和iCORM-3组,每组42只.后3组大鼠建立失血性休克复苏模型,CORM-3组在复苏结束后立即向股静脉注射CORM-3(4 mg/kg),iCORM-3组立即向股静脉注射iCORM-3(4 mg/kg).假手术组和失血性休克复苏组只注射含DMSO的等量生理盐水.失血性休克复苏模型的制备方法为:通过股动脉放血将平均动脉压降至25～35 mmHg并维持60 min,随后将收集的血液在15 min内回输体内达到初始血压水平作为复苏,必要时输注生理盐水.于复苏结束后12 h处死大鼠取皮质,采用气相分析法测定皮质区一氧化碳(CO)含量,Western blotting法检测皮质区细胞核内核转录相关因子2(Nrf2)、BTB-CNC异体同源体1(Bach1)及细胞质内血红素氧合酶-1(HO-1)、白介素(IL)-1β和IL-18的表达,通过免疫荧光染色法测定活化caspase-1-Cy3/神经元特异性核蛋白(NeuN)-FITC/DAPI阳性细胞数,计算皮质神经元焦亡率.最后于复苏后30 d行旷场实验评价大鼠认知功能.结果 与假手术组比较,失血性休克复苏组、CORM-3组和iCORM-3组在复苏后12 h时皮质区CO含量增加,皮质神经元焦亡率升高,Nrf2/Bach1比率上调,HO-1、IL-1β和IL-18表达上调,跨格次数和直立次数减少,中央停留时间延长,差异均有统计学意义(P<0.05).与失血性休克复苏组和iCORM-3组比较,CORM-3组在复苏后12 h时皮质区CO含量增加,皮质神经元焦亡率降低,Nrf2/Bach1比率上调,HO-1表达增加,IL-1β和IL-18表达下降,跨格次数和直立次数增加,中央停留时间缩短,差异均有统计学意义(P<0.05).结论 CORM-3可降低失血性休克复苏大鼠皮质神经细胞焦亡率,缓解认知功能障碍,其机制可能与上调Nrf2/Bach1比例后增加HO-1表达有关.

目的 研究沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)对糖尿病胃轻瘫小鼠胃排空率的影响及机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠采用数字法随机分为空白组、模型组、溶剂对照组、白藜芦醇(resveratrol,Res)组,每组8只.除空白组以外,其余小鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)造模,空白组小鼠给予等量的柠檬酸缓冲液腹腔注射.造模成功后,Res组小鼠给予Res 30 mg·kg-1·d-1腹腔注射,溶剂对照组小鼠给予等量DMSO 0.9％(质量分数)氯化钠注射液溶液腹腔注射,持续6周.6周后采用固体胃排空法测胃排空率,比色法检测小鼠胃窦组织中总超氧化物歧化酶(total superoxide dismutase,T-SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)浓度,免疫组织化学染色和蛋白免疫印迹法(Western blotting,WB)检测胃窦组织中SIRT1、BTB-CNC异体同源体1(BTB and CNC homology 1,Bach1)、酪氨酸激酶受体(tyrosine kinase receptor,c-kit)和血红蛋白氧合酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)的表达变化.结果 与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃排空率明显下降,与模型组小鼠相比,Res组小鼠胃排空率明显升高(P<0.05);与空白组小鼠相比,模型组小鼠胃窦组织中T-SOD活力下降,MDA含量升高,与模型组小鼠相比,Res组小鼠T-SOD活力升高,MDA含量下降(P<0.05);模型组小鼠胃窦组织中SIRT1、c-kit、HO-1较空白组下降,而Bach1浓度高于空白组;Res组小鼠SIRT1、c-kit、HO-1均较模型组上升,而Bach1浓度低于模型组(P<0.05).结论 上调SIRT1可以通过调控Bach1和HO-1蛋白浓度,减轻糖尿病胃轻瘫小鼠胃组织中的氧化应激,维持小鼠正常的胃排空.

目的:研究薰衣草总黄酮对中波紫外线(UVB)致小鼠皮肤光损伤的防护作用,并从核因子E2相关因子2(Nrf2)抗氧化损伤通路探讨其作用机制.方法:将84只雌性KM小鼠随机分为7组:空白组,模型组,溶媒组,维生素E组(0.013 g·kg-1),薰衣草总黄酮低、中、高剂量组(0.25,1.25,2.50 g·kg-1).通过UVB辐照小鼠背部裸露皮肤建立光损伤模型,照射前30 min外涂薰衣草总黄酮,连续照射1周后,对小鼠背部皮肤进行评价并测得其水分和弹性;采用苏木素-伊红(HE)染色和苦味酸-酸性品红法(VG)染色考察薰衣草总黄酮对小鼠皮肤组织病理学改变的影响;生化比色法检测皮肤匀浆后丙二醛(MDA),超氧化物歧化酶(SOD),总抗氧化能力(T-AOC),一氧化氮合酶(NOS),谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的水平;采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测皮肤组织中炎症因子白细胞介素-1(IL-1),白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α);实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)检测小鼠Nrf2,Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Keap1),BTB-CNC异体同源蛋白1(Bach1),血红素加氧酶-1(HO-1),醌氧化还原酶1(NQO1),谷氨酸半胱氨酸合成酶催化亚基(GCLC)mRNA表达.结果:与空白组比较,模型组小鼠外观评分显著升高(P＜0.01),皮肤水分和弹性显著降低(P＜0.01);皮肤组织出现较为明显的病理学变化,表皮明显增厚且伴有结痂小脓肿,损伤程度严重;小鼠的MDA,NOS水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),SOD,T-AOC水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),炎症因子IL-1,IL-6和TNF-α的水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),Nrf2,Keap1,NQO1,GCLC mRNA表达明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Bach1 mRNA的表达显著升高(P＜0.01);与模型组比较,薰衣草总黄酮低、中、高剂量组的小鼠外观评分显著降低(P＜0.01),皮肤水分和弹性显著升高(P＜0.01),各给药组小鼠的MDA,NOS水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),SOD,T-AOC水平明显升高(P＜0.05,P＜0.01),炎症因子IL-1,IL-6和TNF-α的水平明显降低(P＜0.05,P＜0.01),Nrf2,Keap1,NQO1,HO-1,GCLC mRNA表达明显升高(P＜0.05,P＜0.01),Bach1 mRNA表达显著降低(P＜0.01).结论:薰衣草总黄酮对UVB所致的小鼠皮肤光损伤防护效果显著,其作用机制可能与激活Keap 1/Nrf2/ARE信号通路,调控氧化应激反应,改善炎症反应有关.