-
人脐带间充质干细胞对重症急性胰腺炎患者树突状细胞成熟、分化的作用及参与炎症调节的机制研究
编辑人员丨2天前
目的:探讨人脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)对SAP患者树突状细胞(DCs)成熟、分化的作用及参与炎症调节的机制。方法:采集郑州大学附属郑州中心医院行剖宫产的足月胎儿脐带4~5 cm,原代分离培养hUC-MSCs,采用流式细胞术进行表型鉴定和成脂、成骨染色。采集5例SAP患者外周血20 ml,采用淋巴细胞分离液分离出单核细胞,以粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)、IL-4、肿瘤坏死因子(TNF-α)进行诱导培养出DCs,根据培养方式不同分为DCs组、hUC-MSCs+DCs组、hUC-MSCs+DCs+NS398组(NS398为NF-κB下游调控基因COX-2的特异性抑制剂)。应用流式细胞术检测DCs表型,测定细胞培养24 h上清液中的IL-1β、IL-1α、IL-2、IL-6 、IL-10水平。采用蛋白质免疫印迹法检测Toll样受体4(TLR4)、IKKα及NF-κB-p65蛋白表达量。结果:成功培养出hUC-MSCs,其表面标志物CD 90、CD 105、CD 73表达阳性,并可向脂肪细胞、骨细胞分化。随着培养时间延长,DCs由未成熟向成熟分化。与DCs组比较,hUC-MSCs+DCs组的调节性DCs(regDCs)比例增加,其标志物CD 11b显著上调[ (14.26±1.25)%比(4.87±0.58)%],CD 1a 、CD 11c显著下调[(2.81±0.34)%比(13.62±1.52)%、(3.88±0.5)%比(11.8±1.22)%],差异均有统计学意义( P值均<0.05)。培养上清液IL-1β、INF-γ、IL-6表达下调,但差异无统计学意义;而促炎因子IL-1α显著降低[(14.91±2.58)ng/L比(30.19±7.75)ng/L],抑炎因子IL-10显著升高[(17.03±4.69)ng/L比(1.83±0.14)ng/L]。NF-κB-p65、TLR4蛋白表达显著下调(0.74±0.02比0.97±0.01、0.89±0.01比1.72±0.01),IKKα蛋白表达显著上调(1.12±0.01比0.21±0.01),差异均有统计学意义( P值均<0.05)。与DCs组及hUC-MSCs+DCs组比较,hUC-MSCs+DCs+NS398组的NF-κB-p65与TLR4表达量显著下调(0.34±0.01比0.97±0.01、0.74±0.02,0.14±0.01比1.72±0.01、0.89±0.01),而IKKα蛋白表达显著上调(1.68±0.01比0.21±0.01、1.12±0.01),差异均有统计学意义( P值均<0.05)。 结论:hUC-MSCs能够抑制SAP患者DCs成熟、分化,并诱导出CD 11bhigh CD 1alow CD 11clow的regDCs参与免疫调节,其机制可能通过TLR4/IKKα/NF-κB/COX-2途径抑制炎症级联反应,发挥抗炎作用。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
新型肠炎沙门菌菌影候选疫苗在小鼠免疫应答和保护功效的评估
编辑人员丨2天前
目的:比较肠炎沙门菌制备的菌影(SE-ghost)通过肌肉注射(肌注)和口服不同免疫途径接种雌性BALB/c小鼠诱导体液和细胞免疫应答的功效。方法:用SE-ghost接种BALB/c小鼠,间接ELISA检测小鼠血清中IgG抗体水平和阴道灌洗液IgA抗体水平;流式细胞仪检测小鼠脾脏CD3 +CD4 +T、CD3 +CD8 +T细胞百分比变化和脾脏内细胞因子IL-4、IFN-γ分泌;三次免疫后所有小鼠口服半数致死量肠炎沙门菌进行强毒攻击。用SE-ghost刺激小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDCs),流式细胞仪检测表面分子抗体APC-CD11c、FITC- MHC ClassⅡ、PE-CD40、FITC- CD86、PE-CD80表达量;双抗体夹心ELISA测定BMDCs上清液IL-1β、IL-6、IL-10和IL-12p70的产量。 结果:与PBS组相比,SE-ghost(口服)和SE-ghost(肌注)免疫组小鼠体内肠炎沙门菌特异性抗体IgG和IgA水平明显增高;脾脏CD3 +CD4 +T细胞百分比上调、高分泌细胞因子IL-4 、IFN-γ。肌肉注射SE-ghost比口服可诱导更强的体液和细胞免疫应答。致病菌肠炎沙门菌强毒攻击后,SE-ghost(口服)和SE-ghost(肌注)免疫组生存率高达80%。与对照组相比,BMDCs经SE-ghost刺激后高表达表面成熟分子抗体CD86、CD80、CD40、MHCⅡ,高分泌细胞因子IL-1β、IL-6、IL-10、IL-12p70。 结论:通过肌肉注射SE-ghost进行免疫,可在小鼠中引发更强大的抗原特异性免疫应答,以防止沙门菌感染。SE-ghost是一种有用的沙门菌候选疫苗。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
中亚苦蒿醇提物大孔树脂30%乙醇洗脱部位免疫功能研究
编辑人员丨2天前
目的:探讨中亚苦蒿醇提物大孔树脂30%乙醇洗脱部位(AAEM-30%)对小鼠树突状细胞(DC)和免疫功能的作用。方法:中亚苦蒿醇提物经AB-8型大孔树脂分离得到AAEM-30%,对其多糖、黄酮和萜类含量进行测定。体外通过流式细胞术检测AAEM-30%对DC表面分子分化簇(CD)40、CD80和CD86的表达,酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测DC细胞因子白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达;体内通过不同给药剂量(50、100 mg/kg)和不同给药方式(皮下注射、腹腔注射、灌胃)检测AAEM-30%对ICR小鼠免疫功能的影响。结果:AAEM-30%中多糖、黄酮、萜类的质量分数分别为24.30%、22.50%、28.19%。体外能够增强小鼠DC表面分子CD40、CD86以及DC细胞因子IL-6和TNF-α的表达(均 P<0.001)。与对照组比较,3种给药方式的小鼠体质量比较差异均无统计学意义(均 P>0.05);50、100 mg/kg AAEM-30%腹腔注射组的胸腺指数和50 mg/kg AAEM-30%灌胃组的脾脏指数均增加(均 P<0.05)。100 mg/kg AAEM-30%腹腔注射组的CD19 +细胞数量增加( P<0.01),50 mg/kg AAEM-30%灌胃组的CD19 +细胞数量增加( P<0.05)。100 mg/kg AAEM-30%灌胃组的CD11b +和CD11c +数量增加( P<0.05)。灌胃和腹腔注射2种给药方式均能增加CD4 +和CD8 + T淋巴细胞的数量(均 P<0.05)。 结论:AAEM-30%能够促进小鼠DC的成熟,增强小鼠免疫功能。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
围术期穴位电刺激对脊柱手术大鼠树突状细胞成熟的影响
编辑人员丨2天前
目的:评价围术期穴位电刺激对脊柱手术大鼠树突状细胞(cDC)成熟的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠40只,7~8周龄,体重300~350 g,采用随机数字表法分为5组( n=8):对照组(C组)、手术组(S组)、疏密波组(D组)、连续波组(W组)和非经非穴组(N组)。D组和W组麻醉后立即电刺激双侧足三里和三阴交穴10 min,随后行脊柱手术并维持电针刺激至手术结束,手术时间约20 min。术后24和48 h电刺激双侧内关穴和太冲穴30 min。D组使用2/15 Hz疏密波,W组使用15 Hz连续波,N组使用2/15 Hz疏密波,但刺激部位为双侧髂嵴最高点连线上方15 mm,后正中线左右各旁开20 mm处。于术后48 h电刺激大鼠后处死,取脾并制备脾脏组织细胞悬液,采用流式细胞仪检测CD103 +、CD11c +、MHC-Ⅱ +、CD80 +和CD86 +cDC百分比。 结果:与C组比较,D组和W组各指标差异均无统计学意义( P>0.05),S组MHC-Ⅱ +和CD86 +cDC百分比降低,CD103 +和CD80 +cDC百分比升高,N组MHC-Ⅱ +、CD86 +、CD11c +和CD103 +cDC百分比降低( P<0.05);与S组比较,D组MHC-Ⅱ +、CD86 +和CD103 +cDC百分比升高,CD80 +cDC百分比降低,W组MHC-Ⅱ +cDC百分比升高,CD80 +cDC百分比降低,N组CD86 +和CD11c +cDC百分比降低( P<0.05);与D组比较,W组各指标差异无统计学意义( P>0.05),N组CD86 +和CD11c +cDC百分比降低( P<0.05)。 结论:围术期穴位电刺激可减轻脊柱手术对大鼠cDC成熟的抑制作用。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
聚乙二醇干扰素-α2b治疗骨髓增殖性肿瘤的有效性及安全性
编辑人员丨2天前
目的:评估聚乙二醇干扰素-α2b(PEG-IFN-α2b)治疗骨髓增殖性肿瘤(MPN)的有效性及安全性。方法:前瞻性纳入2019年8月至2022年10月天津医科大学第二医院34例接受PEG-IFN-α2b治疗的MPN患者,其中男9例,女25例,年龄[ M( Q1, Q3)]为57(19,78)岁。收集患者的临床特征,并进行随访。截至2023年1月30日,随访时间[ M( Q1, Q3)]为24(16,33)个月。分析治疗后12、24个月的疗效、安全性及免疫细胞、细胞因子水平等变化情况。 结果:随访期间脱落4例,可评估疗效的患者为30例,治疗12、24个月血液学完全缓解率(CHR)分别为57.1%(16/28)、75.0%(18/24),分子学完全缓解率(CMR)+分子学部分缓解率(PMR)分别为27.3%(6/22)、55.0%(11/20),骨髓组织病理总反应率(ORR)分别为34.6%(9/26)、47.6%(10/21)。治疗12、24个月时CD8 +HLA-DR +T细胞、效应T细胞亚群、CD56 bright自然杀伤(NK)细胞、浆细胞样树突状细胞(pDC)比例均较治疗前增加,CD56 dim NK细胞比例较治疗前降低(均 P<0.05);骨髓中C-X-C基序趋化因子10(CXCL10)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、TNF-β水平均较治疗前增高,血管内皮生长因子(VEGF)、白细胞介素(IL)-4水平均较治疗前下降(均 P<0.05)。血液学不良反应中白细胞减少发生率较高,为47%(16/34),非血液学不良反应中乏力、转氨酶升高发生率较高,分别为44.1%(15/34)、32.3%(11/34)。 结论:PEG-IFN-α2b治疗MPN具有较高的血液学、分子学及骨髓组织病理反应率,具有降低恶性克隆负荷、调节免疫微环境等作用,总体安全耐受性较好。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
共刺激分子程序性细胞死亡受体-1/程序性细胞死亡受体配体-1调控树突状细胞对脓毒症患者免疫功能的影响
编辑人员丨2天前
目的:观察程序性细胞死亡受体-1/程序性细胞死亡受体配体-1(PD-1/PD-L1)调控树突状细胞(DC)对脓毒症患者免疫状态的影响,分析PD-1/PD-L1对脓毒症患者预后的预测价值。方法:从2018年10月至2019年9月住遵义医科大学附属医院综合重症监护病房(ICU)病区的脓毒症患者中采用随机数表法抽选25例,根据28 d预后将患者分为存活组(10例)和死亡组(15例);同时随机抽取本院健康体检者20例作为健康对照组。脓毒症患者于确诊后24 h内、健康对照组于入组时取患者外周血,分离血清,采用流式细胞仪(FCM)检测CD4 +T、CD8 +T细胞比值,T细胞亚群比值(CD4/CD8),CD4 +T、CD8 +T细胞PD-1的表达,DC表面PD-L1、CD86的表达情况;采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清白细胞介素-10(IL-10)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的分泌水平;采用Spearman相关性分析法分析CD11c +PD-L1与CD4 +PD-1、CD8 +PD-1、TNF-α、DC、CD11c +CD86、T细胞亚群比值、CD4 +T细胞、CD8 +T细胞、IL-10的相关性;采用二元Logistic回归分析影响脓毒症患者死亡的危险因素,并绘制受试者工作特征曲线(ROC曲线),评价独立危险因素对患者预后的预测价值。 结果:死亡组序贯器官衰竭评分(SOFA)、急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEⅡ)均明显高于存活组〔SOFA评分(分):15.1±4.1比10.7±2.7,APACHEⅡ评分(分):27.0±7.3比17.0±3.9,均 P<0.05〕。存活组和死亡组T细胞亚群比值均<1,且死亡组CD4/CD8明显低于存活组(0.54±0.15比0.79±0.09, P<0.05);健康对照组T细胞亚群比值>1。与健康对照组比较,存活组和死亡组CD4 +T细胞、CD8 +T细胞、CD11c +DC、CD11c +CD86、IL-10、TNF-α水平均明显降低,CD4 +PD-1、CD8 +PD-1、CD11c +PD-L1水平均明显升高,且死亡组上述指标的变化较存活组更显著〔CD4 +T细胞:0.14±0.07比0.22±0.08,CD8 +T细胞:0.24±0.07比0.28±0.10,CD11c +DC:0.84±0.14比0.93±0.03,CD11c +CD86:(58.83±20.77)%比(78.24± 9.39)%,IL-10(ng/L):34.22±13.98比18.49±5.55,TNF-α(ng/L):95.30±29.33比67.00±20.16,CD4 +PD-1:(39.58±10.08)%比(27.03±6.35)%,CD8 +PD-1:(38.77±11.91)%比(29.15±8.37)%,CD11c +PD-L1:(21.13±11.54)%比(12.11±8.34)%,均 P<0.05〕。Spearman相关性分析显示,CD11c +PD-L1与CD4 +PD-1、CD8 +PD-1、IL-10呈正相关( r值分别为0.748、0.713、0.898,均 P<0.05),与DC、CD11c +CD86、T细胞亚群比值、CD4 +T细胞、CD8 +T细胞、TNF-α呈负相关( r值分别为-0.587、-0.906、-0.840、-0.706、-0.513、-0.820,均 P<0.05)。多因素二元Logistic回归分析显示,CD4 +PD-1是影响脓素症患者预后的独立危险因素〔优势比( OR)=1.463,95%可信区间(95% CI)为1.032~2.074, P=0.033〕;ROC曲线分析显示,CD4 +PD-1对脓毒症患者预后有一定预测价值〔ROC曲线下面积(AUC)=0.857,95% CI为0.709~1.000, P<0.01〕;当最佳预测值为34.48%时,其敏感度为66.7%,特异度为90.0%,准确度85.7%。 结论:外周血PD-1/PD-L1的上调会抑制DC的活化及增殖,影响T细胞活化,诱导脓毒症患者进入免疫抑制状态;PD-1/PD-L1可反映脓毒症患者的免疫状况,其中,CD4 +TPD-1对患者预后评估有一定价值。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
动力蛋白轻链LC8-1型在肺腺癌中的表达、作用机制和临床价值
编辑人员丨2天前
目的:探讨动力蛋白轻链LC8-1型(DYNLL1)在肺腺癌(LUAD)中的表达、作用机制和临床价值。方法:本研究为实验研究。从TCGA数据库中收集539例LUAD组织和59例癌旁正常肺组织的DYNLL1 mRNA测序数据,收集GTEx数据库中的正常肺组织样本增加对照样本量(共347例正常肺组织)。收集LUAD患者的临床特征包括年龄、性别、吸烟史、TNM分期和临床分期。选取2020年1月至2022年12月于河北省胸科医院行手术切除的40例LUAD患者为研究对象,收集手术过程中切除的LUAD组织和癌旁正常肺组织用于免疫组织化学检测DYNLL1蛋白表达。通过最小 P值法确定DYNLL1的高表达组和低表达组。采用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,分析DYNLL1表达对LUAD患者总生存期(OS)、疾病特异性生存期和无进展生存期的影响。采用单因素和多因素Cox回归分析LUAD患者OS的影响因素。通过GEPIA基因表达谱动态分析数据库获取LUAD中与DYNLL1显著相关的前100个基因的表达情况,并进行基因本体论(GO)和京都基因和基因组数据库(KEGG)富集分析,进一步通过FunRich软件进行功能富集分析。应用TIMER数据库对DYNLL1进行免疫浸润分析和泛癌中的表达分析。通过TCGA数据库中LUAD的表达数据分析DYNLL1表达与甲基转移酶的关系。通过DiseaseMeth version 2.0在线数据库对DYNLL1在LUAD组织中的甲基化水平进行分析。利用MEXPRESS在线数据库分析DYNLL1相关甲基化位点。使用String数据库分析DYNLL1的蛋白质-蛋白质相互作用。 结果:相比正常组织,DYNLL1 mRNA在多种实体肿瘤组织中均高表达(均 P<0.05)。TCGA数据库、TCGA和GTEx数据库中,LUAD组织的DYNLL1 mRNA水平均高于正常肺组织(均 P<0.05)。免疫组织化学检测显示,DYNLL1主要定位于细胞质或细胞核。DYNLL1蛋白在LUAD组织中的高表达率高于癌旁正常肺组织[80.0%(32/40)比40.0%(16/40), χ2=13.33, P<0.001)]。男性、T分期为T2+T3+T4期、N分期为N1+N2+N3期、临床分期为Ⅲ期+Ⅳ期LUAD患者的DYNLL1 mRNA表达水平高于女性、T分期为T1期、N分期为N0期、临床分期为Ⅰ期+Ⅱ期患者(均 P<0.01)。DYNLL1高表达组和低表达组的总体生存曲线、疾病特异性生存曲线和无进展生存曲线显示,低表达组的生存状态均优于高表达组( HR分别为1.902、1.863、1.662,均 P<0.001)。多因素Cox回归分析显示DYNLL1是LUAD患者OS的影响因素( HR=1.467,95% CI:1.041~2.068, P=0.029)。GO富集分析、KEGG富集分析和FunRich软件功能富集分析显示,DYNLL1可能通过调节细胞周期调控LUAD的发生发展。DYNLL1 mRNA表达与B淋巴细胞( r=-0.261, P<0.001)、CD8 + T淋巴细胞( r=0.105, P=0.020)、CD4 + T淋巴细胞( r=-0.137, P=0.002)和树突状细胞( r=-0.178, P<0.001)具有相关性,与CD19、CD1C、CD2、CD3E、CD4、CD79A、HLA-DPA1、HLA-DPB1、HLA-DQB1、HLA-DRA、ITGAX和NRP1具有相关性。3种甲基转移酶(DNMT1、DNMT3A和DNMT3B)在高表达组和低表达组之间的差异均有统计学意义。LUAD组织中DYNLL1甲基化水平高于正常肺组织( P=0.007)。在DYNLL1的DNA序列中发现了6个甲基化位点。与DYNLL1相互作用的蛋白质包括DYNLRB1、BCL2L11、DYNC1I2、DYNC1I1、WDR34、DYNLT1、DYNC1H1、WDR60、STRN4和MOB4。 结论:DYNLL1在LUAD组织中高表达,可能通过调节细胞周期、参与免疫细胞浸润过程和甲基化等对LUAD的发生发展产生影响,与患者的不良预后密切相关。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
微小RNA-148a-3p对肝癌树突状细胞活化的影响及其机制
编辑人员丨2天前
目的:探讨微小RNA(miR)-148a-3p对肝癌树突状细胞活化的影响及其机制。方法:分离肝癌患者外周血树突状细胞,通过双荧光素酶报告验证miR-148a-3p和细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)的靶向关系。树突状细胞分为4组:对照组、miR-148a-3p组、SOCS1组和miR-148a-3p+SOCS1组。通过转染miR-148a-3p类似物和/或SOCS1质粒来实现过表达。检测各组细胞中miR-148a-3p和SOCS1蛋白、抗原呈递蛋白(CD11c和CD86)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-α(IFN-α)的表达水平和树突细胞迁移能力。多组间的差异采用单因素方差分析(ANOVA),组间两两比较采用SNK- q检验。 结果:miR-148a-3p组的miR-148a-3p水平高于对照组(4.21±0.38比1.00±0.07, t=66.461, P<0.05),SOCS1组的SOCS1蛋白表达水平显著高于对照组(2.91±0.25比1.00±0.08, t=58.212, P<0.05)。miR-148a-3p+SOCS1组的SOCS1蛋白水平显著高于miR-148a-3p组(1.06±0.10比0.24±0.03, t=62.883, P<0.05);且显著低于SOCS1组(1.06±0.10比2.91±0.25, t=54.966, P<0.05)。miR-148a-3p组的CD11(3.24±0.27比1.00±0.08)、CD86(2.96±0.25比1.00±0.07)、IL-6[(517.34±48.63) pg/ml比(365.72±31.25) pg/ml]、IFN-α[(72.91±7.09) pg/ml比(48.34±4.24) pg/ml]水平显著高于对照组( t=63.636、60.397、20.984、23.793, P<0.05),SOCS1组的CD11c、CD86、IL-6和IFN-α蛋白水平显著低于对照组( P<0.05)。miR-148a-3p+SOCS1组的CD11(1.35±0.11比3.24±0.27、0.21±0.02)、CD86(0.98±0.09比2.96±0.25、0.23±0.03)、IL-6[(371.06±35.98) pg/ml比(517.34±48.63)、(278.85±26.44) pg/ml]、IFN-α[(49.28±5.06) pg/ml比(72.91±7.09)、(30.56±3.21) pg/ml]水平显著低于miR-148a-3p组且显著高于SOCS1组( t=51.861、81.572、59.615、78.651、19.345、16.347、21.703、24.992, P<0.05)。miR-148a-3p组迁移能力[(42.96±6.01)%比(28.33±4.25)%]显著高于对照组( t=15.900, P<0.05);SOCS1组的迁移能力[(16.35±2.73)%比(28.33±4.25)%]显著低于对照组( t=18.973, P<0.05);miR-148a-3p+SOCS1组的迁移能力[(30.95±4.51)%比(42.96±6.01)%、(16.35±2.73)%]显著低于miR-148a-3p组且显著高于SOCS1组( t=12.787、22.155, P<0.05)。 结论:miR-148a-3p可通过靶向抑制SOCS1促进肝癌患者的树突状细胞活化。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞对小鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制
编辑人员丨2天前
目的:探讨RMT1-10体外诱导耐受性树突状细胞(Tol-DCs)对小鼠高危角膜移植排斥反应的抑制作用及其机制。方法:选取SPF级雄性BALB/c小鼠100只和C57BL/6小鼠50只,获取C57BL/6小鼠骨髓来源的未成熟树突状细胞(imDCs),按照诱导干预不同分为imDCs组(不干预)、成熟树突状细胞(mDCs)组(加入脂多糖)、RMT1-10组(加入RMT1-10和脂多糖)和IgG同型对照组(加入IgG同型抗体和脂多糖),培养7 d后采用流式细胞术检测各组DCs表型CD11c、CD80、CD86、主要组织相容性复合物(MHC)-Ⅱ、T细胞免疫球蛋白和黏蛋白结构域分子(Tim)-4和CD103表达水平;采用酶联免疫吸附法测定细胞培养液上清液中白细胞介素10(IL-10)和转化生长因子β(TGF-β)质量浓度。建立混合淋巴细胞培养体系,采用细胞计数试剂盒8法检测各组DCs刺激CD4 + T细胞增生的刺激指数(SI)。以角膜基质缝线法诱导BALB/c小鼠角膜新生血管,以4个象限新生血管均匀长入角膜中周区的小鼠作为受体。将80只受体小鼠采用随机数字表法随机分为imDCs组、mDCs组、RMT1-10组和IgG同型对照组,每组20只,各组分别于尾静脉注射相应DCs(1×10 6个/100 μl)。注射后7 d,以C57BL/6小鼠为供体行穿透角膜移植术。术后1个月,每日裂隙灯显微镜下观察受体小鼠角膜植片排斥体征,包括角膜混浊、水肿及新生血管。术后21 d,每组抽取5只受体小鼠,耳廓皮下注射20 μl(1×10 6个细胞)正常C57BL/6小鼠脾脏细胞,24 h后测量耳廓肿胀度评价迟发型超敏反应(DTH)。 结果:RMT1-10组DCs中CD80、CD86、MHC-Ⅱ和Tim-4阳性细胞占CD11c阳性细胞百分比均明显低于mDCs组,差异均有统计学意义(均 P<0.001);RMT1-10组Tim-4阳性细胞百分比明显低于imDCs组,CD103阳性细胞百分比明显高于其他3个组,差异均有统计学意义(均 P<0.001)。RMT1-10组细胞培养上清液中IL-10和TGF-β质量浓度明显高于其他组,差异均有统计学意义(均 P<0.001)。各组DCs对CD4 + T细胞增生的SI总体比较,差异均有统计学意义( F分组=1 833.00, P<0.001; F比例=230.40, P<0.001)。在每一细胞比例内,imDCs组SI均明显低于mDCs组,RMT1-10组SI均明显低于imDCs组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。各组角膜植片生存曲线总体差异有统计学意义( χ2=77.69, P<0.001),其中RMT1-10组角膜植片存活数量明显多于imDCs组,imDCs组角膜植片存活数量明显多于mDCs组,差异均有统计学意义( χ2=9.74、31.02,均 P<0.01)。阳性对照组、mDCs组、IgG同型对照组、imDCs组、RMT1-10组和阴性对照组小鼠耳廓肿胀度分别为(503.6±17.2)、(475.7±17.6)、(456.2±18.8)、(225.2±39.4)、(118.1±12.6)和(106.4±7.4)μm,总体比较差异有统计学意义( F=377.10, P<0.001),其中mDCs组小鼠耳廓肿胀度略低于阳性对照组,imDCs组小鼠耳廓肿胀度明显低于IgG同型对照组,明显高于RMT1-10组,差异均有统计学意义(均 P<0.05)。 结论:RMT1-10可抑制小鼠高危角膜移植排斥反应,其作用机制可能为体外诱导imDCs转化为Tol-DCs并上调TGF-β和IL-10表达,经过继转移后促进受体抗原特异性免疫耐受,进而间接延长角膜植片存活时间。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
-
脾脏单核细胞对纤维化肝脏免疫细胞组成及免疫相关因子表达的影响
编辑人员丨2天前
目的:观察脾脏单核细胞对纤维化肝脏免疫细胞组成及免疫相关因子表达的影响。方法:24只雄性C57BL/6小鼠采用随机数字法分为注射玉米油的对照组(6只)和注射CCl 4的肝纤维化造模组(18只);取造模成功的小鼠12只行脾切除术,再随机分为两组分别接受脾脏单核细胞或磷酸盐缓冲液(PBS)回输,每组6只。4组小鼠继续接受玉米油或CCl 4注射两周后,流式分析各组小鼠肝脏中免疫细胞差异;Luminex检测肝脏匀浆中细胞因子差异。两组间比较采用Student’s t检验。 结果:纤维化组小鼠肝脏中单核-巨噬细胞MoMF)比例高于对照组[(4.20±2.00)%比(1.00±0.28)%, t=-3.879, P<0.01],CD4 +与CD8 +T细胞比例低于对照组[(0.72±0.07)%比(0.90±0.10)%, t=3.470, P<0.01;(0.51±0.12)%比(0.98±0.38)%, t=2.917, P<0.05],但CD4 + T细胞中调节性T细胞(Treg)增多[(19.75±6.43)%比(5.39±2.21)%, t’=-5.171, P<0.01];纤维化组小鼠肝脏匀浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-13、转化生长因子-β(TGF-β)、趋化因子2(CCL2)浓度高于对照组[(24.05±10.05) pg/ml比(14.16±3.31) pg/ml, t’=-2.430, P<0.05;(45.21±9.73) pg/ml比(19.40±7.36) pg/ml, t=-5.182, P<0.01;(381.71±118.56) pg/ml比(230.19±61.58) pg/ml, t=-2.737, P<0.05;(46.58±17.92) pg/ml比(23.87±6.65) pg/ml, t=-2.911, P<0.01]。(2)肝纤维化脾切+回输组小鼠肝脏中自然杀伤细胞(NK)、MoMF及树突状细胞(DC)比例高于脾切组[(2.49±0.43)%比(1.12±0.43)%, t=-4.503, P<0.01;(6.64±1.50)%比(2.93±0.66)%, t=-4.546, P<0.01;(5.45±1.54)%比(2.59±0.66)%, t=-2.732, P<0.05],CD8 +T细胞比例低于对照组[(2.28±0.67)%比(3.87±0.38)%, t=2.950, P<0.05];脾切+回输组小鼠肝脏匀浆中CCL2浓度高于脾切组[(50.09±20.55) pg/ml比(20.08±5.99) pg/ml, t=-2.804, P<0.05]。 结论:脾脏单核细胞参与了纤维化肝脏免疫细胞组成及相关因子表达的调控,对肝脏免疫微环境形成影响。
...不再出现此类内容
编辑人员丨2天前
