目的:制备缓释万古霉素的多聚乳酸-聚乙二醇-多聚乳酸(PLGA-PEG-PLGA)温敏水凝胶，探讨其理化性能、生物学性能和抗菌性能。方法:PLGA(1 500~2 000)-PEG (1 000~1 500)-PLGA(1 500~2 000)多聚物溶液在4 ℃下孵育7 d，充分溶解后在37 ℃水浴中放置10 min成胶并负载万古霉素。冻干脱水48 h后利用扫描电镜观察其微观结构。在37 ℃、60 r/min条件下利用紫外-可见光谱分析绘制其体外降解曲线及药物释放曲线。以二甲基亚砜(DMSO)作为阳性对照，利用噻唑蓝(MTT)法检测本材料细胞相容性。在37 ℃、120 r/min条件下检测其抗菌效果。两组间比较采用独立样本 t检验，多组间比较采用单因素方差分析。 结果:抗菌水凝胶扫描电镜结果显示，PLGA-PEG-PLGA抗菌温敏水凝胶具有疏松多孔的微观结构，载药前[(53.77±31.20) μm、后孔隙尺寸[(50.42±27.60) μm]差异无统计学意义( t＝0.255， P>0.05)；体外降解时长30 d；空载水凝胶组[(96.41±2.41)%]、载药水凝胶组细胞活性[(96.98±2.26)%]，与DMSO组[(37.64±2.69)%]差异有统计学意义( F＝1 727.784， P<0.05)；药物释放实验证实万古霉素可以持续释放30 d；抗菌实验结果表明，载药水凝胶可以对金葡菌提供长达72 h的抗菌效果。 结论:PLGA-PEG-PLGA温敏型水凝胶是一种较理想的抗生素载体，无细胞毒性，能够长效缓释负载的抗生素，具有潜在的临床应用价值。

目的 考察透明颤菌血红蛋白基因(vgb)在大肠埃希菌(E.coli)和龟裂链霉菌(S.rimosus)中的表达,研究在不同溶氧条件下表达的透明颤菌血红蛋白(VHb)对龟裂链霉菌生长和土霉素合成的影响.方法 将vgb插入表达型质粒pET-28a中,导入E.coli BL21 (DE3)用以表达VHb并测定其活性.以整合型质粒pSET152为载体,利用ermE*启动子组成型表达vgb基因,将构建的质粒通过接合转移整合到S.rimosusM4018基因组上,利用CO差示光谱法和SDS-PAGE鉴定两个重组菌中的血红蛋白.在5L罐上考察不同溶氧条件下VHb的表达对重组龟裂链霉菌生长和土霉素合成的影响.结果 重组大肠埃希菌和重组龟裂链霉菌都能够表达具有生物活性的VHb,发酵结果表明,在117h时与对照菌相比,重组龟裂链霉菌在高氧和低氧条件下的干重分别提高了6％和32％,同时单位干重土霉素的产量分别提高了41％和93％.结论 VHb在重组龟裂链霉菌中成功表达,改善了菌体的生长和土霉素的合成,为解决工业发酵过程中氧限制问题提供了策略.

在以阿魏酸为底物生物法转化香兰素过程中,通过Red重组技术用外源的透明颤菌血红蛋白基因(vgb)取代大肠杆菌基因组icdA基因,使菌株可以适应高密度、低溶氧发酵,为香兰素的发酵生产提供新的尝试.CO差光谱分析显示整合的vgb基因表达产生了VHb,且该蛋白具有活性.发酵结果显示表达了vgb基因的新菌株与原重组菌株相比在低氧环境下仍能维持较高的生物量,且香兰素产量由原来的1 668 mg/l上升到2 240 mg/l,提高了约34.2％.

目的 评估壳聚糖-聚乳酸-聚乙醇酸共聚物[poly (lactide-co-glycolide),PLGA]双壁微球在体外持续缓释具有生物活性的NGF的可行性.方法 应用乳化-离子交联方法制备包埋NGF的、具有不同三聚磷酸钠(sodium tripolyphosphate,TPP)交联浓度[1％、3％、10％(W/V)]的壳聚糖-PLGA双壁微球,同时制备包埋NGF的PLGA微球.通过光镜、扫描电镜、激光共聚焦显微镜观察双壁微球的表面及内部形态,并行双壁微球的粒径分析和红外光谱分析.取包埋NGF的PLGA微球或1％、3％、10％TPP浓度交联的包埋NGF的壳聚糖-PLGA双壁微球(分别设为A、B、C、D组),于不同时间点行体外微球降解率测定、微球中NGF缓释率检测;以未包埋NGF的壳聚糖-PLGA双壁微球缓释液(设为A1组)作为对照,比较A1、B、C、D组体外微球缓释液中NGF的生物活性[以缓释液中具有阳性轴突延长反应的大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤(PC12)细胞百分比表示].结果 包埋NGF的壳聚糖-PLGA双壁微球呈球形结构,具有相对粗糙的外表面;激光共聚焦显微镜观察示PLGA微球均匀分布于壳聚糖-PLGA双壁微球内;双壁微球的粒径范围为18.5～42.7 μm;红外光谱分析结果说明双壁微球中壳聚糖的氨基与TPP中的磷酸基发生了静电反应.体外降解率测定显示,B、C、D组双壁微球降解速度明显快于A组,并随着TPP浓度的增加而逐渐减慢,培养各时间点各组间微球降解率比较差异均有统计学意义(P＜0.05).体外NGF缓释率测定显示,与A组PLGA微球相比,B、C、D组双壁微球以相对较慢的速度缓释NGF,且缓释速度随TPP浓度增加而减慢.除84 d外,各时间点B、C、D组间比较NGF总缓释率差异均有统计学意义(P＜0.05).体外NGF的生物活性评估显示,培养各时间点B、C、D组缓释液中具有阳性轴突延长反应的PC12细胞百分比均显著高于A1组(P＜0.05).培养7、28d,B、C、D组间比较差异无统计学意义(P＞0.05);56、84d时,C、D组缓释液中具有阳性轴突延长反应的PC12细胞百分比显著高于B组(P＜0.05),C、D组间差异无统计学意义(P＞0.05).结论 包埋NGF的壳聚糖-PLGA双壁微球在周围神经损伤后的再生方面具有临床应用潜力.