目的:建立药用蛇及其水提物的DNA微型条形码鉴别方法.方法:通过比对药用蛇及常见11种混伪品的16S rRNA序列,建立约220 bp的蛇类DNA微型条形码,并与16S rRNA标准条形码比较,对药用蛇原料及水提物进行测序鉴定.采用MEGA-X软件分析遗传距离并以邻接法(NJ)构建系统发育树.结果:DNA微型条形码引物对药用蛇原料及水提物的扩增率为100％,鉴定率为100％.药用蛇及其混伪品的种内平均遗传距离均小于种间平均遗传距离,且各物种在NJ系统发育树中具有良好的单系性,并与16S rRNA标准条形码原料的鉴定结果一致.结论:该研究建立的蛇类DNA微型条形码可有效实现药用蛇原料及水提物等制品的物种鉴别,为保障蛇类原料、临床汤剂及配方颗粒等药品的安全性和有效性提供了技术支撑.

中药鉴定是保证中药有效性和安全性的重要一环.DNA条形码技术让中药鉴定摆脱了经验依赖,弥补了传统化学方法和形态学方法鉴定中药材的不足,然而对于在炮制或加工过程中DNA降解的药材和复杂样品方面鉴定能力有限.中药DNA条形码鉴定技术近年来发展迅速,DNA微型条形码的出现,不仅可用于鉴定DNA发生严重降解的实验材料,在很大程度上弥补了传统条形码的短板,还可作为候选条形码,与标准条形码组合,共同鉴定混合中药材样本.此外,DNA宏条形码技术通过将DNA条形码与高通量测序技术相结合,以实现组合样本中多个物种的检测,是目前混合中药材鉴定方面最有效的分子鉴定方法.该文通过对近年来DNA微型条形码、DNA宏条形码在有关中药物种及中药共存微生物组成鉴定的研究进行梳理总结,以明晰该领域研究现状,并展望未来发展,为中药分子鉴定研究提供参考.

动物药材是我国中药资源的重要组成部分,但是许多药用动物野生资源正逐步萎缩,药材市场中混伪品乱用现象日益严重,因此准确鉴定基源物种是确保动物药临床使用安全的前提.DNA条形码作为一种新兴的分子鉴定技术,是对常规鉴定方法的有效补充,在中药材鉴定领域已有相关应用.文章综述了近年来国内外应用DNA条形码鉴定动物类中药材的研究进展,并对现存问题和解决策略进行了探讨,以期为加强药材市场监管和保护珍稀药用动物提供参考.

目的:建立一种麝香药材的DNA分子鉴别方法,并与全长DNA条形码鉴别方法进行比较.方法:通过比较麝香及其混伪品的COI序列,设计出一对约180 bp的麝香微型DNA条形码鉴别引物,对麝香及其混伪品进行测序鉴定.结果:COI全长扩增引物能在72.1％的样本中扩出条带,而微型条形码引物能扩出所有麝香样本,且微型条形码片段物种鉴别能力与全长片段一致.使用建立的微型DNA条形码鉴别市售麝香样品,检出2批混伪品,其基原物种为鸡Gallus gallus.结论:微型DNA条形码可用于鉴别麝香原动物及药材.

目的:建立基于DNA微型条形码的炮山甲及其混伪品的分子鉴定技术.方法:采用改良的DNA提取方法提取中华穿山甲与其易混物种炮制甲片的DNA,利用线粒体CO Ⅰ、16S rRNA和12S rRNA基因的标准及微型条形码引物进行PCR.双向测序后进行BLAST和序列位点分析,再计算种内和种间K2P遗传距离,并构建NJ系统树.结果:16S rRNA(L2513/H2714)和12S rRNA(L1085/H1259)引物对在所有甲片DNA中均能扩增成功,所获序列与Genbank序列的BLAST比对相似度大于98％.中华穿山甲与其易混物种的种间遗传距离远大于其种内遗传距离,而且各物种在NJ树中表现出单系性,其中16S rRNA微型条形码能将穿山甲属聚在一起.结论:基于16SrRNA的微型条形码技术可有效鉴别炮山甲及其混伪品.

水产类物种掺假导致了商业欺诈、食品安全等问题,建立一种快速高效的水产类物种掺假检测技术迫在眉睫.目前,标准DNA条形码(FDB)在水产类物种掺假检测中已经得到了广泛应用,但是食品加工中的高温、高压、反复冻融和酸碱变化等因素均会使DNA发生降解,导致标准DNA条形码扩增失败.微型DNA条形码(MDB)可以利用相对较短(＜350 bp)的标准DNA片段对深加工水产品进行物种鉴定,对水产品物种掺假检测具有重要意义.本文首先举例说明了世界各国水产品掺假现状,然后介绍了 FDB检测技术及其在实际应用中存在的问题,最后总结了微型DNA条形码技术在水产类物种掺假检测中的应用,并对微型DNA条形码的片段长度选择以及目的基因筛选进行了初步探讨.