The BAP module,comprising BRASSINAZOLE RESISTANT 1(BZR1),AUXIN RESPONSE FACTOR 6(ARF6),and PHYTOCHROME-INTERACTING FACTOR 4(PIF4),functions as a molecular hub to orchestrate plant growth and development.In Arabidopsis thaliana,components of the BAP module physically interact to form a complex system that integrates light,brassinosteroid(BR),and auxin signals.Little is known about the origin and evolution of the BAP module.Here,we con-ducted comparative genomic and transcriptomic analyses to investigate the evolution and func-tional diversification of the BAP module.Our re-sults suggest that the BAP module originated in land plants and that the ζ,ε,and γ whole-genome duplication/triplication events contributed to the expansion of BAP module components in seed plants.Comparative transcriptomic analysis suggested that the prototype BAP module arose in Marchantia polymorpha,experienced stepwise evolution,and became established as a mature regulatory system in seed plants.We developed a formula to calculate the signal transduction pro-ductivity of the BAP module and demonstrate that more crosstalk among components enables higher signal transduction efficiency.Our results reveal the evolutionary history of the BAP module and provide insights into the evolution of plant signaling networks and the strategies employed by plants to integrate environmental and endog-enous signals.

为探讨合欢皂苷J8(julibrosideJ8,J8)抑制肿瘤血管内皮细胞增殖作用靶点及其相关细胞凋亡的信号通路.本文采用HPLC法检测内皮细胞经J8作用后,J8的在细胞内外含量变化;Vina软件将J8与VEGF、FAS、DR3、DR4、DR5、TFR-1进行分子对接分析;Western blot法检测在加药前后,内皮细胞中VEGF、p-JNK、Bax、EnDOG、Caspase-3、Caspase-8以及Caspase-9蛋白表达水平的变化.分子对接结果表明VEGF、FAS对应的靶点蛋白与J8结合性能较好且多位点结合.HUVEC细胞在加入J8作用24h后,VEGF、p-JNK等蛋白表达明显下调,并可显著上调诱导凋亡相关蛋白Bax和EnDOG的表达,而且对Caspase-3、Caspase-8以及Caspase-9的表达水平无显著的影响.J8可能是通过与血管内皮细胞膜表面的VEGF结合,抑制血管内皮细胞增殖,通过削弱VEGF/JNK通路活性从而引起内皮细胞凋亡.

目的 研究续断水提液诱导人宫颈癌HeLa细胞凋亡的机制及药效成分.方法 采用四甲基罗丹明乙酯(TMRE)染色检测线粒体膜电位变化;采用原位末端标记法(TUNEL)及Annexin V/PI染色流式细胞术检测细胞凋亡;采用线粒体膜蛋白TOM20免疫荧光染色观测线粒体形态改变;采用二氯荧光素(DCF)流式细胞仪检测细胞内活性氧水平;采用溶解氧测定仪测定细胞耗氧量;采用蛋白印迹检测凋亡相关蛋白的表达.结果 续断水提液在30 min内以质量浓度依赖方式显著降低HeLa细胞线粒体膜电位;显著升高TUNEL阳性染色、Annexin Ⅴ单阳性及Annexin Ⅴ、PI双阳性细胞数;使线粒体膜蛋白TOM20表达明显下降;使细胞耗氧量下降;使细胞浆细胞色素C、EndoG、Caspase-8含有量升高.续断单体成分续断皂苷B和木通皂苷D(续断皂苷VI)在25、50 μmol/L均不能使HeLa细胞膜电位下降,对细胞增殖及形态没有影响.结论 续断水提液能损伤线粒体,引起HeLa细胞凋亡,其成分续断皂苷B和木通皂苷D不是续断水提液该作用的药效成分.

目的 研究胡黄连苷Ⅱ对脑缺血再灌注损伤后线粒体电压依赖性阴离子通道1(VDAC1)表达的影响和意义.方法 应用线栓法建立大鼠大脑中动脉闭塞(MCAO)模型,按随机数字表法将造模成功的70只大鼠分为假手术组、模型组、胡黄连苷组、VDAC1选择性抑制剂钌红组、钙红+胡黄莲苷组、VDAC1选择性激动剂精胺组、精胺+胡黄连苷组,每组10只.改良神经功能缺损评分(mNSS)评价动物神经行为功能;ELISA检测脑组织活性氧(ROS)含量;HE染色观察神经细胞形态;原位末端标记(TUNEL)检测神经细胞凋亡;免疫组化染色和Western印迹检测VDAC1和核酸内切酶(EndoG)表达水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠mNSS评分明显升高[(9.6±1.9)分],ROS含量增加[(47.6 ±2.7)U/ml],皮质区变性细胞(0.79±0.04)和凋亡细胞增加(23.8±2.8),VDAC1 (0.94 ±0.06)和EndoG[胞质(0.76±0.06),胞核(0.75±0.06)]表达均显著增强(P＜0.05).与模型组比较,胡黄连苷组大鼠mNSS评分下降[(5.7±0.9)分],ROS含量降低[(35.6 ±2.2)U/ml],皮质区变性细胞(0.48±0.04)和凋亡细胞减少(14.5±2.1),VDAC1 (0.63 ±0.06)和EndoG[胞质(0.34±0.05),胞核(0.31±0.06)]表达均显著降低(P＜0.05).结论 胡黄连苷Ⅱ可通过下调脑缺血再灌注后VDAC1表达而减少线粒体凋亡蛋白EndoG的释放,发挥神经保护作用.

目的:探讨腹腔镜超声在达芬奇机器人手术中的应用价值.方法:回顾性分析2014年9月~2017年9月收治的18例行达芬奇机器人辅助腹腔镜联合使用腹腔镜超声(RLUS)手术患者的临床资料,其中男12例,女6例.内生性肾肿瘤13例,行RLUS定位机器人辅助腹腔镜肾部分切除术;肾癌合并腔静脉瘤栓1例,行 RLUS定位机器人辅助腹腔镜肾癌根治+下腔静脉切开取瘤栓术;肾盂输尿管连接部梗阻合并肾结石4例,行RLUS定位机器人辅助腹腔镜肾盂输尿管离断成形+输尿管软镜取石术.结果:18例患者均行机器人辅助腹腔镜手术顺利完成.13例肾部分切除术患者手术时间为55~70 min,平均60 min,术中出血20~100 ml,平均35 ml,术后病理:12例为透明细胞癌,1例为乳头状细胞癌,切缘均为阴性,术后随访3~35个月,未发现复发及转移.1例行右肾癌根治+下腔静脉切开取瘤栓术患者手术时间135 min,术中出血110 ml.术后病理为右肾透明细胞癌,静脉内瘤栓形成,术后随访3个月,未出现复发及转移.4例肾盂输尿管离断成形+输尿管软镜取石术患者手术时间95~135 min,平均110 min,术后2个月拔除双J管.术后3个月行B超检查,显示积水均较术前明显缓解,2例行IVU检查,患侧输尿管均可全程显影.结论:达芬奇手术机器人联合腹腔镜超声可以在术中准确定位,辅助完成一系列复杂手术,手术效果良好.

目的:了解生脉注射液中可见异物的基本情况,对其可见异物的控制及检查方法进行研究.方法:对收集到的生脉注射液样品,分别采用灯检法及光散射法进行可见异物检查,汇总结果,并予以分析;同时考察生脉注射液的可见异物成因中外源性因素及内源性因素的影响.结果:市面上流通的生脉注射液样品可见异物检查的阳性检出率较低.光照、温度、pH等因素对生脉注射液的可见异物影响不大.结论:各生产企业在生脉注射液的可见异物控制方面措施有效,质量控制较好.

目的:探究山柰酚(KA)抵抗对乙酰氨基酚(APAP)诱导的肝细胞损伤的作用.方法:CCK-8法检测KA对肝细胞活性的影响,检测细胞LDH释放比率确定APAP诱导肝细胞损伤模型的浓度和时间;CCK-8法检测肝细胞活性,检测肝细胞释放的LDH,观察肝细胞形态评估KA对对乙酰氨基酚诱导肝细胞损伤的影响;Western Blot检测p-JNK、JNK、EndoG蛋白表达.结果:本研究采用5 mmol/L APAP诱导肝细胞24 h建立药物肝损伤细胞模型.与APAP组比较,KA组肝细胞细胞的形态明显改善,凋亡细胞明显减少(P<0.01),LDH释放比率明显下降(P<0.001),Western Blot结果表明经KA治疗后,肝p-JNK和Endo G蛋白表达明显下调.结论:该研究表明KA通过抑制p-JNK和Endo G来抵抗APAP诱导肝细胞凋亡以达到肝细胞的保护作用.

目的 探究TRIM24在缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡中的作用及分子机制.方法 建立H9C2心肌细胞缺血再灌注损伤模型.首先用流式细胞术检测凋亡情况,并用Western blot检测缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡中TRIM24以及凋亡相关蛋白的表达情况.随后通过表达TRIM24验证其抗凋亡作用及分子机制,利用细胞核浆蛋白分离试剂盒提取细胞核和细胞质蛋白,并检测EndoG的核浆分布情况.结果 首先确定缺血再灌注损伤能明显诱导心肌细胞凋亡,而且TRIM24在凋亡心肌细胞中的表达明显减少;过表达TRIM24通过调控BAX/BCL-2表达改善线粒体稳态,进而减少线粒体内凋亡相关蛋白EndoG的核转移,最终显著缓解缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡.结论 TRIM24通过调控BAX/BCL-2表达改善线粒体稳态,进而减少线粒体内凋亡相关蛋白EndoG的核转移,最终显著缓解缺血再灌注诱导的心肌细胞凋亡.

The transition to flowering is the most dra-matic phase change in flowering plants and is crucial for reproductive success. A complex regulatory network in plants has evolved to perceive and integrate the endog-enous and environmental signals. These signals perceived, including day length and temperature, converge to regu-late FLOWERING LOCUS T (FT), which encodes a mobile stimulus required for floral induction in Arabidopsis. Despite the discovery of modulation of FT messenger RNA (mRNA) expression by ambient temperature, whether the trafficking of FT protein is controlled in response to changes in growth temperature is so far unknown. Here, we show that FT transport from companion cells to sieve elements is controlled in a temperature-dependent manner. This process is mediated by multiple C2 domain and transmembrane region proteins (MCTPs) and a soluble N-ethylmaleimide-sensitive factor protein attach-ment protein receptor (SNARE). Our findings suggest that ambient temperatures regulate both FT mRNA expression and FT protein trafficking to prevent precocious flowering at low temperatures and ensure plant reproductive suc-cess under favorable environmental conditions.

目的 观察龙虎人丹(LHRD)对过量对乙酰氨基酚(APAP)所致急性肝损伤的防治作用,探讨其防治药物性肝损伤的潜在分子机制.方法 取30只C57BL/6J小鼠随机分成正常对照组、APAP模型组、N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC)阳性对照组(50 mg/kg)、LHRD低剂量(80 mg/kg)组和LHRD高剂量(160 mg/kg)组,固定时间灌胃给予相应药物6天,其中正常对照组和APAP模型组灌胃给予羧甲基纤维素钠(CMC-Na).最后一次给药后所有小鼠禁食22 h,腹腔注射250 mg/kg APAP,其中正常对照组腹腔注射PBS,6h后处死小鼠并取其血清和肝脏.采用试剂盒检测各组小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)活性及肝脏中谷胱甘肽(GSH)含量;HE染色观察肝脏组织形态学变化;荧光探针DCFH-DA法检测组织细胞内活性氧(ROS)表达;Western Blot检测肝脏组织谷氨酸-半胱氨酸连接酶催化亚基(GCLC)和核酸内切酶G(EndoG)表达.结果 与正常对照组比较,APAP模型组血清ALT活性显著升高(P＜0.01),细胞损伤显著加重,EndoG蛋白表达和ROS含量显著增加(P＜0.01),肝脏GSH含量及GCLC蛋白表达均下调(P＜0.05);与APAP模型组比较,NAC阳性对照组及LHRD给药组血清ALT活性下降(P＜0.05),ROS含量及EndoG蛋白表达下调(P＜0.01,P＜0.05),肝组织形态均有改善,且肝脏GSH含量及GCLC蛋白表达量均显著上调(P＜0.01,P＜0.05).结论 LHRD可改善过量对乙酰氨基酚诱导的急性肝损伤,其机制可能与增强肝脏抗氧化应激能力,保护肝细胞有关.