目的:探讨前列腺孤立性导管内癌（isolated intraductal carcinoma of the prostate，iIDC-P）的临床病理特征、分子改变、鉴别诊断及预后。方法:回顾性收集宁波市临床病理诊断中心2016—2022年间的3例iIDC-P的临床病理学资料，进行光镜观察、免疫组织化学染色、高通量DNA靶向测序及随访，并复习相关文献。结果:例1~3患者年龄分别为61、67、77岁，术前总前列腺特异性抗原（TPSA）水平分别为7.99、7.99、4.86 μg/L。例1和例2包含前列腺穿刺和根治标本，例3为经尿道前列腺电切标本。镜下：例1穿刺标本仅1条组织见导管内癌（累及2个导管）、根治标本其中6张切片见导管内癌（病灶直径0.3~1.1 cm），其中1张切片见小灶低级别腺泡腺癌（病灶直径0.05 cm）。例2穿刺标本6条组织见导管内癌，根治标本其中13张切片见导管内癌（病灶直径0.5~1.6 cm），另外3张切片可见低级别腺泡腺癌（最大病灶直径0.6 cm）。例3电切标本其中5条组织见导管内癌。例1和例2导管内癌呈实性生长，导管-腺泡显著膨胀，核显著异型；例3呈致密筛状或疏松筛状结构，核显著异型，核仁明显。例2伴有粉刺样坏死，3例核分裂象均易见。导管内癌免疫表型：双标34βE12+P504s显示基底细胞表达34βE12/异型肿瘤细胞表达P540s，p63和CK5/6显示腺泡/导管周围基底细胞，肿瘤细胞表达NKX3.1、雄激素受体、前列腺特异性抗原、前列腺特异性酸性磷酸酶，不表达GATA3，导管内癌和腺泡腺癌均弱表达PTEN、不表达ERG。高通量DNA靶向测序：例2和例3伴有MAPK/PI3K通路基因改变（KRAS、MTOR和PTEN），例2伴有p53突变、例3伴有FOXA1突变。3例均未发现TMPRSS2：：ERG融合，3例均显示微卫星稳定，肿瘤突变负荷低（2.1~3.1 muts/Mb）。随访16~91个月，均无生化复发及远处转移。结论:iIDC-P是一种特殊的前列腺导管内癌，不同于伴有高级别前列腺癌的前列腺导管内癌，具有独特的分子改变，可能代表一种特殊类型前列腺癌的原位病变。

目的:检测翼状螺旋转录因子叉头框家族蛋白(FOX) A1在膀胱癌组织及细胞中的表达水平，探讨FOXA1对膀胱癌细胞生物学功能的影响及机制。方法:收集郑州大学第一附属医院2016年1月1日至2020年1月1日膀胱癌根治术石蜡病理92例，癌旁组织79例，采用免疫组织化学检测膀胱癌患者及正常膀胱上皮组织中FOXA1蛋白的表达水平，并分析FOXA1表达与患者临床病理特征的关系。在膀胱癌细胞系5637中转染小干扰RNA(siRNA)-FOXA1，将细胞分为对照组(shctrl)及转染组(shFOXA1)采用蛋白质印迹法(Western blot)验证转染效率。采用荧光细胞增殖实验检测细胞增殖能力，采用Matrigel检测细胞侵袭能力。采用Western blot检测snail、波形蛋白(Vimentin)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)表达水平，两组间比较采用 t检验。 结果:免疫组化显示FOXA1在膀胱癌中表达水平显著低于正常膀胱上皮组织[0.45(41/92)比0.63(50/79)， χ2＝5.986， P<0.05]，高级别尿路上皮癌、Ⅲ＋Ⅳ期、T3＋T4膀胱癌组织中FOXA1表达水平更低，差异有统计学意义[0.43(21/49)比0.70(30/43)，0.39(13/33)比0.64(38/59)，0.29(6/21)比0.63(45/71)， χ2＝6.713、5.360、7.949， P<0.05]，shFOXA1转染5637细胞系成功后，对照组在3、5 d时细胞增殖数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为，3 d：(157.67±1.53)个比(420.00±21.52)个；5 d：(421.00±23.00)个比(1 387.01±32.36)个， t＝21.061、39.652， P<0.01；shctrl比shFOXA1-2为，3 d：(157.67±1.53)个比(407.00±16.37)个；5 d：(421.00±23.00)个比(1 493.00±40.73)个， t＝26.673、30.132， P<0.05]。Matrigel实验中对照组侵袭细胞数目低于转染组[5637细胞系shctrl比shFOXA1-1为(151.62±13.77)个比(343.14±20.44)个， t＝21.551， P<0.05；shctrl比shFOXA1-2为(151.62±13.77)个比(407.50±22.50)个， t＝26.422， P<0.05]。Western blot实验显示FOXA1下调组snail、Vimentin表达显著高于对照组(snail：5.24±0.94比1.00±0.09， t＝7.831， P<0.05；Vimentin：5.88±0.48比1.00±0.10， t＝17.141， P<0.05)，FOXA1下调组E-cadherin表达水平显著低于对照组(0.18±0.03比1.00±0.06， t＝22.445， P<0.05)。 结论:FOXA1在膀胱癌组织中异常低表达，可作为抑癌基因在膀胱腺癌发生发展发挥重要作用。

本研究通过抗雄激素药物作用于慢病毒转染构建的叉头框家族蛋白A1(FOXA1)高表达管腔样雄激素受体型(LAR)三阴性乳腺癌(TNBC)细胞株，探究抗雄激素治疗在LAR型TNBC中的作用。

近年来，随着测序技术的发展和对不同人种前列腺癌分子改变的研究，前列腺癌发病机制呈现出明显的人种差异。本文综述前列腺癌中ETS融合基因及FOXA1、SPOP、IDH1基因突变等驱动基因的研究进展，并发现前列腺癌分子分型的研究呈现出中西方人群不同的分子改变。西方人群前列腺癌分子改变以ETS融合基因为主，而中国人群则以基因突变为主，主要为FOXA1突变和SPOP突变，且中国人群前列腺癌优势融合基因并非ETS融合基因，而是SCHLAP1-UBE2E3融合基因。

目的:通过蛋白相互作用网络探讨糖尿病靶点与新型冠状病毒(2019-nCoV)受体血管紧张素转换酶2(ACE2)的关系，为临床用药提供新思路。方法:从GeneCards、OMIM数据库获取糖尿病靶点，将关联分数超过10的靶点纳入，并手动添加ACE2蛋白。通过String获取初始蛋白相互作用关系网络，将其导入Cytoscape3.7.1软件，筛选出与ACE2直接相关的蛋白靶点作为最终分析的靶标，再次导入String，得到待分析蛋白相互作用关系网络，并对其进行模块识别及GO分析和KEGG通路分析。通过对ACE2所在模块评分，分析其对整个网络的影响。结果:最终从糖尿病靶点中筛选得到19个ACE2相关蛋白，通过聚类分析发现3个功能模块，模块涉及G蛋白藕联受体结合、抗氧化剂活性、胰岛素样生长因子受体结合等生物过程，主要涉及的信号通路有肾素-血管紧张素系统信号通路、2型糖尿病信号通路，以及FOXA2信号通路。评分结果显示，模块1内REN、AGT、INS、NOS3、IL6、CRP的评分最高。结论:ACE2与糖尿病关键蛋白有广泛的联系，COVID-19可能冲击糖尿病患者RAS，导致糖尿病合并COVID-19患者的高死亡率，临床可考虑使用RAS抑制剂减轻COVID-19感染对糖尿病患者的影响。

目的:探讨叉头框蛋白A1(FoxA1)在乳腺癌组织中表达及其对乳腺癌细胞增殖、周期和凋亡的影响。方法:收集我院2019年1月至2022年1月的65例乳腺癌组织和癌旁组织作为研究对象，采用免疫组织化学分析FoxA1蛋白表达水平；人乳腺癌细胞系MCF-7分为对照组和FoxA1 KD组，分别采用慢病毒感染建立稳定细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和克隆形成实验测定细胞增殖能力；采用流式细胞术分析两组细胞凋亡水平和周期变化；采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析FoxA1对凋亡和周期相关蛋白的影响。组间数据比较采用 t检验。 结果:癌旁组织中FoxA1蛋白相对表达水平(1.46±0.75)明显低于神经胶质瘤组织WDR12蛋白相对表达水平(2.66±0.57)，差异有统计学意义( t＝10.280， P<0.05)。对照组细胞吸光度( A)值(1.91±0.06)明显高于FoxA1 KD组细胞 A值(1.44±0.09)，差异有统计学意义( t＝10.650， P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(80.55±3.60)%]明显高于FoxA1 KD组细胞克隆形成率[(42.67±2.51)%]，差异有统计学意义( t＝21.160， P<0.05)。对照组细胞凋亡比例[(3.77±1.00)%]明显低于FoxA1 KD组细胞凋亡比例[(32.24±5.93)%]，差异有统计学意义( t＝11.600， P<0.05)。对照组细胞G 0/G 1期比例[(33.74±2.59)%]低于FoxA1 KD组细胞G 0/G 1期比例[(41.52±2.52)%]比较，差异无统计学意义( t＝5.721， P>0.05)。对照组细胞S期比例[(33.20±2.29)%]明显高于FoxA1 KD组细胞S期比例[(26.65±2.08)%]，差异有统计学意义( t＝5.181， P<0.05)。对照组和FoxA1 KD组细胞G 2/M期比例[(34.77±2.95)%、(34.18±1.68)%]比较，差异无统计学意义( t＝0.431， P>0.05)。对照组细胞半胱氨酰天冬氨酸特异性蛋白酶(Caspase)-3 mRNA表达水平(0.92±0.09)明显低于FoxA1 KD组细胞(1.61±0.18)，差异有统计学意义( t＝8.633， P<0.05)。对照组细胞周期蛋白D1(Cyclin D1) mRNA表达水平(0.95±0.04)明显高于FoxA1 KD组细胞(0.50±0.11)，差异有统计学意义( t＝9.082， P<0.05)。 结论:FoxA1蛋白在乳腺癌组织中表达水平明显增加，参与了乳腺癌细胞增殖、凋亡和周期等生物学过程。

Background::The ability to generate functional hepatocytes without relying on donor liver organs holds significant therapeutic promise in the fields of regenerative medicine and potential liver disease treatments. Clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR) activator (CRISPRa) is a powerful tool that can conveniently and efficiently activate the expression of multiple endogenous genes simultaneously, providing a new strategy for cell fate determination. The main purpose of this study is to explore the feasibility of applying CRISPRa for hepatocyte reprogramming and its application in the treatment of mouse liver fibrosis.Method::The differentiation of mouse embryonic fibroblasts (MEFs) into functional induced hepatocyte-like cells (iHeps) was achieved by utilizing the CRISPRa synergistic activation mediator (SAM) system, which drove the combined expression of three endogenous transcription factors— Gata4, Foxa3, and Hnf1a—or alternatively, the expression of two transcription factors, Gata4 and Foxa3. In vivo, we injected adeno-associated virus serotype 6 (AAV6) carrying the CRISPRa SAM system into liver fibrotic Col1a1-Cre ER; Cas9 fl/fl mice, effectively activating the expression of endogenous Gata4 and Foxa3 in fibroblasts. The endogenous transcriptional activation of genes was confirmed using real-time quantitative polymerase chain reaction (RT-qPCR) and RNA-seq, and the morphology and characteristics of the induced hepatocytes were observed through microscopy. The level of hepatocyte reprogramming in vivo is detected by immunofluorescence staining, while the improvement of liver fibrosis is evaluated through Sirius red staining, alpha-smooth muscle actin (α-SMA) immunofluorescence staining, and blood alanine aminotransferase (ALT) examination. Results::Activation of only two factors, Gata4 and Foxa3, via CRISPRa was sufficient to successfully induce the transformation of MEFs into iHeps. These iHeps could be expanded in vitro and displayed functional characteristics similar to those of mature hepatocytes, such as drug metabolism and glycogen storage. Additionally, AAV6-based delivery of the CRISPRa SAM system effectively induced the hepatic reprogramming from fibroblasts in mice with live fibrosis. After 8 weeks of induction, the reprogrammed hepatocytes comprised 0.87% of the total hepatocyte population in the mice, significantly reducing liver fibrosis. Conclusion::CRISPRa-induced hepatocyte reprogramming may be a promising strategy for generating functional hepatocytes and treating liver fibrosis caused by hepatic diseases.

目的 探索前列腺癌神经内分泌分化(neuroendocrine differentiation,NED)进展中单胺氧化酶 A(monoamine oxidase A,MAOA)和叉头框蛋白A1(forkhead box A1,FOXA1)的动态变化特征,为临床神经内分泌型前列腺癌(neuroendocrine prostate cancer,NEPC)的治疗提供新的策略.方法 通过恩杂鲁胺(enzalutamide,ENZ)长期持续诱导的方式建立NED的细胞模型和小鼠移植模型;采用Western Blot和Real-time PCR方法检测MAOA、FOXA1 在NED中的动态表达;选用GEO数据库分析在多种NED模型中MAOA与FOXA1 的动态变化趋势;构建前列腺癌细胞系小鼠移植模型,通过免疫组化分析体内模型中MAOA、FOXA1 在NED中的动态表达;通过慢病毒转染干预MAOA,检测MAOA对FOXA1 的调控作用.结果 MAOA与FOXA1 在NED过程中均呈现先升高后降低的动态变化特征;敲低前列腺癌细胞中MAOA可以导致FOXA1 的表达降低,这可能是MAOA通过FOXA1 在NED的不同阶段发挥不同作用.结论 MAOA和FOXA1 在NED过程中呈先升高后降低的趋势,MAOA的表达能影响FOXA1 的水平,MAOA/FOXA1 可能在NED过程中发挥动态调控的作用.

The highly conserved target of rapamycin(TOR)pathway plays an important role in aging across species.Previous studies have established that inhibition of the TOR complex 1(TORC1)significantly extends lifespan in Caenorhabditis elegans.However,it has not been clear whether TORC1 perturbation affects aging in a spatiotemporal manner.Here,we apply the auxin-inducible degradation tool to knock down endogenous DAF-15,the C.elegans ortholog of regulatory associated protein of TOR(Raptor),to char-acterize its roles in aging.Global or tissue-specific inhibition of DAF-15 during development results in various growth defects,whereas neuron-specific knockdown of DAF-15 during adulthood significantly extends lifespan and healthspan.The neuronal DAF-15 deficiency-induced longevity requires the intestinal activities of DAF-16/FOXO and PHA-4/FOXA transcription factors,as well as the AAK-2/AMP-activated protein kinase a catalytic subunit.Transcriptome profiling reveals that the neuronal DAF-15 knockdown promotes the expression of genes involved in protection.These findings define the tissue-specific roles of TORC1 in healthy aging and highlight the importance of neuronal modulation of aging.

目的 检测宫颈癌组织中细胞分裂周期相关蛋白5(CDCA5)和叉头框蛋白A1(FOXA1)的表达,分析两者在宫颈癌患者中的临床意义.方法 选取2016年2月-2018年11月在丽水市人民医院确诊为宫颈癌的患者80例,利用实时荧光定量(qRT-PCR)技术检测宫颈癌组织和癌旁组织中CDCA5和FOXA1的相对表达量.分析宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1表达与患者临床病理参数之间的关系.绘制Kaplan-Meier生存曲线,分析CDCA5和FOXA1与宫颈癌患者预后的关系.分析宫颈癌组织中CDCA5与FOXA1表达的相关性.结果 癌旁组织中CDCA5和FOXA1相对表达量分别为(1.00±0.00)和(1.00± 0.00),宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1相对表达量分别为(1.53±0.29)和(1.58±0.34),差异均有统计学意义(4=16.346、15.258,均P＜0.05).CDCA5和FOXA1相对表达量与宫颈癌患者的肿瘤直径、FIGO分期、肌层浸润深度之间关系密切(均P＜0.05).CDCA5和FOXA1高表达组患者的生存率低于低表达组患者(均P＜0.05).宫颈癌组织中CDCA5和FOXA1相对表达量呈正相关(r=0.548,P＜0.05).结论 CDCA5、FOXA1在宫颈癌组织中表达上调,两者关系密切,可能共同参与宫颈癌的发病机制和病情进展,并且与患者预后有关.