目的:了解徐州地区儿童腺病毒感染的流行学特征。方法:收集2013—2019年徐州市儿童医院流感样患儿咽拭子标本7 257例，采用Real-time PCR方法检测腺病毒，阳性标本扩增其六邻体基因进行型别分析，对腺病毒55型采用Hep-2细胞分离培养并全基因测序分析。结果:7 257例患儿共检出227例腺病毒阳性，检出率为3.13%，感染主要集中在3~<6岁年龄组儿童，其中检出高峰为5月和6月份；型别分析结果显示，腺病毒感染主要为腺病毒3型和7型，不同年份流行优势型别在腺病毒3型和7型之间更替。腺病毒55型经细胞分离全基因测序，发现仅有少数碱基点突变，未发生集中区域的基因突变和重组。结论:2013—2019年徐州地区儿童流感样病例中腺病毒以3和7型为主，感染人群以学龄前儿童为主，检出高峰为春夏季。

目的:了解2017—2020年无锡市人腺病毒(human adenovirus，HAdV)的基因分型、流行特征及主要流行株的基因变异情况。方法:使用实时荧光PCR技术检测2017—2020年哨点医院送检急性呼吸道感染标本，荧光PCR检测阳性标本经细胞分离培养，Hexon基因测序、分析，确定基因型别及变异。结果:2017—2020年无锡市HAdV检出情况略有不同，总体在5~7月和11~次年1月份出现2个流行峰。病例主要为幼儿(1~3岁)，阳性标本占比为32.05%(75/234)。临床症状主要为发热占比为65.81%，其次是咳嗽占比为58.12%。检出HAdV有8个型别，分属3个亚属，HAdV-3已成为主要流行株，占比为47.18%(67/142)，其余HAdV-7 13.38%(19/142)，HAdV-55 7.75%(11/142)，HAdV-1 9.15%(13/142)，HAdV-2 9.15%(13/142)，HAdV-5 5.63%(8/142)，HAdV-6 2.11%(3/142)，HAdV-4 5.63%(8/142)。本地流行株HAdV-3与9株国内和国际(KX384958.1-USA)参考株比较，HAdV-3在进化过程中623位、938位出现氨基酸的突变。结论:2017—2020年无锡市HAdV在5~7月和11~次年1月出现2个流行峰，病例主要为1~3岁的幼儿，HAdV-3已逐渐成为优势流行株，在压力选择和进化过程中出现2个高频突变位点。

目的:评价人工合成CpG寡聚脱氧核苷酸(CpG oligodeoxynucleotide, CpG-ODN)作为佐剂对灭活人腺病毒55型(human adenovirus type 55, HAdV-55)抗原诱导BALB/c小鼠免疫应答的影响。方法:HAdV-55 QS原型株经噬斑纯化构建疫苗候选株种子库，将疫苗候选株扩增产物经0.05% β-丙内酯灭活，纯化后制备成全病毒颗粒抗原。纯化HAdV-55抗原按低剂量组(0.2 mg/ml)和高剂量组(1 mg/ml)分别与CpG-ODN和氢氧化铝佐剂等体积混合，乳化后接种BALB/c小鼠，同时设PBS对照组，间隔21 d加强免疫1次。分别在初次免疫后21 d和35 d采集小鼠静脉血并分离血清，采集末次血清时分离小鼠脾脏淋巴细胞。通过酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbent assay，ELISA)和微量中和试验检测免疫后小鼠血清中HAdV-55特异性IgG抗体和中和抗体水平，酶联免疫斑点法(enzyme linked immunospot assay，ELISpot)检测小鼠分泌IL-4和IFN-γ细胞因子淋巴细胞水平。结果:无论有无佐剂，随着免疫次数和接种剂量的增加，灭活HAdV-55抗原诱导BALB/c小鼠产生的病毒特异性IgG抗体显著升高；而中和抗体只有在加强免疫后才能达到可检测水平，中和抗体几何平均滴度(geometric mean titer，GMT)在1：11~1：23之间；使用不同佐剂对小鼠免疫应答有显著影响，低剂量抗原联合CpG-ODN和氢氧化铝混合佐剂可诱导小鼠产生较高的体液免疫和细胞免疫应答，其特异性IgG抗体和中和抗体水平分别是单独使用氢氧化铝佐剂组小鼠的2.2和1.8倍，分泌IFN-γ淋巴细胞数是其2.3倍。结论:新型CpG-ODN佐剂免疫能显著提高灭活HAdV-55全病毒抗原在BALB/c小鼠体内的免疫原性，同时使细胞免疫应答向偏向Th1型。

目的:建立一种呼吸道腺病毒常见血清型检测方法，并利用该方法检测温州地区儿童呼吸道人腺病毒(HAdV)感染的主要血清型。方法:利用基于毛细电泳的多重PCR法建立呼吸道腺病毒常见12种血清型检测方法，将2018年1月至2019年12月收治于温州医科大学附属育英儿童医院，经直接免疫荧光法检测HAdV阳性的1 059例急性呼吸道感染患儿的呼吸道标本作为研究对象，对其进行回顾性分析，采用多重PCR方法测定HAdV-1、2、3、4、5、7、14、21、37、40、41和55型等12种血清型，同时随机抽取部分标本与一代测序法比较检测结果一致性。结果:共收集到1 059份HAdV抗原阳性的呼吸道标本，多重PCR法检测发现，1种血清型阳性947例(89.4%)，2种血清型混合感染13例(1.2%)，阴性24例(2.3%)，阳性但不能分型75例(7.1%)。947例单种血清型阳性儿童中，B亚群的HAdV-3型415例(43.8%)，HAdV-7型318例(33.6%)，HAdV-55型12例(1.2%)，HAdV-21型2例(0.2%)；C亚群的HAdV-2型108例(11.4%)，HAdV-1型70例(7.4%)，HAdV-5型16例(1.7%)；E亚群的HAdV-4型6例(0.6%)。未检出HAdV-14、HAdV-37、HAdV-40和HAdV-41。随机抽取多重PCR法检测的HAdV分型阳性的标本51例，与一代测序的检测进行比较，均符合。结论:建立并验证了基于毛细电泳的多重PCR法对儿童呼吸道腺病毒感染常见血清型的诊断价值。B亚群的HAdV-3、HAdV-7和C亚群的HAdV-2、HAdV-1为温州地区儿童呼吸道腺病毒感染的主要血清型，HAdV-14、HAdV-37、HAdV-40和HAdV-41未检出。

目的:了解我国河南省漯河市严重急性呼吸道感染(severe acute respiratory infection，SARI)病例人腺病毒(human adenovirus，HAdV)基因特征。方法:对2017年10月至2019年2月SARI病例中鉴定的HAdV阳性标本进行病毒分离后，扩增并测定其Hexon基因的Loop2区域，初步鉴定病毒分离株型别。然后根据初筛结果，分别使用HAdV各型特异性引物扩增病毒株3个靶基因(Penton base、Hexon和Fiber)的序列全长，并与各型原型株以及国内外相应型别代表株进行系统发育和序列同源性分析，以确定HAdV病毒株型别并了解其基因特征。结果:从河南省漯河市783份SARI病例中鉴定的27份HAdV阳性咽拭子标本中，共分离获得18株病毒分离株，分子分型结果显示，这些毒株分属于B亚属(HAdV-3、HAdV-7和HAdV-55)、C亚属(HAdV-1、P1H2F2、Px1/Ps3H5F5、P89H5F5和HAdV-6)和E亚属(HAdV-4)。其中C亚属HAdV-1分离阳性率最高(33.3%)，其次为B亚属HAdV-3(22.2%)和C亚属P1H2F2(11.1%)。本研究4种HAdV病毒株(HAdV-3、HAdV-4、HAdV-7和HAdV-55)基因组序列在时间和空间上具有显著的保守性和稳定性特点，而HAdV-C鉴定了3种基因重组模式(P1H2F2、Px1/Ps3H5F5和P89H5F5)，其潜在的公共卫生意义需进一步研究证实。结论:2017—2019年河南省漯河市SARI病例HAdV感染主要以C亚属为主，其次为B亚属和E亚属，该数据为当地腺病毒相关传染病的预防控制提供了科学依据。

目的 分析人腺病毒 55 型(HAdV-55)所致肺炎青年患者的临床特征.方法 通过医院医疗信息系统收集人腺病毒 55 型(HAdV-55)所致肺炎青年患者的病历资料,采用描述性流行病学方法对资料进行回顾性研究,并分析患者一般情况、临床症状和体征、实验室检查及影像学检查等结果.结果 临床症状以发热、咳嗽、咳痰、咽痛、乏力、畏寒为主,体征主要为咽部充血、呼吸音异常、扁桃体肿大.实验室检查以白细胞计数(WBC)正常、淋巴细胞计数(LYM)降低、C反应蛋白升高、丙氨酸氨基转移酶(ALT)升高、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)升高、乳酸脱氢酶(LDH)升高为主.影像学检查病变以斑片状实变影及团块样实变影多见,可伴有磨玻璃影.结论 HAdV-55可引起疫情暴发,患者以发热、咳嗽、咽痛为主要症状,影像学以斑片状实变影及团块样实变影多见.

目的 探究西南地区部队官兵55型人腺病毒(HAdV55)抗体流行情况,并检测HAdV55抗体的中和活性,为部队预防和控制HAdV55疫情提供参考依据.方法 收集西南地区部队官兵血清样本325份,用ELISA法检测血清中HAdV55抗体,通过体外中和实验检测抗体阳性血清中和HAdV55感染的活性.结果 西南地区部队官兵体内HAdV55抗体的阳性率较低,325份血清中抗体阳性仅有19份,阳性率为5.85%.19份抗体阳性的血清中,14份在人喉癌上皮细胞系Hep-2具有中和活性,中和效价最高为1:64.结论 西南地区官兵体内HAdV55抗体水平较低,抵抗HAdV55感染的能力较弱.因此一旦出现个别感染者,部队应加强对HAdV55感染的预防和控制,以防止感染的扩散.

目的 分析中缅树鼩(Tupaiabelangeri,Tree Shrew)自然感染 5 种高致病性人腺病毒(Human Adenovirus, HAdv)的血清流行病学,以探讨人腺病毒感染树鼩的可能性.方法 采用固定病毒稀释血清法测定34份树鼩血清对 Ad3、Ad4、Ad7、Ad14和 Ad55的中和抗体水平.结果 4种B组腺病毒的中和抗体阳性率及中和效价较 E组4型的大,阳性率由大到小依次为:Ad14(55.88%)、Ad3(47.06%)、Ad55(29.71%)、Ad7(14.71%)、Ad4(8.82%),树鼩血清主要表现为 Ad3、Ad14和 Ad55混合型多价抗血清.结论 中缅树鼩可自然感染5种人腺病毒,有望以树鼩为实验动物,建立一种成熟的人腺病毒感染模型.

目的 探讨紫外线和热力对55型腺病毒(HAdV-55)的灭活效果,为HAdV-55感染的防控提供参考.方法 分别将HAdV-55置于波长245 nm的紫外线和65℃热力条件下作用30 min、1h和2h,通过定量PCR和病毒滴度试验,检测各处理因素对HAdV-55感染HEp-2细胞水平的影响.结果 紫外线照射30 min后,HAdV-55感染HEp-2细胞的水平降低约50％;紫外照射1h和2h后,病毒仍具有一定感染能力,但感染水平显著降低.65℃热力处理30 min,HAdV-55感染HEp-2的水平降低了约104个数量级.紫外线和热力灭活的病毒产生子代病毒的能力均显著降低.结论 紫外线和热力对HAdV-55都有灭活作用,其灭活作用的强弱与处理时间有关,254 nm紫外线照射和65℃热力处理30 min以上均能显著降低HAdV-55产生子代病毒的水平.

目的 了解新型腺病毒55型(HAdV-55)在中国的流行状况和基因变异及进化规律,为其预防和控制提供科学依据.方法 本研究对2011-2014年在中国5个省市(北京、河北、山东、湖南和云南)发热呼吸道症候群患者标本中分离到的HAdV-55毒株进行了hexon、fiber和penton base 三个基因的序列测定,同时下载GenBank数据库中中国以及全球其他国家和地区、不同时间流行的HAdV-55病毒株的三个基因的序列进行比对,并利用多种序列分析软件进行了同源性和基因进化分析.结果 2006-2016年10年期间,在中国的15个省(市、自治区和直辖市)分离到HAdV-55病毒.进化分析结果显示,HAdV-55的三个主要结构基因均高度保守,其核苷酸和氨基酸序列同源性均大于99％;HAdV-55病毒在进化上是极为保守稳定,在进化树上聚集在一个分支,并有一定的时间聚集进化趋势.HAdV-55的hexon和fiber基因进化速率分为5.228×10-5和1.238×10-4substitutions/site/year,hexon基因的最早共同进化祖先tMRCA可追溯到1963年.结论 HAdV-55已经在中国形成了广泛传播和持续流行态势,建立有效的监测系统和开展疫苗相关研究对于其预防和控制至关重要.