目的 通过初步建立湖南省精液常规检验室间质量评价(质评)体系,了解湖南地区不同生殖男科实验室精液常规检验结果的差异,从而提高湖南地区整体精液常规检验水平.方法 分2次制备并发放2个不同水平的精子浓度及精子活力质控品,发放给湖南地区20家生殖男科实验室,回收检验结果并采用Robust稳健统计法及实验室能力比对分析(PT)评价实验室的检验能力.结果 70％(14/20)的实验室采用计算机辅助精子分析(CASA)、30％(6/20)使用Makler计数板手工计数分析精子浓度;50％(10/20)的实验室采用CASA、50％(10/20)采用手工方式分析精子活力.4个精子浓度质控品的实验室间变异系数(CV)范围为13.47％～21.79％;4个活力质控品CV范围,前向运动精子率(PR)为5.65％～20.76％,非前向运动精子率(NP)为31.36％～59.30％,不活动精子率(IM)为5.50％～8.80％.20家参评实验室精子浓度项目评价结果显示,65％(13/20)合格,10％(2/20)可疑,25％(5/20)离群;20家参评实验室精子活力项目评价结果显示,30％(6/20)合格,35％(7/20)可疑,30％(6/20)离群,1家5％(1/20)未回报第一次活力结果.PT合格率(PT≥80％)为55％(11/20),不合格率(PT＜80％)为45％(9/20).结论 通过Robust稳健统计法评价生殖男科实验室的精液常规检验能力可行;亟需对实验室技术人员进行标准化培训和质量控制,以提高湖南地区各生殖男科实验室精液常规分析水平.

目的:通过对捐精者精液细菌培养、感染不同菌落数的精液质量检测,了解捐精者精液细菌感染率和菌种分布情况、不同菌落数细菌感染对精液质量的影响. 方法:对1 126例捐精者精液样本进行细菌培养,用Synbiosis全自动菌落计数仪对样本进行菌落计数,并用梅里埃VITEK2 Compact全自动微生物生化鉴定仪对菌落数≥104 cfu/ml的样本进行菌种鉴定;按不同菌落数从1 126例精液样本中分别选取22例菌落数＜104 cfu/ml和22例菌落数≥104 cfu/ml的精液样本,使用Makler精子计数板进行人工精液质量检测,并与对照组(未检出细菌,菌落数=0 cfu/ml)的精液质量进行比较. 结果:1 126例精液样本细菌培养中,杂菌污染5例,占0.44％ (5/1 126),未被杂菌污染的样本中有细菌生长993例,占88.58％ (993/1 121),菌落数≥104 cfu/ml的精液样本有22例,占2.22％(22/993),以牛链球菌(Streptococcus bovis)为主,极小棒状杆菌(Tiny bacilli)、表皮葡萄球菌(Staphylococcus epider-mis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)次之,其中革兰阳性菌(G+菌)95.45％ (21/22),革兰阴性菌(G-菌)4.54％ (1/22).菌落数≥104 cfu/ml和菌落数＜104 cfu/ml的精子总数(×106/1次射精)(389.9±110.6、421.9±155.9)和精子前向运动(PR,％)(61.6±4.3、61.0±3.5)与对照组(分别为567.5±327.6、65.0±6.5)比较有显著性差异(P＜0.05),精液液化时间(min)、精液pH值、精子总活力(PR+ NP,％)和正常形态精子(％)与对照组比较无显著性差异(P＞0.05).随机对284例精液样本进行解脲脲原体(UU)检测,UU阳性34例,占11.97％.同时将UU阳性与UU阴性的精液质量作比较发现,无显著性差异(P＞0.05). 结论:精液细菌培养阳性率占88.58％,细菌种类较多,以G+菌为主.同时,随着菌落数的增多,精液质量逐渐降低.

目的:了解重庆市人类精子库捐精志愿者精液质量,探讨年龄对精液质量的影响. 方法:收集重庆市人类精子库899例捐精志愿者精液样本,根据年龄分为5组:22 ～ 25岁、26～30岁、31 ～35岁、36 ～ 40岁、＞40岁,使用Makler板人工计数,分别进行精液体积(ml)、前向运动(PR)精子百分率(PR％)、精子总活力[(PR+NP)％]、精子浓度、精子总数及正常形态精子百分率检测,并与世界卫生组织《人类精液检查与处理实验室手册》第5版(以下简称WHO第5版)的参考值进行比较;各年龄段的精液参数指标采用中位数表示,比较精液质量差异. 结果:899例捐精志愿者精液参数第5百分位数精液体积(1.8 ml)、精子浓度(25.0×106/ml)、精子总数(100.7×106)和正常形态精子百分率(4.3％)均高于WHO第5版第5百分位数参考值,PR％(31.0％)、(PR+NP)％(38.0％)低于WHO第5版第5百分位数参考值;精液参数中位数精液体积(4.0ml)、精子浓度(88.0×106/ml)、精子总数(333.7×106)高于WHO第5版中位数参考值,正常形态精子百分率(11.6％)低于WHO第5版中位数参考值,PR％(55.0％)和(PR+ NP)％ (61.0％)与WHO第5版中位数参考值一致.精子浓度在22～ 25岁、26～30岁、31～35岁、36～ 40岁、＜40岁年龄组分别为88.0(1.0 ～270.0)×106/ml、96.0(5.0 ～335.0)×106/ml、100.0(3.0 ～200.0)×106/ml、105.0(15.0 ～225.0)×106/ml、90.0(22.0～ 159.0)×106/ml,在各年龄组间有显著性差异(P＜0.05),精液体积、PR％、(PR+NP)％、精子总数和正常形态精子百分率在各年龄组间无显著性差异(P＞0.05).结论:重庆市人类精子库捐精志愿者精液质量普遍较好.随着年龄的增长,精子浓度呈显著性升高,但＞40岁以后精子浓度呈显著性下降.

目的 了解四川地区精液分析的现状,为该地区实现精液分析标准化和进行质量控制提供参考.方法 设计精液分析调查表,包含27个问题,其中包括3个关于医院概况的问题,5个关于实验室精液分析人员数量及水平的问题,13个关于精液分析方法及标准化操作的问题,6个关于精液分析质量控制的问题.该调查表由各实验室从事精液分析相关的专业人员通过扫描微信二维码后现场在线回答问题.该地区内共回收25家实验室的精液分析调查表.结果 调查显示,68％(17/25)的实验室每日平均精液标本不超过10例,专门从事精液分析的技术人员较少且未进行规范化的培训.精液分析最基本的检测项目黏稠度 、外观 、液化也有少数实验室未进行检测.44％(11/25)的实验室精液体积使用肉眼观察法.对于精液浓度和活力检测,72％(18/25)的实验室使用普通显微镜检测,44％(11/25)的实验室使用计算机辅助精子分析系统(CASA),48％(12/25)的实验室计数板使用Makler计数板.抗精子抗体检测使用最多的方法为酶联免疫吸附测定(ELISA).精子形态学染色 、存活率 、精液白细胞评估超过一半实验室未开展.绝大多数实验室生精细胞评估未开展.在参与调查的实验室中只有极少数实验室开展室内质量控制,无一家实验室参加室间质量评价.结论 四川省大部分实验室精液分析还面临很多问题,许多实验室还不足够重视精液分析质量,没有意识到精液分析结果准确的重要性.

目的 评价Makler计数板和CASA这两种男科实验室常用仪器的准确性,探索建立这两种仪器最佳质量控制方法. 方法 根据《WHO人类精液检查与处理实验室手册》第五版推荐的标准化分析方法,利用改良Neubauer计数板、新Markler计数板和旧Markler计数板分别对质控珠和自制混合精液质控品进行计数,将计数结果进行统计学分析.同时分别用改良Neubauer计数板、旧Makler计数板和计算机辅助精子分析系统(CASA)对20份不同的精液样本进行计数,然后分别用传统和改进的方法绘制Bland-Altman图进行比较,并通过统计学分析验证两种绘图方法的优劣. 结果 在对混合精液质控品计数中,与旧Makler计数板相比,改良Neubauer计数板和新Makler计数板计数结果均有显著性差异(P＜0.01),而改良Neubauer计数板与新Makler计数板比较没有显著性差异(P＞0.05);在对质控珠计数中,不论高浓度还是低浓度,新、旧两个Makler计数板所评估的结果均有显著性差异(P＜0.01).传统Bland-Altman图判断计数结果,不论是改良Neubauer计数板和旧Makler计数板间,还是改良Neubauer计数板和CASA间,结果一致性较好;而改进后的绘图方法判断对比结果,改良Neubauer计数板与CASA计数结果一致性很差. 结论 Makler计数板需要定时评估其准确性.利用自制的混合精液质控品对其校准效果要比质控珠好,改进方法绘制的Bland-Altman图比传统方法绘制的要准确,更能反映真实的对比结果.

目的 分析男性不育患者精液中解脲支原体(UU)、沙眼衣原体(CT)感染及抗精子抗体(AsAb)与免疫性不育的关系.方法 选取2017年8月至2019年3月我院泌尿生殖男科和生殖医学中心就诊的104例不育男性患者(观察组)、50例已生育健康男性(对照组)为研究对象,采集研究对象的精液标本,采用微生物检验法测定UU感染率,采用乳胶免疫层析法测定CT感染率,并记录AsAb抗体阳性率,应用MAKLER计数板人工精液分析方法检测精液参数,分析UU、CT感染及AsAb阳性率与精液参数的关系.结果 观察组UU感染率、CT感染率、AsAb阳性率均高于对照组(P＜0.01);AsAb阳性者中,UU、CT感染率均高于AsAb阴性者(P＜0.05);观察组精液液化时间较对照组延长,观察组的精子浓度、精子存活率、前向运动较对照组低,而精子畸形率高于对照组(P＜0.05),观察组中UU、CT感染及AsAb阳性者精液液化时间延长,而精子浓度、精子存活率、前向运动低于UU、CT感染及AsAb阴性患者,UU、CT感染及AsAb阳性者精子畸形率高于UU、CT感染及AsAb阴性患者(P＜0.05).结论 精液中UU、CT感染及AsAb抗体与免疫性不育有密切关系,且对患者精液参数有一定影响,是引起男性不育的重要原因.

目的:通过自制精液质控品用于计算机辅助精子分析(CASA)的日常室内质控,以提高精液检测的室内质控质量,获得良好的精密度及准确度,提高为兵服务质量. 方法:依次使用高、低精子浓度水平的精子商品化质控品校准CASA,同时将15份精液混合质控品,分装在75个冻存管内,通过标准程序用CASA进行精子浓度、活力和运动参数(VCL,VSL,VAP,LIN,WOB,STR)的分析.连续监测50天.为了分析冷冻精子做为室内质控品对其浓度准确性的影响,再用Makler板进行计数. 结果:高低浓度水平商品化精液质控品的变异系数CV分别为6.18％和7.85％.而自制质控品的浓度为(25.97±1.41)× 106/ml,CV值为5.42％.精子的活动力(PR+NP)％及运动参数VCL,VSL,VAP,LIN,WOB,STR值分别为(22.15±1.75)％、(59.18 ±2.05) μm/s、(26.79±1.2) μm/s、(34.98±1.4) μm/s、(46.81±1.55)、(60.52±1.3)、(76.46±1.98)变异系数CV分别为7.9％、3.46％、4.48％、4.01％、3.3％、2.15％、2.59％.同时利用Makler板计数自制精子的浓度和活力值分别为(34.39±2.37)×106/ml和(38.04±1.69)％,CV值分别为6.89％和4.44％.通过平均值及标准差画出每一项指标的Levey-Jennings质控图. 结论:用液氮冻存精液的方法制备自制室内质控品,来监测CASA所检测精子浓度,精子运动参数的准确度及精密度的方法是可行的.且自制质控品检测精子浓度比商品化质控品所测的变异系数要小.

目的 了解四川地区不同实验室对精液分析检测结果的差异,为提高四川地区整体精液分析结果的准确性及可比性打下基础.方法 分别制备1个水平的精子浓度及精子形态质控品,2个水平的精子活力质控品,发放给四川地区17家男科实验室或检验科,回收检测结果并分析参与实验室的均值和实验室间变异系数(CV).结果 共15家实验室反馈了数据,其中15家反馈精子浓度检测结果的实验室中有10家(67％)实验室采用计算机辅助精子分析系统(CASA)对浓度质控品进行分析,8家(53％)使用计数板类型为Makler计数板.14家反馈精子活力及形态检测结果的实验室中,10家(71％)实验室采用人工分析方式对精子活力质控品进行分析,14家(100％)实验室采用人工分析方式对精子形态进行分析.实验室间精子浓度CV值为29.84％,2个活力质控品中前向运动精子比例CV值分别为18.30％及12.97％,正常精子形态百分比CV值为72.13％.结论 该研究为首次在四川地区开展精液分析的室间质量评价活动,精液分析室间质量评价中,前向运动精子比例CV值最低,正常精子形态比例CV值最高.亟需对实验室技术人员进行标准化培训和质量控制,以提高四川地区各实验室精液分析结果的准确性,使不同实验室间的结果具有可比性.