目的:探讨夜间睡眠时长和精液质量参数的关联性。方法:采用横断面研究，于2017年8月至2018年8月期间在深圳市人民医院生殖中心对3357名男性的夜间睡眠时长、入睡时间和入睡时长进行问卷调查，采用计算机辅助精液分析系统（CASA）对精液质量进行分析获得精液质量参数，运用多元线性回归分析夜间睡眠质量与精液质量参数之间的关系，并根据年龄和体质量指数（BMI）分层进一步探讨夜间睡眠时长与精液质量参数的关联性。结果:以夜间睡眠时长6~8 h组为对照，在校正了年龄和BMI、禁欲时间、运动、饮酒和吸烟后，结果显示夜间睡眠时长≥8 h人群的精子前向运动率和总活动率分别为49.15%和59.49%，较对照组降低，所对应的回归系数[95%置信区间( CI)]分别是-3.16 (-5.77~-0.55)和-3.22 (-5.93~-0.51)；与入睡时长最短组（<10 min）相比，入睡时长的增加与精子前向运动率的降低有关（ P=0.045），入睡时长31~60 min组的男性精子总活动率也明显较<10 min组明显降低（ β=-3.80,95% CI=-6.54~-1.06, P=0.007）。进一步分层分析显示，在35岁~40岁的研究对象中，夜间睡眠时长<6 h的男性精子前向活动率较6~8 h组降低（ β=-4.01,95% CI=-7.84~-0.18, P=0.04）；在年龄≥40岁的研究对象中，夜间睡眠时长≥8 h的男性精子总数均较6~8 h组降低(变化百分比:-47.84%,95% CI=-72.29%~-2.19%, P=0.04)。BMI≥24 kg/m 2且夜间睡眠时长≥8 h的男性精子前向活动率和总活动率均较BMI≥24 kg/m 2但夜间睡眠时长6~8 h组降低，对应的回归系数分别是 β=-5.75,95% CI=-10.40~-1.10, P=0.02和 β=-6.85,95% CI=-11.69~-2.00, P=0.01。 结论:在年龄≥40岁或BMI≥24 kg/m 2的人群中，夜间睡眠时长≥8 h与精子前向运动率和总活动率降低有关。

《WHO人类精液检查与处理实验室手册》是人类精液检查与精子评估程序和方法的重要参考文献。在手册第6版，精子活力采用4级分类系统评定，精子形态使用结构化顺序分析，不再表述精液参数参考值范围、限值和精液质量术语，强调实验室的质量保证和质量控制，删除了精子与宫颈黏液、卵透明带和卵母细胞相互作用试验，以及去透明带仓鼠卵穿透试验；新增加检测精子DNA损伤、精子染色质、精子非整倍体和精液白细胞介素的试验，新介绍玻璃化冷冻精子、计算机辅助精子分析（computer-aided sperm analysis，CASA）系统评价精子超活化运动、磁激活细胞分选术制备精子和检查射精顺序的方法。手册第6版中保留、修订的内容，在一定程度反映了国际上现今精液检查与精子评估的标准化、实用性和发展方向，对我国男科学实验室的发展有指导和促进作用。

目的:探讨辅助生育夫妇的男性年龄与精液质量及精子DNA碎片化指数（DNA fragmentation index，DFI）的关联性。方法:采用横断面研究，收集2020年1月至2023年8月期间在武汉大学人民医院生殖医学中心因非男性因素行辅助生殖技术助孕治疗的3 361例男性的临床资料。使用计算机辅助精液分析系统分析精液质量参数，使用精子核染色体结构检测分析DFI。将受试者按年龄分为20~29岁（A组）、30~39岁（B组）和40~59岁（C组）3组。采用多元线性回归和限制性立方样条（restricted cubic spline，RCS）法分析年龄与精液质量参数及DFI之间的关联。结果:共纳入研究对象共3 361例，年龄为（34.86±5.34）岁。B组和C组的精子前向运动率［（40.17±18.16）%、（37.83±16.96）%］及精子总活动率［（55.27±21.37）%、（53.09±21.14）%］显著低于A组［（43.78±18.16）%、（58.29±20.24）%］；精子浓度［（78.96±63.04）×10 6/mL、（91.93±72.28）×10 6/mL］及DFI［（19.18±12.18）%、（21.73±12.52）%］显著高于A组［（71.75±57.44）×10 6/mL，（16.31±10.04）%］，差异均有统计学意义（均 P<0.001）。C组的精液量［（2.94±1.42）mL］显著低于A组［（3.28±1.43）mL］和B组［（3.15±1.58）mL］，差异均有统计学意义（均 P<0.05）。在调整了文化程度、体质量指数、吸烟、饮酒、禁欲天数后，多元线性回归结果显示：与A组相比，B组年龄与精子前向运动率（ β=-3.055，95% CI：-4.879~-1.231）、精子总活动率（ β=-2.366，95% CI：-4.516~-0.216）呈负相关，与精子浓度（ β=7.752，95% CI：1.398~4.106）、DFI呈正相关（ β=2.744，95% CI：1.526~3.961）。与A组相比，C组年龄与精液量（ β=-0.379，95% CI：-0.565~-0.192）、精子前向运动率（ β=-5.507，95% CI：-7.714~-3.301）、精子总活动率（ β=-4.932，95% CI：-7.532~-2.331）呈负相关，与精子浓度（ β=17.288，95% CI：9.604~24.973）、DFI（ β=5.226，95% CI：3.753~6.699）呈正相关。RCS分析结果显示，年龄与精液量存在显著线性剂量-反应关系（ P非线性检验=0.424），精液量随年龄增长而下降（ P<0.001）；年龄与精子浓度、精子前向运动率、精子总活动率及DFI呈非线性剂量-反应关系（ P非线性检验=0.003、 P非线性检验<0.001、 P非线性检验<0.001、 P非线性检验=0.004）。 结论:非男性因素行辅助生殖助孕术的男性中，年龄超过30岁与精液量、精子前向运动率及精子总活动率下降，与精子浓度及DFI上升显著相关。

目的:寻找体外受精（ in vitro fertilization， IVF）过程中合适的精液处理方法。 方法:本研究采用前瞻性随机对照双盲设计，选取300例因女性因素且男性生育力检查未见异常行IVF-胚胎移植（embryo transfer，ET）助孕的不孕夫妇为研究对象，纳入的患者通过计算机产生随机数进行随机化分组，分为浮游组（新型无损伤精子筛选技术，FY组， n=100）、密度梯度组（DG组， n=100）和上游组（SU组， n=100）。收集三组患者受精后剩余的精子观察精子超微结构，并比较三组优选后精子DNA碎片指数（DNA fragment index，DFI）及IVF-ET治疗过程中的受精率、卵裂率、优质胚胎率及妊娠率等指标之间的差异。 结果:FY组精子DFI显著低于DG组和SU组（3.22%±2.73%比8.31%±2.14%比6.43%±2.56%），差异有统计学意义（ P=0.02），FY组的精子头、尾部质膜完整率明显高于其他两组（92.0%±24.2%比80.2%±29.5%比73.2%±30.1%和93.9%±1.2%比80.1%±1.1%比74.9%±1.2%），差异具有统计学意义 （P=0.01， P=0.03）。FY组的优质胚胎率、囊胚形成率明显高于DG组和SU组［44.14%（452/1024）比32.30%（292/904）比32.46%（296/912）和54.40%（396/728）比43.52%（302/694）比46.34%（330/712）］，差异均具有统计学意义（ P均<0.001）。新鲜周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组［57.14%（24/42）比33.33%（16/48）比35.56%（16/45）和50.00%（30/60）比27.45%（14/51）比28.26%（13/46）］，差异具有统计学意义（ P=0.04， P=0.02）。复苏周期FY组的妊娠率和植入率明显高于DG组和SU组［52.38%（22/42）比31.25%（10/32）比37.14%（13/35）和52.38%（22/42）比29.41%（10/34）比30.56%（11/36）］，差异具有统计学意义（ P=0.03， P=0.02）。 结论:浮游法可减少对精子造成的物理损伤，提高精子质膜的完整率，降低精子DFI，改善辅助生殖技术结局。

目的:探讨钠-葡萄糖共转运蛋白2抑制剂（SGLT2i）对2型糖尿病（T2DM）小鼠睾丸生精功能的影响。方法:将21只8周龄雄性 db/db小鼠按随机数表法随机分为3组（每组7只），分别为 db/db组［溶媒（水）干预］、达格列净（Dapa）组［达格列净（1 mg·kg -1·d -1）］和卡格列净（Cana）组［卡格列净（10 mg·kg -1·d -1）］，每日灌胃，干预5周，另选5只同窝 db/m小鼠作正常对照。监测所有小鼠的体重和血糖，干预结束后使用计算机辅助精子分析系统评价小鼠精液质量、HE染色评估睾丸组织形态学、脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的脱氧尿嘧啶核苷酸缺口末端标记（TUNEL）和免疫组化染色分析睾丸细胞凋亡情况。将小鼠精母细胞GC-2细胞系分为3组，分别为正常对照组（对照溶剂）、PA组（100 μmol/L棕榈酸）、PA+Dapa组（100 μmol/L棕榈酸联合30 μmol/L达格列净），干预48 h，使用免疫印迹法、流式细胞术及试剂盒检测细胞氧化应激及凋亡情况。采用单因素方差分析或Brown-Forsythe/Welch进行组间比较。 结果:与 db/db组相比，Dapa组和Cana组小鼠的空腹血糖、糖负荷后各时间点血糖水平均降低（均 P<0.05）；精子存活率和前向运动精子率均增加，曲线速度和平均路径速度均提升（均 P<0.05）；睾丸组织活化Caspase-3表达、TUNEL阳性生精小管比例和TUNEL阳性细胞比例均降低（均 P<0.05）。GC-2细胞中，与PA组相比，PA+Dapa组细胞内活性氧水平、丙二醛含量、细胞凋亡率均降低，超氧化物歧化酶活性、B细胞淋巴瘤2（BCL2）表达均增加（均 P<0.05）。 结论:SGLT2i改善T2DM小鼠生精功能障碍和精液质量下降，并通过减少睾丸组织氧化应激和凋亡发挥降糖非依赖的生殖系统直接保护作用。

精子形态分析是临床精子质量评估的重要检测项目，但由于染色、涂片以及人工计数中诸多的干扰因素，导致目前精子形态分析仍然不能具有最佳的重复性与准确度。计算机辅助精子形态分析（CASMA）是对人工检测的良好补充，但传统的计算机分析方法仍然有很多不足。深度学习算法通过模拟人类神经网而具有很强的特征学习能力，通过建立不同的模型，近年来它被逐渐用于精子形态分析中。了解深度学习在精子形态分析中的应用可为临床仪器与检测方法的开发提供新的思路和参考。

目的:研究弱精子症（asthenospermia，AS）和畸形精子症（teratozoospermia，TM）患者精子与正常生育男性精子中葡萄糖转运蛋白8（glucose transporter 8，GLUT8）蛋白表达量的变化，探讨精子GLUT8的表达与精子活力和畸形率的相关性。方法:采用计算机辅助精液分析系统（computer-assisted semen analysis system，CASA）检测各组精子运动参数。采用病例对照研究法，收集2019年12月至2020年12月期间于南京医科大学附属泰州市人民医院生殖医学科男科实验室进行精液常规检查的AS患者、TM患者和正常生育男性的精液样本。按照精子活力，分为正常活力精子（normal viable spermatozoa，NV）组与AS组，每组各41例；按照精子形态，分为正常形态精子（normal morphology spermatozoa，NM）组与TM组，每组各40例。Western blotting法检测NV组、AS组、NM组和TM组的GLUT8蛋白表达量，每组各7例。比较NV组和AS组、NM组和TM组的精子参数及GLUT8蛋白的差异。结果:NV组与AS组的精子参数在活力（62.64%±37.14%、14.41%±11.89%）、活动率（55.62%±12.31%、24.40%±12.75%）、曲线速度［（87.22±12.35）μm/s、（71.75±18.35）μm/s］、直线速度［（40.22±6.71）μm/s、（33.31±10.11）μm/s）］、平均路径速度［（47.66±6.49）μm/s、（39.42±10.25）μm/s］、精子头部侧向摆动幅度［（2.88±0.49）μm、（2.35±0.66）μm］差异均有统计学意义（均 P<0.001）。NM组与TM组的精子参数比较差异均无统计学意义（均 P>0.05）。AS组中GLUT8蛋白表达量（0.26±0.17）低于NV组（2.00±0.38， P=0.002），而NM组与TM组GLUT8蛋白表达量差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:AS患者精子中GLUT8蛋白表达量下降，而GLUT8蛋白的表达量与精子形态之间并无显著联系。

目的:探讨补充维生素D(vitamin D，VD)对中年雄性小鼠精子活力的影响。方法:采用VD常规含量饲料喂养的7周龄雄性ICR小鼠随机分为4组：中年VD缺乏组、中年常规VD组、中年补充VD组、年轻常规VD组(每组7只)，前3组小鼠8~28周龄分别给予VD缺乏、常规含量、高于常规含量的饲料(VD含量分别为<100、1 000及1 500 U/kg饲料)喂养，后一组小鼠持续采用VD常规含量的饲料喂养至8周龄。利用酶联免疫吸附测定(ELISA)法测定血清25-羟维生素D(25OHD)水平，采用计算机辅助精液分析系统检测精液各项参数。结果:中年补充VD组小鼠的血清25OHD水平显著高于其他3组小鼠，中年常规VD组和年轻常规VD组的血清25OHD水平显著高于中年VD缺乏组。各组间小鼠的睾丸和附睾的平均重量未见显著性差异。与中年常规VD组、中年VD缺乏组相比，中年补充VD组小鼠的精子活动率和前向运动速度显著升高，达到接近年轻常规VD组小鼠的水平。结论:补充VD有助于维持中年雄性小鼠的精子活力。

目的 从应用噬菌体展示随机肽库技术和生物信息学方法筛选出的候选人精子特异性抗原表位肽中鉴定新的人精子特异性抗原表位.方法 多肽固相合成法合成候选人精子特异性抗原表位肽单体和三聚体.斑点免疫印迹法和酶联免疫吸附试验(ELISA)检测与抗精子抗体(ASA))阳性血清的免疫反应.ELISA检测免疫小鼠血清抗候选人精子特异性抗原表位肽抗体滴度.计算机辅助精子分析检测候选人精子特异性抗原表位肽免疫小鼠血清对人精子的作用.结果 高效液相色谱法和质谱法测定结果显示,合成的候选人精子特异性抗原表位肽纯度和结构与设计相符.斑点免疫印迹法和ELISA检测结果显示,氨基酸序列为n-TRRIHRHMTIRR-c的候选人精子特异性抗原表位肽及其三聚体与35 例ASA阳性血清中的17 例呈较强的免疫反应.该候选人精子特异性抗原表位肽及其三聚体免疫小鼠血清处理人精子后,精子活力相关参数较对照组均明显降低(P<0.05),其中三聚体导致的精子活力相关参数下降尤为明显(P<0.01).结论 氨基酸序列为n-TRRIHRHMTIRR-c的十二肽具有人精子特异性抗原表位,是一种新的人精子特异性抗原表位肽.

目的 揭示琥珀酸脱氢酶(SDH)在人精子功能调控中的作用.方法 将分离纯化后的人精子样本与不同浓度(10、20、40 mmol/L)SDH抑制剂丙二酸二钠共孵育不同时间(1、2 h)后,试剂盒检测对照组及丙二酸二钠处理组SDH酶活性,Western blot检测SDH催化亚基(SDHA)蛋白水平.精子功能研究实验:1)通过计算机辅助精液分析系统检测丙二酸二钠对未获能精子重要运动参数[前向运动率(PR)、总活力(TM)、平均路径速度(VAP)]以及获能精子穿透粘性介质能力的影响;2)伊红-苯胺黑法评估丙二酸二钠对精子存活率的作用;3)PSA-FITC染色法检测丙二酸二钠处理对获能精子顶体反应发生率的影响.结果 丙二酸二钠不改变人精子中琥珀酸脱氢酶 A(SDHA)蛋白表达水平,但其能够抑制SDH酶催化活性、精子前向运动率、总活力以及获能精子穿透粘性介质的能力,且上述抑制效应同丙二酸二钠浓度正相关.此外,丙二酸二钠不影响获能精子自发顶体反应发生率.结论 丙二酸二钠通过抑制SDH活性损伤人精子运动功能.