目的:分析口腔黏膜鳞癌细胞增殖过程中Maspin基因甲基化的调控作用机制,为相关研究及临床治疗提供借鉴.方法:鳞状细胞癌HIOEC-B(a)P细胞系随机分为4组:5-氮-2-脱氧胞苷+曲古抑菌素A(ADC+TSA)阴性组、低(0.1 μmol/L+0.05μmol/L)、中(1μ,mol/L+0.5 μmol/L)和高剂量组(10 μmol/L+5 μ,mol/L).以正常口腔黏膜上皮细胞作为对照组.实时定量PCR检测各组细胞Maspin基因的甲基化程度,MTT法检测各组细胞的增殖情况,4',6-二脒基-2-苯基吲哚(DAPI)染色检测细胞凋亡.采用SPSS20.0软件包对数据进行单因素方差分析.结果:与对照组相比,癌细胞的Maspin基因甲基化程度显著增强(P＜0.01),与阴性组相比,中剂量和高剂量组Maspin基因甲基化程度显著减弱(P＜0.05,P＜0.01),低、中、高剂量组的细胞增殖抑制率显著高于阴性组(P＜0.05,P＜0.01).随着药物剂量的提高,细胞凋亡程度逐渐增加(P＜0.05).结论:Maspin基因甲基化可能参与口腔黏膜鳞癌细胞的增殖过程.

Maspin基因是一种肿瘤抑制基因,编码丝氨酸蛋白酶抑制剂.研究发现Maspin可诱导凋亡、抑制肿瘤细胞的侵袭和转移、抑制新生血管的形成从而发挥肿瘤抑制作用.近年来发现Maspin还与宿主的免疫相关.文章主要对Maspin的结构分布、肿瘤抑制作用机制及免疫相关性进行综述.

目的 采用蛋白质组学技术分析乳腺浸润性导管癌组织的蛋白谱,寻找腋窝淋巴结转移与无转移患者的差异表达蛋白.方法 选择行乳腺癌改良根治术的原发乳腺浸润性导管癌患者12例,其中腋窝淋巴结转移7例,腋窝淋巴结未转移5例.术中留取乳腺癌组织、癌旁组织和正常乳腺组织标本,提取组织样本中的蛋白,采用二维凝胶电泳法分析淋巴结转移和未转移乳腺癌组织的差异表达蛋白位点,蛋白表达量的差异倍数>2.0或<0.5且具有重复性时认为是差异表达蛋白位点(以癌旁组织和正常乳腺组织标本做对照,排除个体差异的影响);采用二维凝胶电泳结合基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱对筛选出来的差异蛋白位点进行质谱鉴定.另取164例乳腺浸润性导管癌组织(其中腋窝淋巴结转移66例、无腋窝淋巴结转移98例),采用免疫组化SP法检测腋窝淋巴结转移与无转移患者癌组织中的差异表达蛋白.结果 12例乳腺癌组织中,腋窝淋巴结转移和未转移乳腺癌组织共检出差异表达蛋白87个,其中差异表达最显著的6个蛋白分别是核基质结合区结合蛋白1(SATB1)、埃兹蛋白(Ezrin)、微管解聚蛋白(Stathmin)、E-钙黏附蛋白(E-cadherin)、Maspin蛋白、肿瘤转移抑制基因蛋白(KAI-1).164例乳腺浸润性导管癌组织中,腋窝淋巴结转移乳腺癌组织Ezrin、KAI-1阳性表达率均高于未转移乳腺癌组织,E-cadherin蛋白阳性表达率低于未转移乳腺癌组织(P均<0.05).结论 乳腺浸润性导管癌腋窝淋巴结转移与无转移患者癌组织中Stathmi、KAI-1、E-cadherin蛋白表达存在差异,这些蛋白可能在淋巴结转移过程中发挥一定作用,可能作为评价乳腺癌淋巴转移的标志物.

目的:观察黄芩苷对HOKs炎症反应中IKKα介导的MASPIN的调控作用,探讨黄芩苷对口腔黏膜炎症的分子调控机制.方法:以脂多糖(LPS)刺激人口腔角质细胞(human oral keratinocytes,HOKs),体外局部模拟口腔黏膜上皮细胞炎性环境.CCK-8法检测黄芩苷对HOKs的毒性作用;在LPS刺激的HOKs中预先加入不同浓度黄芩苷,应用ELISA法检测黄芩苷对LPS刺激的HOKs中IL-6和TNF-α分泌的调控作用;利用RT-PCR及Western免疫印迹检测黄芩苷对LPS刺激的HOKs中IKKα介导的MASPIN基因及蛋白表达水平的调控作用.采用SPSS 21.0软件包对数据进行统计学分析.结果:以10 μg/mLLPS刺激HOKs,可作为口腔黏膜上皮细胞炎症模型.黄芩苷(1～20 μg/mL)对HOKs无毒性作用;随着黄芩苷浓度的升高,MASPIN在LPS刺激的HOKs中的表达逐渐升高,而IKKα及炎性细胞因子TNF-α、IL-6的表达逐渐降低(P＜0.05).结论:在LPS刺激的HOKs中,黄芩苷可降低炎性因子表达,下调IK-Kα,上调MASPIN.