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基于Micro-CT血管成像技术重建大鼠先天性尿道下裂包皮血管的实验研究
编辑人员丨5天前
目的:应用Micro-CT扫描技术分析尿道下裂大鼠包皮血管的分布规律,阐述不同类型尿道下裂血管的分布特点,为尿道下裂皮瓣的选择提供理论基础。方法:选取孕鼠6只,应用非那雄胺溶液(40 mg·kg -1·d -1)于孕12~17 d连续6 d经腹部皮下注射,分娩28 d后对幼鼠进行计数,根据幼鼠尿道外口位置分为正常组和轻度、重度尿道下裂组。幼鼠6个月龄时于腹主动脉插管并行硅酮橡胶(Microfil)灌注后行Micro-CT扫描,CTAn软件收集扫描数据后对整个阴茎组织行三维重建,得到完整包皮血管影像,观察不同程度尿道下裂包皮血管的分布特点并计算包皮血管分数。 结果:共产幼鼠41只,雄性24只,阴茎正常的有8只,尿道下裂的有16只,轻度尿道下裂的有3只,重度尿道下裂的有13只。Micro-CT扫描包皮血管情况:①正常组及轻度下裂组,二者包皮血管形态相似,两侧阴茎背浅动脉的深层血管分别走行于阴茎体的背外侧,于包皮内外板交界处形成环绕阴茎头的血管环结构后向内板发出细小分支;②重度下裂组,根据血管形态分为血供良好(6只)和血供不良(7只)两种类型,血供良好型内外板交界处可形成类似正常组和轻度尿道下裂组的血管环;血供不良型则不能形成血管环结构,其血管分支不发达,部分血管呈网状分布。结论:大鼠孕期应用非那雄胺可产生稳定尿道下裂后代。包皮内外板交界处血运丰富,适合作尿道皮瓣材料;内外板交界处的血管环结构与横裁岛状皮瓣法裁剪方向一致,最大程度地保存了皮瓣血运。包皮血供不良的重度尿道下裂内外板的血管环结构消失,而管径细小的网状血管增多,这可能是重度尿道下裂患者术后并发症发生率较高的原因之一。
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编辑人员丨5天前
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一种超声引导下快速建立小鼠急性心肌梗死模型的方法
编辑人员丨5天前
目的:探讨超声心动图辅助下构建小鼠急性心肌梗死(AMI)模型的方法。方法:SPF级C57BL/6小鼠80只,超声心动图引导下将针电极置入到左冠状动脉前降支(LAD),10瓦特电凝5~10 s阻断血流诱导AMI;假手术组(Sham)步骤同上,不进行电凝。记录建模前后心电图;术后1天检测血浆游离肌钙蛋白T(cTnT),升主动脉注入Microfil显影冠脉;28 d后超声测量左室射血分数(LVEF)、收缩末期容积(LVESV)、舒张末期容积(LVEDV)、整体纵向应变(LVGLS)、面积变化分数(LVFAC);心脏切片马松染色。在LAD远、中、近段分别阻断血流构建小、中等及大面积AMI。两组间比较采用 t检验,两组以上比较采用one-way ANOVA。 结果:建模后心电图ST段抬高,术后第1天cTnT显著升高,梗死区域清晰且无冠脉血管显影。术后28 d心超发现,AMI小鼠LVGLS明显高于Sham小鼠(-5.6±1H7比-17.1±1.8, t=12.17, P<0.01);术后28 d马松染色见纤维瘢痕形成。构建小、中等及大面积AMI模型,cTnT随AMI面积扩大而逐渐升高[Sham:(280.0±145.3) pg/ml;小:(5 811.0±987.3) pg/ml;中等:(6 975.2±1 338.4) pg/ml;大:(9 590.5±2 173.8) pg/ml, F=49.69, P<0.01]。AMI后28 d随心梗面积增大,心脏重量逐渐增加(Sham:6.12±0.25;小:6.31±0.44;中等:6.93±0.67;大:7.69±1.05, F=7.31, P<0.01)。 结论:应用超声心动图辅助可快速制备小鼠AMI模型,该方法创伤小,重复性好。
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编辑人员丨5天前
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异补骨脂素促进小鼠胫骨骨折愈合的研究
编辑人员丨2024/1/20
目的:探讨灌服不同剂量异补骨脂素(isopsoralen,ISO)对小鼠骨折及血管愈合的影响.方法:选取2月龄体质量为(20±2)g的雄性C57BL/6小鼠60只,采用随机数字表法分为4组:模型组(Model)、低剂量组(isopsoralen-low dose,ISO-L)、中剂量组(isopsoralen-medium dose,ISO-M)和高剂量组(isopsoralen-high dose,ISO-H),每组 15 只.建立右侧胫骨骨折模型.术后采用灌胃给药,ISO-L组、ISO-M组和ISO-H组分别灌服ISO的浓度为10、20和40 mg·kg-1,Model组灌服等体积生理盐水,每日1次,连续给药28d.每周称量体重 1次.分别于第7、14、21、28天行X线检查,并采用改良后I.R.Garrett评分对骨痂生长情况进行评价.至28 d后取材,剥离主要脏器称重并计算脏器系数,进行脏器苏木素伊红染色(hematoxylin-eosin,HE)观察病理结构变化.采用微计算机断层扫描技术(Micro-CT)扫描骨折区域并进行三维重建得出效果图,量化骨体积分数(bone volume/total volume,BV/TV).将脱钙后的胫骨进行石蜡包埋并切片,通过HE染色和番红固绿染色观察骨折断端愈合及塑形情况.通过血管灌注Microfil造影剂后取出右侧胫骨并脱钙,使用Micro-CT扫描骨折区域骨痂微血管,比较血管体积分数及血管直径.结果:给药28d后,各组小鼠体质量及器官系数比较,差异无统计学意义(P>0.05),脏器HE染色未发现明显病理学改变.X线片和改良后I.R.Garrett评分结果显示,ISO-M组28 d评分高于Model组(P<0.05);ISO-H组第14、21、28天评分均高于其他3组(P<0.05).Micro-CT结果显示,ISO-M组腔内骨痂明显减少,低于Model组(P<0.05);ISO-H组骨痂大部分消退,BV/TV均低于其他3组(P<0.05).HE染色及番红固绿染色结果显示ISO-H组骨折区域断端闭合,已出现连续板层骨,骨折愈合进程超过其他组.血管造影结果显示,ISO-H组和ISO-M组血管体积分数高于Model组和ISO-L组(P<0.05),ISO-H组和ISO-M组血管直径高于Model组和ISO-L组(P<0.05).结论:ISO在10~40 mg·kg-1浓度范围内无明显毒副作用,可以改善骨微结构,促进骨痂微血管的生成,呈浓度依赖性加速小鼠骨折断端的愈合.
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编辑人员丨2024/1/20
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家兔与人股骨近端的解剖学对照研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 观察家兔与人股骨近端解剖学特点,探讨使用家兔作为动物模型研究股骨头坏死时,解剖学上的差异可能对实验结果影响.方法 36只家兔从4个方面进行观察:(1)股骨近端外部形态学特点观察(n=5);(2)股骨近端骨内外血管分布观察(n=23,9只行Microfil灌注,14只行过氯乙烯灌注);(3)股骨头组织学观察[n=4,2只行苏木紊-伊红(HE)染色,2只行免疫组织化学(IHC)染色];(4)扫描电镜观察股骨头切面形态(n=4),结果与我院正常髋关节电子计算机断层扫描(CT)影像(n=10)、既往文献结果进行对比分析.结果 (1)家兔与人股骨近端外部形态学特点有较大差异:相对人,兔股骨头直径与股骨干直径比值较小(兔:0.92±0.05,人:1.53±0.13,P=0.0100),转子间径与股骨干直径比值较大(兔:2.51±0.12,人:2.32±0.18,P=0.015),股骨颈长度与股骨干直径比值较小(兔:0.25±0.03,人:0.67±0.07,P=0.000),颈干角较小[兔:(125.37±2.40)°,人:(133.80±4.33)°,P=0.000];(2)家兔与人股骨近端骨内外血管分布有较大差异;(3)家兔与人股骨头组织学观察类似;(4)扫描电镜结果与HE染色类似,未见明显动静脉吻合.结论 家兔股骨头在形态、血液供应等方面与人类有较大的差异,在选用家兔作为动物模型研究股骨头坏死时,必须重视这些差异,针对不同研究目的,选用更加合理、科学的实验方法,以便更准确地分析实验结果.
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编辑人员丨2023/8/6
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小鼠Willis环右颈总动脉灌注Microfil成像研究
编辑人员丨2023/8/6
目的 评估通过小鼠右侧颈总动脉途径灌注对比剂Microfil显示Willis环的可行性和效果.方法 选取20只雄性C57BL/6小鼠(约14周龄,重约20 g).将小鼠肝素化、麻醉后固定、解剖胸腔,依次自小鼠心尖灌注0.9%氯化钠溶液、4%多聚甲醛溶液和2%戊二醛溶液混合液;分离右侧颈总动脉,经右侧颈总动脉近端灌注Microfil,4℃过夜;取脑后体视镜下观察Willis环.将体视镜下观察到的Willis环定义为完全充盈、大部分充盈和充盈不良.结果 20只小鼠全部灌注成功,其中完全充盈11只(55%),大部分充盈4只(20%),充盈不良5只(25%).大体观察小鼠Willis环完整,染色血管清晰;体视镜下Willis环充盈、立体.结论 通过小鼠右侧颈总动脉途径灌注Microfil显示Willis环方法简单、可行,不仅能使Willis环充盈良好,还能清晰显示其立体结构,具有MRA成像效果.
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编辑人员丨2023/8/6
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激光直接心肌隧道术治疗缺血性心脏病实验研究
编辑人员丨2023/8/5
研究钬激光和高功率二氧化碳激光在急性缺血心肌上产生穿透室壁全层隧道对心肌缺血的保护作用。以20kg体重Yorkshire猪分为钬激光组(7只),CO 2激光组(10只)及对照组(8只)进行实验。结果表明:钬激光无法产生满意的激光隧道,但有诱发新生血管形成的可能;高功率二氧化碳激光能够产生理想的激光隧道,对急性缺血心肌提供血液灌注,并可避免室颤的发生。但远期通畅仍有待解决。
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编辑人员丨2023/8/5
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钙磷涂层的JDBM镁合金多孔支架促进血管新生及骨缺损修复的效果评估
编辑人员丨2023/8/5
目的·研究含有钙磷涂层(CaHPO4·2H2O,DCPD)的JDBM(Mg-Nd-Zn-Zr)镁合金支架体内外促血管新生和骨缺损修复的生物学效应.方法·应用模板复制法和化学沉积法构建JDBM-DCPD和JDBM-MgF2支架,使用微型CT(micro-CT)和扫描电子显微镜检测2种支架的表征.在支架表面种植骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cell,BMSC)并通过CCK-8实验及细胞黏附实验观察支架对细胞的生物相容性.通过Transwell细胞迁移实验和成管实验检测支架浸提液对内皮细胞系Ea.hy926细胞迁移和成管能力的影响,并通过免疫荧光染色进一步观察血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的分泌情况;通过碱性磷酸酶和茜素红染色检测浸提液对BMSC成骨能力的影响.构建SD大鼠股骨髁临界性骨缺损模型并植入支架,术后8周通过Microfil血管灌注、micro-CT扫描、组织切片染色等方法评估JDBM-DCPD支架的促血管新生及促成骨能力.结果·JDBM-DCPD支架的主孔径为400~450 μm,钙磷颗粒均匀分布在孔壁上,大小为15~25 μm.BMSC能够在JDBM-DCPD支架表面黏附且生长良好.与对照组和JDBM-MgF2支架浸提液相比,JDBM-DCPD支架浸提液在体外能够显著促进Ea.hy926内皮细胞迁移、成管以及VEGF的表达,同时可显著增强BMSC早期和晚期成骨分化.体内植入8周后,JDBM-DCPD支架促进缺损区血管和新骨再生作用显著优于JDBM-MgF2支架.结论·JDBM-DCPD支架在体内外实验中展现了优良的成血管效应,特别是在体内植入后可以实现早期血管化,从而更加有效地促进骨再生.
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编辑人员丨2023/8/5
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改良大鼠脊髓缺血再灌注损伤模型的再评价及应用研究
编辑人员丨2023/8/5
目的 建立并评价一种改良大鼠脊髓缺血再灌注损伤(SCII)模型.方法 选取清洁级雄性SD大鼠36只(300~400 g),经腹腔注射麻醉药物,麻醉满意后打开腹腔并夹闭右肾动脉上极腹主动脉近心端1 h,分别再灌注不同时间制作改良大鼠SCII模型.将实验动物随机分为A1组(血管造影剂对照组,给予正常大鼠左心室灌注造影剂Microfil)、A2组(实验对照组,夹闭腹主动脉后左心室灌注Microfil)、B1组(假手术组)、B2组(缺血60 min再灌注24 h)、B3组(缺血60 min再灌注48 h)、B4组(缺血90 min再灌注24 h)和B5组(缺血90 min再灌注48 h).A组大鼠同步辐射CT三维重建夹闭腹主动脉前后脊髓动脉血供分布情况;B组采用BBB分级法评价大鼠下肢运动功能变化;HE染色和尼氏染色观察损伤脊髓组织随缺血时间延长病理动态变化.结果 同步辐射CT三维重建结果显示:夹闭大鼠右肾动脉上腹主动脉近心端可以阻断T13以下节段脊髓大部分动脉血供,但不能完全阻断;与对照组比较,BBB评分从B2至B5逐渐降低,各组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);尼氏染色及HE染色显示B1组无明显改变,再灌注时间同样的情况下,缺血时间的长短与脊髓病理学改变程度以及脊髓灰质前角神经元改变成正比,表现为神经元尼氏体淡染或消失.结论 经过改良的SCII模型可以模拟不同程度的缺血再灌注损伤,缺血范围较传统方法更广,经济可靠,病理改变稳定.
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编辑人员丨2023/8/5
