目的:评价腹腔巨噬细胞NAD依赖性蛋白脱乙酰酶3(Sirt3)表达在右美托咪定抑制脓毒症小鼠炎症反应中的作用。方法:SPF级健康雄性C57BL6小鼠64只，7周龄，体重约20 g。采用随机数字表法分为4组( n＝16)：假手术组(S组)、脓毒症组(Sep组)、右美托咪定组(DEX组)和右美托咪定+Sirt3抑制剂3-TYP组(TYP组)。采用盲肠结扎穿孔的方法制备小鼠脓毒症模型，DEX组于制备模型前1 h时腹腔注射生理盐水0.25 ml，30 min后腹腔注射右美托咪定50 μg/kg(生理盐水稀释至0.25 ml)；TYP组于制备模型前1 h时腹腔注射3-TYP 5 mg/kg(生理盐水稀释至0.25 ml)，30 min后腹腔注射右美托咪定50 μg/kg。S组和Sep组于制备模型前1 h和30 min分别腹腔注射等量生理盐水。S组仅进行开腹、取出盲肠操作，不结扎穿孔。于术后24 h时腹腔灌洗，提取腹腔巨噬细胞贴壁培养，采用qRT-PCR法检测巨噬细胞Sirt3、IL-1β和TNF-α mRNA表达，Western blot法检测Sirt3的表达，ELISA法测定腹腔灌洗液IL-1β和TNF-α浓度，观察各组小鼠10 d生存情况。 结果:与S组比较，Sep组、DEX组和TYP组腹腔巨噬细胞Sirt3及其mRNA表达下调，IL-1β和TNF-α mRNA表达上调，腹腔灌洗液IL-1β和TNF-α浓度升高，小鼠10 d生存率下降( P<0.05)；与Sep组比较，DEX组腹腔巨噬细胞Sirt3及其mRNA表达上调，IL-1β和TNF-α mRNA表达下调，腹腔灌洗液IL-1β和TNF-α浓度降低，小鼠10 d生存率升高( P<0.05)；与DEX组比较，TYP组腹腔巨噬细胞Sirt3及其mRNA、IL-1β和TNF-α mRNA表达上调，腹腔灌洗液IL-1β和TNF-α浓度升高，小鼠10 d生存率降低( P<0.05)。 结论:腹腔巨噬细胞Sirt3表达上调参与了右美托咪定抑制脓毒症小鼠炎症反应的过程。

目的 探讨NAD依赖性蛋白脱乙酰酶Sirtuin-3(Sirt3)对糖尿病心肌病(DCM)的影响及其相关机制.方法 将6 只8 周龄雄性C57BL/6J小鼠分入正常组和DCM模型组,每组各3 只.DCM模型组高脂饮食4 周后连续5d腹腔注射链脲菌素;正常组正常饮食,腹腔注射等量的柠檬酸缓冲液5d.用300 μmol/L的棕榈酸(PA)刺激H9C2 细胞 24h构建心肌细胞脂毒性模型,将PA处理过的细胞纳入PA组,未处理过则纳入对照组.对细胞进行Sirt3 的干扰RNA(si-Sirt3)和对照试剂(si-con)转染,转染24h后给予PA刺激24h并收集细胞.将细胞按照处理方式不同分入4 组:si-con组,si-Sirt3 组,si-con+PA组,si-Sirt3+PA组.采用Western blot检测正常组和DCM模型组小鼠心肌组织中Sirt3 蛋白水平,以及对照组和PA组细胞中Sirt3 蛋白水平.采用Western blot检测H9C2 细胞中超氧化物歧化酶2(SOD2)乙酰化水平.采用DHE染色检测活性氧产生情况.结果 与正常组比较,DCM模型组小鼠心肌组织中Sirt3 蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).与对照组比较,PA组细胞中Sirt3 蛋白水平降低,差异有统计学意义(P<0.05).与si-con组比较,si-con+PA组ac-SOD2/SOD2水平和活性氧水平升高,差异有统计学意义(P<0.05);与si-con+PA组比较,si-Sirt3+PA组ac-SOD2/SOD2 水平和活性氧水平升高,差异有统计学意义(P<0.05).结论 Sirt3 可通过SOD2 的去乙酰化消除心肌细胞中的活性氧,减少心肌细胞氧化应激损伤,在DCM的发生和发展中发挥重要作用.

丹参始载于《神农本草经》,丹参具有活血祛瘀、凉血消痈的功效,近代药理学研究发现丹参具有强心、改善微循环、抗血栓等作用.临床当中常用丹参的水煎剂,丹参的水煎剂的溶解成分主要为丹酚酸类物质,其中丹酚酸类物质当中的丹酚酸B是丹参水溶性成分之一,具有很强的生理学活性,丹酚酸B是丹酚酸类物质当中抗氧化作用最强的.丹酚酸B在体内具有调节烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶,脱偶联型内皮一氧化氮合酶(eNOS),并通过调节Janus蛋白酪氨酸激酶2/信号转导子和转录激活子3/血管内皮生长因子(JAK2/STAT3/VEGF)和肿瘤阻抑蛋白(p53),B细胞淋巴瘤-2(Bcl-2),Bcl-2相关X蛋白(Bax),半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-3(Caspase-3)抗凋亡通路,抑制细胞外信号调节激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶(ERK/MAPK),c-Jun氨基末端激酶/有丝分裂原活化蛋白激酶(JNK/MAPK),丝裂原活化蛋白激酶p38(p38MAPK)和雌激素受体α/磷脂酰肌醇3-激酶/丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶/核转录因子-κB(ERα/PI3 K/Akt/NF-κB)抗炎通路,沉默信息调节因子2相关酶1/核因子E2相关因子2/Kelch样ECH联合蛋白1-抗氧化反应元件(SIRT1/Nrf2/Keap1-ARE)和NAD依赖性脱乙酰酶sirtuin-3/β细胞上的叉头转录因子1/超氧化物歧化酶(SIRT3/FOX01/SOD2)抗氧化通路和促自噬通路抑制氧化应激,保护组织器官免受氧化损伤.本文从丹酚酸B抗氧化应激损伤的通路研究出发,综述近五年发表在国内外期刊的相关研究,为扩大丹酚酸B临床应用范围提供新的思路.

目的:观察川楝素对胃癌细胞糖酵解的抑制作用及其对线粒体NAD依赖性脱乙酰酶Sirtuin-3(SIRT3),信号传导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3),缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)等糖酵解相关调控因子的调节作用,进而探究川楝素抑制胃癌细胞的糖酵解效应的作用机制.方法:选取31例胃癌组织石蜡标本,采用免疫组织化学方法检测SIRT3、STAT3和HIF-1α蛋白表达,分析三者表达的相关性.将两种胃癌细胞株AGS和HGC-27分为不同浓度的川楝素处理组和对照组,分别加入100 nmol/L川楝素,250 nmol/L川楝素和等体积DMSO溶剂,孵育24 h后,采用糖代谢试剂盒检测胃癌细胞的葡萄糖摄取量和乳酸生成量,采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测糖酵解通路中关键调控因子mRNA表达.通过双荧光素酶报告系统分析川楝素对胃癌细胞中SIRT3启动子的调控作用,同时过表达STAT3检测其对荧光信号的影响.结果:免疫组织化学结果显示,在胃癌组织中SIRT3与STAT3和HIF-1α蛋白表达呈负相关(P均<0.05),STAT3与HIF-1α蛋白表达呈正相关(P<0.05).与对照组相比,川楝素(100 nmol/L和250 nmol/L)可明显抑制胃癌细胞的糖酵解效应,抑制肿瘤细胞吸收葡萄糖和分泌乳酸的能力(P均<0.05).川楝素作用于胃癌细胞24 h后,糖酵解关键酶葡萄糖转运蛋白1(GLUT1)和乳酸脱氢酶(LDHA)的mRNA表达水平明显降低(P均<0.01).川楝素作用后,STAT3和HIF-1αmRNA表达水平下降,而SIRT3 mRNA表达水平上调.川楝素可上调SIRT3启动子区域的荧光素酶活性,而过表达STAT3可抑制其上调(P均<0.05).结论:川楝素可通过抑制STAT3表达诱导SIRT3的转录表达,从而抑制HIF-1α表达,进而抑制胃癌细胞的糖酵解效应,引起胃癌细胞葡萄糖代谢模式的转化.

多囊卵巢综合征( polycystic ovarian syndrome, PCOS)是育龄妇女最常见的内分泌疾病,影响了全球大约10％ ～15％的妇女[1].目前,对于PCOS的发病机制尚不明确,除卵巢多囊样改变、高雄激素血症及排卵障碍外,常伴有胰岛素抵抗( insulin resistance,IR)、氧化应激、肥胖、血脂代谢异常等[2].哺乳动物 Sirtuin1 ( SIRT1 )是烟酰胺腺嘌呤二核苷酸( NAD +)依赖性组蛋白脱乙酰酶,参与DNA修复、细胞存活和衰老、氧化应激等众多细胞过程[3].越来越多的报道表明, SIRT1在IR、氧化应激、卵母细胞的发育与衰老以及颗粒细胞的增殖与凋亡中起着重要调节作用[4-5].探究SIRT1 在PCOS中的发生机制,有助于为PCOS的治疗提供新的靶点.本文对SIRT1在PCOS中的作用及相关发病机制进行综述,以期为后续研究提供参考.