目的 建立丹楂通脉丸的指纹图谱,利用化学计量学分析色谱峰贡献率,结合网络药理学方法预测其药效物质基础.方法 采用Agilent C18 色谱柱(250 mm×4.6 mm,5 μm),检测波长 280 nm,流动相 0.1%磷酸水-乙腈,流速 1.0 mL·min-1,梯度洗脱,建立丹楂通脉丸甲醇提取物指纹图谱.利用网络药理学筛选相关成分的靶点和通路,构建"成分-靶点-通路"网络,对丹楂通脉丸潜在的药效物质与关键靶点进行分子对接验证.通过体外实验验证潜在的药效物质的抗炎活性.结果 10批样品指纹图谱中有 15个共有峰,2个特征峰被指认,分别为丹酚酸B和丹酚酸A.网络药理学分析表明,丹酚酸B和丹酚酸A是丹楂通脉丸发挥活性作用的有效成分,预测其可作为丹楂通脉丸的主要药效物质.体外细胞实验证明,与模型组比较,丹酚酸B高、中、低剂量组NO释放量均明显降低(P<0.01),丹酚酸A高剂量组NO释放量显著下降(P<0.01),具有一定的抗炎活性.结论 通过指纹图谱和网络药理学预测丹楂通脉丸药效物质,为丹楂通脉丸质量的全面控制和评价提供了科学依据.

VEGF与血管内皮生长因子受体（VEGF recepor, VEGFR）结合的信号转导通路是调控血管新生的关键通路，也是疾病基础研究的重点及临床治疗的重要靶点。丹参提取物及主要化合物丹酚酸B在不同疾病中对VEGF/VEGFR信号通路也有双向调节作用，丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA、隐丹参酮可通过该通路抑制血管生成，丹参酮ⅡA磺酸钠可通过该通路促进血管生成。

目的:评价丹酚酸B(Sal B)对脓毒症小鼠血管平滑肌细胞(VSMC)炎症反应的影响及circACTA2在其中的作用。方法:在体实验：健康雄性C57BL/6小鼠81只，6～8周龄，采用随机数字表法分为3组( n＝27)：假手术组、脓毒症组和Sal B组。采用盲肠结扎穿孔法制作脓毒症模型。模型制备成功后，Sal B组腹腔注射Sal B 7 mg/kg，1次/d，连续2 d。每组随机取20只小鼠用于造模后7 d内测定SBP、DBP、MAP、全血乳酸(Lac)浓度，记录生存情况。造模后48 h时每组随机取7只小鼠，取动脉血管组织，采用免疫荧光染色法测定IL-1β表达，分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β 、TNF-α 、IL-6及其mRNA的表达，采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达。细胞实验：小鼠动脉VSMC培养后，采用随机数字表法分为6组( n＝3)：对照组(C组)、LPS组、Sal B组、si-circACTA2＋C组、si-circACTA2＋LPS组和si-circACTA2＋Sal B组。LPS组采用LPS(终浓度1 μg/ml)、Sal B组采用LPS(终浓度1 μg/ml)和Sal B (终浓度5 μmol/L)孵育24 h。si-circACTA2＋C组仅用si-circACTA2转染VSMC。si-circACTA2转染VSMC 24 h后，si-circACTA2＋LPS组用LPS (终浓度1 μg/ml)、si-circACTA2＋Sal B组采用LPS(终浓度1 μg/ml)和Sal B (终浓度5 μmol/L)孵育24 h。分别采用Western blot法和qRT-PCR法测定IL-1β 、TNF-α 、IL-6及其mRNA的表达，采用qRT-PCR法测定circACTA2的表达。 结果:在体实验：与假手术组相比，脓毒症组SBP、DBP及MAP降低，全血Lac浓度升高，7 d生存率降低，动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调，circACTA2表达下调( P<0.05)，IL-1β荧光增强。与脓毒症组相比，Sal B组SBP、DBP及MAP升高，全血Lac浓度降低，7 d生存率升高，动脉血管组织IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达下调，circACTA2表达上调( P<0.05)，IL-1β荧光减弱。细胞实验：与C组相比，LPS组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调，circACTA2表达下调( P<0.05)。与LPS组相比，Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达下调，circACTA2表达上调( P<0.05)。与si-circACTA2＋C组相比，si-circACTA2＋LPS组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达上调( P<0.05)。与si-circACTA2＋LPS组相比，si-circACTA2＋Sal B组IL-1β、TNF-α和IL-6及其mRNA表达差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:Sal B可减轻脓毒症小鼠VSMC炎症反应，机制可能与促进circACTA2表达有关。

目的:建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱及多指标成分含量测定方法，探讨丹参-当归配伍对主要化合物溶出的影响。方法:制备丹参、当归单煎及共煎溶液，采用Eclipse XDB-C 18色谱柱（4.6 mm×250 mm，5 μm），以0.1%磷酸水溶液-乙腈溶液为流动相进行梯度洗脱，流速1.0 ml/min，柱温35 ℃，检测波长280 nm，建立丹参-当归药对配伍前后HPLC指纹图谱，求取指纹图谱共有模式，进行色谱峰归属；测定丹参素、咖啡酸、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、丹参酮Ⅱ A、阿魏酸、绿原酸、洋川芎内酯9种成分含量，分析配伍前后各成分溶出度变化。 结果:HPLC指纹图谱及含量测定方法精密度良好，溶液中各待测成分在48 h内稳定，各色谱峰 RSD值均<5.0%，9种成分在各自线性范围内均有良好的线性关系，回收率均符合相关规定，各样品指纹图谱相似度均>0.9；丹参-当归药对配伍后共标定出17个共有峰，其中10个成分来自丹参，7个成分来自当归，该色谱条件下未发现有新化合物生成；丹参-当归药对配伍共煎后，丹参中迷迭香酸、丹酚酸B及丹参素平均溶出度较丹参单煎组减少（ P<0.05或 P<0.01）；丹参中咖啡酸平均溶出度较丹参单煎组增加（ P<0.01）；当归中绿原酸及阿魏酸平均溶出度较当归单煎组增加（ P<0.05或 P<0.01）；当归中洋川芎内酯平均溶出度与单煎组比较差异无统计学意义（ P>0.05）。 结论:丹参-当归药对配伍共煎后HPLC指纹图谱特征峰均可归属于丹参与当归，该色谱条件下未发现新化合物生成，对指标性成分的溶出度有显著影响。

目的:探究丹酚酸B在脂多糖（lipopolysaccharide, LPS）诱导的小鼠急性肺损伤（acute lung injury, ALI）中的作用及可能机制。方法:采用随机数字表法将18只健康成年雄性C57BL/6小鼠分为3组（每组6只）：假手术组（Sham组）、LPS组、LPS+丹酚酸B组（LPS+SAB组）。予LPS组和LPS+SAB组小鼠气管内注射10 mg/kg LPS，Sham组气管内注射等体积PBS；经过上述处理，LPS+SAB组即刻经尾静脉注射50 mg/kg丹酚酸B，Sham组和LPS组经尾静脉注射等体积PBS。12 h后通过H-E染色观察肺组织病理改变，使用BCA法检测支气管肺泡灌洗液（bronchoalveolar lavage fluid, BALF）中总蛋白浓度，ELISA法检测BALF中TNF-α、IL-6和IL-1β浓度，Western blot法检测肺组织丝裂原激活的蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase, MAPK）和NF-κB信号通路中p38、c-Jun氨基端激酶（c-Jun-N-terminal kinase, JNK）、胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinase, ERK）、p65蛋白及其磷酸化蛋白水平，使用丙二醛（malondialdehyde, MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase, SOD）试剂盒分别检测肺组织中MDA和SOD含量。结果:与Sham组比较：LPS组和LPS+SAB组小鼠肺损伤评分，BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度，肺组织中p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65，肺组织中MDA含量均升高（ P<0.05）；LPS组和LPS+SAB组肺组织中SOD含量降低（ P<0.05）。LPS+SAB组小鼠肺损伤评分，BALF中总蛋白浓度及TNF-α、IL-6、IL-1β浓度，肺组织p-p38/p38、p-JNK/JNK、p-ERK/ERK、p-p65/p65，肺组织中MDA含量均低于LPS组（ P<0.05）；LPS+SAB组SOD含量高于LPS组（ P<0.05）。 结论:丹酚酸B可通过抑制肺组织炎症蛋白激活和氧化应激，从而减轻LPS诱导的小鼠ALI严重程度。

目的:探讨丹酚酸B对人非小细胞肺癌放射敏感性的影响及其可能机制。方法:MTT检测丹酚酸B对非小细胞肺癌A549、H1299细胞系的毒性作用。克隆形成实验检测丹酚酸B对放射敏感性的影响。Transwell实验检测丹酚酸B对肿瘤细胞迁移能力影响。蛋白印迹法检测丹酚酸B调控射线诱导的去泛素化酶OTUD7B及迁移标志蛋白MMP-2、MMP-9、E-cadherin、AKT及p-AKT的表达。结果:丹酚酸B能抑制A549、H1299细胞增殖。克隆形成实验显示丹酚酸B可增加A549、H1299细胞放射敏感性，放射增敏比分别为1.45、1.38。Transwell实验结果显示丹酚酸B可抑制细胞迁移能力( P<0.05)。蛋白印迹法结果示射线诱导A549、H1299细胞OTUD7B表达并有时间依赖性，而丹酚酸B能通过阻抑OTUD7B表达进而抑制MMP-2、MMP-9、p-AKT表达、促进E-cadherin表达。 结论:丹酚酸B具有增强A549、H1299细胞放射敏感性的作用，其可能机制是丹酚酸B通过下调射线诱导的OTUD7B表达，抑制上皮-间质转化的进程而实现的。

目的:观察丹酚酸B对高糖培养的视网膜内皮细胞迁移及管道形成的影响，并采用网络药理学方法探讨其作用机制。方法:将细胞按随机数字表法分为正常组及1.0、0.5、0.1 μg/ml丹酚酸B组。各组细胞加入5.5 mmol/L葡萄糖进行干预，1.0、0.5、0.1 μg/ml丹酚酸B组分别加入1.0、0.5、0.1 μg/ml丹酚酸B进行干预。72 h后，采用CCK-8法检测各组细胞活力。将细胞按随机数字表法分为正常组、模型组及丹酚酸B低、中、高剂量组。正常组细胞加入5.5 mmol/L葡萄糖进行干预。模型组加入25 mmol/L葡萄糖干预；丹酚酸B低、中、高剂量组分别加入25 mmol/L葡萄糖及0.062 5、0.125 0、0.250 0 μg/ml丹酚酸B进行干预。采用Transwell实验检测细胞迁移数目，Matrigel实验分析细胞成管总长度。通过SuperTarget与Swiss TargetPrediction筛选丹酚酸B的活性作用靶点；检索GAD数据库、pharmGkb数据库、TTD数据库、DiGSeE数据库和OMIM数据库，获取糖尿病视网膜病变的相关靶点；两者取交集得到共同靶点，通过Cytoscape构建成分-靶点-疾病相互作用网络；利用DAVID对共同靶点进行GO分析及KEGG通路富集分析；运用Accelrys Discovery Studio Client 2.5软件进行分子对接。结果:CCK-8法检测结果显示，0.5、0.1 μg/ml丹酚酸B组细胞吸光度值与正常组比较差异无统计学意义( P>0.05)。Transwell实验、Matrigel实验结果显示，与模型组比较，丹酚酸B各剂量组迁移细胞相对个数、细胞成管总长度减少( P<0.05或 P<0.01)。通过网络药理学构建相互作用网络发现，丹酚酸B作用于46个靶点，8个信号通路。 结论:丹酚酸B可抑制高糖培养的视网膜血管内皮细胞的迁移能力和体外成管能力，并通过多靶点、多通路干预糖尿病视网膜病。

目的:探究丹酚酸B对心肌缺血再灌注损伤(MIRI)的作用及其可能的作用机制.方法:本实验选用人诱导多功能干细胞来源的心肌细胞(hiPSC-CMs),通过缺氧6 h复氧24 h建立心肌损伤模型,选取丹酚酸B(7.5、15、30、60和120 μg/mL)5个剂量研究其对hiPSC-CMs及hiPSC-CMs心肌损伤模型阻抗与场电位的影响.后进行动物实验,分为假手术组,心肌缺血再灌注模型组,丹酚酸B低(15 mg/kg)、中(30 mg/kg)、高(60 mg/kg)剂量组,阳性对照普萘洛尔(2.5 mg/kg)组,灌胃给药4 d后,进行冠状动脉左前降支结扎手术(缺血30 min,再灌注24 h)建立大鼠MIRI模型,采用TTC染色法观察大鼠心脏缺血区域面积;HE染色法观察大鼠心肌结构病理形态;全自动生化分析仪测定血清中心肌酶活性探究丹酚酸B用药在MIRI中的作用;使用试剂盒检测丹酚酸B在MIRI过程中可能存在的抗氧化机制.结果:丹酚酸B有增强hiPSC-CMs收缩力,减轻心肌损伤,改善场电位功能的作用.并且可以有效减少MIRI模型大鼠的心肌缺血面积,改善心肌结构损伤,降低心肌酶活性.此外,还能够降低MIRI大鼠血清中丙二醛(MDA)含量,提升超氧化物歧化酶(SOD)活性和还原型谷胱甘肽(GSH)活性,在改善心肌损伤的过程中发挥抗氧化作用.结论:丹酚酸B可以有效降低MIRI,并发挥着改善心肌细胞生理功能,保护心脏的作用.其作用机制可能与降低血清MDA水平、提高SOD和GSH活性有关.

目的 采用星点设计-效应面法(CCD-RSM)联用D-最优混料设计,优化抗下肢静脉血栓颗粒的制剂工艺.方法 以溶媒用量、煎煮时间为主要考察因素,以有效成分丹酚酸B和多糖含量及干膏收率的总评归一值(OD)为评价指标,采用CCD-RSM确定最佳提取工艺;以颗粒吸湿率为评价指标,结合溶化性、成型率、休止角等,利用D-最优混料设计优选最佳成型工艺.结果 最佳提取工艺:采用8倍量水提取2次,每次100 min.成型工艺为浸膏与辅料比例1:2,辅料间比例为可溶性淀粉:糊精:蔗糖=0.452:0.518:0.030.结论 优选的制剂工艺条件稳定、可行,可为抗下肢静脉血栓颗粒的生产提供依据.

丹参酚酸类化合物是丹参发挥保护心血管系统、抗肿瘤与抗纤维化等多种药理作用的一类关键物质基础.以合成丹酚酸A、丹酚酸B和迷迭香酸等丹参酚酸类化合物为目标的微生物细胞工厂的构建,可以实现丹参酚酸类化合物异源高效合成,缓解临床对丹参药材的用药压力.本文就丹参酚酸类化合物的合成生物学、生物合成关键催化酶及其代谢调控等研究现状进行了归纳分析,以期为丹参酚酸类化合物的高效合成与资源应用提供科学依据.