目的:评价大鼠神经病理性痛时外周神经免疫球蛋白重链结合蛋白(BIP)与电压门控性钠离子通道亚型1.8(Na v1.8)的关系。 方法:SPF级健康雄性SD大鼠44只，体重210～260 g。采用坐骨神经慢性缩窄损伤(CCI)法制备神经病理性痛模型。实验Ⅰ　采用随机数字表法将20只大鼠分为2组( n＝10)：假手术组(Sham组)和CCI组。实验Ⅱ　采用随机数字表法将24只大鼠分为3组( n＝8)：假手术组(Sham组)、CCI＋生理盐水组(CCI＋NS组)和CCI＋BIP抑制剂HA15组(CCI＋H组)。于术后第4天开始，CCI＋NS组腹腔注射0.9%生理盐水1 ml，CCI＋H组腹腔注射HA15 0.7 mg/kg，连续3 d(1次/d)。实验Ⅰ和Ⅱ均于术前1 d、术后1、3、d及7 d(T 0-T 4)时测定机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)，术后第7天行为学测试完成后采用Western blot法检测背根神经节和坐骨神经BIP与Na v1.8的表达。实验Ⅰ于术后第7天行为学测试结束后采用免疫荧光检测背根神经节和坐骨神经BIP和Na v1.8的表达及共定位情况，采用免疫共沉淀实验评价BIP和Na v1.8相互作用情况。 结果:实验Ⅰ　与Sham组比较，CCI组T 1-T 4时MWT降低，TWL缩短，背根神经节Na v1.8表达下调，BIP表达上调，坐骨神经Na v1.8和BIP表达上调( P<0.05)，CCI组背根神经节和坐骨神经BIP与Na v1.8存在明显共定位，背根神经节BIP可以免疫共沉淀出Na v1.8，Na v1.8也能免疫共沉淀出BIP。实验Ⅱ　与Sham组比较，CCI＋NS组T 1-T 4时MWT降低，TWL缩短，背根神经节Na v1.8表达下调，BIP表达上调，坐骨神经Na v1.8和BIP表达上调( P<0.05)；与CCI＋NS组比较，CCI＋H组T 3，4时MWT升高，TWL延长，背根神经节和坐骨神经Na v1.8和BIP表达下调( P<0.05)。 结论:BIP可介导外周神经Na v1.8的再分布，参与大鼠神经病理性痛的病理生理机制。

背景:食管高敏感是胃食管反流病(GERD)患者烧心等症状产生的重要原因.瞬时受体电位香草酸亚型1(TRPV1)和电压门控钠离子通道1.8(NaV1.8)可能在食管高敏感的调控中发挥重要作用.目的:检测TRPV1、NaV1.8在GERD动物模型食管和迷走神经感觉神经元中的表达,探究其在食管高敏感中的作用.方法:12只雄性豚鼠随机分为对照组和GERD组,后者通过饮用盐酸胃蛋白酶溶液建立GERD模型.通过观察动物体质量变化、食管炎症组织学评分和炎症细胞因子表达验证造模成功与否.通过分析心率变异性(HRV)明确动物是否处于内脏高敏感状态.以免疫荧光法、qRT-PCR和蛋白质印迹法检测食管、迷走神经结状神经节和颈静脉神经节中的TRPV1、NaV1.8表达、分布和共表达情况.结果:GERD组食管炎症组织学评分显著高于对照组(0.85±0.43对0.22±0.45),促炎细胞因子表达增高,抗炎细胞因子表达降低,体质量增长缓慢(P均<0.05).造模前两组HRV指标低频/高频(LF/HF)比值无明显差异(P>0.05),造模后GERD组LF/HF比值显著增高(P<0.05).GERD组食管黏膜上皮和颈静脉神经节TRPV1、NaV1.8表达和共表达均显著上调(P均<0.05),结状神经节中两者表达无明显变化(P均>0.05).结论:在食管酸暴露情况下,食管黏膜上皮TRPV1、NaV1.8表达增高,迷走神经颈静脉神经节中两者表达亦显著上调,促进迷走神经通路伤害性信号的传递,最终导致食管高敏感发生.

心律失常是心血管疾病中的常见病症,严重威胁人类的健康.目前针对心律失常的治疗方法颇多,由于心律失常发生机制的复杂性以及认识的局限性,总体疗效仍不理想.近年SCN10A基因编码的电压门控性钠通道Nav1.8备受关注,越来越多的学者发现应用A-803467特异性阻断Nav1.8,可能通过抑制心脏自主神经,改善心脏电重构,与Nav1.5相互作用改变心肌的电生理特性等途径,在心律失常中发挥着重要作用,为心律失常的治疗提供了新的思路.

目的 观察微小 RNA-145(miR-145)对糖尿病神经病理性痛大鼠痛阈的影响,并探讨其可能机制.方法 取正常大鼠12只作为对照组(N组),糖尿病神经痛模型制备成功的 SD大鼠36只,随机分为三组:糖尿病神经痛组(D组)、糖尿病神经痛-空载组(DN组)和糖尿病神经痛-miR-145过表达组(agomiR-145组),每组12只.N 组和 D组大鼠鞘内分别注射等剂量生理盐水10 μl, DN组大鼠鞘内注射阴性对照病毒(10 μl,1×106TU/ml),agomiR-145组大鼠鞘内注射 agomiR-145(10 μl,1×106TU/ml).于鞘内注药前1 d 和注药后1、3、7、14 d 测定四组大鼠机械缩足痛阈(MWT)和热缩足反射潜伏期(TWL).然后采用RT-PCR法检测大鼠背根神经节(DRG)中miR-145 mRNA相对表达量,免疫荧光检测大鼠背根神经节 Nav1.8阳性细胞荧光相对强度.荧光素酶报告实验验证 miR-145的靶基因.结果 注药前1 d D 组、DN 组和 agomiR-145组 MWT 明显低于、TWL 明显短于N组(P<0.05);注药后3、7、14 d agomiR-145组MWT明显高于D组和DN组(P<0.05);注药后7、14 d agomiR-145组大鼠TWL明显长于 D 组和 DN 组(P<0.05).D 组和 DN 组DRG中 miR-145 mRNA相对表达量明显低于 N 组和 agomiR-145组,电压门控钠离子通道1.8 (Nav1.8)阳性细胞明显多于 N组和 agomiR-145组(P<0.05).荧光素酶报告实验验证 miR-145作用于 Nav 1.83'-非翻译区并调控 Nav1.8的表达.结论 miR-145通过下调背根神经节 Nav 1.8表达缓解糖尿病大鼠机械痛敏和热痛敏.

目的:观察足底切口痛模型大鼠术后行为学改变及背根神经节(dorsal root ganglion,DRG)中Nav1.8表达的动态变化,探讨Nav1.8与术后痛觉敏化的关系.方法:雄性SD大鼠36只随机分为足底切口痛组(n=30)和对照组(n=6),分别于术前、术后2 h、1 d、2 d、3 d、5 d测定大鼠的机械性痛阈和热痛阈;测痛后取同侧L4-L6节段背根神经节,运用实时荧光定量PCR、蛋白质印迹检测大鼠背根神经节中Nav1.8的表达.结果:切口痛组大鼠术后痛阈下降,术后2 h机械性痛阈和热痛阈降至最低(P<0.05),Nav1.8表达量最高(P<0.05);术后1 d热痛阈和机械性痛阈开始恢复,Nav1.8表达也逐渐下降.结论:切口痛术后痛觉敏化与Nav1.8表达的动态变化趋势基本一致,Nav1.8参与急性术后痛觉敏化的形成与维持过程,在急性术后疼痛中发挥重要作用.

目的 评价α2肾上腺素能受体与背根神经节神经元Nav1.8表达的关系,阐明右美托咪定减轻大鼠急性内脏痛的机制.方法 清洁级健康成年雄性SD大鼠32只,6～8周龄,体重180～220 g,采用随机数字表法分为4组(n=8):对照组(C组)、急性内脏痛组(VP组)、右美托咪定组(D组)和右美托咪定+阿替美唑组(DA组).VP组、D组和DA组直肠注入10-3 mmol∕L辣椒素1.3 ml制备大鼠急性内脏痛模型,C组经直肠注入等容量生理盐水.于造模前20 min时DA组经颈背部皮下注射阿替美唑1 mg∕kg,于造模前15 min时D组和DA组分别经尾静脉注射右美托咪定10μg∕kg,C组和VP组在相应时点给予等容量生理盐水.于制备模型后1 h时记录内脏痛行为学评分;随后处死大鼠取L3-6背根神经节,采用免疫组化法计数Nav 1.8表达阳性神经元数,采用qRT-PCR法检测Nav1.8 mRNA的表达.结果 与C组比较,VP组、D组和DA组内脏痛行为学评分、Nav1.8表达阳性神经元数和Nav1.8 mRNA表达水平升高(P<0.05);与VP组比较,D组和DA组内脏痛行为学评分、Nav1.8表达阳性神经元数和Nav1.8 mRNA表达水平降低(P<0.05);与D组比较,DA组内脏痛行为学评分、Nav1.8表达表达阳性神经元数和Nav1.8 mRNA表达水平升高(P<0.05).结论 右美托咪定减轻大鼠急性内脏痛的机制与激动α2肾上腺素能受体下调背根神经节神经元Nav 1.8表达有关.

目的:研究敲减大鼠背根神经节(DRG)内ClC-3氯通道/反向转运体对神经元电压门控性钠通道表达和大鼠机械痛敏的影响及机制.方法:成年SD大鼠鞘内注射ClC-3 shRNA腺相关病毒(AAV-ClC-3 shRNA)以敲减DRG内ClC-3的表达,RT-qPCR、免疫荧光染色和Western blot从mRNA和蛋白水平检测ClC-3、细胞因子和电压门控性钠通道表达的变化,用up-down方法检测机械痛敏.结果:鞘内注射AAV-ClC-3 shRNA后DRG组织ClC-3的表达下调,大鼠出现机械触诱发痛.敲减DRG组织ClC-3的表达可致电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9的表达增加.敲减DRG组织ClC-3的表达可提高肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平,降低白细胞介素10(IL-10)水平.结论:大鼠DRG内ClC-3下调导致TNF-α/IL-10失衡,进而增加电压门控性钠通道Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8和Nav1.9表达,增强神经组织兴奋性,最终导致机械痛敏.

背景与目的:淋巴结转移是影响结直肠癌(CRC)患者预后的关键因素.电压门控钠通道(Nav)在多种肿瘤中高表达,且与肿瘤的转移密切相关.因此,本研究探讨CRC组织中不同的Nav亚型的表达情况以及Nav的表达与CRC淋巴结转移及侵袭性的关系.方法:收集100例首发CRC患者的肿瘤组织和癌旁组织手术标本,行HE检测鉴别后,采用qRT-PCR检测两种组织中不同Nav亚型的表达.分析不同亚型Nav表达与CRC患者淋巴转移情况、脉管侵润以及神经累犯的关系.用免疫组化检测相关Nav在非转移性淋巴结和转移性淋巴结中的表达差异.结果:多种Nav亚型在CRC组织中高表达,尤其是Nav1.1、Nav1.5、Nav1.6、Nav1.8.其中Nav1.1、Nav1.6在淋巴结阳性患者的癌组织中明显高表达,而Nav1.6在有脉管侵犯的患者的癌组织中明显高表达(均P＜0.05).相关性分析结果显示,Nav1.1、Nav1.6的表达与淋巴结转移呈明显正相关(r=0.272,P=0.006;r=0.234,P=0.019);Nav1.6的表达与脉管侵润相关(r=0.341,P=0.001),而 Nav1.1的表达与神经累犯呈正相关(r=0.330,P=0.001).免疫组化检测结果显示,Nav1.6在阳性淋巴结中高表达,而Nav1.1在阳性淋巴结与阴性淋巴结中均呈低表达.结论:CRC组织中有多种Nav亚型的异常表达,其中Nav1.1和Nav1.6可能是CRC淋巴结转移的潜在标记物,且Nav1.6可能与CRC细胞的侵袭性密切相关.

由于发病率高、药物效果有限或治疗药物受限等原因,慢性疼痛的治疗一直是世界范围内研究人员关注的难题.电压门控钠通道(VGSCs)阻滞剂有较为显著的镇痛作用,目前已知与慢性疼痛相关的钠通道亚型主要有Nav1.3、Nav1.7、Nav1.8、Nav1.9.2021年8—9月进行了该研究,全面概括了上述钠通道亚型与慢性疼痛的关系,归纳出潜在候选药物临床前研究方法,以及已被证实安全有效的选择性钠通道阻滞剂品种,为选择性钠通道阻滞剂的开发提供参考.

目的 探讨阻断心脏神经节丛(ganglionated plexi,GP)的电压门控钠离子通道1.8(NaV1.8)对急性心肌梗死后心房颤动发生的影响.方法 将12只雄性比格犬随机分为A-803467组(NaV1.8阻断剂,n=6)及对照组(DMSO,n=6).构建急性心肌梗死模型后,A-803467组于4个主要GP表面多点注射A-803467(1μmol/0.5 mL),对照组注射DMSO(1μmol/0.5 mL).记录用药前及用药后30 min、60 min及90 min,两组犬的窦性心率、心房有效不应期、心房易损窗口及心房颤动持续时长的变化情况;记录用药后10 min高频电刺激(20 Hz,0.1 ms,方波)右前GP引起的窦性心率变化情况.结果 与对照组相比,A-803467可提高窦性心率,显著缩短心房有效不应期,增宽心房易损窗口,延长心房颤动时长.此外,A-803467可抑制高频电刺激右前GP导致的窦性心率减慢.结论 阻断GP的NaV1.8可提高急性心肌梗死后心房颤动的诱发性.NaV1.8可调控急性心肌梗死后心房颤动的发生,其作用机制可能与调控心脏GP的功能有关.