目的:探讨非衍生化串联质谱法（MS/MS）中十四烯酰基肉碱（C14∶1）/十二烯酰基肉碱（C12∶1）在新生儿筛查极长链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症（VLCADD）中的应用价值，并探索筛查VLCADD的最佳指标组合方案。方法:回顾性分析2014年1月至2021年12月南京市新生儿疾病筛查中心和苏州市新生儿疾病筛查中心17例MS/MS筛查发现并经酰基辅酶A脱氢酶极长链（ ACADVL）基因确诊的VLCADD患儿和423 507名经MS/MS筛查正常的新生儿资料。采用受试者工作特征（ROC）曲线分别确定所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1筛查VLCADD的截断值。同时将不同指标单独或联合组成5个结果判读方案，分别为方案1（C14∶1/C12∶1）、方案2（C14∶1）、方案3（C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16）、方案4（C14∶1/C12∶1+C14∶1）和方案5（C14∶1/C12∶1+C14∶1+C14∶1/C2+C14∶1/C16），并计算各方案的检出率、假阳性率、阳性预测值，采用χ2检验比较其筛查效率。 结果:所有新生儿组、足月新生儿组和正常出生体重新生儿组C14∶1/C12∶1的截断值均为2.80。5个判读方案筛查VLCADD的检出率均为17/17。其中方案1假阳性率［26.15‰（11 075/423 524）］最高，阳性预测值［0.15%（17/11 092）］最低。方案4（方案5）假阳性率最低，为［0.02‰（10/423 524）］，阳性预测值最高，为［62.96%（17/27）］，与方案1、方案2、方案3比较，假阳性率（χ2值分别为302.30、11 191.50和32.06）和阳性预测值（χ2值分别为102.51、3 485.61和13.83）差异均有统计学意义（ P均<0.001）。 结论:C14∶1/C12∶1是新生儿筛查VLCADD有效的辅助判读指标，推荐C14∶1/C12∶1+C14∶1为非衍生化串联质谱法判读VLCADD的最佳筛查指标组合。

目的:分析南京地区新生儿遗传代谢病的检出情况。方法:分析2013年12月至2018年7月南京市出生的175 767例串联质谱新生儿筛查的结果。采用非衍生化串联质谱技术检测干血滤纸片氨基酸、酰基肉碱和琥珀酰丙酮浓度，筛查新生儿氨基酸、有机酸和脂肪酸等三大类遗传代谢病。对于筛查阳性的患儿，通过基于高通量测序技术的基因Panel检测致病基因突变。对数据采用描述性统计学方法进行分析。结果:175 767例新生儿筛查初筛阳性率为2.1%（3 691/175 767），3 691例初筛阳性中召回3 598例，最终临床诊断遗传代谢病患儿62例，包括氨基酸代谢病35例、有机酸代谢病12例、脂肪酸代谢病15例。本地区新生儿遗传代谢病的总发病率为0.035 3%，其中氨基酸代谢病、有机酸代谢病和脂肪酸代谢病的总发病率分别为0.019 9%、0.006 8%和0.008 5%。发病率最高的疾病分别为苯丙氨酸羟化酶缺乏症0.015 9%、甲基丙二酸血症0.005 1%和原发性肉碱缺乏症0.005 1%。62例临床诊断为遗传代谢病的患儿中，51例（82.2%，包括17例苯丙氨酸羟化酶缺乏症和34例其他遗传代谢病）进行了基因诊断（另外11例苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿拒绝进行基因诊断）。17例苯丙氨酸羟化酶缺乏症患儿均找到2个致病突变，分别来自于父母。34例其他遗传代谢病患儿中29例找到2个致病突变，分别来自于父母；另5例患儿仅找到1个致病突变，其中2例高甲硫氨酸血症为常染色体显性遗传。结论:本地区发病率较高的新生儿遗传代谢病为苯丙氨酸羟化酶缺乏症、甲基丙二酸血症和原发性肉碱缺乏症。串联质谱筛查出的部分病例仅表现为筛查指标异常，随访中尚未出现特异性临床症状，需要进行更长期的随访。

目的:比较两种非衍生化串联质谱检测试剂(NeoBase? 1和NeoBase? 2)在新生儿遗传代谢病筛查中的应用情况。方法:选择2020年6月至12月在西北妇女儿童医院进行遗传代谢性疾病筛查的表型正常新生儿滤纸干血片标本，共计7295份。同时应用NeoBase? 1和NeoBase? 2试剂检测滤纸干血斑样本，了解正常新生儿11种氨基酸和12种酰基肉碱水平分布，并制定参考区间；采用配对Wilcoxon检验比较11种氨基酸和12种酰基肉碱水平之间差异；同时检测经临床确诊的23例6种遗传代谢病患儿的标本，验证两种试剂对疾病判读的一致性。结果:正常新生儿的11种氨基酸和12种肉碱水平经K-S单标本正态分布检验，呈偏态分布(均 P<0.001)，两种试剂检测的所有指标水平差异均有统计学意义(均 P<0.001)；以0.5~99.5百分位数确定两种试剂检测各种氨基酸和酰基肉碱的正常参考范围，两种试剂确定的参考范围有重叠，经临床确诊样本验证，NeoBase? 2与NeoBase? 1均检测到相应异常指标的改变，两种试剂均能检测出疾病患儿，检出率均为100%。 结论:NeoBase? 2与NeoBase? 1相比，检测氨基酸和酰基肉碱的水平有差异，但均能检测到确诊样本的异常指标改变，对疾病的判断无影响，可用于新生儿遗传代谢性疾病的筛查。

目的:探讨遗传代谢病的疾病谱、发病率、遗传特征及随访追踪情况。方法:选取2010年12月至2019年12月上海部分助产机构出生的活产儿遗传代谢病筛查结果进行回顾性分析。新生儿均在出生48 h并充分哺乳后采集足跟血置于特定滤纸上，采用非衍生化串联质谱法进行氨基酸、有机酸、线粒体脂肪酸氧化缺陷3大类疾病筛查，对筛查阳性病例召回诊断，确诊患儿进行治疗和随访。结果:共筛查213 391名活产儿，诊断遗传代谢病52例，总发病率为1∶4 104，其中氨基酸代谢障碍28例（1∶7 621），有机酸代谢障碍9例（1∶23 710），线粒体脂肪酸氧化缺陷15例（1∶14 226），发病率排在前4位的依次为苯丙氨酸羟化酶缺乏症12例、短链酰基辅酶A脱氢酶缺乏症8例、高甲硫氨酸血症6例和甲基丙二酸血症5例；另外确诊母源性原发性肉碱缺乏症14例和母源性3-甲基巴豆酰辅酶A羧化酶缺乏症2例。52例患儿随访结果，死亡5例（9.6%），失访3例（5.8%），44例（84.6%）患儿明确诊断后，按照相应的诊疗指南给予特殊奶粉或药物治疗，并定期检测随访，体格和智能发育基本正常。结论:本研究初步调查了上海部分地区新生儿氨基酸、有机酸、线粒体脂肪酸氧化缺陷的发生情况，通过早筛查、早诊断、早干预可改善患儿预后。

目的 比较串联质谱(MS/MS),包括非衍生标准曲线定量法(简称"标曲法")和衍生法、非衍生法及荧光法在苯丙酮尿症(PKU)随访患者血苯丙氨酸(Phe)浓度测定中的应用.方法 收集上海新华医院随访的204例PKU患者干血滤纸片(DBS)样本;MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法及荧光法测定Phe浓度,分为低、中、高,即<360、360~600和>600 μmol/L 3组,对Phe检测值进行一致性检验及非参数检验.结果 MS/MS标曲法批内和批间精密度为4.0%~7.2%,回收率为93.2%~97.3%.一致性检验显示各组Phe检测值在95%一致性界限外的值不超过8.1%.低、中浓度组,荧光法、MS/MS标曲法和衍生法Phe检测值四分位数分别为176(118,251)μmol/L、174(94, 273)μmol/L、153(94,242)μmol/L,和540(478,578)μmol/L、485(414,529)μmol/L、466(402,513) μmol/L;荧光法较MS/MS标曲法高4.8%~9.0%,(Z=-3.787~-2.674,P<0.01);MS/MS非衍生法较标曲法低3.9%~5.2%,(Z=-7.474~-5.747,P<0.01);高浓度组,MS/MS标曲法、衍生法、非衍生法和荧光法检测值为807(695,924)μmol/L,700(575,785)μmol/L,680(623,771)μmol/L和711(674,794)μmol/L,MS/MS标曲法较其他方法高10.9%~16.2%,(Z=-4.458~-4.356,P<0.01).结论 MS/MS标曲法测定DBS中Phe浓度特异性和准确度较好,4种方法测定血Phe浓度一致性较好,虽检测值存在差异,但均可用于多数PKU患者的Phe浓度监测.

目的 调查海南省所有8个少数民族自治市县(昌江、乐东、东方、保亭、白沙、琼中、五指山和陵水)新生儿原发性肉碱缺乏症(PCD)发病情况.方法 收集2017年8月1日至2018年7月31日在海南省8个少数民族自治市县出生18701例新生儿滤纸干血片样本,其中男婴10051例,女婴8650例.采用串联质谱技术,使用PE公司生产的非衍生化多种氨基酸、肉碱和琥珀酰丙酮测定试剂盒,对游离肉碱(C0)和酰基肉碱(C2、C3、C16、C18等指标)展开检测,初筛C0低于10μmol/L者母婴召回一同复查肉碱谱,仍低者送血标本至北京迈基诺基因做基因诊断,送尿标本至广州金域检测尿气相质谱.结果 18701例新生儿当中确诊原发性肉碱缺乏症5例,新生儿原发性肉碱缺乏症发病率为2.67/10000(5/18701),通过基因检测确诊2例黎族基因突变c.388GA,2例汉族为P.R254X和1例苗族P.Y84N.确诊患儿均得到左卡尼丁治疗,避免了代谢失常或心肌和骨骼肌受损.结论 海南省所有8个少数民族市县新生儿PCD发病率高,新生儿原发性肉碱缺乏症黎族和汉族突变位点不同,串联质谱筛查PCD能保障出生人口素质.

目的 对Waters公司Xevo TQD串联质谱仪及其配套试剂PerkinElmer公司NeoBaseTM Non-derivatized MSMSkit在测定新生儿多种遗传代谢病筛查的指标-血氨基酸和肉碱的能力进行性能验证.方法 参考《中华人民共和国卫生行业标准》WS/T 420-2013中临床实验室对商品定量试剂盒分析性能的验证,依据CLIA88要求,对精密度和正确度两项主要性能进行验证.结果 (1) Xevo TQD检测9种氨基酸的批内和批间精密度分别为2.69％-5.31％和3.96％-10.28％,检测13种肉碱的批内和批间精密度分别为2.59％～7.84％和4.03％～ 11.51％.(2) Xevo TQD检测多种氨基酸和肉碱的正确度均符合要求;结论Waters Xevo TQD检测氨基酸及肉碱的性能通过验证,满足实验室要求.

An analytical methodology based on an O-[2-(methacryloyloxy)-ethylcarbamoyl]-10,11-dihydroquinidine (MQD)-silica hybrid monolithic column was developed for the enantioseparation of 9-fluorenylmethoxycarbonyl (FMOC) derivatized amino acids by nano-liquid chromatography. The mo-bile phase was optimized including the apparent pH, content of ACN, and concentration of the buffer to obtain a satisfactory enantioresolution performance. 27 FMOC derivatized amino acids including 19 protein and 8 non-protein amino acids were tested, and 19 out of them were enantiomerically discriminated obtaining baseline separation for 11 of them. Analytical characteristics of the method were evaluated for norvaline and tryptophan in terms of linearity, precision, accuracy, limits of detection (LOD) and quantitation (LOQ) showing good performance to be applied to the enantiomeric determination of these amino acids in dietary supplements. LOD and LOQ values were 9.3 and 31μM for norvaline en-antiomers and 7.5 and 25μM for tryptophan enantiomers, respectively. The contents of D-norvaline and D-tryptophan were below their respective LODs in all the analyzed samples. Quantitation of L-tryptophan and L-norvaline showed good agreement with the labeled contents except for one sample which did not show presence of L-norvaline, contrary to the label indication.

目的 对国产"MS/MS琥珀酰丙酮和非衍生化多种氨基酸、肉碱测定试剂盒"(广州市丰华生物工程有限公司,以下简称MS/MS试剂盒)测定新生儿干血滤纸片(dried blood spots specimens,DBS)中氨基酸和肉碱这两类指标的性能进行验证,评估其是否适用于新生儿遗传代谢病筛查.方法(1)通过测定室内质控品和室间质控品,评估精密度和准确度;(2)收集1513例干血滤纸片样本,同时使用MS/MS试剂盒和NeoBaseTM Non-derivatized MSMS kit(Perkin Elmer公司)进行检测,分析两种检测试剂盒的一致性,并比较MS/MS试剂盒检测结果和临床诊断结果的一致性;(3)对MS/MS试剂盒检测结果进行分析,初步确定筛查指标的参考范围.结果(1)MS/MS试剂盒检测10种氨基酸的变异系数分别为2.36％～6.85％(CV批内)和2.52％～7.44％(CV批间),1种琥珀酰丙酮和15种肉碱的变异系数分别为2.42％～7.12％(CV批内)和4.23％～9.54％(CV批间).准确度符合要求;(2)MS/MS试剂盒与NeoBaseTM Non-derivatized MSMS kit的一致性评价显示,阳性一致性82.7％、阴性一致性99.5％和总一致性98.7％,kappa=0.854,MS/MS试剂盒检测多种遗传代谢病的灵敏度为100.0％,特异性为96.8％;(3)根据检测结果建立了各筛查指标的初始参考范围,后续随着检测数据的不断积累,将进一步修正切值.结论(1)MS/MS试剂盒检测结果符合实验室性能要求,可应用于新生儿多种遗传代谢病的筛查.(2)MS/MS试剂盒应用于新生儿多种遗传代谢病的筛查需要根据统计结果重新设定参考区间.