目的:评价吡法齐明（pyrifazimine，TBI-166）与抗耐药结核病A组药物贝达喹啉（bedaquiline，BDQ）、莫西沙星（moxifloxacin，MFX）及新型抗结核药物德拉马尼（delamanid，DLM）、SQ109、Q203、PBTZ169两药组合在体外及小鼠体内的抗结核活性，为TBI-166联合用药提供依据。方法:本研究自2020年9月至2021年7月。应用棋盘法测定TBI-166与BDQ、MFX、DLM、SQ109、PBTZ169两药组合的相互作用，时间杀菌曲线法评估具有部分协同作用的两药组合的抗结核活性；BALB/c小鼠急性结核病模型评价两药联用组（TBI-166+BDQ、TBI-166+SQ109、TBI-166+PBTZ169、TBI-166+Q203）与单药组（TBI-166、BDQ、SQ109、PBTZ169、Q203）治疗4和8周的抗结核活性，采用独立样本 t检验进行数据分析。 结果:TBI-166与抗结核药物联用后，最低药物浓度（MIC）降至应用单药的6.25%~25.00%，TBI-166分别与BDQ、SQ109、PBTZ169两药联用后，部分抑制浓度指数（FICI）值分别为0.56、0.75、0.75；时间杀菌实验显示TBI-166分别与BDQ、SQ109、PBTZ169两药组合作用于结核分枝杆菌14 d后与单药应用时相比活菌量减少了至少3 log 10 CFU/ml；在小鼠实验中发现BDQ、SQ109和PBTZ169分别与TBI-166组合后与单药组相比肺组织活菌量较少，其中TBI-166+BDQ组小鼠在治疗4周后肺组织培养阴性，小鼠肺内活菌数比BDQ单药组低1.49 log 10CFU（ P<0.01）。 结论:体外及小鼠体内实验揭示TBI-166分别与BDQ、SQ109、PBTZ169联用后均具有协同抗结核活性。

目的 测定14种抗结核药物在巨噬细胞内的抗结核活性,并评价体外巨噬细胞内抗结核活性测定对新药筛选的作用.方法 采用结核分枝杆菌标准株H37Rv感染J774.1巨噬细胞,建立体外巨噬细胞感染模型.分别检测利福平、异烟肼、左氧氟沙星、吡嗪酰胺、贝达喹啉、氯苯吩嗪、利奈唑胺、硝基咪唑类药物PA-824、氯苯吩嗪的衍生物TBI166、利奈唑胺的同类药物OTB-658,以及苯并噻嗪类药物PBTZ-169和BTZ-043、TZY-5 84、NTB-3119H作用后的巨噬细胞中的细菌载量,评价抗结核药物的胞内活性;并采用微孔培养显色法(MABA法)测定上述药物的体外最低抑菌浓度.从中选取利福平、异烟肼、左氧氟沙星、贝达喹啉、氯苯吩嗪、利奈唑胺、TBI-166、PBTZ-169分别作用J774.1巨噬细胞3h,利用高效液相色谱质谱/质谱联用技术测定细胞内药物浓度.结果 细胞培养基中药物浓度为0.50 μg/ml时,异烟肼、PBTZ-169、贝达喹啉、BTZ-043、NTB-3119H、TZY-5-84和PA-824降低巨噬细胞内结核分枝杆菌1.60、1.33、1.31、1.25、1.13、1.01和1.00 lg(CFU/ml)(CFU:菌落形成单位),胞内活性最强的是异烟肼和PBTZ-169,其次是贝达喹啉;但吡嗪酰胺、利奈唑胺、TBI-166和OTB-658仅降低巨噬细胞内结核分枝杆菌0.65、0.55、0.33和0.31 lg(CFU/ml).经体外90％最低抑菌浓度(MIC90)和胞内活性比较,发现利奈唑胺和OTB-658虽然具有良好的体外抗菌活性(MIC90分别为0.25和0.05 μg/ml),但是二者在细胞培养基中浓度为5μg/ml时仅降低巨噬细胞内结核分枝杆菌0.77和0.50 lg(CFU/ml).在培养基中药物浓度为20g/ml时,PBTZ-169、贝达喹啉、氯苯吩嗪、利福平、TBI-166、异烟肼、左氧氟沙星和利奈唑胺在巨噬细胞内的浓度为1.42、2.11、4.93、1.65、0.50、0.27、1.13和0.32 μg/ml,胞内药物浓度是其MIC90(分别为0.0005、0.03、0.12、0.05、0.04、0.05、0.25、0.25 μg/ml)的2840.00、70.33、41.08、33.00、12.50、5.40、4.52和1.28倍.结论 各药物进入巨噬细胞的能力并不相同,巨噬细胞内抗菌活性的差异提示细胞内药物浓度及与MIC90的关系是细胞内活性的决定因素.

目的 分析多层螺旋计算机断层扫描(MSCT)三维重建诊断颅骨骨折效能,以为临床诊断提供参考依据.方法 回顾性分析2017年3月-2020年3月信阳市第四人民医院收治166例急性颅脑外伤(TBI)患者的临床资料,所有患者受伤后6h内均接受MSCT平扫与MSCT三维重建检查.以手术结果作为金标准,对比两种方法对颅骨骨折的诊断效能,并采用Kappa-致性检验分析MSCT平扫与MSCT三维重建诊断与手术结果诊断的一致性.结果 本研究166例TBI患者经手术证实有86例患者存在颅骨骨折,占51.81％,均为单发性骨折,其中线形骨折34例,粉碎性骨折14例,开放性骨折15例,轻度凹陷性骨折23例;以手术结果作为金标准,MSCT三维重建诊断颅骨骨折准确度为98.19％,灵敏度为97.67％,特异度为98.75％,阳性预测值为98.82％,阴性预测值为97.53％,均高于MSCT平扫[68.67％、81.40％、55.00％、66.04％、73.33％],差异有统计学意义(x2=52.322、12.162、43.068、32.464、62.321,P均＜0.001);且经Kappa-致性检验显示,MSCT平扫与手术结果的一致性较好,Kappa值为0.744;MSCT三维重建与手术结果的一致性很好,Kappa值为0.968,显著优于MSCT平扫.结论 MSCT三维重建诊断颅骨骨折具有较高的临床价值,不仅能够提高临床诊断准确度,还可辅助临床评估颅骨骨折类型,利于为临床制定手术方案提供指导,值得在临床推广应用.

目的 对吡法齐明(pyrifazimine,TBI-166)通过醌氧化还原酶(quinone oxidoreductase,QOR)介导累积活性氧(reactive oxygen species,ROS)发挥抗结核作用的机制进行探索.方法 表达、纯化MtbQOR蛋白,设置空白对照组及加TBI-166(0.03、0.3、3 μg/ml)组,酶标仪监测波长340 nm处吸光度(A340)下NADPH的下降程度(△A);应用辅酶Ⅱ NADP(H)含量检测试剂盒检测不同浓度TBI-166作用H37Rv菌体后NADPH/NADP+的比值;应用细菌活性氧检测试剂盒检测结核分枝杆菌H37Rv标准株和临床分离株菌体内ROS荧光值.结果 空白对照组 △A(0.316±0.032)较0.03、0.3、3 μg/ml TBI-166组(0.506±0.107、0.531±0.054、0.801±0.079)明显降低,差异有统计学意义(t=-3.799,P＜0.05;t=-7.634,P＜0.01;t=-12.683,P＜0.01).在48 h 内,加TBI-166组 NADPH/NADP+比值(0.847±0.229)低于空白对照组比值(1.728±0.384).H37Rv 菌株中,TBI-166刺激组ROS荧光值(23 072±2584)明显高于空白对照组(8282±448),差异有统计学意义(F=33.334,P＜0.01).在菌株号为12897菌株中,TBI-166刺激组ROS荧光值(18 369±3118)明显高于空白对照组(12 268±2735),差异有统计学意义(F=5.026,P＜0.05);在菌株号为15171菌株中,3μg/ml TBI-166刺激组ROS荧光值(17 572±249)明显高于空白对照组(11 109±343),差异有统计学意义(F=122.601,P＜0.01);在菌株号为11492及11195菌株中,TBI-166刺激组与空白对照组ROS荧光值差异无统计学意义(F=161.440,P＞0.05;F=44.788,P＞0.05).结论 TBI-166可以通过增加MtbQOR介导的氧化还原反应,降低NADPH/NADP+的比值,刺激菌体累积ROS发挥抗结核作用.

目的 评估创伤性脑损伤(TBI)患者发生急性肾损伤(AKI)的危险因素,以及高血糖尤其是应激性高血糖(SIH)对TBI预后的影响.方法 回顾性分析2018年7月—2021年7月本院重症监护室收治的166例中度和重度TBI患者,根据患者出院时有无发生AKI分为AKI组(n=42)和无AKI组(n=124),使用多因素分析寻找TBI患者发生AKI的危险因素,并进行相关性及ROC曲线分析.对比分析SIH和糖尿病性高血糖(DH)导致血糖升高对TBI患者预后的影响.结果 较高的降钙素原(PCT)(OR=2.538,95％CI:1.035-2.524,P＜0.001)、血糖(OR=2.208,95％CI:1.510-2.906,P＜0.001)、糖化血红蛋白(HbA1c)(OR=1.859,95％CI:1.026-2.692,P＜0.001)、血清胱抑素 C(sCys-C)(OR=2.284,95％CI:1.184-3.384,P＜0.001)是 TBI 后发生 AKI 的独立危险因素.血糖和 HbA1c(r=0.348,P＜0.05),sCys-C和PCT、血糖、HbA1c(r值分别为0.166、0.426、0.370,P＜0.05)均有一定的正相关,但相关性均较弱.ROC分析结果显示PCT、血糖、HbA1c、sCys-C均具有一定的预测价值,AUC分别为0.622、0.653、0.719、0.898.预后结果显示,SIH组的RRT比例、住院病死率、住院时间、AKI发生率均显著高于DH组和正常组(P＜0.05),此外SIH组的住院病死率、住院时间、AKI发生率均显著高于DH组(P＜0.05).结论 PCT、血糖、HbA1c、sCys-C是TBI后发生AKI的独立危险因素,伴随SIH的TBI患者预后较差.

目的:评价吡法齐明(pyrifazimine,TBI-166)与贝达喹啉(bedaquiline,Bdq)、莫西沙星(moxifloxacin,Mfx)、德拉马尼(delamanid,Dlm)、SQ109及PBTZ169的两药组合对结核分枝杆菌(MTB)临床分离株的相互作用,并初步探讨TBI-166与Bdq的协同作用机制,为TBI-166联合用药提供依据.方法:选取MTB标准株H37Rv(ATCC 27294)、2株药物敏感型MTB临床分离株(菌株编号:30031和30091),以及1株前广泛耐药结核分枝杆菌临床分离株(菌株编号:13385),应用棋盘法测定TBI-166与Bdq、Mfx、Dlm、SQ109、PBTZ169两药组合对临床分离菌株的相互作用;应用时间杀菌曲线法评估具有协同作用的两药组合的抗菌活性;采用细菌活性氧(ROS)检测试剂盒及三磷酸腺苷(ATP)检测试剂盒分别测定不同浓度的TBI-166和Bdq处理H37Rv标准株24 h后菌体内的ROS及ATP水平的变化.结果:与Bdq联用后,TBI-166对MTB临床分离株30031、30091及13385的最低抑菌浓度(minimum inhibitory concentration,MIC)分别为 0.08、0.05、0.08 μg/ml,均降至 TBI-166 单药 MIC 值的 1/2.TBI-166 与 Bdq 的两药组合对菌株 30031、30091 及 13385 的分级抑菌浓度指数(fractional inhibitory concentration index,FICI)值分别为1.00、0.75、1.00.时间杀菌曲线法结果显示,TBI-166与Bdq的两药组合与菌株30031、30091及13385作用14 d后与TBI-166单药应用时相比活菌量分别减少1.59 logi0 CFU/ml、1.27 log10 CFU/ml、1.70 log10 CFU/ml.0.4 μg/ml TBI-166 与 0.3 μg/ml Bdq 联用作用于 H37Rv 标准株 24 h 后菌体内 ATP 含量(相对光单位值为115 160.67±19 129.79)与0.3 μg/ml Bdq(相对光单位值为208 599.20±24 078.74)相比,明显下降,差异有统计学意义(F=75.109,P=0.013);而ROS含量(荧光值为21 014.33±1189.19)与0.3 μg/ml Bdq(荧光值为13 715.00+907.93)相比明显升高,差异有统计学意义(F=115.403,P＜0.001).结论:TBI-166与Bdq联用具有协同杀菌活性,并且其协同杀菌机制可能与ROS进一步累积及ATP合成受阻有关.