目的:探讨NTRK3重排甲状腺乳头状癌（PTC）的临床病理学特征、诊断和鉴别诊断。方法:收集2015年1月至2020年1月福建省立医院南院诊断的BRAF V600E阴性的PTC病例174例。对这些病例行免疫组织化学染色和荧光原位杂交（FISH）检测，筛选出NTRK3重排PTC的病例。总结确诊病例的临床资料、病理学特征、免疫组织化学特点及分子病理学改变。同时复习相关文献，并对癌症基因组图谱（TCGA）相关PTC病例进行分析和总结。结果:共确诊3例NTRK3重排PTC，患者均为女性（年龄26、49和34岁）。镜下观察：2例呈多结节状浸润性生长，除1例主要为滤泡结构，其余2例均具有滤泡、乳头及实性混合结构。3例可见典型的PTC细胞核特征，并具有一定的核异质性，胞质透亮或嗜酸性，其中2例可见肾小球样小体形成。肿瘤背景均呈淋巴细胞性甲状腺炎改变，间质见沙砾体形成。并见淋巴结转移、脉管癌栓和被膜外侵犯等侵袭性特征，但均未见明确凝固性肿瘤坏死和核分裂象。免疫组织化学表达甲状腺转录因子1（TTF1）和pan-TRK，不表达S-100蛋白和Mammaglobin，FISH均检测到NTRK3重排。复习并分析相关文献及TCGA数据集病例显示了相似的结果。结论:NTRK3重排PTC是一种罕见的PTC类型，因临床病理学特征不明显很容易漏诊、误诊，需要借助免疫组织化学染色pan-TRK，FISH甚至二代测序等技术明确诊断。对BRAF V600E阴性病例进行pan-TRK免疫组织化学染色具有很好地快速筛查作用。随着pan-TRK抑制剂出现，他们的识别可以帮助改善诊断和预后，并确定适当的治疗方法。

神经营养性受体酪氨酸激酶（NTRK）是负责编码原肌球蛋白相关激酶（Trk）的基因，有NTRK1、NTRK2、NTRK3三位家族成员，分别位于染色体1q22、9q21、15q25，编码家族蛋白TrkA、TrkB和TrkC。近年研究发现，Trk激酶与多种肿瘤的发生发展和恶化有关，对于具有NTRK融合基因表达的患者，Trk是肿瘤治疗的重要靶点，将靶向治疗纳入治疗方案将会提高肿瘤患者的生存率和生活质量。

目的:探讨色甘酸二钠(SCG)对缺血性卒中(CIS)大鼠神经功能和认知功能的影响,阐明其作用机制.方法:选取80只雄性SD大鼠,随机选取18只作为假手术组,剩余大鼠采用线栓法构建大鼠脑缺血/再灌注(I/R)损伤模型.将造模成功的 45只大鼠随机分为I/R组、I/R+低剂量SCG组和I/R+高剂量SCG组,每组15只.造模后24 h,I/R+低剂量SCG组和I/R+高剂量SCG组大鼠分别腹腔注射20 和60 mg·kg-1 SCG,连续2周.采用改良的神经功能缺损程度评分(mNSS)法评估各组大鼠神经功能评分,2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色检测各组大鼠脑梗死面积,Y型迷宫实验检测各组大鼠记忆能力,电生理检测各组大鼠正确反应率、正确反应时间和兴奋性突触后电位(fEPSP)斜率,高尔基染色检测各组大鼠脑组织中海马齿状回区树突棘密度,免疫荧光法检测各组大鼠脑组织中海马齿状回区 5-溴脱氧尿嘧啶核苷(BrdU)阳性细胞数和双肾上腺皮质激素(DCX)蛋白表达水平,Western blotting法检测各组大鼠脑组织中脑源性神经营养因子(BDNF)、抗酪氨酸激酶受体B(TrkB)、神经生长因子3(NT-3)和抗酪氨酸激酶受体C(TrkC)蛋白表达水平.结果:与假手术组比较,I/R组大鼠神经功能评分升高(P<0.05),脑梗死区域面积增大(P<0.05),正确反应率降低(P<0.05),正确反应时间增加(P<0.05),fEPSP斜率和树突棘密度降低(P<0.05),脑组织齿状回区BrdU阳性细胞数和DCX蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05),海马组织中NT-3蛋白表达水平升高(P<0.05),而BNDF、TrkB和TrkC蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05).与I/R组比较,I/R+高剂量SCG组大鼠神经功能评分降低(P<0.05),脑梗死面积减少(P<0.05),正确反应率升高(P<0.05),正确反应时间减少(P<0.05),fEPSP斜率和树突棘密度升高(P<0.05),脑组织中海马齿状回区BrdU阳性细胞数和DCX蛋白表达水平明显升高(P<0.05),大鼠海马组织中BDNF、TrkB、NT-3 和 TrkC 蛋白表达水平升高(P<0.05).结论:SCG对I/R损伤模型大鼠神经功能与认知功能具有保护作用,其作用机制可能与SCG提高BDNF/TrkB和NT-3/TrkC信号通路蛋白表达及促进神经元增殖有关.

目的 探讨神经营养因子3(neurotrophic factor-3,NT-3)及其受体酪氨酸激酶受体C (tyrosine kinase receptors,TrkC)mRNA及蛋白在脑卒中后抑郁(post stroke depression,PSD)模型大鼠额前皮质的表达变化.方法 将实验大鼠进行行为学评分(Open-field法),评分相近的大鼠被分为4组:正常组、抑郁组、卒中组及PSD组,每组13只.抑郁组:采用孤养法结合慢性不可预见的中等应激刺激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)建立;卒中组:利用线栓法建立局灶性脑缺血大鼠模型;PSD组:动物建成脑缺血模型后孤养再加以CUMS方法建立PSD模型,并与正常对照组、卒中组及抑郁组作比较.于造模后第29天应用免疫组化及RT-PCR检测各组大鼠额前皮质NT-3及其高亲和力受体TrkC的免疫阳性细胞及mRNA的表达情况.结果 免疫组化实验结果发现,PSD组额前皮质NT-3免疫阳性细胞数[(10.11±2.89)个/视野]较正常对照组明显减少[(19.00±12.41)个/视野] (P<0.05),其余各组相比差异无统计学意义(P>0.05);PSD组大鼠额前皮质TrkC免疫阳性细胞数[(19.56±5.66)个/视野]较正常对照组[(25.11±3.95)个/视野]及脑卒中组[(29.67±7.38)个/视野]明显减少(P<0.05);抑郁组免疫阳性细胞数[(19.00±5.61)个/视野]也较正常对照组[(25.11±3.95)个/视野]及脑卒中组(29.67±7.38个/视野)明显减少(P<0.05);其余各组相比差异无统计学意义(P>0.05).RT-PCR检查结果显示各组大鼠额前皮质组织中均有 GAPDH、NT3和 TrkCmRNA的表达, PSD组大鼠额前皮质NT-3的表达明显低于正常对照组(P<0.05);其余各组比较差异无统计学意义(P>0.05);各组TrkCmRNA表达差异无统计学意义(P>0.05).结论 PSD大鼠额前皮质NT-3及其受体TrkC的表达减少可能与PSD发病有关.

背景:活性生物材料的良好组织相容性和生物活性与神经干细胞的多向分化潜能均有极大的应用前景和应用价值.目的:观察神经营养因子3-壳聚糖活性生物材料支架在体外对神经干细胞的诱导分化作用及神经干细胞神经营养因子3信号通路关键蛋白的表达.方法:提取并纯化新生24 h Wistar大鼠脊髓神经干细胞,分4组进行诱导分化:对照组(单纯培养基组)、可溶性神经营养因子3组、单纯壳聚糖组、神经营养因子3-壳聚糖组.诱导6 h,提取蛋白质行Western Blot检测神经营养因子3信号通路关键蛋白TrkC、Akt/p-Akt、Erk/p-Erk的表达;诱导7 d,行MAP2、MBP、GFAP 免疫细胞化学染色观察神经元的多向分化及各类细胞的分化比例;诱导14 d,行 MAP2、Synapsin-1、PSD95免疫细胞化学染色观察神经营养因子3-壳聚糖活性生物材料是否诱导神经干细胞分化形成神经网络.结果与结论:①神经营养因子3-壳聚糖组诱导神经干细胞高比例分化为神经元,比例为73.8%,明显高于其他3组,同时分化形成的胶质细胞低于其他3组;②神经营养因子3-壳聚糖组中关键蛋白TrkC、p-Akt、p-Erk的表达高于其他3组;③神经营养因子3-壳聚糖可以诱导神经干细胞在体外分化形成神经网络.

目的 探讨神经营养素-3(NT-3)能否促进脂多糖(LPS)诱导的M1型巨噬细胞向M2型巨噬细胞极化.方法 体外培养小鼠RAW264.7巨噬细胞株,分为LPS组和LPS+NT-3组.用脂多糖(100 ng/ml)刺激12h后,撤掉LPS培养基,冲洗,分别加入基础培养基和含有NT-3(40 ng/ml)的基础培养基,培养24 h后,全部置换成基础培养基培养24 h,收集上清与细胞.固定后的细胞分别做CD68/CCR7(M1型细胞标记物)、CD68/CD206(M2型细胞标记物)、CD68/TrkC免疫荧光双标染色.用酶联吸附试验(ELISA)检测上清中TNF-α和IL-10水平.结果 免疫荧光细胞化学染色显示,LPS刺激后的巨噬细胞表达NT-3的受体TrkC.LPS组可观察到较多的M1型细胞和较少的M2型细胞.LPS+NT-3组可观察到M1型细胞数减少,而M2型细胞数增多.与LPS组比较,LPS+NT-3组的M1型巨噬细胞比例降低,同时M2型巨噬细胞比例增加(P＜0.01).ELISA结果显示,与LPS组比较,LPS+NT-3组上清中TNF-α的水平明显下降(P＜0.01),IL-10的水平相对升高但是差异不明显(P＞0.05).结论 NT-3促进M1型巨噬细胞向M2型极化可能通过与其受体TrkC结合发挥作用,进而减少促炎因子TNF-α的分泌.

目的:研究管灸对面神经损伤家兔面神经核中受体TrkC表达的影响.方法:采用机械压榨法制作家兔面神经损伤模型,将家兔随机分为假手术组、模型组、管灸组、热疗组,通过免疫组化学、组织原位杂交和RT-PCR三种方法分别检测各组面神经核中受体TrkC蛋白和基因的表达变化.结果:在三种方法检测下发现家兔面神经损伤后面神经核TrkC的表达均明显下降(P＜0.01),管灸组面神经核TrkC的表达均显著高于模型组(P＜0.01)结论:管灸疗法可显著提高面神经核中受体TrkC的表达,这可能对促进面神经损伤后的再生和修复有重要作用.

目的 探讨空肠弯曲菌脂多糖(Cj-LPS)对大鼠脊髓髓鞘损伤的影响.方法 Wistar大鼠分为对照组(NC组)、脂多糖组(Cj-LPS组)和抗LPS组(Anti-LPS组).NC组使用试剂为生理盐水混合完全弗氏佐剂(CFA);Cj-LPS组试剂则由Cj-LPS、CFA和生理盐水组成;抗LPS组试剂为特异性抗Cj-LPS IgG混合CFA.注射后第4周和第6周分别处死各组大鼠.光镜观察脊髓组织形态变化,RT-PCR检测神经营养因子-3(NT-3)及其受体TrkC和神经生长抑制因子NogoA及其受体NgR mRNA的表达.结果 Cj-LPS组大鼠出现脊髓髓鞘损伤,NT-3/TrkC mRNA的表达下降,NogoA/NgR mRNA的表达增加;与Cj-LPS组比较,抗LPS组脊髓髓鞘损伤减轻.结论 Cj-LPS可诱导大鼠脊髓髓鞘损伤,而抗LPS抗体可以改善由Cj-LPS诱导的大鼠脊髓髓鞘损伤.

目的:探讨卵巢癌中神经营养素(NTs)家族及其受体表达量与细胞增殖、侵袭相关性.方法:2015年12月～2017年10月间在广元市第一人民医院接受手术治疗的卵巢癌患者90例作为卵巢癌组,卵巢巧克力囊肿患者67例作为良性病变组.对比两组病灶组织中NTs家族及其受体、增殖基因、侵袭基因表达量的差异,进一步采用Pearson检验评估卵巢癌组织中NTs家族及其受体表达量与癌细胞恶性程度的相关关系.结果:卵巢癌组中NT-3 mRNA的表达量低于良性病变组,NT-5、TrkA、TrkB、TrkC mRNA的表达量高于良性病变组;增殖基因FUNDC1、GRP78、PTTG、SMG-1 mRNA的表达量高于良性病变组,shSASH1、ESRP1 mRNA的表达量低于良性病变组;侵袭基因Clusterin、EFEMP1、Twist、IFITM1 mRNA的表达量高于良性病变组,DUSP10 mRNA的表达量低于良性病变组.Pearson检验发现,卵巢癌中NT-5、TrkA、TrkB、TrkC mRNA表达量与癌细胞增殖、侵袭活性直接相关.结论:卵巢癌中NTs家族及其受体表达异常,具体表达量与癌细胞的增殖及侵袭活性均直接相关.

[目的]通过检测膀胱癌细胞系中酪氨酸激酶受体C( tyrosine kinase receptor C,TrkC)中的表达水平及小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)干涉膀胱癌细胞中TrkC的表达,分析TrkC在膀胱癌中的作用.[方法]采用RT-PCR和Western blotting的方法检测人膀胱癌细胞株5 637、T24、SCaBER中TrkC的表达,根据TrkC基因序列设计并合成siRNA,构建质粒.用脂质体将pSilencer/TrkC和对照空载体pSilencer转染人膀胱癌细胞株SCaBER,通过Western blotting检测转染细胞的TrkC表达情况,绘制细胞生长曲线,克隆形成实验检测TrkC对SCaBER细胞增殖的影响的影响.[结果]RT-PCR和Western blotting结果均表明人膀胱癌细胞株5 637、T24、SCaBER中TrkC的表达水平明显高于人正常膀胱移行上皮细胞SV-HUC-1;成功利用SiRNA下调 SCaBER细胞中TrkC的表达后,细胞生长曲线及克隆形成实验结果显示SCaBER细胞出现生长抑制.[结论]TrkC在膀胱癌细胞中的表达高于正常膀胱上皮细胞,下调TrkC表达可以抑制膀胱癌细胞SCaBER增殖,TrkC可能成为膀胱癌基因治疗的新靶点.