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西方蜜蜂AKHR基因的生物信息学及表达模式分析
编辑人员丨2天前
本研究对西方蜜蜂Apis mellifera脂动激素受体(Adipokinetic hormone receptor,AKHR)基因AmAKHR CDS区进行RT-PCR扩增和生物信息学分析,并测定了AmAKHR在工蜂不同组织和不同发育阶段的表达模式,旨在为进一步的功能研究提供参考和基础.通过PCR扩增AmAKHR的CDS,使用相关软件预测AmAKHR蛋白的理化性质、分子特征及蛋白互作网络.采用RT-qPCR技术检测AmAKHR在工蜂不同组织和不同发育阶段的相对表达量.结果表明,AmAKHR基因CDS长度为1 050 bp,编码349个氨基酸;AmAKHR的相对分子量约为40.63 kDa,分子式为C1873H2939N471O484S26,含39个磷酸化位点,7个α-跨膜螺旋结构及8个保守基序,不含信号肽,主要分布于质膜;AmAKHR与小蜜蜂Apis florea的AKHR在进化树上聚为一支;AmAKHR的二级结构包含127个无规则卷曲,124 个α-螺旋,87 条延伸链和11 个β-转角;AmAKHR与卵黄原蛋白和神经肽Corazonin等10个蛋白构成1个互作网络;AmAKHR在西方蜜蜂工蜂的毒腺、中肠、咽下腺、脂肪体、脑和触角等6个组织中差异表达,在脂肪体中的表达量最高,而在中肠中的表达量最低;AmAKHR在西方蜜蜂工蜂 1 日龄幼虫、3 日龄幼虫、5 日龄幼虫、2日龄预蛹、1日龄蛹中均有表达,且表达量随着日龄的增长而持续上调.研究结果揭示AmAKHR为疏水性蛋白和膜蛋白,并与卵黄原蛋白和神经肽等10个蛋白潜在互作,AmAKHR可能在西方蜜蜂工蜂的能量代谢、脂类分解和变态发育中发挥作用.
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编辑人员丨2天前
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治疗性放射性核素的应用及展望
编辑人员丨2天前
放射性核素靶向治疗是一种有效的肿瘤治疗方法,它通过载体或介入技术将药物精准地传递至病灶,并发射出特定的射线能量,以最大限度地减少对健康细胞的破坏,从而实现治疗目标.治疗性放射性核素的类型、放射能量、物理半衰期、制备方法、毒性等因素决定了其在临床上的应用范围.该文综述治疗性放射性核素的特点和临床应用现状,以期为靶向治疗用放射性核素临床应用提供参考.
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编辑人员丨2天前
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体外冲击波对糖尿病神经痛大鼠脊髓磷酸化蛋白质组学的影响
编辑人员丨2天前
目的:评价体外冲击波对糖尿病神经痛大鼠脊髓磷酸化蛋白质组学的影响。方法:SPF级健康雄性SD大鼠36只,2月龄,体质量200~250 g。采用随机数字表法分为3组( n=12):对照组(C组)、糖尿病神经痛组(D组)和体外冲击波+糖尿病神经痛组(E组)。C组大鼠持续普通饲料喂养,D组和E组大鼠高糖高脂喂养8周后,腹腔注射链脲佐菌素35 mg/kg,注射后3、7和14 d时尾静脉随机血糖均>16.7 mmol/L,大鼠机械缩足反应阈(MWT)和热缩足潜伏期(TWL)≤85%基线值即视作大鼠糖尿病神经痛模型制备成功。E组于造模后进行体外冲击波,冲击量1 000冲击/次,频率10 Hz,能量1.0 bar,1次/周,共4次。于造模前(T 0)、造模后1、2、3和4周(T 1-4)时测定MWT和TWL。最后一次冲击后麻醉处死大鼠取腰段脊髓组织行蛋白质组学分析,免疫组化法检测胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、IL-1β和TNF-α的表达。 结果:与C组比较,D组和E组T 1-4时MWT和TWL降低( P<0.05);与D组比较,E组T 1-4时MWT和TWL升高( P<0.05)。磷酸化蛋白质组学筛选结果,D组与C组共筛选出差异磷酸化蛋白284个,E组与C组共筛选出差异磷酸化蛋白282个,E组与D组共筛选出差异磷酸化蛋白303个,磷酸化mGluR5表达差异有统计学意义( P<0.05)。免疫组化结果显示,与C组比较,D组脊髓GFAP、IL-1β和TNF-α表达上调( P<0.05);与D组比较,E组脊髓GFAP、IL-1β和TNF-α表达下调( P<0.05)。 结论:体外冲击波减轻大鼠糖尿病神经痛的机制与抑制星形胶质细胞激活及mGluR5过度磷酸化有关。
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编辑人员丨2天前
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糖尿病高危足不同中医证型的血清代谢物轮廓分析
编辑人员丨2天前
目的:利用代谢组学技术对比不同证型糖尿病高危足受试者的血清代谢谱,并探讨其代谢规律。方法:将符合入选标准的2018年4-12月上海中医药大学附属医院上海市中西医结合医院糖尿病高危足131例受试者经辨证分为寒凝瘀阻证(44例)、热毒伤阴证(54例)、气血两虚证(33例),另选取体检中心32位健康人血样作为健康对照组,采用气相色谱-质谱(gas chromatography-mass spectrometry, GC-MS)检测血清尿素、L-亮氨酸、天冬氨酸、 9H-嘌呤、D-葡萄糖、D-吡喃葡萄糖、β-1-半乳糖吡喃糖苷、血清丁酸、苯、咪唑并[1,2-a]吡啶、β-D-葡萄糖醛糖含量,采用多维数据处理方法对血清代谢物轮廓进行比较。 结果:与健康对照组比较,糖尿病高危足组血清尿素[(2.41±1.57)×10 5比(3.32±2.10)×10 5]、L-亮氨酸[(4.94±3.15)×10 5比(6.39±3.57)×10 5]、天冬氨酸[(3.94±4.48)×10 5比(9.62±6.93)×10 5]、 9H-嘌呤[(1.74±1.95)×10 5比(3.34±2.23)×10 5]含量降低( P<0.05或 P<0.01),D-葡萄糖[(3.72±1.71)×10 5比(2.21±1.32)×10 5]、D-吡喃葡萄糖[(3.32±2.10)×10 5比(1.35±1.43)×10 5]含量升高( P<0.01),涉及能量代谢、氨基酸代谢和糖代谢。糖尿病高危足寒凝瘀阻证受试者L-络氨酸含量高于健康对照组,热毒伤阴证受试者尿素、嘌呤、亮氨酸、天冬氨酸含量低于健康对照组,气血两虚证受试者嘌呤含量低于健康对照组( P<0.01)。寒凝瘀阻证受试者血清丁酸、β-1-半乳糖吡喃糖苷水平高于热毒伤阴证,热毒伤阴证受试者血清尿素水平高于寒凝瘀阻证、气血两虚证( P<0.01)。 结论:糖尿病高危足不同证型受试者的血清代谢物存在一定差异,可从体内代谢物角度反映不同证型糖尿病高危足的代谢规律。
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编辑人员丨2天前
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新型冠状病毒肺炎合并动脉硬化患者的肠道菌群分析
编辑人员丨2天前
目的:分析新型冠状病毒肺炎合并动脉硬化患者的肠道菌群组成及功能特征,为临床合理使用肠道微生态调节剂提供理论依据。方法:招募2020年4月5日至4月19日之间收住在我院的新型冠状病毒肺炎患者为研究对象,按动脉硬化检测结果分为硬化组和对照组。入院7 d内采集粪便样本,提取肠道菌群DNA并建库,采用鸟枪法进行宏基因测序,基于测序结果进行生物信息学分析。结果:本研究共纳入16例新型冠状病毒肺炎患者,硬化组7例,对照组9例。硬化组baPWV值及血压值高于对照组( P<0.05)。肠道菌群物种分析结果:门水平beta多样性分析显示组间肠菌群落构成差异明显( P<0.05)。与对照组相比,硬化组患者粪便微生物中 Holdemanella、 Mitsuokella、 Deinococcus、 Lachnospira、 Turicibacter、 Butyrivibrio、 Sporomusa、 Halanaerobium相对丰度显著降低,这些菌群与产生SCFAs、调节能量代谢、抗辐射、抗氧化应激和抗炎作用相关。KEGG通路富集分析结果:对照组菌群功能主要富集在脂多糖生物合成、短链脂肪酸代谢、其他氨基酸代谢及膜运输等通路上,硬化组主要富集在氨基酸代谢和DNA损伤修复通路上。 结论:新型冠状病毒感染后,患者使用增加短链脂肪酸的微生物制剂可能有助于恢复肠道菌群稳态。
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编辑人员丨2天前
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大鼠非动脉炎性前部缺血性视神经病变模型视神经蛋白质组学分析
编辑人员丨2天前
目的:定量分析SD大鼠非动脉炎性前部缺血性视神经病变(NAION)模型中视神经组织蛋白表达变化,并对差异蛋白进行生物信息学分析。方法:选取10只8周龄体质量200~250 g的SPF级雄性SD大鼠,采用孟加拉玫瑰红联合激光光动力方法建立NAION模型,最终选取4只造模成功的大鼠作为NAION模型组,同时取4只体质量和周龄相匹配的健康、无眼疾SD大鼠作为正常对照组。于造模后7 d,分离各组大鼠球后视神经,采用酶切法进行样本制备,采用同位素标记相对和绝对定量标记结合液相色谱-串联质谱技术对组织蛋白进行质谱鉴定和定量检测,选取组间表达倍数大于1.5倍且差异有统计学意义( P<0.05)的蛋白为差异蛋白,并对差异蛋白进行生物信息学分析。 结果:造模后3 d,NAION模型组大鼠视盘隆起,荧光素眼底血管造影图像显示视盘区有荧光素钠渗漏,模型建立成功。共鉴定出1 291个可定量蛋白,其中差异蛋白80个。与正常对照组比较,NAION模型组中表达上调的蛋白5个,表达下调的蛋白75个。V型胶原α1链(Col5A1)和cAMP依赖性蛋白激酶催化亚基β(Prkacb)、G蛋白相关支架蛋白(Dlg1)等蛋白表达升高;神经微丝蛋白(Nefm)、微管相关蛋白1b(Map1b)、Ras相关蛋白(Rala)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶N2(Pkn2)、血小板活化因子乙酰水解酶IB亚基(Pafah1b1)等蛋白表达降低。差异蛋白主要参与细胞骨架的调节、细胞对缺氧的反应、轴突生成及延伸、突触调节、神经元凋亡调控、轴浆运输等生物学进程。京都基因与基因组通路富集分析结果显示,差异蛋白主要参与代谢通路、突触囊泡循环、血小板活化等信号通路。结论:神经生长、能量代谢、轴浆运输及凋亡等信号通路相关蛋白的表达共同参与NAION中神经细胞的凋亡。
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编辑人员丨2天前
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低能量体外震波对糖尿病大鼠皮肤切割伤愈合强度的影响及其作用机制
编辑人员丨2天前
目的:观察低能量体外震波(ESW)对糖尿病大鼠皮肤切割伤愈合强度的影响并探讨其在切口愈合过程中的作用机制。方法:36只雄性SD大鼠(购自中国科学院实验动物中心)随机分为3组:空白对照组、糖尿组对照组和ESW治疗组,每组各12只。糖尿对照组和ESW治疗组使用链脲佐菌素法建立糖尿病大鼠模型。3周后于各组大鼠背部制作切割伤模型。ESW治疗组在伤后1、3、5 d行ESW治疗,糖尿病对照组和正常对照组仅涂抹耦合液,未行ESW治疗。伤后7 d和14 d收集标本,万能材料测试仪测量切口愈合强度,苏木精-伊红(HE)和Masson染色观察组织愈合,并检测切口组织内羟脯氨酸含量和转化生长因子-β1(TGF-β1)的表达。组间比较采用 t检验和One-way ANOVA检测。 结果:在伤后7 d和14 d,ESW组切口的愈合强度明显高于糖尿病对照组,差异有统计学意义[(5.12±0.80) N比(2.38±0.67) N, F=1.602, t=-9.078, P<0.05;(12.80±2.49) N比(6.11±0.89) N, F=17.410, t=-7.289, P<0.05];ESW组羟脯氨酸含量明显高于糖尿病对照组[(15.66±1.89) mg/g比(8.60±1.79) mg/g, F=0.018, t=-6.639, P<0.05;(22.46±3.21) mg/g比(11.69±2.26) mg/g, F=0.082, t=-5.928, P<0.05];TGF-β1阳性表达主要位于切口的成纤维细胞内,并且在伤后7 d和14 d ESW治疗组TGF-β1蛋白表达明显高于糖尿病对照组,差异有统计学意义(0.42±0.05比0.14±0.02, F=2.901, t=-15.294, P<0.05;0.36±0.02比0.20±0.01, F=2.447, t=-14.482, P<0.05)。 结论:低能量ESW可以增加糖尿病皮肤切割伤的愈合强度,这与ESW上调成纤维细胞TGF-β1的表达,进而增加切口内的胶原合成有关。
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编辑人员丨2天前
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单色绿光和蓝光对七氟烷麻醉致小鼠脑电爆发抑制的影响
编辑人员丨2天前
目的:评价单色绿光和蓝光对七氟烷麻醉致小鼠脑电爆发抑制的影响。方法:SPF级健康雄性C57BL/6J小鼠22只,体重22~26 g,10~12周龄,采用随机数字表法分为4组:绿光对照组(G-Con组, n=5)、单色绿光组(Green组, n=6)、蓝光对照组(B-Con组, n=5)和单色蓝光组(Blue组, n=6)。G-Con组和Green组于2.0%七氟烷麻醉30 min后,分别在无其他光源的圆柱形玻璃麻醉室内暴露于800 lux的复合白光和单色绿光(530 nm),继续2.0%七氟烷麻醉30 min;B-Con组和Blue组于2.5%七氟烷麻醉30 min后,分别暴露于800 lux的复合白光和单色蓝光(460 nm),继续2.5%七氟烷麻醉30 min。采用脑电图监测小鼠的脑电信号,计算单色光暴露前后各30 min时段脑电能量以及光暴露前10 min时段(T 0)、光暴露后0~10 min时段(T 1)、10~20 min时段(T 2)和20~30 min时段(T 3)爆发抑制率(BSR)。 结果:与G-Con组比较,Green组T 0时段BSR差异无统计学意义( P>0.05),T 1、T 2和T 3时段BSR增加( P<0.05);与B-Con组比较,Blue组T 0时段BSR差异无统计学意义( P>0.05),T 1、T 2和T 3时段BSR减少( P<0.05)。与光暴露前比较,Green组光暴露后δ波、θ波、α波、β波及γ波能量均降低,Blue组δ波和γ波能量升高( P<0.05)。 结论:单色绿光可促进七氟烷麻醉致小鼠脑电爆发抑制,加深麻醉深度;单色蓝光可减少脑电爆发抑制,减浅麻醉深度。
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编辑人员丨2天前
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双能量CT参数联合血清Ⅰ型前胶原N端前肽和Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列鉴别诊断脊柱肺癌骨转移瘤和骨髓瘤的价值
编辑人员丨2天前
目的:分析双能量CT参数联合血清Ⅰ型前胶原N端前肽(PⅠNP)和Ⅰ型胶原羧基端肽β特殊序列(β-CTX)鉴别诊断脊柱肺癌骨转移瘤和骨髓瘤的价值。方法:回顾性分析晋城市人民医院2019年10月至2021年3月54例脊柱肺癌骨转移瘤和50例骨髓瘤患者的临床资料。患者入院当天行双能量CT检查,记录40~80 keV(能量间隔为10 keV)能量水平下的CT值;治疗前采用化学免疫发光法检测血清PⅠNP和β-CTX水平。以病理学检查结果为"金标准",比较两组患者双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值及血清PⅠNP和β-CTX水平。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值、PⅠNP和β-CTX单独及联合对疾病的鉴别诊断价值。结果:脊柱肺癌骨转移瘤患者双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值和血清PⅠNP、β-CTx均明显高于骨髓瘤患者[79.86(61.20,116.32)HU比58.29(46.92,64.03)HU、64.48(50.27,90.08)HU比45.78(38.59,56.75)HU、57.35(43.31,78.04)HU比43.62(36.91,54.06)HU、52.05(42.98,75.79)HU比41.26(32.84,51.76)HU、45.52(38.55,63.59)HU比36.68(28.72,49.83)HU、66.35(31.15,81.97)μg/L比31.38(27.76,34.50)μg/L和0.61(0.48,0.67)μg/L比0.49(0.47,0.52)μg/L],差异有统计学意义( P<0.05或 P<0.01)。ROC曲线分析结果显示,双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值联合对脊柱肺癌骨转移瘤与骨髓瘤鉴别诊断的灵敏度高于单个能谱曲线CT值(83.33%比59.26%、61.11%、62.96%、64.81%和66.67%),曲线下面积(AUC)也高于单个能谱曲线CT值(0.882比0.798、0.811、0.817、0.801和0.773),差异有统计学意义( P<0.01或<0.05);血清PⅠNP联合β-CTX对脊柱肺癌骨转移瘤与骨髓瘤的鉴别诊断灵敏度高于单个血清指标(81.48%比57.41%和62.96%),AUC也高于单个血清指标(0.829比0.753和0.729),差异有统计学意义( P<0.01或<0.05);全部指标联合对脊柱肺癌骨转移瘤与骨髓瘤的鉴别诊断灵敏度高于单纯双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值联合和PⅠNP联合β-CTX(98.15%比83.33%和81.48%),AUC也高于单纯双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值联合和PⅠNP联合β-CTX(0.976比0.882和0.829),差异有统计学意义( P<0.01);各指标单独和联合的特异度比较差异无统计学意义( P>0.05)。 结论:脊柱肺癌骨转移瘤相较于骨髓瘤双能量CT 40~80 keV能谱曲线CT值、血清PⅠNP和β-CTX水平均明显升高,且上述指标联合对二者有理想的鉴别诊断价值。
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编辑人员丨2天前
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基于Meta和网络药理学分析参苓白术散治疗糖尿病肥胖的作用机制
编辑人员丨2024/8/17
目的:采用文献荟萃分析法(Meta)评估参苓白术散对糖尿病型肥胖的治疗作用,再结合网络药理学和动物实验方法分析参苓白术散治疗糖尿病肥胖的作用机制.方法:纳入国内外相关文献,以身体质量指数(BMI)、糖化血红蛋白(HbA1c)、餐后 2 h血糖(2 h PG)、空腹血糖(FBG)、胰岛素抵抗指数(Homa-IR)、腰臀比作为结局指标,评估参苓白术散对糖尿病型肥胖的治疗作用.从GEO数据库中下载糖尿病肥胖的相关基因,在中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、中医药综合数据库(TCMID)和中药分子机制生物信息学分析工具(BATMAN-TCM)中下载参苓白术散的作用靶点,对两者的交集靶点进行蛋白质-蛋白质相互作用分析,再根据拓扑分析筛选出核心靶点蛋白质;制备糖尿病肥胖小鼠的模型,分组后进行参苓白术散的灌胃治疗,2 周后测量各组小鼠体质量、血糖、Lee's指数,采用苏木精-伊红(HE)染色法分析各组小鼠的脂肪细胞体积变化,测量小鼠血清中的胆固醇、三酰甘油及核心靶点蛋白质的浓度.结果:共纳入 9 篇文献,数据完整,未发现发表偏倚,评估为low risk.患者服用参苓白术散后,BMI、HbA1c、2 h PG、Homa-IR和腰臀比均得到明显改善;参苓白术散-糖尿病肥胖的交集靶点共 59 个,核心靶点为载脂蛋白E(APO-E)、胰岛素生长因子-1(IGF-1)、纤溶酶原激活物抑制物-1(PAI-1),参苓白术散主要通过影响细胞对油酸的反应(GO:0071400)、转化生长因子 β1 生产的正调控(GO:0032914)和纤溶酶原激活的负调控(GO:0010757)等生物学功能,影响不饱和脂肪酸的生物合成(hsa01040)、脂肪酸代谢(hsa01212)等信号通路来治疗糖尿病肥胖;动物实验结果表明,经过参苓白术散灌胃治疗后的小鼠血糖变化不显著,体质量和Lee's指数呈现明显下降趋势,脂肪细胞直径明显缩小,胆固醇、三酰甘油浓度及APO-E、IGF-1、PAI-1 水平均呈现下调趋势.结论:结合Meta分析和动物实验的结果,参苓白术散对糖尿病肥胖具有明显的治疗作用,其作用机制可能与影响不饱和脂肪酸、脂肪酸的合成,减少糖和脂肪的转化,纠正机体能量代谢失衡,调控自噬促进脂肪组织的分解有关.
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编辑人员丨2024/8/17
