目的:探讨夏枯草提取物对乳腺癌细胞增殖和凋亡的影响及可能机制。方法:采用0.04、0.08、0.16、0.32 mg/ml浓度夏枯草提取物处理乳腺癌MCF-7细胞筛选后续实验浓度。根据处理方法将MCF-7细胞分成不同组别。细胞计数试剂盒8(CCK-8)检测细胞增殖抑制率；蛋白质印迹法检测裂解的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cleaved-Caspase-3)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、血管内皮生长因子(VEGF)、磷酸化磷脂酰肌醇3激酶(p-PI3K)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白表达；流式细胞仪检测细胞凋亡；实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测miR-195表达水平。两组间比较行 t检验，多组间比较采用单因素方差分析，组间两两比较采用SNK检验。 结果:0.04、0.08、0.16和0.32 mg/ml浓度夏枯草提取物处理后细胞MCF-7增殖率显著低于NC组，差异有统计学意义[(92.11±9.21)%、(78.69±7.87)%、(51.37±5.14)%、(46.05±4.61)%， F＝89.060， P<0.05]。夏枯草提取物处理的MCF-7细胞中cleaved-Caspase-3表达水平(1.05±0.11比0.42±0.04)、细胞凋亡率[(25.22±2.53)%比(8.12±0.80)%]和miR-195表达(3.67±0.37比1.00±0.12)均高于NC组，差异有统计学意义( t＝16.147、19.333、20.593， P<0.05)。miR-195组miR-195表达(3.46±0.35比1.00±0.11)、cleaved-Caspase-3表达(0.96±0.10比0.43±0.04)和凋亡率[(22.36±2.24)%比(8.02±0.80)%]高于miR-NC组，Cyclin D1表达(0.35±0.04比0.92±0.09)和细胞增殖率[(45.27±3.53)%比(89.12±7.10)%]低于miR-NC组( P<0.05)，差异有统计学意义( t＝20.116、17.362、14.763、11.991、18.086， P<0.05)。夏枯草提取物组VEGF(0.40±0.04比0.92±0.09)、p-PI3K(0.32±0.04比0.76±0.08)和p-Akt表达水平(0.34±0.03比0.70±0.06)低于NC组，差异有统计学意义( t＝31.208、42.144， P<0.05)。 结论:夏枯草提取物通过上调miR-195抑制VEGF/PI3K/Akt信号通路抑制乳腺癌细胞增殖，促进细胞凋亡。

目的:筛选非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂耐药相关微小RNA(miRNA，miR)并分析其生物学功能。方法:从高通量基因表达数据库(GEO)中搜索并下载与非小细胞肺癌顺铂耐药相关的miRNA芯片数据，并通过Targetscan和miRanda预测miRNA的靶基因，对靶基因行基因本体(GO)生物学进程分析，京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析，并构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI)；进一步对KEGG通路行网路分析，并结合与顺铂耐药存在显著相关性的miRNA，构建miR-KEGG网路。组间数据比较采用 t检验。 结果:共筛选到GSE84200、GSE43249和GSE56036 3个数据库，总计23个与顺铂耐药相关的miRNA。Targetscan和miRanda共同预测的靶基因共计914个。GO功能富集分析表明这些基因主要以蛋白结合，信号传导和正性调节基因转录等生物学过程相关。KEGG通路分析显示这些基因主要参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)等信号通路。PPI网路分析结合关键基因分析显示p53为关键基因。miR-KEGG网络分析显示miR-195-5p和miR-424-5p在顺铂耐药中发挥重要作用。结论:miR-195-5p和miR-424-5p可能在顺铂耐药中发挥重要作用，生物学分析预测有助于进一步认识miRNA在非小细胞肺癌顺铂耐药中的功能。

目的:观察氧诱导视网膜病变（OIR）小鼠视网膜组织中miRNA的表达，筛选与p21及视网膜新生血管（RNV）形成相关的miRNA。方法:实验研究。40只健康7日龄C57BL/6J小鼠随机分为正常组和OIR组，每组20只。OIR组构建氧诱导RNV模型，正常组不做任何处理。小鼠17日龄时，处死小鼠，视网膜荧光铺片观察小鼠RNV发生情况；光学显微镜下计数突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核。取视网膜组织行miRNA芯片分析，检测正常组与OIR组之间差异表达的miRNA。所得差异miRNA靶基因分别进行基于基因注释（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）的富集分析；通过Targetscan、MiRanda、MicroT-CDS数据库比对筛选可能与p21有关的miRNA及通路。组间两两比较采用独立样本 t检验。 结果:与正常组比较，OIR组小鼠视网膜无灌注区面积、RNV及突破视网膜内界膜的血管内皮细胞核数量增加，差异均有统计学意义（ t=18.800、9.025， P<0.05）。与正常组比较，OIR组有统计学差异表达的miRNA 54个，其中，上调、下调者分别为47、7个。从3个数据库与所得差异miRNA的比对结果中共筛选到与p21相关miRNA 13个，按差异倍数从高到低分别为miR-7218-5p、miR-322-5p、miR-224-5p、miR-335-5p、miR-329-3p、miR-362-3p、miR-532-5p、miR-20b-5p、miR-20a-5p、miR-195a-5p、miR-423-5p、miR-497a-5p、miR-129-5p。差异miRNA靶基因富集分析，得到1 112个GO条目及50条KEGG通路，其中50个GO条目和13条KEGG通路与p21相关。 结论:在OIR模型中共筛选出13个与P21相关的miRNA。

目的:分析MiR-195与DLL4蛋白在结直肠癌组织中的表达模式，探讨二者与结直肠癌患者临床病理指标及预后的关系。方法:采用实时荧光定量PCR检测miR-195在56例结直肠癌组织中microRNA相对表达量，用Western blot和免疫组化检测DLL4蛋白的表达和肿瘤微血管密度，分析二者表达模式与结直肠癌患者临床病理学指标及预后的关系。采用基因过表达miR-195处理结肠癌细胞系SW480，Western blot检测通路相关蛋白DLL4、Jagged1、Noth受体胞内段、CyclinD1、Hes1、Bcl-2及NF-kB的表达。结果:结直肠癌组织中DLL4蛋白表达水平高于正常结直肠组织，平均为正常结直肠组织中的(2.342±0.004)倍( t＝5.323， P＝0.018) ；而miR-195表达水平低于正常结直肠组织，平均为正常结直肠组织的(0.277±0.005)倍( t＝2.371， P＝0.008)。DLL4蛋白表达水平与miR-195表达呈负相关( r＝-0.881， P＝0.015)。二者表达与结直肠癌的分化程度、淋巴结转移、TNM分期密切相关。DLL4蛋白高表达患者的预后差于DLL4蛋白低表达的患者( P＝0.013)，miR-195低表达患者的预后差于miR-195高表达患者( P＝0.009)，差异均有统计学意义。miR-195可阻断Notch通路，其相关蛋白ICN 、Hes-1随作用时间延长而表达下降。 结论:miR-195与Notch拮抗性表达可能与结直肠癌发生发展密切相关，可作为结直肠癌判定预后的新的指标。

目的:探讨长链非编码RNA 565686(lncRNA-565686)对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集武汉大学人民医院2017年1月至2020年1月行前列腺癌根治术的33例前列腺癌组织和同期行经尿道前列腺电切术的45例良性前列腺增生组织标本，采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测lncRNA-565686在前列腺组织和前列腺癌细胞的相对表达水平。在前列腺癌细胞(PC-3)中转染lncRNA-565686短发卡RNA，分别将未转染短发卡RNA、转染空载体和转染短发卡RNA细胞分为未转染组、空载体转染组和转染组。分别采用细胞克隆增殖实验检测细胞增殖能力；采用细胞迁移和侵袭实验(Transwell实验)检测细胞迁移和侵袭能力；采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA-565686与微小RNA-195(miR-195)的靶向调控关系。组间比较采用 t检验。 结果:前列腺癌组织中lncRNA-565686的相对表达水平高于良性前列腺增生组织，差异有统计学意义(2.51±0.19比0.99±0.13， t＝39.826， P<0.05)；前列腺癌淋巴结细胞(LNCaP)、PC-3细胞中lncRNA-565686表达水平高于人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)细胞，差异有统计学意义(2.36±0.04和3.58±0.06比0.99±0.06， t＝40.257、68.757， P<0.05)；干扰lncRNA-565686表达后，转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于未转染组和空载体转染组。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA-565686与miR-195之间的直接调控关系。 结论:lncRNA-565686在前列腺癌中高表达，下调lncRNA-565686的表达可明显抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，其机制可能与直接负向调控miR-195的表达相关。

目的:观察微小RNA(microRNA，miR)-195调控结直肠癌中Notch通路配体Delta样配体4(Dll4)表达，探讨其作用靶点，明确miR-195通过Notch通路抗结直肠癌的分子机制。方法:收集北京大学人民医院胃肠外科2010年11月至2011年2月56例行结直肠癌根治术切除的标本，3、应用芯片技术筛选6例结直肠肿瘤组织和正常肠黏膜组织中micro-RNA的表达差异，用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-195在组织中相对表达量，应用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测56例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Notch通路中Dll4蛋白表达；采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-195与Dll4 3’端非编码区(3’UTR)区的相互作用及活性，采用基因过表达miR-195(40 pmol/L)处理结肠癌细胞系SW480，运用流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响，Western blot检测通路相关蛋白Dll4、锯齿状蛋白1(Jagged1)、Notch受体胞内段(NICD)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、转录因子发状分裂相关增强子1(HES1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、核因子-κB(NF-κB)的表达。组间比较采用方差分析(ANOVA)，独立样本 t检验比较蛋白表达量差异，统计学方法分别采用独立样本 t检验、配对样本 t检验及单因素方差分析。 结果:结直肠癌组织中miR-195表达水平明显低于正常肠黏膜，而Dll4蛋白表达水平高于正常肠黏膜，分别为正常肠黏膜的0.34倍(0.341±0.008)及1.92倍(1.922±0.003) ( t＝3.116、2.374， P<0.05)，差异均有统计学意义，体外转入miR-195后，Dll4荧光素酶活性低于对照组(0.442±0.010、1.010±0.002， t＝4.305， P<0.01)，差异有统计学意义，miR-195和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)都可阻断Notch1通路，抑制SW480细胞的增殖(3.1%比17.3%， t＝4.232， P<0.01)，差异有统计学意义，诱导其凋亡(13.7%比48.3%， t＝8.355， P<0.01)，两者具有协同作用( t＝7.474， P<0.01)，差异有统计学意义。同时Notch通路相关蛋白NICD、Hes-1随作用时间延长而表达下降。 结论:结直肠癌中miR-195及Dll4呈拮抗性表达，与其病理学特征密切相关，Dll4为miR-195调控的下游靶基因，miR-195通过负性调控Dll4/Notch信号通路抗结直肠癌。

目的:探讨miR-195调控FOXK1基因及PI3K/Akt通路对胃癌细胞增殖侵袭和迁移能力的影响及机制。方法:采用公共数据库样本对胃腺癌中miR-195的表达差异和预后意义进行分析。研究分为MGC803和AGS两种细胞系中过表达miR-195-5p实验组和cel-miR-67-3p mimic和cel-miR-239b-5p mimic两组阴性对照组。通过阿尔玛蓝、细胞划痕和Transwell实验检测细胞增殖、侵袭和迁移能力的改变。通过starbase v3.0对miR-195潜在的靶基因及结合位点进行预测。采用Western blot检测过表达miR-195-5p后靶基因FOXK1和PI3K/Akt通路磷酸化位点的表达水平，并采用双荧光素酶报告验证miR-195-5p和FOXK1的关系。统计分析采用IBM SPSS 22软件和R 4.0.3软件。结果:miR-195在胃腺癌肿瘤标本中的表达水平相比于癌旁正常组织的表达显著降低（ P<0.001），并与患者生存显著相关（HR: 1.853, P=0.011）。多种表型实验证明miR-195表达水平的上调可明显抑制胃腺癌细胞的增殖和侵袭能力（MGC803侵袭： P<0.001，MGC803迁移： P<0.001；AGS侵袭： P<0.001，AGS迁移： P<0.001）（划痕：MGC803迁移： P<0.010，AGS迁移： P<0.010）。进一步研究证实FOXK1基因可能受到miR-195的调控，是miR-195的潜在靶点之一。而miR-195在调控FOXK1的同时能明显降低PI3K/Akt信号通路的激活程度，过表达miR-195之后，PI3K/Akt通路中的磷酸化Akt（S473位点）表达明显下降。 结论:本研究说明miR-195调控FOXK1抑制PI3K/Akt通路，从而抑制胃癌细胞增殖侵袭能力，进一步说明miR-195在胃癌的诊断和治疗中潜在的重要作用，对胃癌发生发展的分子机制及新靶点的发现具有重要的临床意义。

目的:探究miR-195靶向成纤维细胞生长因子受体(FGFR)对膀胱上皮癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:将膀胱上皮癌细胞(BIU87细胞)随机分为模拟物组(M组)、空白对照组(B组)及抑制物组(I组)。通过克隆实验检测BIU87细胞的克隆情况；采用qRT-PCR法检测BIU87细胞中的miR-195表达量；采用Transwell检测BIU87细胞的侵袭能力；采用免疫细胞化学法检测细胞中FGFR1蛋白的阳性表达情况；采用细胞划痕法检测BIU87细胞的迁移能力；采用Western blot法检测细胞中FGFR1蛋白含量的差异性；通过双荧光素酶报告证实miR-195与FGFR的靶向关系。结果:BIU87细胞中的miR-195表达量均低于HTB-9及SW780细胞(均 P<0.05)。M组的miR-195表达量最高，均高于B组及I组(均 P<0.05)，I组的miR-195表达量低于B组( P<0.05)。M组的克隆数量、侵袭能力及迁移能力、FGFR1蛋白表达均低于B组及I组(均 P<0.05)，I组的FGFR1蛋白含量高于B组( P<0.05)；与B、I组比较，M组的FGFR1阳性数均减少(均 P<0.05)，且I组的FGFR1阳性数多于B组( P<0.05)；转染miR-195后，BIU87细胞中的FGFR1野生型基因活性降低( P<0.05)。 结论:miR-195能够对膀胱上皮癌细胞的生物学活性产生一定影响，其过表达对BIU87细胞克隆、迁移及侵袭等生物学行为均有一定抑制作用，其低表达对BIU87细胞克隆、迁移及侵袭等生物学行为均有一定促进作用，并可能是通过调控FGFR1的蛋白表达来实现。

目的:探讨食管癌患者血清微小RNA（miR）-195表达及临床意义。方法:回顾性分析2015年4月至2019年4月在北京怀柔医院105例食管癌患者的临床资料。采用实时定量荧光聚合酶链反应法检测血清miR-195相对表达量，并与同期90例健康体检者比较。绘制受试者工作特征（ROC）曲线，分析血清miR-195相对表达量诊断食管癌的效能；生存分析采用Kaplan-Meier法，比较采用log-rank检验；采用多因素Cox分析影响食管癌患者预后的独立危险因素。结果:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康体检者（4.39 ± 1.86比7.17 ± 2.37），差异有统计学意义（ t = 9.155， P<0.05）。以食管癌患者血清miR-195相对表达量平均值作为阈值，>4.39为高表达，50例；≤ 4.39为低表达，55例。血清miR-195相对表达量与肿瘤直径、TNM分期、浸润程度和淋巴结转移有关（ P<0.05），而与性别、年龄、病理类型和分化程度无关（ P>0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清miR-195相对表达量诊断食管癌的曲线下面积为0.819（95% CI 0.758~0.879， Z = 10.265， P<0.05），约登指数0.539，截断值取6.03时灵敏度为82.86%，特异度为71.11%。血清miR-195低表达患者中位生存时间明显短于高表达患者（25.7个月比36.6个月），5年总生存率明显低于高表达患者（18.2%比38.0%），差异有统计学意义（ P<0.05）。多因素Cox分析结果显示，miR-195和肿瘤直径是影响食管癌患者预后的独立危险因素（ HR = 0.377和0.418，95% CI 1.276~5.599和1.478~7.608， P<0.01）。 结论:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康人群，且miR-195表达越低，患者预后越差，miR-195可以作为食管癌患者早期诊断和预后评估的指标之一。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感性候选基因9(CASC9)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响，明确微小RNA-195-5p(miR-195-5p)与lncRNA CASC9的靶向关系。方法:收集2017年4月至2018年5月间湖北省襄阳市中西医结合医院40例行手术切除并经组织病理学确诊的胰腺癌组织及相应癌旁正常胰腺组织，选取4株胰腺癌细胞(AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1)和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7，采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA CASC9表达。将BxPC-3细胞分为si-CASC9组(转染靶向lncRNA CASC9的siRNA)、si-control组(转染与lncRNA CASC9不匹配的siRNA)和CASC9组(转染lncRNA CASC9过表达质粒)、CASC9/miR-195-5p组(共转染CASC9过表达质粒和miR-195-5p mimics)。采用MTT法检测各组细胞增殖活性，采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达，采用生物信息学和荧光素酶实验分析CASC9和miR-195-5p的靶向关系。结果:胰腺癌组织lncRNA CASC9表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(4.70±1.25比2.15±0.82， P＝0.04)，胰腺癌细胞株AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1细胞lncRNA CASC9表达量分别为1.43±0.12、1.86±0.13、2.03±0.14、1.73±0.15，均显著高于HPDE6-C7细胞的1.00±0.10( P值均<0.001)，其中以BxPC-3细胞的表达量最高。si-CASC9组细胞较si-control组细胞的增殖活性显著下降(细胞培养第3天0.57±0.05比0.72±0.04， P＝0.01；第4天0.75±0.07比0.95±0.07， P＝0.02)；Bax表达上调(1.39±0.13比1.07±0.11， P＝0.03)，Bcl-2表达显著下调(1.44±0.11比1.71±0.12、 P＝0.04)。CASC9/miR-195-5p组细胞增殖活性较CASC9组显著下降( P值<0.005)；Bax表达水平显著高于CASC9组(0.68±0.04比0.56±0.03， P＝0.01)，Bcl-2表达显著低于CASC9组(1.05±0.03比1.47±0.04， P<0.001)。 结论:lncRNA CASC9靶向结合miR-195-5p可逆转CASC9促进胰腺癌细胞增殖和抑制胰腺癌细胞凋亡的作用。