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精神分裂症患者外周血微小RNA-16、微小RNA-124、微小RNA-195表达与认知功能和社会功能的关系
编辑人员丨4天前
目的:探讨精神分裂症患者外周血微小RNA-16、微小RNA-124和微小RNA-195表达与认知功能和社会功能的相关性。方法:选择台州市第二人民医院2016年1月至2018年12月收治的精神分裂症患者112例为观察组;另选择台州市第二人民医院2016年1月至2018年12月健康体检者93例作为对照组。采用实时定量荧光聚合酶链式反应法检测外周血微小RNA-16、微小RNA-124和微小RNA-195表达;采用中文版蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评价患者认知功能;采用住院精神病人社会功能评定量表(SSPI)评价患者社会功能。结果:观察组外周血微小RNA-16(0.03±0.01)和微小RNA-195(0.08±0.03)表达低于对照组(0.12±0.02)和(0.27±0.06),而微小RNA-124(14.63±3.24)表达高于对照组(7.45±1.39),差异均有统计学意义( t=41.763、19.898、29.389,均 P<0.05)。观察组MoCA量表评分[(22.17±3.45)分]低于对照组[(28.39±1.28)分],差异有统计学意义( t=16.465, P<0.05)。观察组SSPI量表评分[(26.58±5.16)分]低于对照组[(45.37±3.27)分],差异有统计学意义( t=30.405, P<0.05)。微小RNA-16和微小RNA-195与MoCA量表评分和SSPI量表评分呈线性正相关(MoCA量表评分: r=0.641、0.724,SSPI量表评分: r=0.801、0.657,均 P<0.05),微小RNA-124与MoCA量表评分和SSPI量表评分呈线性负相关( r=-0.738、-0.769,均 P<0.05)。 结论:精神分裂症患者外周血微小RNA-16和微小RNA-195表达降低而微小RNA-124表达升高,其中微小RNA-16和微小RNA-195表达与认知功能和社会功能呈正相关,而微小RNA-124与认知功能和社会功能呈负相关。
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编辑人员丨4天前
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非小细胞肺癌顺铂耐药相关微小RNA的生物信息学分析
编辑人员丨4天前
目的:筛选非小细胞肺癌(NSCLC)顺铂耐药相关微小RNA(miRNA,miR)并分析其生物学功能。方法:从高通量基因表达数据库(GEO)中搜索并下载与非小细胞肺癌顺铂耐药相关的miRNA芯片数据,并通过Targetscan和miRanda预测miRNA的靶基因,对靶基因行基因本体(GO)生物学进程分析,京都基因与基因组百科全书(KEGG)信号通路分析,并构建蛋白与蛋白相互作用网络图(PPI);进一步对KEGG通路行网路分析,并结合与顺铂耐药存在显著相关性的miRNA,构建miR-KEGG网路。组间数据比较采用 t检验。 结果:共筛选到GSE84200、GSE43249和GSE56036 3个数据库,总计23个与顺铂耐药相关的miRNA。Targetscan和miRanda共同预测的靶基因共计914个。GO功能富集分析表明这些基因主要以蛋白结合,信号传导和正性调节基因转录等生物学过程相关。KEGG通路分析显示这些基因主要参与丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)和磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)等信号通路。PPI网路分析结合关键基因分析显示p53为关键基因。miR-KEGG网络分析显示miR-195-5p和miR-424-5p在顺铂耐药中发挥重要作用。结论:miR-195-5p和miR-424-5p可能在顺铂耐药中发挥重要作用,生物学分析预测有助于进一步认识miRNA在非小细胞肺癌顺铂耐药中的功能。
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编辑人员丨4天前
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微小RNA-195靶向调控Delta样配体4抗结直肠癌分子机制研究
编辑人员丨4天前
目的:观察微小RNA(microRNA,miR)-195调控结直肠癌中Notch通路配体Delta样配体4(Dll4)表达,探讨其作用靶点,明确miR-195通过Notch通路抗结直肠癌的分子机制。方法:收集北京大学人民医院胃肠外科2010年11月至2011年2月56例行结直肠癌根治术切除的标本,3、应用芯片技术筛选6例结直肠肿瘤组织和正常肠黏膜组织中micro-RNA的表达差异,用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)检测miR-195在组织中相对表达量,应用固定化蛋白质印迹法(Western blot)检测56例结直肠癌组织及其邻近正常肠黏膜中Notch通路中Dll4蛋白表达;采用双荧光素酶报告基因实验检测miR-195与Dll4 3’端非编码区(3’UTR)区的相互作用及活性,采用基因过表达miR-195(40 pmol/L)处理结肠癌细胞系SW480,运用流式细胞仪观察其对细胞凋亡的影响,Western blot检测通路相关蛋白Dll4、锯齿状蛋白1(Jagged1)、Notch受体胞内段(NICD)、细胞周期蛋白(Cyclin) D1、转录因子发状分裂相关增强子1(HES1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)、核因子-κB(NF-κB)的表达。组间比较采用方差分析(ANOVA),独立样本 t检验比较蛋白表达量差异,统计学方法分别采用独立样本 t检验、配对样本 t检验及单因素方差分析。 结果:结直肠癌组织中miR-195表达水平明显低于正常肠黏膜,而Dll4蛋白表达水平高于正常肠黏膜,分别为正常肠黏膜的0.34倍(0.341±0.008)及1.92倍(1.922±0.003) ( t=3.116、2.374, P<0.05),差异均有统计学意义,体外转入miR-195后,Dll4荧光素酶活性低于对照组(0.442±0.010、1.010±0.002, t=4.305, P<0.01),差异有统计学意义,miR-195和γ-分泌酶抑制剂(DAPT)都可阻断Notch1通路,抑制SW480细胞的增殖(3.1%比17.3%, t=4.232, P<0.01),差异有统计学意义,诱导其凋亡(13.7%比48.3%, t=8.355, P<0.01),两者具有协同作用( t=7.474, P<0.01),差异有统计学意义。同时Notch通路相关蛋白NICD、Hes-1随作用时间延长而表达下降。 结论:结直肠癌中miR-195及Dll4呈拮抗性表达,与其病理学特征密切相关,Dll4为miR-195调控的下游靶基因,miR-195通过负性调控Dll4/Notch信号通路抗结直肠癌。
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编辑人员丨4天前
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miR-195靶向成纤维细胞生长因子受体对膀胱上皮癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响
编辑人员丨4天前
目的:探究miR-195靶向成纤维细胞生长因子受体(FGFR)对膀胱上皮癌细胞增殖、迁移及侵袭的影响。方法:将膀胱上皮癌细胞(BIU87细胞)随机分为模拟物组(M组)、空白对照组(B组)及抑制物组(I组)。通过克隆实验检测BIU87细胞的克隆情况;采用qRT-PCR法检测BIU87细胞中的miR-195表达量;采用Transwell检测BIU87细胞的侵袭能力;采用免疫细胞化学法检测细胞中FGFR1蛋白的阳性表达情况;采用细胞划痕法检测BIU87细胞的迁移能力;采用Western blot法检测细胞中FGFR1蛋白含量的差异性;通过双荧光素酶报告证实miR-195与FGFR的靶向关系。结果:BIU87细胞中的miR-195表达量均低于HTB-9及SW780细胞(均 P<0.05)。M组的miR-195表达量最高,均高于B组及I组(均 P<0.05),I组的miR-195表达量低于B组( P<0.05)。M组的克隆数量、侵袭能力及迁移能力、FGFR1蛋白表达均低于B组及I组(均 P<0.05),I组的FGFR1蛋白含量高于B组( P<0.05);与B、I组比较,M组的FGFR1阳性数均减少(均 P<0.05),且I组的FGFR1阳性数多于B组( P<0.05);转染miR-195后,BIU87细胞中的FGFR1野生型基因活性降低( P<0.05)。 结论:miR-195能够对膀胱上皮癌细胞的生物学活性产生一定影响,其过表达对BIU87细胞克隆、迁移及侵袭等生物学行为均有一定抑制作用,其低表达对BIU87细胞克隆、迁移及侵袭等生物学行为均有一定促进作用,并可能是通过调控FGFR1的蛋白表达来实现。
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编辑人员丨4天前
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长链非编码RNA 565686通过靶向调控微小RNA-195对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨长链非编码RNA 565686(lncRNA-565686)对前列腺癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响及其分子机制。方法:收集武汉大学人民医院2017年1月至2020年1月行前列腺癌根治术的33例前列腺癌组织和同期行经尿道前列腺电切术的45例良性前列腺增生组织标本,采用实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)技术检测lncRNA-565686在前列腺组织和前列腺癌细胞的相对表达水平。在前列腺癌细胞(PC-3)中转染lncRNA-565686短发卡RNA,分别将未转染短发卡RNA、转染空载体和转染短发卡RNA细胞分为未转染组、空载体转染组和转染组。分别采用细胞克隆增殖实验检测细胞增殖能力;采用细胞迁移和侵袭实验(Transwell实验)检测细胞迁移和侵袭能力;采用双荧光素酶报告基因实验验证lncRNA-565686与微小RNA-195(miR-195)的靶向调控关系。组间比较采用 t检验。 结果:前列腺癌组织中lncRNA-565686的相对表达水平高于良性前列腺增生组织,差异有统计学意义(2.51±0.19比0.99±0.13, t=39.826, P<0.05);前列腺癌淋巴结细胞(LNCaP)、PC-3细胞中lncRNA-565686表达水平高于人正常前列腺上皮细胞(RWPE-1)细胞,差异有统计学意义(2.36±0.04和3.58±0.06比0.99±0.06, t=40.257、68.757, P<0.05);干扰lncRNA-565686表达后,转染组细胞增殖、迁移和侵袭能力均低于未转染组和空载体转染组。双荧光素酶报告基因实验证实lncRNA-565686与miR-195之间的直接调控关系。 结论:lncRNA-565686在前列腺癌中高表达,下调lncRNA-565686的表达可明显抑制前列腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力,其机制可能与直接负向调控miR-195的表达相关。
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编辑人员丨4天前
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食管癌患者血清微小RNA-195表达及临床意义
编辑人员丨4天前
目的:探讨食管癌患者血清微小RNA(miR)-195表达及临床意义。方法:回顾性分析2015年4月至2019年4月在北京怀柔医院105例食管癌患者的临床资料。采用实时定量荧光聚合酶链反应法检测血清miR-195相对表达量,并与同期90例健康体检者比较。绘制受试者工作特征(ROC)曲线,分析血清miR-195相对表达量诊断食管癌的效能;生存分析采用Kaplan-Meier法,比较采用log-rank检验;采用多因素Cox分析影响食管癌患者预后的独立危险因素。结果:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康体检者(4.39 ± 1.86比7.17 ± 2.37),差异有统计学意义( t = 9.155, P<0.05)。以食管癌患者血清miR-195相对表达量平均值作为阈值,>4.39为高表达,50例;≤ 4.39为低表达,55例。血清miR-195相对表达量与肿瘤直径、TNM分期、浸润程度和淋巴结转移有关( P<0.05),而与性别、年龄、病理类型和分化程度无关( P>0.05)。ROC曲线分析结果显示,血清miR-195相对表达量诊断食管癌的曲线下面积为0.819(95% CI 0.758~0.879, Z = 10.265, P<0.05),约登指数0.539,截断值取6.03时灵敏度为82.86%,特异度为71.11%。血清miR-195低表达患者中位生存时间明显短于高表达患者(25.7个月比36.6个月),5年总生存率明显低于高表达患者(18.2%比38.0%),差异有统计学意义( P<0.05)。多因素Cox分析结果显示,miR-195和肿瘤直径是影响食管癌患者预后的独立危险因素( HR = 0.377和0.418,95% CI 1.276~5.599和1.478~7.608, P<0.01)。 结论:食管癌患者血清miR-195相对表达量明显低于健康人群,且miR-195表达越低,患者预后越差,miR-195可以作为食管癌患者早期诊断和预后评估的指标之一。
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编辑人员丨4天前
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长链非编码RNA CASC9靶向miR-195-5p对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响
编辑人员丨4天前
目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA)肿瘤易感性候选基因9(CASC9)对胰腺癌BxPC-3细胞增殖和凋亡的影响,明确微小RNA-195-5p(miR-195-5p)与lncRNA CASC9的靶向关系。方法:收集2017年4月至2018年5月间湖北省襄阳市中西医结合医院40例行手术切除并经组织病理学确诊的胰腺癌组织及相应癌旁正常胰腺组织,选取4株胰腺癌细胞(AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1)和正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7,采用实时定量PCR法检测胰腺癌组织和各株细胞lncRNA CASC9表达。将BxPC-3细胞分为si-CASC9组(转染靶向lncRNA CASC9的siRNA)、si-control组(转染与lncRNA CASC9不匹配的siRNA)和CASC9组(转染lncRNA CASC9过表达质粒)、CASC9/miR-195-5p组(共转染CASC9过表达质粒和miR-195-5p mimics)。采用MTT法检测各组细胞增殖活性,采用蛋白质免疫印迹法检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2表达,采用生物信息学和荧光素酶实验分析CASC9和miR-195-5p的靶向关系。结果:胰腺癌组织lncRNA CASC9表达量显著高于癌旁正常胰腺组织(4.70±1.25比2.15±0.82, P=0.04),胰腺癌细胞株AsPC-1、HPAC、BxPC-3、PANC1细胞lncRNA CASC9表达量分别为1.43±0.12、1.86±0.13、2.03±0.14、1.73±0.15,均显著高于HPDE6-C7细胞的1.00±0.10( P值均<0.001),其中以BxPC-3细胞的表达量最高。si-CASC9组细胞较si-control组细胞的增殖活性显著下降(细胞培养第3天0.57±0.05比0.72±0.04, P=0.01;第4天0.75±0.07比0.95±0.07, P=0.02);Bax表达上调(1.39±0.13比1.07±0.11, P=0.03),Bcl-2表达显著下调(1.44±0.11比1.71±0.12、 P=0.04)。CASC9/miR-195-5p组细胞增殖活性较CASC9组显著下降( P值<0.005);Bax表达水平显著高于CASC9组(0.68±0.04比0.56±0.03, P=0.01),Bcl-2表达显著低于CASC9组(1.05±0.03比1.47±0.04, P<0.001)。 结论:lncRNA CASC9靶向结合miR-195-5p可逆转CASC9促进胰腺癌细胞增殖和抑制胰腺癌细胞凋亡的作用。
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编辑人员丨4天前
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长链非编码RNA AFAP1-AS1靶向miR-195-5p对肝癌细胞生物学行为的影响
编辑人员丨2024/7/27
目的 探讨长链非编码核糖核酸(lncRNA)AFAP1-AS1及微小核糖核酸-195-5p(miR-195-5p)对肝细胞癌(HCC)细胞生物学行为的影响.方法 常规培养人HCC细胞系(HepG2、Hep3B、SMMC-7721、Bel7402、SK-hep1细胞)和正常人肝细胞(HL-7702细胞),用实时荧光定量PCR法检测AFAP1-AS1、miR-195-5p并筛选实验细胞.将对数生长期实验细胞随机分为si-AFAP1-AS1组、si-NC组,miR-195-5p mimics组、mimics-NC组,miR-195-5pinhibitor+si-NC组、miR-195-5p inhibitor+si-AFAP1-AS1 组、inhibitor-NC+si-AFAP1-AS1 组、inhibitor-NC+si-NC组,用Lipofectamine 2000试剂将相应质粒按照分组转染入细胞.用CCK-8实验、菌落形成实验检测细胞增殖能力,用流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,用Transwell实验检测细胞迁移及侵袭能力,用双荧光素酶报告基因实验验证AFAP1-AS1与miR-195-5p的靶向关系.结果 HCC细胞中AFAP1-AS1表达高于正常人肝细胞(P均<0.05),HCC细胞中miR-195-5p表达低于正常人肝细胞(P均<0.05).由于SK-hep1细胞中AFAP1-AS1表达最高、miR-195-5p表达最低,因此,后续研究均采用SK-hep1细胞进行实验.与si-NC组比较,si-AFAP1-AS1组中AFAP1-AS1表达低、细胞增殖能力低、迁移和侵袭细胞少、G0/G1期细胞比例高、细胞凋亡率高(P均<0.05).通过Starbase v3.0在线数据库预测发现,AFAP1-AS1与miR-195-5p有互补的结合位点.双荧光素酶报告基因实验结果显示,miR-NC组、miR-195-5p组共转染WT-AFAP1-AS1后相对荧光素酶活性比较差异有统计学意义(P<0.05),共转染MUT-AFAP1-AS1后相对荧光素酶活性比较差异无统计学意义(P>0.05).与inhibitor-NC+si-NC组比较,si-NC+miR-195-5p inhibitor组细胞增殖能力高、迁移和侵袭细胞多、G0/G1 期细胞比例低、细胞凋亡率低(P均<0.05),而si-AFAP1-AS1+miR-195-5p inhibitor组上述细胞生物学行为则相反.结论 lncRNA AFAP1-AS1可能通过竞争性结合miR-195-5p参与调控HCC细胞增殖、迁移、侵袭、凋亡等生物学行为.
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编辑人员丨2024/7/27
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基于H19/miR-195-5p/SGK1通路分析金银花提取物对子宫内膜癌术后感染大鼠的干预效果
编辑人员丨2024/7/20
目的 分析基于H19/微小RNA-195-5p(miR-195-5p)/糖皮质激素调节激酶1(SGK1)通路的金银花提取物对子宫内膜癌术后感染大鼠的干预效果.方法 选取70只SPF级Wistar雌性大鼠,取其中30只进行LD35试验,确定致死量后,选取80 mg/kg的剂量进行给药及观察;剩余40只中10只作为空白组,30只建立子宫内膜癌术后感染模型,共有26只大鼠建模成功,将其分为模型组8只、药物对照组9只、金银花提取物组9只;药物对照组给予阿莫西林克拉维酸钾,金银花提取物组给予金银花提取物,空白组、模型组不做处理,干预14 d后观察大鼠变化.检测各组小鼠白细胞介素-8(IL-8)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、金黄色葡萄球菌菌落数水平和H19、miR-195-5p、糖皮质激素调节激酶1(SGK1)mRNA表达量及相对表达量.结果 与空白组相比,模型组、药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mR-NA表达量及相对表达量上升,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量下降(P<0.05);与模型组相比,药物对照组、金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及蛋白相对表达量上升(P<0.05);与药物对照组相比,金银花提取物组IL-8、TNF-α、IL-1β、金黄色葡萄球菌菌落数水平、H19、SGK1 mRNA表达量及相对表达量下降,miR-195-5p mRNA表达量及相对表达量上升(P<0.05).结论 金银花提取物可减轻子宫内膜癌术后感染大鼠炎性反应,减少金黄色葡萄球菌菌落数,其机制可能与H19/miR-195-5p/SGK1得到调节有关.
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编辑人员丨2024/7/20
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血浆miR-155、miR-195水平诊断首发精神分裂症执行功能障碍的价值及交互作用
编辑人员丨2024/7/6
目的 探讨血浆微小RNA-155(miR-155)、微小RNA-195(miR-195)水平诊断首发精神分裂症执行功能障碍的诊断价值及交互作用.方法 选取2020年6月至2023年6月商丘市第二人民医院收治的105例首发精神分裂症患者作为观察组,按照1∶1配对原则,另选取同期无精神分裂症体检志愿者105例作为对照组.比较两组受检者的血浆miR-155、miR-195水平,同时比较观察组有无执行功能障碍患者的执行缺陷综合征行为评价(BADS)评分及血浆miR-155、miR-195水平,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析血浆miR-155、miR-195水平对执行功能障碍的诊断价值,采用Pearson法分析血浆miR-155、miR-195水平与BADS评分的相关性,通过交互作用分析上述指标对首发精神分裂症执行功能障碍发生的影响.结果 观察组患者的血浆miR-155、miR-195水平分别为1.88±0.54、1.93±0.37,明显高于对照组的0.98±0.30、1.06±0.15,差异均有统计学意义(P<0.05);有执行功能障碍患者的卡片测验、动作计划测验、找钥匙测验、时间判断、动物园路线、修订六元素测试评分、BADS总分分别为(2.02±0.25)分、(1.21±0.14)分、(1.13±0.10)分、(1.54±0.19)分、(0.86±0.22)分、(1.40±0.28)分、(8.16±0.41)分,明显低于无执行功能障碍患者的(3.55±0.14)分、(3.36±0.18)分、(3.43±0.15)分、(3.48±0.16)分、(3.29±0.20)分、(3.40±0.12)分、(20.51±1.03)分,血浆miR-155、miR-195水平分别为2.07±0.31、2.15±0.33,明显高于无执行功能障碍患者的1.78±0.24、1.81±0.20,差异均有统计学意义(P<0.05);经Pearson法分析结果显示,血浆miR-155、miR-195与卡片测验、动作计划测验、找钥匙测验、时间判断、动物园路线、修订六元素测试评分、BADS总分均呈负相关(P<0.05);经ROC分析结果显示,血浆miR-155、miR-195联合诊断首发精神分裂症患者执行功能障碍的AUC为0.911(95%CI:0.839~0.957),约登指数为0.742,敏感度为91.89%,特异度为82.35%;经交互作用分析结果显示,miR-155阳性表达与miR-195阳性表达在首发精神分裂症患者执行功能障碍中呈正向交互作用(32.178<7.572×11.357,为次相乘模型)(P<0.05).结论 血浆miR-155、miR-195水平与首发精神分裂症执行功能障碍发生密切相关,且两指标阳性在执行功能障碍发生过程中呈正向交互作用,联合检测对执行功能障碍具有一定诊断价值.
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编辑人员丨2024/7/6
