目的:观察miR-3074-5p及其靶基因 p27在子痫前期胎盘组织中的表达情况，初步探讨miR-3074-5p/ p27分子途径在子痫前期病理过程中的作用。 方法:收集2017年9月至2018年3月期间在天津医科大学第二医院产科行剖宫产手术的子痫前期患者（子痫前期组，16例）和相同孕周非子痫前期的剖宫产产妇（对照组，9例）的胎盘组织，通过实时定量PCR、免疫组织化学（immunohistochemistry，IHC）和Western blotting检测，比较两组胎盘组织中miR-3074-5p以及p27、细胞周期蛋白D1（cyclin D1，CCND1）和细胞周期蛋白依赖性激酶2（cyclin dependent kinase 2，CDK2）等蛋白的表达水平。应用双荧光素酶基因报告系统，验证miR-3074-5p对 p27 mRNA的靶向抑制作用；通过RNA干扰技术，敲低人绒毛外滋养细胞系HTR-8/SVneo中p27蛋白的表达水平，观察p27表达下调对细胞生理活性的影响。 结果:与对照组相比，子痫前期组胎盘组织中miR-3074-5p（ P=0.034）与CCND1蛋白的表达量都显著下调（ P=0.031），而p27蛋白的表达量则显著上调（ P=0.010）；IHC结果显示，p27和CCND1蛋白主要表达于合体滋养层细胞中。双荧光素酶报告系统检测结果证实，miR-3074-5p能与 p27 mRNA的3’UTR序列结合而抑制其表达；敲低HTR-8/SVneo细胞中 p27的表达水平后，细胞的增殖（ P=0.014）和侵袭（ P=0.045）活性都显著增强。 结论:miR-3074-5p可能通过直接靶向抑制 p27的表达而参与调控人绒毛外滋养层细胞的生理活性，进而影响胎盘发育及功能；胎盘组织中miR-3074-5p的异常低表达可能通过诱导 p27的表达而参与子痫前期的病理过程。

目的 引用双生子经典研究途径,筛选冠心病患者外周血差异表达的微小 RNA (miR),分析miR在冠心病患者中的调控作用. 方法 选择两对冠心病–健康双生子为研究对象,其中2例冠心病患者为研究组,2 名健康者为对照组,分别抽取外周血5 ml,TRIzol法提取细胞总RNA,miRCURYTM LNA Array杂交芯片筛选差异表达miR.采用MirBase、TargetScan和MIRDB软件预测差异性miR的靶基因;DAVID软件进行靶基因GO分析和KEGG分析,Cytoscape软件绘制基因调控网络图. 结果 共筛选出43条差异表达miRs,其中12条表达上调,31条表达下调.最为显著的hsa-miR-1066-5p、hsa-miR-3074-3p、hsa-miR-4505、hsa-miR-3658 和hsa-miR-4459 分别下调10 倍以上,hsa-miR-4699-3p上调8倍以上,靶基因GO注释和KEGG分析显示下调的miRs参与了大量免疫因子调控. 结论 冠心病患者差异表达的miRs对免疫因子的调控,可能是导致冠心病发病的关键作用之一.

目的 本研究旨在通过检测类风湿关节炎外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)中TNFSF14(tumor necrosis factor superfamily 14)表达情况,寻找其上游的miRNA,并探讨它们参与RA的可能机制.方法 我们通过RT-PCR检测了TNFSF14在22例RA和22例健康人(HCs)PBMCs中的mRNA表达,通过生信分析寻找其上游miRNA,功能学实验和双荧光素酶报告系统验证预测的候选miRNAs.通过计算受试者工作特征曲线(ROC)和斯皮尔曼相关性检验评估miRNA和TNFSF14在RA中的诊断价值.结果 TNFSF14表达水平在RA患者PBMCs中显著降低;生物信息学分析结果预测miR-3074-5p是TNFSF14上游关键调节性miRNA;功能学实验和双荧光素酶报告系统证实TNFSF14是miR-3074-5p的靶基因.miR-3074-5p在RA中上调,且ROC分析提示,miR-3074-5p的表达将RA患者与HCs相区分(AUC为1.00);斯皮尔曼相关性分析说明RA患者PBMCs中miR-3074-5p的表达水平与anti-CCP(抗环瓜氨酸抗体)呈正相关,TNFSF14 mRNA表达水平与RA-IgG、类风湿因子(RF)和DAS28水平呈负相关.结论 miR-3074-5p可能通过靶向TNFSF14抑制TNFSF14的表达,进而参与RA的病理过程,且二者都是RA诊断的潜在分子标记物.

目的 分析微小RNA(microRNA)-3614-5p在卵巢癌细胞中的表达,探讨其对卵巢癌细胞增殖和迁移的影响及分子机制.方法 OncoLnc在线数据库分析miR-3614-5p表达水平与卵巢癌患者生存期的关系.采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测miR-3614-5p在卵巢癌细胞系(SKOV-3、OVCAR-3、A2780、HO-8910、OC3)和正常卵巢上皮细胞系(IOSE80)中的表达.以miR-3614-5p表达最低的细胞系为转染对象,分别转染化学合成的miR-3614-5p模拟物(miR-3614-5p组)和miR-NC(对照组).分别采用CCK-8法和Transwell迁移实验检测高表达miR-3614-5p对细胞增殖和迁移能力的影响.采用生物信息学和双荧光素酶报告基因法预测并验证miR-3614-5p的靶基因.qRT-PCR和Western blot法检测miR-3614-5p对靶基因表达的影响.结果 miR-3074-5p表达水平较高的卵巢癌患者生存期长于miR-3074-5p表达水平较低的患者(P<0.05).与IOSE80细胞比较,miR-3614-5p在卵巢癌细胞系中的表达显著减少(P<0.01),其在OVCAR-3细胞中表达最少(P<0.01).与对照组比较,miR-3614-5p组OVCAR-3细胞增殖能力显著降低(P<0.05)、细胞迁移能力显著降低(P<0.01).miR-3614-5p与G蛋白 α 抑制剂2(G protein alpha inhibiting activity polypeptide 2,GNAI2)mRNA的3′非翻译区存在结合位点(P<0.01).高表达miR-3614-5p可显著干扰GNAI2基因的表达(P<0.01).结论 miR-3614-5p在卵巢癌细胞系中的表达降低,其可通过干扰靶基因GNAI2的表达,抑制卵巢癌细胞的增殖和迁移过程,miR-3614-5p可能是治疗卵巢癌的新靶点.