目的:探讨Circ_002770调控微小RNA(miR)-331-3p对黑色素瘤上皮-间充质转化(EMT)和侵袭的影响。方法:选取32例黑色素瘤患者的癌组织及癌旁组织，采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测黑色素瘤组织和细胞中Circ_002770和miR-331-3p的表达水平；双荧光素酶报告实验检测miR-331-3p与Circ_002770之间的靶向关系；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测EMT程度；Transwell小室法检测细胞侵袭。组间差异采用单因素方差分析进行统计分析。结果:黑色素瘤组织(3.01±0.21)中Circ_00277的表达显著高于癌旁组织(1.00±0.06)，差异有统计学意义( t＝72.113， P<0.05)；MM细胞中Circ_00277的表达显著高于正常皮肤上皮细胞，差异有统计学意义( t＝98.021， P<0.05)。黑色素瘤组织(0.41±0.16)中miR-331-3p的表达显著低于癌旁组织(1.00±0.05)，差异有统计学意义( t＝36.892， P<0.05)；MM细胞中miR-331-3p的表达显著低于正常皮肤上皮细胞，差异有统计学意义( t＝187.239， P<0.05)。Circ_002770发挥分子海绵的作用抑制miR-331-3p表达；miR-331-3p与circ_002770野生型荧光载体共转染后A357细胞活性(0.46±0.21)显著低于对照组(1.00±0.23)，差异有统计学意义( t＝23.823， P<0.05)。而miR-331-3p与circ_002770突变型荧光载体共转染后A357细胞活性无明显变化(1.01±0.40比1.05±0.31)。低表达Circ_002770或过表达miR-331-3p均抑制黑色素瘤细胞的侵袭与EMT( P<0.05)。 结论:Circ_002770可吸附miR-331-3p促进黑色素瘤细胞的EMT和侵袭，进而影响黑色素瘤的进展。

前列腺癌的发病率较高，是癌相关死亡的第二大病因，这可能与肿瘤快速进展到去势抵抗性阶段有关。ErbB家族成员被证明在这种致死性疾病的进展中起重要作用。本文重点总结了ErbB-2相关信号通路在晚期前列腺癌进展中的作用，包括配体激活调节、细胞前列腺酸磷酸化酶(cPAcP)、miR-331-3p、PlncRNA-1等对ErbB-2的抑制作用，p66Shc、胆固醇和脂筏、CXCR4、Src等对ErbB-2的增强作用，以及CD44与ErbB-2的联合作用，同时讨论了ErbB-2与晚期前列腺癌进展相关的下游信号通路，包括AKT、ERK1/2和STATs等。

目的:探索SOX13基因来源的环状RNA hsa_circ_0004777的特征分析及功能预测。方法:探究了hsa_circ_0004777的基本特征，包括验证反向剪接位点，RNase R消化实验，细胞内RNA的胞质胞核分布，蛋白翻译潜能的预测。此外，使用生物信息学方法，预测hsa_circ_0004777结合的微小RNA（microRNA，miRNA）以及miRNA的靶基因，并且构建了circRNA-miRNA-mRNA的网络图。再对预测到的miRNA的靶基因进行基因本体论（gene ontology，GO）功能富集分析和信号通路富集分析。结果:hsa_circ_0004777的形成是由SOX13基因第4号外显子反向剪接至第2号外显子，hsa_circ_0004777能抵抗RNase R处理，主要分布在细胞质。生信预测hsa_circ_0004777通过作为hsa-miR-1225-3p、hsa-miR-637、hsa-miR-139-5p、hsa-miR-145-5p、hsa-miR-384、hsa-miR-660-5p、hsa-miR-942-5p、hsa-miR-331-3p这8个miRNA的海绵来发挥作用；hsa_circ_0004777潜在结合的8个miRNA的靶基因在对聚合酶Ⅱ启动子转录的正调控、DNA模板、骨骼肌细胞分化等生物过程显著富集。结论:成功探索了SOX13基因来源的环状RNA hsa_circ_0004777的特征，并且从circRNA-miRNA-mRNA网络图中预测了它的功能，为进一步研究hsa_circ_0004777奠定了基础，也为更深入研究SOX13提供了思路。

目的 探究三阴性乳腺癌(TNBC)组织中微RNA-331-3p(miR-331-3p)和跨膜蛋白119(TMEM119)水平变化与临床预后的相关性.方法 选取2017年1月至2019年1月在信阳市中心医院行手术治疗的98例TNBC病人的癌组织以及癌旁组织,分别作为TNBC组和癌旁组.在术后3年对所有病人进行随访,分为预后良好组为23例,预后不良组为75例.通过实时荧光定量PCR(qRT-PCR)法检测miR-331-3p和TMEM119的表达水平;采用Pearson法分析TNBC组织中miR-331-3p和TMEM119表达水平的相关性;分析miR-331-3p和TMEM119水平与TNBC病人预后的关系;影响TNBC病人预后的影响因素采用Cox回归的方法进行分析.结果 TNBC组TMEM119(1.53±0.24)的表达水平与癌旁组相比(1.01±0.13)显著上升,miR-331-3p(0.74±0.13)的表达水平与癌旁组(1.02±0.11)相比显著下降(t=41.53、41.53,P<0.05).Pearson相关性分析结果显示,miR-331-3p和TMEM119表达水平呈负相关关系(r=-0.49,P<0.001).miR-331-3p和TMEM119表达水平与肿瘤长径、TNM分期、腋窝淋巴结转移有关(P<0.05).miR-331-3p高表达组病人3年内生存率16/49(32.65%)高于低表达组7/49(14.29%);TMEM119高表达组病人3年内生存率4/49(8.16%)低于低表达组19/49(38.78%)(Z=4.60,P=0.032;Z=12.78,P<0.001).预后不良组miR-331-3p(0.65±0.13)表达水平与预后良好组(1.03±0.12)相比显著降低,TMEM119(1.69±0.27)表达水平与预后良好组(1.02±0.14)相比显著升高(t=38.74、33.30,P<0.05).结果显示,TNM分期(HR=5.88)、miR-331-3p(HR=2.45)和TMEM119(HR=2.86)表达水平是影响TNBC病人预后的危险因素(P<0.05).结论 TNBC病人癌组织中miR-331-3p低表达,TMEM119高表达,二者水平与预后评估密切相关.

目的 探讨LINC00943调节miR-331-3p/KMT2A轴对宫颈癌(CC)细胞恶性生物学行为和上皮间质转化(EMT)的影响.方法 检测正常宫颈上皮细胞Ect1/E6E7和人CC细胞系(HeLa、SiHa、C33A、CaSki)中LINC00943表达,筛选HeLa细胞为最佳细胞系.Targetscan检索预测miR-331-3p与LINC00943、KMT2A的结合位点,培养HeLa细胞并分为 sh-NC 组、sh-LINC00943 组、sh-LINC00943+NC inhibitor 组、sh-LINC00943+miR-331-3p inhibitor 组、miR-NC 组、miR-331-3p mimics 组、miR-331-3p mimics+pcDNA 组、miR-331-3p mimics+KMT2A 组,检测各组细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭情况以及EMT相关蛋白的表达水平.结果 LINC00943在CC细胞系的HeLa细胞中表达量最高(P＜0.05).双荧光素酶报告实验表明,LINC00943靶向下调miR-331-3p,miR-331-3p靶向下调KMT2A.细胞实验结果显示:沉默LINC00943或过表达miR-331-3p可抑制HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和EMT,促进细胞凋亡(P＜0.05);抑制miR-331-3p表达或过表达KMT2A可逆转沉默LINC00943或过表达miR-331-3p对HeLa细胞增殖、迁移、侵袭和EMT的抑制作用(P＜0.05).体内肿瘤形成实验证实,沉默LINC00943可显著抑制肿瘤生长和EMT.结论 LINC00943在CC细胞中高表达,沉默LINC00943可调节miR-331-3p/KMT2A轴抑制CC细胞增殖、迁移、侵袭和EMT等恶性生物学行为,促进细胞凋亡.

目的 探讨脑血流储备参数、血清miR-331-5p水平与老年帕金森病(PD)患者发生自主神经功能障碍的关系.方法 选取2022年3月—2023年6月张家口市第一医院收治的老年PD患者40例为PD组,另纳入同时期在张家口市第一医院体检的健康者40例为对照组.采用多参数心脑血流监测系统监测两组脑血流储备参数[大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉脑血流速度(CBFV)及相位差、增益],采用实时聚合酶链反应检测两组血清miR-331-5p水平,采用PD自主神经症状量表(SCOPA-AUT)评估PD组患者自主神经功能障碍发生情况.采用多因素Logistic回归分析探讨老年PD患者发生自主神经功能障碍的影响因素.结果 PD组大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉CBFV慢于对照组,相位差小于对照组,血清miR-331-5p水平高于对照组(P＜0.05).40例老年PD患者中13例(32.5%)发生自主神经功能障碍.自主神经功能障碍与非自主神经功能障碍者H-Y分期比较,差异有统计学意义(P＜0.05);自主神经功能障碍者皮肤交感反应(SSR)异常发生率高于非自主神经功能障碍者,大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉CBFV慢于非自主神经功能障碍者,相位差小于非自主神经功能障碍者,血清miR-331-5p水平高于非自主神经功能障碍者(P＜0.05).多因素Logistic回归分析结果显示,SSR异常、H-Y分期和大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉CBFV及相位差、血清miR-331-5p水平是老年PD患者发生自主神经功能障碍的独立影响因素(P＜0.05).结论 大脑中动脉、大脑后动脉、基底动脉CBFV及相位差、血清miR-331-5p水平是老年PD患者发生自主神经功能障碍的独立影响因素,脑血流储备功能下降、血清miR-331-5p水平升高可增加老年PD患者发生自主神经功能障碍的风险.

目的 观察结直肠癌(CRC)组织微小RNA-331-3p(miR-331-3p)、混合谱系白血病转位辅因子 10(MLLT10)mRNA表达变化,并探讨其表达与临床病理特征和上皮间质转化的关系.方法 选择CRC患者156例,取术中获取的CRC组织及其配对的癌旁正常组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应检测miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达以及上皮间质转化相关基因E-钙黏蛋白(E-cadherin)、N-钙黏蛋白(N-cadherin)、锌指转录因子Snail mRNA表达.比较CRC组织与癌旁正常组织miR-331-3p及MLLT10、E-cadherin、N-cadherin、Snail mRNA表达;分析CRC组织miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达与临床病理特征的关系,二者表达的关系及其与E-cadherin、N-cadherin、Snail mRNA表达的关系.结果 CRC组织MLLT10、N-cadherin、Snail mRNA相对表达量均高于癌旁正常组织,miR-331-3p、E-cadherin mRNA相对表达量均低于癌旁正常组织(P均<0.01).CRC组织miR-331-3p、MLLT10 mRNA表达与TNM分期、淋巴结转移有关(P均<0.05),而与性别、年龄、肿瘤最大径、肿瘤位置、组织分化程度无关(P均>0.05).Pearson相关分析显示,CRC组织miR-331-3p表达与MLLT10 mRNA表达呈负相关(r=-0.678,P<0.05);CRC组织miR-331-3p表达与E-cadherin mRNA表达呈正相关(r=0.589,P<0.05),与N-cadherin、Snail mRNA表达呈负相关(r分别为-0.712、-0.654,P均<0.05);CRC组织MLLT10 mRNA表达与E-cadherin mRNA表达呈负相关(r=-0.549,P<0.05),与N-cadherin、Snail mRNA表达呈正相关(r分别为0.668、0.714,P均<0.05).结论 CRC组织miR-331-3p低表达、MLLT10 mRNA高表达,二者表达与TNM分期、淋巴结转移以及上皮间质转化密切相关.

目的:探讨LINC01006 靶向miR-331-3p在多发性骨髓瘤(multiple myeloma,MM)进展中的功能.方法:RT-qPCR检测39 例MM患者和22 例正常对照者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006 和miR-331-3p的表达.分别转染si-LINC01006、si-NC、miR-331-3p mimics、miR-NC、si-LINC01006 + anti-miR-NC、si-LINC01006 +anti-miR-331-3p至MM细胞U266,通过CCK-8、流式细胞术和Tran-swell法评估U266 细胞抑制率、凋亡率和转移数.DIANA Tools网站预测LINC01006 与miR-331-3p的相互作用,并通过双荧光素酶报告基因法进一步验证.结果:MM患者骨髓标本来源的浆细胞中LINC01006表达升高,miR-331-3p表达降低.转染si-LINC01006 可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05),并上调miR-331-3p表达(P<0.05).转染miR-331-3p mimics可增加细胞抑制率和凋亡率(P<0.05),减少细胞转移数(P<0.05).miR-331-3p与LINC01006 直接结合.转染anti-miR-331-3p 显著逆转转染 si-LINC01006 对 MM 细胞抑制率、凋亡率和转移数的影响.结论:沉默LINC01006 通过促进miR-331-3p表达来抑制MM细胞增殖和转移,诱导凋亡,从而抑制MM进展.

目的:探讨长链非编码 RNA(LncRNA)重组人 V-maf 肌腱膜纤维肉瘤癌基因 G 反义RNA1(MAFG-AS1)调节miR-331-3p/SERPINE1 轴对胃癌细胞恶性生物学行为的影响.方法:qRT-PCR检测人胃癌组织(n=30)、癌旁组织(n=30)、胃黏膜正常上皮细胞GES-1、人胃癌细胞BGC-823、SGC-7901、MGC-803 中MAFG-AS1、miR-331-3p、SERPINE1 表达;将BGC-823 细胞随机分为ctrl组、pcDNA3.1 组、pcLncRNA MAFG-AS1 组、pcLncRNA MAFG-AS1+miR-NC 组、pcLncRNA MAFG-AS1+ miR-331-3p组;qRT-PCR检测各组BGC-823 细胞MAFG-AS1、miR-331-3p、SERPINE1 水平;CCK-8法检测各组BGC-823 细胞活力;EDU法检测各组BGC-823 细胞增殖;Transwell检测各组BGC-823 细胞迁移和侵袭;western blot检测各组BGC-823 细胞 SERPINE1、PCNA、MMP-2 表达;双荧光素酶报告基因实验分别验证MAFG-AS1 和miR-331-3p、miR-331-3p 和SERPINE1 的关系.结果:与癌旁组织相比,胃癌组织中MAFG-AS1、SERPINE1 mRNA表达显著性升高(3.01±0.37 vs 1.02±0.12,2.49±0.26 vs 1.01±0.10,t=28.022、29.000,P＜0.05),miR-331-3p 表达显著性降低(0.32±0.03 vs 1.03±0.07,t =51.063,P＜0.05).与 GES-1 细胞比较,不同胃癌细胞中 MAFG-AS1、SERPINE1 mRNA 表达显著性升高,miR-331-3p表达显著性降低(P＜0.05),且BGC-823 细胞变化结果更显著,后续实验选择BGC-823 细胞.与ctrl 组、pcDNA3.1 组比较,pcLncRNA MAFG-AS1 组 BGC-823 细胞 MAFG-AS1、SER-PINE1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、SERPINE1、PCNA、MMP-2 蛋白水平均显著性升高,miR-331-3p mRNA 水平显著性降低(P＜0.05);与 pcLncRNA MAFG-AS1 组、pcLncRNA MAFG-AS1+miR-NC 组比较,pcLncRNA MAFG-AS1+miR-331-3p 组 BGC-823 细胞 SER-PINE1 mRNA水平、细胞活力A值、EDU阳性细胞率、迁移与侵袭细胞数、SERPINE1、PCNA、MMP-2 蛋白水平均显著性降低,miR-331-3p mRNA 水平显著性升高(P＜0.05);MAFG-AS1 靶向负调控 miR-331-3p表达,miR-331-3p 靶向负调控 SERPINE1 表达.结论:过表达 LncRNA MAFG-AS1 可能通过靶向下调miR-331-3p来上调SERPINE1 表达,进而促进BGC-823 细胞增殖、迁移和侵袭.

目的 筛选外周血中能够早期预警肝移植术后急性排斥反应的微小RNA(miRNA,miR).方法 雄性Lewis大鼠40只、BN大鼠80只,分别按体重采用随机数字法分组并采用改良二袖套法构建肝原位移植大鼠模型.免疫耐受组(IT组)采用BN大鼠作为供体,另一BN大鼠为受体;急性免疫排斥组(AR组)采用Lewis大鼠作为供体,BN大鼠为受体;未成熟树突状细胞(imDCs)免疫干预组[转化生长因子-β1(TGF-β1) imDCs组]术法同AR组,受体术前5d腹腔注射2×106个过表达TGF-β1的imDC.术后7d采下腔静脉血进行miRNA基因芯片检测,筛选组间符合差异倍数[FC(abs)] ＞2.0的差异性表达miRNA.结果 TGF-β1 imDCs组与IT组比较,miR-199a-3p、miR-331-3p和miR-203a-3p显著下调[miR-199a-3p:FC (abs)=27.997,P=0.017;miR-331-3p:FC(abs)=5.403,P=0.034;miR-203 a-3p:FC (abs)=24.593,P=0.022];AR组与TGF-β1 imDCs组比较,miR-199a-3p、miR-331-3p和miR-203 a-3p显著下调[miR-199a-3p:FC (abs)=459.128,P=0.000;miR-331-3p:FC(abs) =9.877,P=0.031;miR-203a-3p:FC(abs) =26.894,P=0.020].以miR-199a-3p的表达差异最为显著[FC(abs) =459.128].结论 肝移植术后大鼠外周静脉血miR-199a-3p的下调可能早期预警急性排斥反应的发生.