目的:探讨微小RNA(miRNA，miR)-597靶向Rab23对肝癌细胞增殖、凋亡和周期的影响及其分子机制。方法:选取南阳市中心医院2017年5月到2019年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常肝细胞LO2、肝癌细胞系HepG2、SMMC-7721和Huh7中miR-597表达水平；采用慢病毒在肝癌细胞系HepG2构建对照miRNA和miR-597过表达细胞系，分别为对照组和观察组，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、克隆形成实验和异体移植瘤实验分析肿瘤细胞的增殖能力；采用流式细胞术分析细胞周期和凋亡水平；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析miR-597的靶基因；采用蛋白质印迹法(Western blot)检测靶蛋白表达水平。组间计量资料比较采用 t检验。 结果:肝细胞LO2中miR-597表达水平(1.09±0.15)明显高于肝癌细胞HepG2、SMMC-7721和Huh7 (0.37±0.14、0.45±0.16、0.58±0.14)，差异有统计学意义( t＝4.011、3.714、3.281， P<0.05)。对照组细胞吸光度值(2.87±0.26)明显高于观察组(1.53±0.22)，差异有统计学意义( t＝3.091， P<0.05)。对照组细胞克隆形成率[(71.23±8.29)%]明显高于观察组[(38.54±4.98)%]，差异有统计学意义( t＝5.220， P<0.05)。对照组小鼠体内肿瘤体积[(1 284.59±209.32) mm 3]明显高于观察组[(799.58±109.43) mm 3]，差异有统计学意义( t＝5.530， P<0.05)。对照组小鼠肿瘤重量[(3.98±0.29) g]明显高于观察组[(1.42±0.19) g]，差异有统计学意义( t＝3.218， P<0.05)。对照组细胞S期比例[(34.21±4.58)%]明显高于观察组[(44.58±5.87)%]，差异有统计学意义( t＝4.719， P<0.05)。对照组细胞G 2期比例[(32.14±4.28)%]低于观察组[(20.37±4.29)%]，差异有统计学意义( t＝3.612， P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(3.76±1.09)%]明显低于观察组[(24.54±3.68)%]，差异有统计学意义( t＝4.006， P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶报告基因结果显示，Rab23是miR-597的靶基因。对照组细胞Rab23蛋白表达水平(1.48±0.18)明显高于观察组(0.79±0.15)，差异有统计学意义( t＝2.976， P<0.05)。 结论:miR-597通过Rab23调控肝癌细胞的增殖、周期和凋亡。

目的:探讨长链非编码RNA(lncRNA) GSTM3TV2对肝癌细胞增殖、侵袭和转移的影响，并探讨其与微小RNA(miR)-597的相互作用。方法:选取郑州大学附属南阳市中心医院、南阳市宛城区第一人民医院和郑州大学第一附属医院2016年5月到2018年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析癌旁和肝癌组织中GSTM3TV2和miR-597表达水平；在肝癌细胞系HepG2建立lncRNA对照组和GSTM3TV2 KD组细胞系，采用细胞计数试剂盒(CCK-8)、Transwell和体内异体移植瘤实验检测GSTM3TV2的体内外功能；采用生物信息学和双荧光素酶报告基因分析GSTM3TV2与miR-597的关系；将miRNA抑制剂转染HepG2细胞，分析其作用机制。计量数据比较采用 t检验。 结果:肝癌组织中GSTM3TV2表达水平(2.96±0.34)明显高于癌旁组织(2.96±0.34)，差异有统计学意义( t＝4.819， P<0.05)。lncRNA对照组细胞48 h吸光度( A)值(2.17±0.22)明显高于GSTM3TV2 KD组(1.09±0.20)，差异有统计学意义( t＝3.429， P<0.05)。lncRNA对照组细胞侵袭数量[(154.82±13.83)个]明显高于GSTM3TV2 KD组[(87.29±10.43)个]，差异有统计学意义( t＝5.018， P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内成瘤体积[(1 048.45±251.30) mm 3]明显大于GSTM3TV2 KD组[(759.49±142.09) mm 3]，差异有统计学意义( t＝4.719， P<0.05)。lncRNA对照组细胞体内肿瘤重量[(1.09±0.21) g]明显高于GSTM3TV2 KD组[(0.61±0.15) g]，差异有统计学意义( t＝3.185， P<0.05)。lncRNA对照组细胞淋巴结转移数量[(15.29±3.39)个]明显多于GSTM3TV2 KD组[(8.22±2.09)个]，差异有统计学意义( t＝3.103， P<0.05)。生物信息学和双荧光素酶活性结果显示miR-597是GSTM3TV2的靶基因。lncRNA对照组细胞miR-597表达水平(1.09±0.21)明显低于GSTM3TV2 KD组(2.80±0.26)，差异有统计学意义( t＝3.529， P<0.05)。 结论:lncRNA GSTM3TV2通过调节miR-597促进肝癌细胞增殖、侵袭和转移等恶性细胞生物学行为。

目的:探讨微小RNA(miR)-597在肝癌组织中的表达及其与临床病理和预后的关系。方法:选取南阳市中心医院2016年5月至2018年5月收集的126例肝癌和癌旁组织作为研究对象，采用荧光定量PCR分析癌旁和肝癌组织中miR-597表达水平；分析miR-597表达水平与肝癌患者临床病理特征(年龄、性别、肿瘤直径、乙型肝炎、门静脉癌栓、组织分级、TNM分期、淋巴结转移)的关系，并比较miR-597表达阳性和阴性患者3年生存率和中位生存期。采用单因素卡方和多因素回归分析miR-597表达与临床病理特征和预后的关系。结果:癌旁组织miR-597表达水平(1.28±0.28)明显高于肝癌组织miR-597表达水平(0.41±0.11)，差异有统计学意义( t＝3.991， P<0.05)。中高分化患者肝癌组织中miR-597表达水平(0.82±0.15)明显高于低分化患者肝癌组织(0.31±0.11)，差异有统计学意义( t＝3.047， P<0.05)。Ⅰ~Ⅱ期患者肝癌组织miR-597表达水平(0.70±0.12)明显高于Ⅲ~Ⅳ期患者肝癌组织(0.29±0.16)，差异有统计学意义( t＝3.280， P<0.05)。肝癌伴乙型肝炎患者肝癌组织miR-597表达水平(0.39±0.14)明显低于肝癌无乙型肝炎患者(0.76±0.13)，差异有统计学意义( t＝3.338， P<0.05)。门静脉癌栓患者组织miR-597水平(0.36±0.17)明显低于无门静脉癌栓患者肝癌组织(0.69±0.15)，差异有统计学意义( t＝3.874， P<0.05)。淋巴结转移患者肝癌组织miR-597表达水平(0.29±0.17)明显低于无淋巴结转移患者(0.84±0.15)，差异有统计学意义( t＝4.309， P<0.05)。miR-597高表达患者生存时间(29.5个月)明显高于miR-597低表达患者生存时间(16.4个月)，差异有统计学意义(Log-rank＝5.905， P<0.05)。miR-597高表达患者术后3年生存率(35/68，51.47%)高于miR-597低表达组患者术后3年生存率(12/58，20.69%)，差异有统计学意义(Log-rank＝5.046， P<0.05)。单因素方差分析显示，组织分级、TNM分期、门静脉癌栓、乙型肝炎阳性、淋巴结转移是影响肝癌组织miR-597表达的危险因素( P<0.05)。 结论:miR-597在肝癌组织中表达水平下调，与患者临床病理特征和预后明显相关。

目的 探讨肝细胞癌组织微核糖核酸-597(miR-597)表达与临床病理特征、肝动脉化疗栓塞术(TACE)疗效的关系.方法 选取2019年1月至2021年1月荆门市人民医院收治的肝细胞癌病人136例,比较不同临床病理特征病人癌组织中miR-597表达水平;另治疗后随访3个月,根据TACE疗效将病人分为有效组和无效组,并比较miR-597表达水平;采用多因素logis-tic回归分析影响肝细胞癌病人TACE疗效的相关因素.结果 伴门静脉癌栓、伴淋巴结转移、肿瘤长径>5 cm、Ⅲa期、低分化、Child-Pugh分级B级的肝细胞癌病人癌组织中miR-597表达水平均低于无门静脉癌栓、无淋巴结转移、肿瘤长径≤5 cm、Ⅰb+Ⅱ期、中高分化、Child-Pugh分级A级的病人(P<0.05);TACE治疗后,治疗有效率为22.06％,有效组癌组织中miR-597表达水平高于无效组(0.827±0.054比0.351±0.046,P<0.05);经logistic回归分析发现,门静脉癌栓、淋巴结转移、肿瘤长径、临床分期、病理分化、Child-Pugh分级、微血管侵犯、血清甲胎蛋白(AFP)及癌组织中miR-597表达水平均是肝细胞癌病人TACE疗效的影响因素(P<0.05).结论 肝细胞癌组织miR-597表达水平与病人临床病理学特征密切相关,且miR-597表达水平亦与TACE疗效有关,其低表达量常提示TACE疗效不佳.

目的 检测乳腺癌组织中微小RNA-199b-5p(miR-199b-5p)、微小RNA-597(miR-597)的表达,同时分析miR-199b-5p、miR-597表达与乳腺癌临床病理特征及预后的关系,并分析其早期诊断的价值.方法 收集95例乳腺癌组织和癌旁组织,采用实时荧光定量PCR法检测组织中miR-199b-5p、miR-597的相对表达量,分析miR-199b-5p、miR-597表达与乳腺癌临床病理特征的关系;采用Kaplan-Meier生存曲线分析miR-199b-5p、miR-597表达对患者术后5年总生存率的影响,并采用受试者工作特征曲线(receiver operating characteristic,ROC)分析miR-199b-5p和miR-597表达对患者早期诊断的预测价值.结果 与癌旁正常组织相比,miR-199b-5p、miR-597在乳腺癌组织中的表达均降低(P均＜0.05).miR-199b-5p低表达与有淋巴结转移和较高TNM分期有关(P均＜0.05);miR-597低表达与肿瘤低分化、有淋巴结转移和较高TNM分期有关(P均＜0.05).Kaplan-Meier生存曲线分析结果表明,miR-199b-5p、miR-597低表达患者的总生存率均分别低于miR-199b-5p、miR-597高表达患者(P均＜0.05).此外,miR-199b-5p和miR-597对乳腺癌早期诊断的ROC曲线下面积(area under the cure,AUC)分别为0.813和0.721,联合诊断的敏感度和特异度分别为0.825、0.813.结论 乳腺癌组织中,miR-199b-5p和miR-597表达降低与淋巴结转移、病情恶化、低生存率相关,miR-199b-5p和miR-597有望成为乳腺癌早期诊断和预后预测靶标.

目的 观察肝细胞性肝癌(HCC)组织及细胞系中miR-597的表达情况,以及上调miR-597表达对HCC癌细胞增殖、迁移和侵袭能力的影响,并探讨其作用机制.方法 选择20例HCC患者,其中男性12例,女性8例;年龄21～69岁,中位年龄46岁;临床分期T1N0M0期10例,T2N0M0期3例,T3N0M0期3例,T4N0M0期4例;14例有乙型肝炎病史,1例有乙型肝炎、丙型肝炎重叠感染史,5例无肝炎病史.取癌组织及对应的癌旁组织,采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测其miR-597 mRNA表达水平.采用RT-qPCR检测不同肝癌细胞系及正常肝上皮细胞中miR-597mRNA表达水平.将体外传代培养人HCC细胞系Hep3B,分为对照组和miR-597过表达组,分别转染对照(miR-NC)及miR-597模拟物(miR-597 mimics),用RT-qPCR检测细胞中miR-597 mRNA表达水平;用MTT实验检测Hep3B细胞的增殖能力;划痕实验和Transwell实验检测Hep3B细胞的迁移和侵袭能力;荧光素酶报告实验确定FOSL2是否是miR-597的靶基因;通过Western blot实验检测Hep3B细胞FOSL2蛋白的表达水平.采用RT-qPCR检测癌组织及对应的癌旁组织中FOSL2 mRNA表达水平,分析miR-597与FOSL2表达的相关性.结果 HCC组织中miR-597 mRNA表达水平明显低于癌旁组织(P＜0.01).HCC细胞系中miR-597 mRNA表达水平明显低于肝正常上皮细胞(P＜0.05).miR-597过表达组miR-597 mRNA表达水平显著高于对照组(P＜0.05),且细胞增殖、迁移和侵袭能力均显著低于对照组(P＜0.05).miR-597直接靶定FOSL2的3'非翻译区(3'-UTR),同时miR-597过表达组FOSL2蛋白的表达水平相对于对照组明显降低(P＜0.05),HCC组织中FOSL2 mRNA表达水平明显高于癌旁组织(P＜0.01),且FOSL2与miR-597的表达呈显著负相关(r=-0.784,P＜0.001).结论 miR-597在HCC组织中低表达而FOSL2高表达,上调miR-597的表达能够抑制HCC细胞的增殖、迁移和侵袭,其机制可能与下调FOSL2蛋白的表达有关.

目的 探讨LncRNA EIF3J-AS1靶向miR-597-5p对胃癌细胞增殖、周期分布和凋亡的影响.方法 RT-qPCR分析LncRNA EIF3J-AS1和miR-597-5p在胃癌组织、癌旁组织、胃癌细胞(SNU-1、AGS、HS-746T)以及人胃黏膜细胞GES1中的表达.将si-LncRNA EIF3J-AS1、si-NC、miR-NC、miR-597-5p mimics、pcDNA、pcDNA-LncRNA EIF3J-AS1、si-LncRNA EIF3J-AS1与anti-miR-NC、si-LncRNA EIF3J-AS1与anti-miR-597-5p分别转染SNU-1细胞,流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡率.CCK-8法检测细胞活力.LncRNA EIF3J-AS1和miR-597-5p的靶向关系通过双荧光素酶报告实验来证实.结果 胃癌组织中LncRNA EIF3J-AS1表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05),miR-597-5p表达水平显著低于癌旁组织(P<0.05).胃癌细胞中LncRNA EIF3J-AS1表达水平显著高于GES1细胞(P<0.05),miR-597-5p表达水平显著低于GES1细胞(P<0.05).沉默LncRNA EIF3J-AS1表达显著降低细胞活力、S期细胞比例(P<0.05),增加凋亡率和G0/G1期细胞比例(P<0.05),上调miR-597-5p表达水平(P<0.05).过表达miR-597-5p显著降低细胞活力、S期细胞比例(P<0.05),增加凋亡率和G0/G1期细胞比例(P<0.05).过表达LncRNA EIF3J-AS1显著降低miR-597-5p表达水平(P<0.05).LncRNA EIF3J-AS1与miR-597-5p直接特异性结合.抑制miR-597-5p表达显著削弱沉默LncRNA EIF3J-AS1对SNU-1细胞活力、周期分布和凋亡的影响(P<0.05).结论 沉默LncRNA EIF3J-AS1通过靶向上调miR-597-5p可抑制胃癌细胞增殖,阻碍周期进展,并诱导细胞凋亡.

目的 研究长链非编码RNA(lncRNA)LINC00958影响乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用与机制.方法 定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测LINC00958和miR-597-5p在乳腺癌组织中的表达.MDA-MB-231细胞转染si-LINC00958或miR-597-5p或共转染si-LINC00958和anti-miR-597-5p.qRT-PCR检测LINC00958和miR-597-5p表达,四甲基偶氮唑蓝(MTT)检测MDA-MB-231细胞增殖,Transwell检测细胞迁移、侵袭,流式细胞术检测细胞凋亡,West-ern印迹检测Ki-67、基质金属蛋白酶(MMP)-2、MMP-9、B细胞淋巴瘤(Bcl)-2、Bcl-2相关X蛋白(Bax)表达.双荧光素酶报告实验分析LINC00958与miR-597-5p的靶向关系.结果 与癌旁组织比较,41例乳腺癌组织中LINC00958表达显著上调,miR-597-5p表达显著下调(P<0.05).抑制LINC00958表达显著降低MDA-MB-231细胞增殖、Ki-67表达水平、迁移、侵袭细胞数、MMP-2、MMP-9、Bcl-2表达水平,显著提高细胞凋亡率、Bax表达水平(P<0.05),与miR-597-5p过表达的结果相同.LINC00958靶向调控miR-597-5p的表达.干扰miR-597-5p表达后,抑制LINC00958表达对乳腺癌MDA-MB-231细胞增殖、迁移、侵袭和凋亡的作用被显著逆转(P<0.05).结论 LINC00958通过靶向下调miR-597-5p,增强乳腺癌MDA-MB-231细胞的增殖、迁移、侵袭,并减轻细胞凋亡.

目的 探讨LncRNA LINC00941对神经胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭的影响及分子机制.方法 培养正常人类神经胶质细胞HEB和胶质瘤细胞系LN18、SW1088、Hs683,将胶质瘤细胞LN18随机分为si-NC组、si-LINC00941组、pcDNA-NC组、pcDNA-LINC00941组、miR-NC组、miR-597-5p组、anti-miR-NC组、anti-miR-597-5p组、si-Rho鸟嘌呤核苷酸交换因子(ARHGEF)4组、si-LINC00941+anti-miR-NC组、si-LINC00941+anti-miR-597-5p组、si-LINC00941+pcDNA-NC组、si-LINC00941+pcDNA-ARHGEF4组.采用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测LINC00941、miR-597-5p和ARHGEF4 mRNA的表达水平;West-ern印迹法检测ARHGEF4、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、基质金属蛋白酶(MMP)2和MMP9蛋白表达;四甲基偶氮唑盐比色法(MTT)检测细胞活性;Transwell检测细胞迁移和侵袭;双荧光素酶报告实验检测LINC00941、miR-597-5p及miR-597-5p和AR-HGEF4的靶向关系.结果 与正常的人类神经胶质细胞HEB相比,胶质瘤细胞系LN18、SW1088、Hs683中LncRNA LINC00941表达水平升高,miR-597-5p表达水平降低,ARHGEF4 mRNA和蛋白表达水平升高,差异均有统计学意义(P<0.05).LncRNA LINC00941、ARHGEF4低表达或miR-597-5p高表达,CyclinD1、MMP2和MMP9表达水平显著降低,细胞活性显著降低,细胞迁移和侵袭数量显著降低(P<0.05).LncRNA LINC00941靶向调控miR-597-5p,miR-597-5p靶向调控ARH-GEF4.下调miR-597-5p或上调ARHGEF4均能逆转LINC00941低表达对LN18细胞增殖、迁移和侵袭的影响.结论 Ln-cRNA LINC00941下调表达可能通过miR-597-5p/ARHGEF4分子轴抑制神经胶质瘤细胞增殖、迁移和侵袭.

目的 探讨黑果腺肋花楸花色苷提取物对血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导的血管平滑肌细胞增殖和凋亡的影响及分子机制.方法 人主动脉血管平滑肌细胞(HA-VSMC)分为NC组、AngⅡ组、不同浓度黑果腺肋花楸花色苷提取物组、AngⅡ+si-con组、AngⅡ+si-LINC00511组、AngⅡ+miR-con组、AngⅡ+miR-597-5p组、花色苷+AngⅡ+anti-miR-con组、花色苷+AngⅡ+anti-miR-597-5p组.细胞计数试剂盒(CCK)-8检测细胞增殖活力;流式细胞术检测细胞凋亡;实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-qPCR)检测LINC00511和miR-597-5p的表达水平;双荧光素酶报告实验检测LINC00511和miR-597-5p的靶向关系.结果 不同浓度黑果腺肋花楸花色苷提取物处理后,AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞增殖活力降低,细胞凋亡率升高,LINC00511表达水平降低,miR-597-5p表达水平升高,差异有统计学意义(P<0.05).低表达LINC00511或高表达miR-597-5p,AngⅡ诱导的HA-VSMC细胞增殖活力降低,细胞凋亡率升高,差异有统计学意义(P<0.05).LINC00511靶向调控miR-597-5p,低表达miR-597-5p可以逆转黑果腺肋花楸花色苷提取物对AngⅡ处理的HA-VSMC增殖和凋亡的影响.结论 黑果腺肋花楸花色苷提取物通过调控LINC00511和miR-597-5p抑制血管平滑肌细胞增殖,促进血AngⅡ诱导的细胞凋亡.