目的:探讨阿片类生长因子受体假基因1（OGFRP1）对卵巢癌细胞增殖、侵袭和迁移的影响及其作用机制。方法:选取120例卵巢癌患者癌组织及正常卵巢组织，实时荧光定量PCR（RT-qPCR）检测OGFRP1和miR-665表达水平；将A2780细胞分为空白（PBS）组、si-NC组、si-OGFRP1组、miR-NC组、miR-665组、si-OGFRP1+anti-miR-NC组、si-OGFRP1+anti-miR-665组。四甲基偶氮唑盐比色法（MTT）检测细胞存活率；Transwell检测细胞迁移和侵袭；双荧光素酶报告实验检测OGFRP1和miR-665的靶向关系。结果:与正常卵巢组织相比，卵巢癌组织中OGFRP1表达水平升高（2.75±0.27 vs 1.00±0.09），miR-665表达水平降低（0.51±0.05 vs 1.00±0.08）（均 P<0.05）。抑制OGFRP1表达或过表达miR-665后，卵巢癌A2780细胞的活性、细胞迁移与侵袭数均降低（均 P<0.05）。双荧光素酶报告实验结果显示，OGFRP1靶向调控miR-665；抑制miR-665和OGFRP1表达后，卵巢癌A2780细胞活性升高，迁移、侵袭细胞数增加（ P<0.05）。 结论:抑制OGFRP1表达可抑制卵巢癌A2780细胞增殖、迁移和侵袭，其机制可能与上调miR-665有关。

目的:探讨HCV感染者血清微小核糖核酸（miR）665及miR-224的表达，分析其对肝癌的诊断价值。方法:选取2017年1月至2020年5月保定市人民医院收治的130例HCV感染者和60例健康体检正常者。HCV感染者根据其诊断结果，分为慢性丙型肝炎（CHC）组54例，肝硬化组46例和肝癌组30例。根据HCV RNA的检测结果，将HCV感染者分为低病毒载量组（34例，HCV RNA<10 3 IU/mL）、中病毒载量组（57例，HCV RNA为10 3~10 6 IU/mL）和高病毒载量组（39例，HCV RNA>10 6 IU/mL）。采用Metavir评分判断HCV感染者肝纤维化程度，F0期29例，F1~F2期56例，F3~F4期45例。应用ROC曲线分析血清miR-665、miR-224及甲胎蛋白（AFP）水平诊断肝癌的价值。 结果:各组miR-665和miR-224水平差异均有统计学意义（ F=16.18和11.52， P均<0.001）。肝癌组、肝硬化组和CHC组血清miR-665（ q=17.39、13.84和10.25）及miR-224（ q=10.29、12.65和12.85）表达水平均明显高于对照组（ P均< 0.001）。肝癌组血清miR-665及miR-224表达水平均高于CHC组（ q=17.11和15.12）和肝硬化组（ q=17.00和14.97）（ P均< 0.001）。随着病毒载量的增加和肝纤维化的加重，血清miR-665及miR-224表达水平明显增高，差异有统计学意义（ F =14.83、8.71，17.62和11.18， P均<0.001）。ROC曲线显示，miR-665、miR-224及AFP三项联合诊断肝癌的曲线下面积最大（0.963），其灵敏度和特异性为99.2%和90.3%。 结论:HCV感染患者血清miR-665及miR-224表达水平明显升高，miR-665、miR-224及AFP三项联合对HCV感染导致的肝癌具有较好的诊断价值。

目的:探讨败酱草水提物对胶质瘤细胞生物行为的影响及其可能作用机制.方法:收集2019 年2月至2020 年1 月期间于本院接受手术切除并经病理证实的31 例胶质瘤组织,qRT-PCR法检测正常脑组织与胶质瘤组织中circ_0000936、miR-665 的表达量;Pearson法分析胶质瘤组织中circ_0000936 和miR-665 表达量的相关性;体外培养人胶质瘤细胞LN229,不同浓度的败酱草(0.5 mg/mL、1.0 mg/mL、2.0 mg/mL)处理LN229 细胞,si-NC、si-circ_0000936 分别转染至 LN229 细胞,pcDNA-circ_0000936 转染至LN229 细胞后加入2.0 mg/mL败酱草处理细胞;CCK-8、平板克隆形成实验、Transwell小室实验与流式细胞术分别检测细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭及凋亡能力;双荧光素酶报告基因实验检测circ_0000936 与miR-665 的靶向关系;Western blot法检测Bax、Bcl-2 蛋白表达量.结果:胶质瘤组织中circ_0000936 的表达量高于正常脑组织(P<0.05),而miR-665 的表达量低于正常脑组织(P<0.05);circ_0000936 和miR-665 呈负相关(r =-0.980,P<0.001);败酱草能够以浓度依赖性方式降低细胞活力、细胞克隆形成率、Bcl-2 蛋白水平和circ_0000936 的表达量(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),而凋亡率、Bax蛋白水平和miR-665 的表达量升高(P<0.05);转染si-circ_0000936 后miR-665 的表达量升高(P<0.05),细胞活力、细胞克隆形成率和Bcl-2 蛋白水平降低(P<0.05),迁移及侵袭细胞数减少(P<0.05),凋亡率和Bax蛋白水平升高(P<0.05);转染pcDNA-circ_0000936 能够逆转败酱草对LN229 细胞生物学行为的作用.结论:败酱草水提物可通过调控circ_0000936/miR-665 诱导胶质瘤细胞凋亡,并阻碍增殖、迁移及侵袭.

目的 探讨老年慢性心力衰竭(chronic heart failure,CHF)患者血清微小RNA(miR)-665、miR-144水平与心功能的关系.方法 连续选取2021年3月至2023年3月内蒙古医科大学附属医院诊治的老年CHF患者120例为CHF组,根据纽约心脏病协会(NYHA)心功能分级:Ⅱ级39例、Ⅲ级51例、Ⅳ级30例;选择同时间段老年健康志愿者120例纳入对照组.收集临床资料及心功能指标,检测血清miR-665、miR-144表达水平,Pearson相关性分析miR-665、miR-144与心功能指标的关系.结果 与对照组比较,CHF组LVEF显著降低,左心室舒张末期内径(left ventricular end-diastolic diameter,LVEDD)、左心室收缩末期 内径(left ventricular end-systolic diameter,LVESD)及血清miR-665、miR-144表达水平显著升高(P＜0.01).CHF组心功能Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级患者LVEF依次降低,LVEDD、LVESD及血清miR-665、miR-144表达水平依次升高,差异有统计学意义(P＜0.01).Pearson相关性分析显示,血清 miR-665 与 miR-144 呈正相关(r=0.693,P=0.000);miR-665、miR-144 与 LVEF 呈负相关(r=-0.577,P=0.000,r=-0.591,P=0.000),与 LVEDD(r=0.485,P=0.000,r=0.507,P=0.000)、LVESD(r=0.539,P=0.000,r=0.494,P=0.000)呈正相关.结论 老年CHF患者血清miR-665、miR-144水平升高,均与心功能密切相关.

目的:探讨长链非编码RNA(LncRNA)SNHG15 对肾细胞癌(RCC)细胞增殖、凋亡、迁移和侵袭的影响及作用机制.方法:786-O和 ACHN细胞分为转染空载体 pcDNA3.1 的空白对照组和转染 SNHG15 表达质粒的SNHG15 组;分为转染无关序列的 shRNA阴性对照组(shNC 组)、转染靶向 SNHG15 的短发夹 RNA 组 1 和组 2(shSNHG15#1 组和shSNHG15#2 组).分别采用MTT法、Caspase 3/7 活性试剂盒、划痕实验和Transwell小室检测786-O 和ACHN细胞的增殖、凋亡、迁移和侵袭能力.生物信息学预测和双荧光素酶报告实验验证SNHG15、miR-665 和Myc之间的关系.结果:SNHG15 过表达可增加 786-O 和ACHN细胞SNHG15 的表达,而短发夹RNA敲低SNHG15 的表达(P<0.001).SNHG15 过表达可促进 786-O 和 ACHN细胞的增殖、凋亡抵抗、迁移和侵袭(P<0.05),敲低SNHG15 表达可抑制786-O和ACHN细胞的以上恶性生物学行为(P<0.05).双荧光素酶报告实验证实SNHG15 可直接结合miRNA-665,解除miR-665 对其靶蛋白Myc的抑制,增加Myc蛋白表达.结论:SNHG15 可促进RCC细胞的增殖、凋亡抵抗、迁移和侵袭,可能与通过竞争性吸附miR-665 进而增加Myc蛋白表达有关.

目的:通过考察中药开心解郁方干预抑郁症模型大鼠海马miR-665表达变化并对miR-665的靶基因进行生物信息分析,探讨miR-665在抑郁症的发病及开心解郁方抗抑郁机制中的作用.方法:建立慢性应激抑郁症大鼠模型并用开心解郁方干预42天,取海马组织提取总RNA,采用RT-qPCR检测各组大鼠海马miR-665相对表达量,并采用TargetScan和microRNAorg数据库对miR-665进行靶基因预测,采用DAVID数据库对预测得到的靶基因进行GO功能富集分类及KEGG信号通路分析.结果:与正常组比较,模型组大鼠海马miR-665表达水平显著增高,差异具有统计学意义(P＜0.01);与模型组比较,中药组及西药组大鼠海马miR-665表达水平显著降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).miR-665靶基因的生物学功能主要富集于有机物质反应等;信号通路主要富集于N-糖链的合成等.结论:miR-665可能参与了抑郁症病理机制过程调控,通过改善其表达异常可能为开心解郁方的抗抑郁机制之一,通过对其靶基因的功能预测分析对于后期继续研究开心解郁方干预miR-665的具体作用机制提供了方向和理论基础.

目的 探讨血清miRNA复发分子标志物检测与鼻咽癌患者出现复发远处转移相关性.方法 选取病理确诊的鼻咽鳞癌患者60例行8 MeV高能X射线调强放射治疗和奈达铂联合氟尿嘧啶的化疗方案.治疗结束后每3个月对患者随访1次.随访29 ～ 65个月,经MRI和病理检测25例没有发生远处转移和复发(未复发转移组),35例发生远处转移或复发(复发转移组),应用miRCURY LNATM microRNA Arrays芯片对血清内miRNA差异性表达谱筛查,免疫组织化学检测患者肿瘤组织内Jabl与Akt1表达情况.结果 miRNAs芯片结果显示,治疗前复发转移组比未复发转移组血清内miRPlusE1253的表达量上升,miR-125b、miR-22、miR-26b、miR-29a、miR-665和miR-720的表达量下降(均P＜0.05).治疗后复发转移组比未复发转移组血清内miRPlusE1072的表达量上升,miR-26b、miR-122、miR-30c、miR-29b、miR-550、miR-143、miRJ20和let-7c的表达量下降(均P＜0.05).未复发转移组患者肿瘤组织内Jab1与Akt1蛋白阳性表达率均低于复发转移组(均P＜0.05).Logistic回归分析显示,治疗前血清miR29b、miR125b表达量和Jab1、Akt1阳性表达为患者复发转移独立危险因素(均P＜0.05).结论 血清miR-125b、miR29b水平及肿瘤组织内Jab1与Akt1阳性表达与鼻咽癌患者远处转移或复发相关.

目的 探讨肝癌患者血清来源的外泌体内miR-665与肝癌临床病理指标及预后的关系.方法 采用试剂盒方法提取患者血清内的外泌体并用透射电镜观察验证.然后利用RT-PCR方法检测30例肝癌患者和10例体检者血清来源的外泌体内miR-665的表达水平,进行对照研究,探讨临床病理指标和预后的关系.结果 血清提取的外泌体呈囊泡状,直径约30～150 nm.肝癌患者血清来源的外泌体miR-665较正常体检者表达水平明显升高,中位表达水平是对照组的8.3倍.外泌体miR-665高表达与患者肿瘤大小(>5 cm)(P=0.0042)、有包膜浸润(P=0.0197)以及临床TNM分期(III～IV期)(P=0.0276)成明显相关,与患者年龄、性别、HBsAg以及AFP水平未见明显相关性(P>0.05),外泌体miR-665高表达组患者生存期较低表达组更短(P=0.036).结论 肝癌患者血清中外泌体miR-665水平升高与肝癌进展相关,测定血清外泌体内miR-665的水平可能有助于肝癌的临床诊断和预后判断.

目的 本研究通过应用主动脉缩窄术建立小鼠心力衰竭模型,观察miR-665在心力衰竭发生发展过程中的作用.方法 采用实时荧光定量PCR检测心力衰竭时心脏组织miR-665的表达水平.体外检测内皮细胞的迁移和管腔形成能力.体内通过重组腺相关病毒(rAAV-9)介导miR-665在心脏中表达,采用超声心动图检测心脏形态和功能变化以及应用western blot等方法检测相关分子机制变化.结果 相关病毒(rAAV-9)能够抑制内皮细胞的迁移和管腔形成能力.在主动脉弓缩窄术诱导的心力衰竭模型中,过表达miR-665能够促进心肌肥厚,损伤心功能.结论 miR-665通过抑制内皮细胞的迁移和管腔形成,减弱冠状动脉微血管的形成从而促进心力衰竭.

背景与目的MicroRNAs (miRNAs)是一种广泛存在于真核生物体中的非编码小分子RNA,尽管一些miRNA在肿瘤中作用已被发现,但是miR-665对小细胞肺癌的中的表达及影响还尚不清楚.本研究旨在分析miR-665对肺癌细胞增殖、周期、侵袭和迁移的影响,探讨miR-665在小细胞肺癌中发挥的作用及其工作机制.方法 qRT-PCR检测miR-665在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达水平;TargetScan预测miR-665的潜在靶基因并用双荧光素酶报告基因实验、qRT-PCR和Western blot进行验证;免疫组化、qRT-PCR和Western blot检测LLGLI在肺癌组织和癌旁正常组织中的表达水平;CCK8法、流式细胞法、Transwell和细胞划痕实验检测miR-665和LLGL1对肺癌细胞NCI-H446、NCI-H1688增殖、侵袭、迁移以及S期细胞比值的影响;构建肺癌裸鼠移植瘤模型并观察miR-665对小鼠肿瘤生长的影响.结果 miR-665在肺癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常组织;miR-665能靶向作用于LLGL1的3'-UTR并抑制其表达;相比于癌旁正常组织,LLGL1在肺癌组织中的表达水平明显降低;抑制miR-665的表达可以抑制肺癌NCI-H446细胞的增殖、S期细胞比值、侵袭和迁移能力,而干扰LLGL1能逆转这种抑制效果;上调miR-665则促进肺癌NCI-H1688的增殖、S期细胞比值、侵袭和迁移能力,但这种促进效果同样被LLGL1的过表达逆转;在肺癌裸鼠移植瘤模型中,抑制miR-665能上调LLGL1蛋白的表达并抑制肿瘤的生长,而上调miR-665的表达则可以产生相反的结果.结论 miR-665表达水平的变化与肺癌密切相关,miR-665可以通过抑制其靶基因LLGL1的表达促进肺癌细胞的生物学行为,在小细胞肺癌中发挥促癌基因的作用.