目的:探讨肠道微生物来源的石胆酸（LCA）对脓毒症小鼠肝损伤的保护作用。方法:将15只C57BL/6J小鼠分为假手术组（Sham组）、脓毒症组（Sep组）、粪菌移植组（Sep-fmt组），每组各5只。采用盲肠结扎穿孔术（CLP）构建脓毒症小鼠模型，Sham组仅行腹壁开关手术；Sep-fmt组于CLP后第2天给予粪菌液连续灌胃3 d；Sham组和Sep组根据体质量给予等剂量含10%甘油的无菌磷酸盐缓冲液连续灌胃3 d。采用粪便进行16S核糖体RNA（rRNA）测序分析并筛选出胆汁酸代谢差异代谢产物。然后将30只C57BL/6J小鼠分为假手术组（Sham组，6只）、脓毒症组（Sep组，12只）、LCA组（LCA-Sep组，12只），各组分别保证6只大鼠进行后续实验分析。LCA-Sep组在脓毒症造模之前给予100 mg/kg的LCA灌胃，连续5 d；Sham组、Sep组根据体质量给予等剂量溶媒连续灌胃5 d。采用粪便进行16S rRNA测序分析，观察各组小鼠死亡情况并进行临床严重程度评分（CSS）。检测血清肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白细胞介素6（IL-6）、IL-10水平并评估各组小鼠肝脏组织病理损伤。结果:Sham组、Sep组和Sep-fmt组小鼠各次级胆汁酸比较，差异均有统计学意义（P均< 0.001），且Sep-fmt组中LCA的增幅最大，故后续实验选取LCA对脓毒症小鼠进行灌胃。CLP术后24 h，Sham组小鼠无死亡，Sep组小鼠死亡4只，LCA-Sep组小鼠死亡2只；各组存活小鼠CSS比较，差异具有统计学意义[（1.0 ± 0.0）、（3.5 ± 0.5）、（2.5 ± 0.5）分，F = 47.500，P < 0.001]。α多样性分析显示，3组小鼠肠道菌群丰富度[Chao1指数和基于丰度的覆盖估计值（ACE）指数]和多样性（Shannon指数和Simpson指数）比较，差异均有统计学意义（H = 8.766、8.766、9.704、10.994，P均< 0.05），且LCA-Sep组肠道菌群多样性高于Sep组（P均< 0.05）。β多样性分析显示，3组小鼠的菌群结构存在显著差异（H = 18.322，P = 0.001）。3组小鼠拟杆菌门的平均相对丰度分别为62.17%、11.10%、34.47%，变形菌门的平均相对丰度分别为10.99%、62.81%、40.58%。3组血清TNF-α、IL-6、IL-10及肝脏切片中TUNEL阳性细胞数比较，差异均有统计学意义（H = 14.749、14.363、15.158，F = 131.688，P均< 0.001），且Sep组TNF-α、IL-6水平及肝脏切片中TUNEL阳性细胞数更高，LCA-Sep组IL-10水平更高（P均< 0.05）。免疫荧光结果显示，Sham组M2巨噬细胞数表达较多，Sep组M2巨噬细胞数表达有所减少；给予LCA预处理后，LCA-Sep组小鼠肝组织M2巨噬细胞数表达较Sep组增加。结论:脓毒症可导致小鼠肠道菌群失调、炎症因子升高和肝细胞损伤；肠道菌群代谢产物LCA可以下调脓毒症小鼠肠道菌群中的潜在致病菌丰度，促进M2巨噬细胞的极化，减轻全身炎症水平和肝细胞凋亡。

目的:探讨脓毒症并发急性呼吸窘迫综合征（ARDS）患者不同病情严重程度血清鞘氨醇-1-磷酸（S1P）、无翅型MMTV整合位点家族成员5a（Wnt5a）的变化及其与早期预后的关系。方法:选取2020年3月至2022年12月临沂市中心医院收治的162例脓毒症并发ARDS患者。根据ARDS严重程度将患者分为轻度ARDS组（56例）、中度ARDS组（66例）和重度ARDS组（40例）。比较3组患者血清S1P、Wnt5a水平。并根据治疗28 d预后情况将其分为生存组（92例）和死亡组（70例），比较生存组和死亡组患者的血清S1P、Wnt5a水平。采用多因素logistic回归模型分析脓毒症并发ARDS患者早期预后的影响因素；受试者工作特征（ROC）曲线分析脓毒症并发ARDS患者血清S1P、Wnt5a对早期预后的预测价值。结果:轻度ARDS组、中度ARDS组和重度ARDS组的血清S1P、Wnt5a水平比较，差异均有统计学意义（F = 223.888、63.613，P均< 0.001）。与轻度ARDS组比较，中度ARDS组与重度ARDS组的血清S1P水平更低，血清Wnt5a水平更高（P均< 0.05）；与中度ARDS组比较，重度ARDS组的血清S1P水平更低，血清Wnt5a水平更高（P均< 0.05）。死亡组患者血清S1P水平低于生存组，血清Wnt5a水平高于生存组（t = 7.380、6.485，P均< 0.001）。死亡组年龄、脓毒性休克占比、住ICU时间≥ 10 d占比、机械通气时间≥ 3 d占比、急性病生理学和长期健康评价（APACHE）Ⅱ评分、血乳酸水平、序贯器官衰竭估计（SOFA）评分均高于存活组，而使用血管活性药物占比、氧合指数均低于存活组（P均< 0.05）。多因素logistic回归模型结果显示，年龄、脓毒性休克、血清Wnt5a水平、血乳酸水平、APACHEⅡ评分及SOFA评分是脓毒症并发ARDS患者28 d死亡的危险因素，血清S1P与氧合指数则是保护因素（P均< 0.05）。ROC曲线分析结果显示，血清S1P及Wnt5a单独检测预测死亡的曲线下面积（AUC）分别为0.803 [95%置信区间（CI）（0.734，0.861），P < 0.001]、0.758 [95%CI（0.684，0.822），P < 0.001]，血清S1P联合Wnt5a检测预测死亡的AUC为0.866 [95%CI（0.804，0.914），P < 0.001]，二者联合检测预测死亡的AUC大于血清S1P和Wnt5a单独检测预测（Z = 2.405、3.309，P均< 0.001）。结论:脓毒症并发ARDS患者的病情加重与血清S1P水平下降及Wnt5a水平升高有关，二者联合检测对早期预后具有较高的预测效能。

目的 探讨半乳糖凝集素-3(galectin-3,Gal3)在耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)感染小鼠皮肤模型中对皮肤脓肿发展以及肥大细胞(mast cell,MC)激活的影响.方法 将6～8周龄的野生型小鼠和Gal3基因敲除(Gal3-/-)小鼠分为4组:野生型小鼠+PBS组、野生型小鼠+MRS A组、Gai3/-小鼠+PBS组、Gal3-/-小鼠+MRSA组,分别皮下注射MRSA或PBS,每组5只.观察记录小鼠皮肤脓肿发展和病理学变化,比较皮肤组织中的载菌量,并分析相关炎性细胞因子、MC脱颗粒及活化标志物5-羟色胺(5-hydroxy tryptamine,5-HT)的差异.结果 感染MRSA后,野生型小鼠皮肤出现渐进性脓肿,而Gal3-/-小鼠脓肿体积较小.与野生型小鼠+MRSA组相比,Gal3-/-小鼠+MRSA组皮肤载菌量显著降低(P＜0.01),且组织病理学观察显示较少的炎症细胞浸润.Gal3-/-小鼠皮肤中的细胞因子IL-1β、TNF-α、IL-33、TGF-β和IL-10均显著低于野生型小鼠(P＜0.05).甲苯胺蓝染色显示,野生型小鼠+MRSA组皮肤组织中大量MC释放颗粒物质,而Gal3-/-小鼠+MRSA组仅发现少量脱颗粒的MC.免疫组化染色进一步发现,Gal3-/-小鼠+MRSA组中5-HT的表达显著低于野生型小鼠+MRSA组.结论 Gal3缺失降低MRSA感染导致的小鼠皮肤中MC的活化与脱颗粒,改变炎症反应,减轻了皮肤组织的脓肿发生.

目的 对离子色谱(ion chromatography,IC)联用脉冲安培检测器(pulsed amperometric detector,PAD)分析重组人促红细胞生成素(recombinant human erythropoietin,rhEPO)N糖图谱方法进行多实验室联合验证.方法 将rhEPO供试品用25 mmol/L磷酸盐缓冲液超滤置换缓冲体系,调整浓度至2mg/mL,用糖苷酶F酶切后,经乙醇沉淀,取上清冷冻干燥,获得rhEPO游离N糖.色谱条件:分析柱为Dionex CarboPac PA200,保护柱为Dionex CarboPac PA200;流动相A为50 mmol/L氢氧化钠溶液,流动相B为200 mmol/L氢氧化钠溶液,流动相C为250 mmol/L乙酸钠溶液;进样体积为25 μL;流速为0.5mL/min;柱温为30 ℃;梯度洗脱;使用仪器自带分析软件进行峰簇最高峰保留时间和峰簇面积百分比积分.选择3家实验室(L1～L3)进行方法的联合验证,包括准确度、精密度、线性、检出限(limit of detection,LOD)和定量限(limit of quantification,LOQ)、稳定性.结果 rhEPO N糖各峰簇清晰可见;3个实验室不同浓度供试品各峰簇面积百分比均在84％～116％之间,方法准确度良好;各峰簇最高峰保留时间RSD均＜5％,面积百分比RSD均＜10％,方法重现性良好;蛋白浓度在1.0～3.0mg/mL范围内,线性良好,R2＞0.98;LOD约为0.10 mg/mL,LOQ约为0.32 mg/mL;在2～8 ℃下存放48 h,稳定性良好.结论 建立了 rhEPO N糖图谱IC法,联合验证指标良好,为rhEPO质量标准的提高提供了技术支持.

目的 观察凉解感冒合剂联合磷酸奥司他韦胶囊治疗流行性感冒患者的临床疗效及安全性.方法 纳入的112例流行性感冒患者随机分为观察组和对照组各56例,观察组口服磷酸奥司他韦胶囊+凉解感冒合剂,对照组口服磷酸奥司他韦胶囊,5 d为1个疗程.比较两组临床疗效、临床症状(发热、咽痛、咳嗽、流涕、肌肉酸痛)消退时间,检测血清中 C 反应蛋白(C-reactive protein,CRP)、肿瘤坏死因子 α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、干扰素 γ(interferon-γ,IFN-γ)、单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)水平,记录不良反应.结果 观察组临床痊愈率为62.5％(35/56),高于对照组的44.6％(25/56);发热、咽痛、咳嗽、肌肉酸痛消退时间均少于对照组(P＜0.05).治疗后,两组CRP、TNF-α、IFN-γ和MCP-1水平均显著下降(P＜0.05);与对照组比较,观察组CRP、TNF-α水平更低(P＜0.05).两组总有效率、流涕消退时间和不良反应发生率相近(P＞0.05).结论 凉解感冒合剂联合磷酸奥司他韦胶囊治疗流行性感冒疗效高且安全性好.

回顾性分析1例不典型假性甲状旁腺功能减退症(pseudohypoparathyroidism,PHP)患者的临床资料及诊疗过程,并进行相关文献复习.患者幼时起病,反复骨骼畸形,既往曾诊断为佝偻病,不规律服用钙剂及维生素D(Vitamin D,Vit D)史,矫形手术效果不佳.近期因肢体乏力发现高血压、低血钾.入院反复实验室检查示低血钙、正常血磷、高甲状旁腺激素、高肾素、低血钾,肾性失钾,予Vit D试验性治疗5d,血钙改善不明显,血磷下降,尿磷增加,行全外显子检测提示GNAS基因突变,最终诊断PHP,建议此类临床特征特殊的患者应及时行基因检测以明确诊断.

目的 基于高通量测序技术探讨荔枝核总黄酮(TFL)对肝纤维化大鼠差异lncRNAs、mRNAs表达的影响及其生物学功能分析.方法 2021年4-7月于广西中医药大学实验动物中心进行实验,建立肝纤维化大鼠模型,将大鼠随机分为对照组(Control,n=6)、模型组(Model,n=7)和荔枝核总黄酮组(TFL,n=7),TFL组大鼠给予TFL 50 mg·kg-1·d-1干预6周.采用HE和Masson染色观察肝脏组织纤维化改变,ELISA法测定血清透明质酸酶(HA)、Ⅳ型胶原(Ⅳ-C)、层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ),RNA-seq高通量测序技术筛选Model和TFL组差异表达lncRNAs和mRNAs.cis方式预测差异表达lncRNAs靶基因,GO和KEGG对各差异表达lncRNAs靶基因和mRNAs进行生物学功能富集分析.结果 纤维化评分比较,Model组＞TFL组＞Control组(F=14.420,P＜0.001),大鼠血清 HA、LN、Ⅳ-C 和 PC Ⅲ 水平比较,Model 组＞TFL 组＞Control 组(F=47.055、74.655、177.328、54.445,P 均＜0.001).共筛选出Model组与TFL组差异表达lncRNAs 73个(上调43个,下调30个),Model组与TFL组差异表达mRNAs 261个(上调150个,下调111个),采用cis方式共预测到Model与TFL组24个靶基因;差异表达lncRNAs靶基因和mRNAs的生物学富集功能分析显示TFL通过参与昼夜节律、谷胱甘肽代谢泛醌、戊糖磷酸途径等信号通路发挥抗肝纤维化的作用.结论 TFL能够明显改善大鼠纤维化组织病理学形态,降低血清HA、Ⅳ-C、LN、PC-Ⅲ含量,其作用机制可能与调控特定差异lncRNAs和mRNAs表达,参与昼夜节律、谷胱甘肽代谢泛醌、戊糖磷酸途径等信号通路有关.

目的 探究不同分型急性缺血性脑卒中患者血清骨桥蛋白(OPN)、白介素1受体关联激酶4(IRAK4)和1-磷酸鞘氨醇(S1P)水平及与改良Rankin量表(mRS)评分的关系.方法 选取2022年1月—2023年12月东莞松山湖东华医院神经内科收治的急性缺血性脑卒中患者150例为病例组,根据分型分为大动脉粥样硬化型(n=23)、小动脉闭塞型(n=52)、心源性栓塞型(n=60)、其他病因型(n=11)及不明原因型(n=4).根据mRS评分分为预后良好亚组(n=117)与预后不良亚组(n=33).另选取健康志愿者120例纳入健康对照组.采用酶联免疫吸附法检测OPN、IRAK4、S1P水平,记录患者神经功能缺损(NIHSS)评分、mRS评分;Pearson相关性分析NIHSS评分、mRS评分与血清OPN、IRAK4和S1P的相关性;受试者工作特征曲线(ROC)分析血清OPN、IRAK4和S1P对急性缺血性脑卒中患者预后的预测价值.结果 与健康对照组比较,病例组血清O PN、IRAK4和S1P水平升高(t/P=25.882/＜0.001、14.910/＜0.001、50.674/＜0.001);不同类型急性缺血性脑卒中患者血清OPN、IRAK4和S1P比较,小动脉闭塞型＞心源性栓塞型＞其他病因型＞大动脉粥样硬化型＞不明原因型(F/P=60.344/＜0.001、17.798/＜0.001、67.339/＜0.001、124.678/＜0.001);与预后良好亚组比较,预后不良亚组血清OPN、IRAK4和S1P水平、NIHSS评分显著更高(t/P=5.377/＜0.001、3.829/＜0.001、3.285/＜0.001、4.805/＜0.001);血清 OPN、IRAK4 和 S1P 水平与 NIHSS 评分、mRS 评分均呈正相关(NIHSS 评分:r/P=0.459/0.009、0.423/0.017、0.525/＜0.001;mRS 评分:r=0.493、0.479、0.487,P均＜0.001);血清OPN、IRAK4、S1P及三者联合预测急性缺血性脑卒中患者预后价值AUC分别为0.656、0.740、0.804、0.872,三者联合预测急性缺血性脑卒中预后的AUC大于OPN、IRAK4、S1P单独预测(Z/P=3.237/0.001,5.181/0.001,2.018/0.035).结论 急性缺血性脑卒中患者血清OPN、IRAK4和S1P水平升高,且小动脉闭塞型和心源性栓塞型分型OPN、IRAK4、S1P水平和NIHSS评分显著高于其他分型,血清OPN、IRAK4及S1P联合检测对急性缺血性脑卒中患者预后具有较高的预测价值.

黑磷纳米片(BPNSs)作为一种潜在纳米肥能够为农业领域发展带来新的机遇.为验证BPNSs及其降解产物磷酸根在植物中的富集过程,探索BPNSs对大豆生长性状的影响,本研究开展了 BPNSs-大豆共培养实验.结果表明:BPNSs可显著提升大豆植株尤其是根部的磷含量,缺磷霍格兰(Hoagland)培养条件下,BPNSs处理组根部磷含量提升45.8％,地上部磷含量提升8％,从而减缓了叶片褪绿过程,延缓了大豆缺磷症状的产生,促进了地上部与根部生长速率回归正常.透射电镜观察结果表明,大量BPNSs富集于根部尤其是根中髓内,这解释了 BPNSs处理组大豆根磷含量远超对照组的原因.本研究结果为BPNSs在未来纳米农业中应用提供了基础数据.

目的 建立高效液相色谱法测定右兰索拉唑含量及其异构体.方法 右兰索拉唑含量测定采用ZORBAX XDB-C18(4.6 mm × 250 mm,5 μm)色谱柱,以甲醇-水-三乙胺-磷酸(400∶600∶5∶1.5)[用磷酸溶液(1→ 10)调节pH值至7.3]∶甲醇(55∶45)为流动相.检测波长为284 nm;流速为1.0 mL·min-1;柱温30℃.右兰索拉唑异构体测定采用CHIRALCELOZ-3R(4.6 mm× 150 mm,3 μm)色谱柱,以 0.05 mol·L-1 磷酸二氢钠溶液-乙腈(60∶40)为流动相.结果 右兰索拉唑及其异构体的线性范围分别为73.2071～219.6214μg·mL-1(r=0.999 98)、0.5081～3.0485 μg·mL-1(r=0.999 99);右兰索拉唑低、中、高浓度的平均回收率分别为 98.9％(RSD=0.040％)、99.4％(RSD=0.42％)、98.7％(RSD=0.89％),异构体低、中、高浓度的平均回收率分别为103.6％(RSD=2.3％)、102.6％(RSD=2.1％)、100.8％(RSD=0.26％);检测限分别为 0.4928 μg·mL-1、0.2540 μg·mL-1;定量限分别为0.9856μg·mL-1、0.5081 μg·mL-1.结论 本方法准确度高、重复性好,可用于右兰索拉唑含量测定及其异构体检查.