前列腺癌的发病率较高，是癌相关死亡的第二大病因，这可能与肿瘤快速进展到去势抵抗性阶段有关。ErbB家族成员被证明在这种致死性疾病的进展中起重要作用。本文重点总结了ErbB-2相关信号通路在晚期前列腺癌进展中的作用，包括配体激活调节、细胞前列腺酸磷酸化酶(cPAcP)、miR-331-3p、PlncRNA-1等对ErbB-2的抑制作用，p66Shc、胆固醇和脂筏、CXCR4、Src等对ErbB-2的增强作用，以及CD44与ErbB-2的联合作用，同时讨论了ErbB-2与晚期前列腺癌进展相关的下游信号通路，包括AKT、ERK1/2和STATs等。

目的 探索Kruppel样转录因子2(KLF2)对肝窦内皮细胞(LSEC)体外迁移的影响及其机制.方法 采用慢病毒感染的方式构建过表达和干扰KLF2表达的LSEC(分别为LV5-KLF2和LV3-shKLF2),采用荧光定量PCR和蛋白印迹法检测病毒感染效率,未处理LSEC作为野生对照(WT)组.采用Transwell实验检测KLF2表达的改变对LSEC迁移能力的影响,荧光定量PCR和蛋白印迹法检测促迁移因子血管内皮细胞生长因子受体2(VEGFR2)的表达,蛋白印迹法检测迁移相关信号通路蛋白Src,P38 MAPK,P44/42 MAPK的表达.结果 Transwell实验计数12 h细胞迁移数,过表达KLF2可抑制LSEC的体外迁移能力,LV5-KLF2组LSEC细胞迁移数目较LV5-NC和WT组少[(35.6±1.4)、(71.3±2.4)和(69.3±1.6)],差异均有统计学意义(均P ＜0.001).而下调KLF2表达后,LV3-shKLF2组LSEC的细胞迁移能力较LV5-NC和WT组增强,细胞迁移数目较对照组多[(189.5±5.4)、(83.4±2.5)和(82.2±3.4)],差异均有统计学意义(均P＜0.001).荧光定量PCR和蛋白印迹法证实过表达KLF2可抑制LSEC中促迁移因子VEGFR2的mRNA和蛋白水平的表达,而干扰KLF2则上调VEGFR2的mRNA和蛋白表达水平.蛋白印迹结果提示过表达KLF2,抑制LSEC中信号通路蛋白p-Src、p-P38 MAPK及p-P44/42的表达,而干扰KLF2则促进LSEC中上述磷酸化蛋白的表达.结论 KLF2可能通过Src/MAPK通路抑制LSEC的体外迁移.

在中枢神经系统中,神经元与胶质细胞之间存在缝隙连接.其中,缝隙连接蛋白43(connexin43,Cx43)是中枢神经系统中含量最丰富的缝隙连接蛋白之一,参与细胞间物质交换的代谢偶联以及电信号传递的电偶联,对细胞新陈代谢、内环境稳态、细胞分化等生理过程具有重要调控作用.脑缺血后,缝隙连接失偶联及半通道活性异常引起细胞内外环境的稳态失衡,最终导致脑组织损伤.因此,维持Cx43的正常功能对于保护脑组织免受脑缺血再灌注诱导的神经元损伤至关重要.

目的 评价右美托咪定对小鼠海马神经元缺氧复氧时Src介导NR2A酪氨酸磷酸化水平的影响.方法 拉颈处死孕18 d的C57小鼠,剖腹取胎鼠,分离海马神经元.将神经元接种于培养液中,培养至第7天,采用随机数字表法分为3组(n=30):对照组(C组)、缺氧复氧组(H/R组)和右美托咪定组(D组).H/R组和D组缺氧4h复氧24 h制备小鼠海马神经元缺氧复氧损伤模型;D组给予终浓度为1 μmol/L的右美托咪定孵育4h,随后制备模型.于复氧24 h时采用MTT法检测海马神经元活力,TUNEL染色法观察海马神经元凋亡情况,计算细胞凋亡指数,Western blot法检测海马神经元c-Src、p-Src Y416、NR2A、p-NR2A Y1325和cleaved caspase-3表达水平.结果 与C组比较,H/R组海马神经元活力降低,凋亡指数升高,p-Src Y416、p-NR2A Y1325和cleaved caspase-3表达上调(P＜0.05);与H/R组比较,D组海马神经元活力升高,凋亡指数降低,p-Src Y416、p-NR2A Y1325和cleaved caspase-3表达下调(P＜0.05).3组c-Src和NR2A表达比较差异无统计学意义(P＞0.05).结论 右美托咪定可抑制缺氧复氧小鼠海马神经元凋亡,其机制可能与降低Src介导NR2A酪氨酸磷酸化水平有关.

目的 观察蚓激酶对TGF-β1诱导人肾小管上.皮细胞α-平滑肌肌动蛋白(α-smooth muscle actin,α-SMA)、纤维连接蛋白(fibronectin,FN)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和Src家族蛋白酪氨酸激酶表达的影响.方法 将人肾小管上皮细胞按随机数字表法分为正常组,模型组,贝那普利组及蚓激酶低、中、高剂量组.除正常组外,其余各组加入10 μg/ml的TGF-β1溶液进行干预,30 min后,贝那普利组加入盐酸贝那普利10 μmol/L进行干预,蚓激酶低、中、高剂量组分别加入蚓激酶30、60、120 U/ml进行干预.培养24 h后,采用Western blot法和荧光定量PCR检测α-SMA、FN、FAK和Src激酶蛋白及基因表达.结果 与模型组比较,蚓激酶低、中、高剂量组α-SMA[(0.84±0.14)、(0.72±0.08)、(0.69±0.05)比(1.24±0.03)]、FN[(0.59±0.09)、(0.55±0.11)、(0.44±0.08)比(0.83±0.1 8)]、FAK[(0.94±0.04)、(0.79±0.05)、(0.70±0.02)比(1.29±0.07)]、Src激酶[(0.87±0.20)、(0.78±0.15)、(0.71±0.11)比(1.23±0.01)]蛋白表达降低(P＜0.05),α-SMA mRNA[(3.13±0.62)、(2.76±0.14)、(2.15±0.33)比(4.12±0.3 2)]、FN mRNA[(3.08±0.34)、(2.78±0.17)、(2.49±0.11)比(4.34±0.06)]、FAK mRNA[(1.73±0.23)、(1.63±0.36)、(1.57±0.27)比(2.61±0.59)]、Src激酶mRNA[(2.11±0.17)、(1.78±0.25)、(1.71±0.22)比(2.78±0.47)]表达降低(P＜0.05).结论 蚓激酶可通过调节TGF-β1诱导的人肾小管上皮细胞FAK、Src激酶的表达,减少α-SMA、FN生成,从而阻抑肾纤维化的发展.

目的 探究肿瘤凋亡和P53再生化合物(RITA)对肺鳞癌细胞凋亡的影响及作用机制.方法 采用MTT细胞活力检测法检测不同浓度RITA对肺鳞癌细胞H226和正常肺上皮细胞BEAS-2B增殖的影响,筛选合适的干预浓度.经0、0.05、0.1和0.2μmol/L RITA处理后,采用流式细胞术分析H226细胞内活性氧(ROS)产生和细胞凋亡水平变化.Western blot检测P-Src、Src、转录信号转换器和激活因子3(Stat3)、P-Stat3、Bim、Mcl-1、存活蛋白(Survivin)、Bax及B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)的蛋白表达水平.H226细胞经0.2μmol/L RITA和5.0 mmol/L抗氧化剂N-乙酰半胱氨酸(NAC)同时处理后,观察NAC能否逆转RITA对H226细胞的生物学效应.结果 0.05～0.2μmol/L范围内,随着RITA浓度的升高,H226细胞增殖活性下降,半抑制浓度(IC50)为(0.130±0.008)μmol/L,而相同给药浓度下对BEAS-2B细胞增殖无明显影响.0～0.2μmol/L RITA可增加H226细胞内ROS水平并诱导细胞凋亡,下调P-Src、P-Stat3、Mcl-1、Survivin、Bcl-2蛋白表达,上调Bim、Bax蛋白表达.经NAC处理后,RITA抑制Src/Stat3通路活性及诱导H226细胞凋亡的效应被逆转.结论 RITA通过提高肺鳞癌H226细胞内ROS的水平,从而抑制Src/Stat3通路活性,最终诱导细胞凋亡.