目的:探讨缺血性卒中患者远期死亡及其影响因素。方法:基于多中心口服降纤二级预防数据库的缺血性卒中患者资料，通过流行病学调查方法，登记可随访患者信息及死亡原因，再与原数据库患者基线资料进行比较。结果:共278例患者完成随访，蚓激酶组166例，对照组112例；10年内共有124例死亡（44.6%），其中92例（74.2%）为血管性死亡。蚓激酶组全因死亡74例（44.6%），血管性死亡55例（33.1%）；对照组全因死亡50例（44.6%），血管性死亡37例（33.0%）。Cox比例风险模型分析显示，蚓激酶治疗对缺血性卒中患者10年生存率无显著影响。患者死亡影响因素分析显示，基线国际标准化比值（international normalized ratio, INR）与患者10年非血管性死亡风险显著相关[风险比（hazard ratio, HR）1.98，95%置信区间（confidence interval, CI）1.21~3.25； P=0.006]。半年内组织型纤溶酶原激活物（tissue plasminogen activator, tPA）降幅越大，10年全因死亡风险越低（ HR 0.94，95% CI 0.90~0.99； P=0.011）；1年内INR降幅越大，10年血管性死亡风险越低（ HR 0.41，95% CI 0.17~0.96； P=0.040）；1年内D-二聚体降幅越大，10年血管性死亡风险越高（ HR 1.37，95% CI 1.02~1.83； P=0.034）。缺血性卒中患者1年内INR降幅越大，10年非血管性死亡风险越高（ HR 2.15，95% CI 1.29~3.59； P=0.004）。 结论:缺血性卒中患者10年死亡发生率较高，死亡者中约3/4为血管性死亡。急性期降纤治疗对缺血性卒中患者10年全因死亡无明显影响；半年内tPA降幅越大，全因病死率越低；基线及1年内D-二聚体水平降幅越大，10年血管性死亡风险越高；基线及1年内INR降幅越大，10年非血管性死亡风险越高。

目的:探讨蚓激酶对急性中危肺血栓栓塞的治疗效果及安全性.方法:回顾性分析2010年1月至2015年10月在湖南省人民医院住院治疗的60例急性中危肺血栓栓塞患者的临床资料,依据治疗方式不同分为蚓激酶组(蚓激酶联合低分子肝素钠序贯华法林组)和对照组(低分子肝素钠序贯华法林组),每组30例.比较两组在治疗前、治疗后10,20及30 d的临床疗效及安全性.结果:CT肺动脉造影(CT pulmonary angiography,CTPA)和超声心动图结果表明蚓激酶组右心室最大短轴直径、左心室最大短轴直径、右心室最大短轴直径与左心室最大短轴直径比值、肺动脉收缩压和主肺动脉直径在治疗后10,20及30 d与对照组比较差异均有统计学意义(p＜0.05),且两组在治疗后10,20及30 d比较差异均有统计学意义(P＜0.05).与对照组比较,蚓激酶组N末端B型脑钠肽原(NT-proBNP)在治疗后10,20和30 d明显降低(P＜0.05).对照组和蚓激酶组氧分压(PO2)在治疗后10,20和30 d明显升高,但治疗后20和30 d两组比较差异无统计学意义(p＞0.05).D-二聚体在对照组和蚓激酶组治疗后10d明显增高,而在治疗后20,30d明显降低,且两组及组内比较差异均有统计学意义(P＜0.05).蚓激酶组临床疗效优于对照组(p＜0.05).结论:蚓激酶联合低分子肝素钠序贯华法林治疗急性中危肺血栓栓塞患者临床疗效显著且安全,值得临床推广.

[目的]改进蚓激酶的提取工艺.[方法]从新鲜蚯蚓中经提取、分离和纯化3个工序制备蚓激酶.以酶的活性为指标,依序对比4种溶剂提取方法,4种沉淀分离方法和2种层析纯化方法,得出较优工艺,并运用分级沉淀除杂和凝胶层析除盐进行工艺改进.[结果]优选出缓冲液提取,乙醇分级沉淀分离,DEAE-Sepharose FF和Sephadex G-75层析纯化的蚓激酶提取新工艺,制得蚓激酶酶活28000μ/mg,高于旧工艺.[结论]改进后的工艺制备的酶活高,操作简单,适合于工业化生产.

目的 探讨舒血宁注射液联合蚓激酶治疗脑梗死患者的临床疗效.方法 收集2015年3月—2017年4月来北京市房山区良乡医院(首都医科大学良乡教学医院)就诊的脑梗死患者86例为研究对象,随机分为对照组和治疗组,每组各43例.对照组口服蚓激酶肠溶胶囊,60万单位/次,3次/d,饭前30 min口服.治疗组在对照组治疗基础上静脉滴注舒血宁注射液,20 mL/次,1次/d.两组均连续治疗14 d.观察两组的临床疗效,比较两组治疗前后神经功能缺损(NIHSS)评分、日常生活活动能力(ADL)评分、血清铁蛋白(SF)、C反应蛋白(CRP)水平的变化情况.结果 治疗后,对照组和治疗组患者的总有效率分别为76.7％、93.0％,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).治疗后,两组NIHSS评分、SF、CRP均显著降低,ADL评分均显著升高,同组治疗前后比较差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,治疗组NIHSS评分、SF、CRP低于对照组,ADL评分高于对照组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).结论 舒血宁注射液联合蚓激酶治疗脑梗死具有较好的临床疗效,能改善患者的神经功能缺损状况,明显提高患者的日常生活活动能力,具有一定的临床推广应用价值.

目的:评价蚓激酶口服肠溶制剂的质量现状及存在问题,为质量标准的提高和临床用药提供参考,同时促进厂家完善产品质量.方法:按照国家评价性抽验的总体要求,在法定检验方法检验的基础上,开展以下探索性研究,测定样品的重金属残留、蚓激酶的酶学性质分析、蛋白质来源确证与成分分析、近红外光谱模型.统计分析蚓激酶口服肠溶制剂的质量现状并进行评价.结果:按照法定标准检验,结果显示78批次蚓激酶口服肠溶制剂均符合规定,合格率为100％.探索性研究结果显示来源不同企业的蚓激酶原料中的5种重金属考察,铅、铜、砷、镉均有检出,平均检出量分别为0.4 mg·kg-1,8.4 mg·kg-1,4.4 mg·kg-1与3.4 mg·kg-1;证实蚓激酶具有纤维蛋白溶酶及纤维蛋白溶酶原激酶两种酶活性并建立测定方法;建立了纤维蛋白-聚丙烯酰胺电泳方法检测纤溶活性蛋白质;确证了蚓激酶的来源,并在各企业的样品中鉴定出8～9种溶纤活性相关的蛋白质组分.结论:根据现行标准检验及探索性研究结果,蚓激酶口服肠溶制剂总体合格率较好,现行标准需提高,生产企业需规范蚯蚓养殖管理过程并建立统一的原材料蚯蚓的质量标准.

目的 研究蚓激酶对单侧输尿管梗阻(UUO)模型大鼠肾间质纤维化(RIF)的影响及作用机制.方法 采用单侧输尿管结扎术的方法制备UUO大鼠模型.大鼠随机分为假手术组,模型组,蚓激酶低、中、高剂量组(0.9×105,1.8×105,3.6×105 U·kg-1),灌胃给药,连续14 d.生化指标检测血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)含量;HE染色和Masson染色观察肾脏组织病理学变化;采用免疫组化法检测肾脏组织转化生长因子-β1 (TGF-β1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和Ⅰ型胶原蛋白(Col-Ⅰ)的表达.结果 与假手术组比较,模型组大鼠的Scr、BUN含量有不同程度升高,蚓激酶各给药组的Scr、BUN含量有不同程度降低,但各组之间的差异无统计学意义(P＞0.05).模型组大鼠梗阻侧肾脏组织部分肾小管上皮细胞空泡变性,部分管腔扩张或萎缩坏死,可见炎性细胞浸润、成纤维细胞增生和RIF,蚓激酶不同剂量干预治疗后,上皮细胞变形萎缩、炎性细胞浸润及间质纤维化程度均明显改善.与假手术组比较,模型组的TGF-β1、α-SMA及Col-Ⅰ阳性表达水平明显升高(P＜0.05);与模型组比较,蚓激酶各剂量组的TGF-β1、α-SMA、Col-Ⅰ阳性表达水平明显降低(P＜0.05).结论 蚓激酶具有抗RIF的作用,可能与其抑制肾脏组织TGF-β1、α-SMA和Col-Ⅰ的表达有关.

患者女性,84岁,因“间断胸痛伴腹胀、下肢浮肿2周,气短4d”于2017年4月18日入院.患者2周前活动后出现间断心前区闷痛,每次持续约5 min至半小时不等,可自行缓解.病程中逐渐出现腹胀、食欲缺乏及尿量减少,每天尿量约400～500 ml,双下肢可凹性水肿,活动轻度受限.否认发热、咳嗽咯血,就诊于当地医院,考虑“心绞痛”,治疗不详.4d前,患者突发气短,伴咳嗽咳痰,痰中少量血丝,夜间不能平卧,为进一步诊治收入我院重症监护室.既往高血压20余年,自服硝苯地平,血压控制不详;糖尿病、肾功能不全3年,本次入院前外院曾发现“腹主动脉瘤伴血栓形成”,服用蚓激酶治疗(具体不详).入院10d前肌酐为289 μmol/L.40余年前行剖宫产手术;10余年前行右眼白内障手术.

目的:建立测定蚓激酶中铬(Cr)、锰(Mn)、铁(Fe)、钴(Co)、镍(Ni)、铜(Cu)、砷(As)、银(Ag)、镉(Cd)、锑(Sb)、钡(Ba)、汞(Hg)、铊(Tl)、铅(Pb)14个有害元素含量的方法.方法:采用微波消解-电感耦合等离子体质谱法,射频功率为1 530 W,冷却温度为4℃,碰撞气为氦气,载气为氩气,载气流量为1.08 L·min-1,积分时间为0.3 s,等离子气流量为15 L· min-1,四极杆真空度为3.04×10-4Pa,采样锥孔径为1.0 mm,截取锥孔径为0.4 mm,数据采集重复次数为3次.结果:Mn、Ni与Cu元素检测线性范围为0～500 ng·mL-1,Fe元素检测线性范围为0～10 000 ng·mL-1,Hg元素检测线性范围为0～10 ng·mL-1,其余各元素检测线性范围均为0～100 ng·mL-1,r均≥0.999 0;检测下限为0.004～0.7 ng·mL-1;精密度的RSD＜2％,重复性的RSD＜8％;各元素平均加样回收率为95.4％～109.8％(RSD＜4％,n=9).结论:该方法线性回归良好,灵敏度高,准确性好,适用于蚓激酶原料药中有害元素的检测分析.

目的:探讨蚓激酶 (LBK) 对胃癌SGC7901细胞的调控作用, 并阐明其作用机制.方法:取对数生长期SGC7901细胞, 将细胞分为对照组和2、4、8 U·mL-1 LBK组.采用MTT法检测不同时间段 (24、48和72h) 各组SGC7901细胞增殖抑制率, 采用细胞划痕实验检测各组SGC7901细胞体外迁移能力, 采用流式细胞术检测各组SGC7901细胞凋亡率和不同细胞周期细胞百分率, 采用Western blotting法检测各组SGC7901细胞中Bcl-2、Bax和Caspase-3蛋白表达水平.结果:MTT检测, 与对照组比较, 作用24、48和72h后不同剂量LBK组SGC7901细胞增殖抑制率明显升高 (P＜0.01) .细胞划痕实验, 与对照组比较, 4和8U·mL-1LBK组SGC7901细胞划痕距离明显增加 (P＜0.01) .流式细胞术检测, 与对照组比较, 4和8U·mL-1 LBK组SGC7901细胞凋亡率明显升高 (P＜0.01) , G1期和S期细胞百分率明显降低 (P＜0.01) , G2期细胞百分率明显升高 (P＜0.01) .Western blotting法检测, 与对照组比较, 8U·mL-1 LBK组SGC7901细胞中Bcl-2蛋白表达水平明显降低 (P＜0.05) , Bax和caspase-3蛋白表达水平明显升高 (P＜0.05) .结论:LBK可抑制胃癌细胞株SGC7901增殖和迁移能力, 且能够诱导细胞凋亡, 其可能的机制是通过调节Bcl-2、Bax和caspase-3蛋白表达水平来实现的.

地龙,为蚯蚓干燥体,是一种传统的动物源性天然中药材,性寒味咸,具有活血化瘀,镇痛消炎等作用,其药用价值在《神农本草经》及《本草纲目》均有记载.地龙中提取的地龙蛋白含有多种蛋白质组分,包括胶原酶、纤溶酶、蚓激酶、纤溶激活蛋白和钙调素结合蛋白等.对于地龙蛋白的药理活性已经有不少研究,认为地龙可以通过调节体内凝血系统和纤溶系统,抑制并促溶血栓,改善微循环及防治心脑血管疾病[1-3];可通过抑制血管紧张素转化酶活力控制高血压[4];可通过促进细胞免疫发挥免疫调节功能[5];也有研究提示地龙蛋白可能通过抑制肿瘤微血管生长从而抑制鼻咽癌的转移[6].药理实验和临床研究表明,地龙蛋白药理作用主要集中在心血管系统及血液系统方面[7].