目的 构建Ⅱ型猪链球菌05ZYH33菌株双组分系统Ihk/Irr的双基因缺失突变株.方法 首先对双组分系统 Ihk/Irr基因进行序列分析;选取Ihk/Irr基因的相关片段克隆至pET30a表达载体,进行可溶表达并注射家兔制备抗体;分别将ihk基因上游irr基因下游各1 kb的片段扩增,将两个片段连接起来;克隆至温敏型pJRS233的穿梭质粒中;利用两步同源重组法获得突变体;分别提取突变株的基因组DNA,RNA及菌体总蛋白,利用PCR, RT-PCR,Western-blot方法验证突变体.结果 成功制备了双组分系统Ihk/Irr可溶性表达的蛋白,成功构建了重组的温敏型ikr-pJRS233重组质粒,成功将重组质粒转入猪链球菌05ZYH33中并获得突变株,基因组PCR,RT-PCR及Western-blot分别证实了双组分系统Ihk/Irr双基因被成功敲除.结论 成功构建重组温敏型的穿梭质粒,导入到猪链球菌05ZYH33菌株中经两步同源重组获得突变株,在基因组DNA,RNA及蛋白水平上验证了双组分系统Ihk/Irr双基因缺失株的成功构建.

目的 报告河北省首例人感染猪链球菌病例的相关调查情况和实验室检验结果.方法 通过询问病史、现场观察、血液及脑脊液细菌学培养、荧光PCR检测及生化鉴定等方法进行调查.结果 病人由破损伤口直接感染,临床症状表现为意识障碍,伴有发热、恶心、呕吐,大小便失禁,运动功能紊乱.血液培养出特征菌落,经鉴定为人感染猪链球菌Ⅱ型.结论 病人发病前存在明显的流行病学接触史,切断传染源和传播途径是控制该病的有效措施.应加强人畜共患疾病的健康教育和宣传,提高自我防护意识.

人感染猪链球菌病是由猪链球菌(Streptococcussuis)引起的一种人畜共患疾病,属于急性细菌性感染[1],人感染猪链球菌病在我国江苏和四川曾引起过暴发流行[2-3],我国其他省份也有散发病例,但在河北省未见报道,我院于2017年2月7日自患者脑脊液中分离培养出猪链球菌Ⅱ型1例,现报道如下.

猪链球菌病是由猪链球菌感染人而引起的一种人畜共患疾病[1],猪链球菌是感染猪的一种常见和重要病原体,也是人类动物源性脑膜炎的常见病因,可引起人脑膜炎、败血症、关节炎、心内膜炎、肺炎和眼内炎等疾病,临床表现为发热、寒战、头痛、食欲下降等感染中毒症状[2].本病呈世界性分布,最早于1968年由丹麦学者报道[3],随后荷兰、瑞典、法围、英国、日本、泰国、中国香港等地也有病例报道.截止2014年全球约有超过1 600例病例报道[4].我国于1998年在江苏省、2005年在四川省发生暴发流行[1],近年来其他省市也有散发病例,但重庆鲜有报道,我院于2018年12月5日收治1例人感染猪链球菌病患者,血及脑脊液培养出猪链球菌Ⅱ型,现报道如下.

目的 调查分析2019年4月和5月巴马县2例人感染猪链球菌病病例感染和死亡原因,为当地预防、治疗和抢救该类病人提供参考.方法 收集2例病例入院诊断、治疗和抢救资料进行分析,并对病人所在村屯进行流行病学调查,同时对比分析河池市及该县历年人感染猪链球菌病例和病死状况.结果 2015年巴马县报告发现有人感染猪链球菌病例,2019年2例人感染猪链球菌死亡病例分别属于猪链球菌Ⅰ型和Ⅱ型感染,病前均有病猪接触史.2例病例死亡均在发病出现休克症状后方才就医,延误了最佳治疗时机.其中1例感染猪链球菌Ⅰ型病例从入院到抢救无效死亡仅6h,给临床治疗和抢救带来极大困难.结论 加强对当地居民的宣传和教育,新购置的生猪肉充分煮熟后方可食用,避免接触病死生猪,有接触史者一旦发病应尽早就医.

目的 明确诊断,确定南京市首例人感染猪链球菌病例的感染来源和暴露方式.方法 采集病例血液和脑脊液标本,利用血平板和PCR开展链球菌分离检测,通过访谈病例及其妻子、接诊临床医生,查阅就诊记录和病历资料,开展流行病学调查.结果 病例为36岁男性,2018年8月29日7时以高热起病,病程中出现头痛、呕吐和神志不清、嗜睡等神经系统症状.病例脑脊液中分离的菌株经生化反应和荧光定量PCR鉴定为猪链球菌Ⅱ型.病例于8月25日在湖南省某市某屠宰场购买10个生猪头,在洗切加工过程中手部2处划伤但未及时清洗和消毒.结论 这是1起境内输入性人感染猪链球菌疫情,经过病例手部破损的伤口接触传播.建议当地加强畜间疫情监测、牲畜检疫和屠宰场(点)监管.

猪链球菌感染为人畜共患的急性传染病,属于少见病,传染源为病猪和带菌猪,主要传播途径为人接触病(死)猪,致病菌经破损皮肤或黏膜侵入人体,人类普遍对猪链球菌易感,引起人重症链球菌感染的主要是猪链球菌 Ⅱ 型[1].人感染该菌后可表现为脑膜炎、败血症、感 染 性 休 克、心 内 膜 炎 和 肺 炎 等 多 种 形式.临床上在早期表现不典型时有被漏诊.本院曾收治 l 例脑膜炎型人猪链球菌感染合并败血症的患者,现报道如下,以加强大家对猪链球菌感染的认识,为今后猪链球菌感染诊疗提供参考.

[背景]近年来,我国规模猪场着重加强了对猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病等疫病的防控,却忽视了由肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli,ExPEC)对猪群健康产生的潜在危害性,了解和掌握猪源ExPEC流行特征意义显著.[目的]探究临床分离的54株猪源ExPEC血清型、系统进化群和基因型的分布及流行特征.[方法]应用玻板凝集试验和试管凝集试验鉴定O抗原血清型,采用PCR技术检测系统进化群鉴定相关基因、28个ExPEC相关毒力基因以及多位点序列分型相关基因.[结果]受试菌中有52株确定了 O抗原血清型,其中40株为O38(74.1％),为优势血清型;8株为O127(14.8％),O93和O11均2株(各占3.7％).受试菌中44株为B2群(81.5％),是主要系统进化群,D群和B1群均5株(各占9.3％);28个 ExPEC 相关毒力基因中ompA、ibeA、fimH、traT、focD、papA、iroN、iutA、iucD、cvaC、tsh、kpsMTⅡ、iss和ompT出现的频率超过50％,其中ompA和ibeA检出率分别达100％和96.3％,为高度流行的毒力基因,未检到cnfl,而bmaE、malX和iha更倾向分布于D群菌株中.受试菌共呈现31种ST型,其中ST10和ST648均5株(各占9.3％),ST410和ST101均4株(各占7.4％).[结论]猪源ExPEC优势血清型及系统进化群在不同地区、不同时段上的流行分布均存在一定差异,呈现动态过程,O38作为优势血清型目前尚未见报道,具有高致病性的B2群和D群菌株有逐渐增多的趋势.ST型复杂多样,呈现遗传多样性,在一定程度上与人源和禽源ExPEC具有相同的遗传背景.

总结1例人感染猪链球菌Ⅱ型致链球菌中毒性休克综合征的护理经验.护理重点为做好抗感染治疗的护理,维持循环及内环境稳定,做好皮肤护理、口腔护理、营养支持护理,重视早期康复护理等.经治疗与护理,患者病情好转,入IC U 18 d后转入感染科病房继续治疗.

[背景]马链球菌兽疫亚种(Streptococcus equi subsp.zooepidemicus,SeZ)是引起马腺疫的主要病原,还可引起猪链球菌病,加强该菌的地方株分子流行病学监测对有效防控相关疫病十分必要.[目的]对新疆地区2个马场SeZ分离株进行鉴定和药敏特性分析,并分析3株新疆分离株的分子流行与菌株的遗传进化特征.[方法]对分离纯化的3株病原菌(ZHZ113、ZHZ211和ZHZ523)进行染色观察、生化及药敏特性检测,对16S rRNA和SeM基因进行遗传进化分析,以链球菌7个管家基因arcC、nrdE、proS、spi、tdk、tpi和yqiL为目的基因对3株分离菌进行多位点序列分型(Multilocus Sequence Typing,MLST)研究.[结果]3株SeZ的药敏结果显示这3株分离菌对不同抗生素的耐药程度不同,但均对头孢西丁、庆大霉素、链霉素、红霉素、左氧氟沙星、环丙沙星、土霉素等11种药物敏感.16S rRNA基因序列分析显示这3株分离菌均属于Ⅱ群(兽疫链球菌).3株菌的MLST分型结果分别为ST39、ST419、ST421型,其中ST419和ST421型为SeZ目前尚未见报道的新ST型.SeM基因分析结果显示马源SeZ在不同国家、不同动物和不同时间段上的流行分布存在差异和动态变化的特点.[结论]3株SeZ分离菌分别与美国犬源及马源菌株亲缘关系较近,反映部分SeZ株在新疆地区的基因型分布及分子流行特点.